腫瘤標志物檢測注意事項及臨床意義

腫瘤標志物檢測注意事項及臨床意義第一頁，共80頁。腫瘤標志物（tumormaker，TM）是指在腫瘤發(fā)生和發(fā)展過程中，由腫瘤細胞合成、分泌或是由機體對腫瘤細胞反應而產生的一類物質。一般存在于血液、尿液、其他體液、細胞和組織中，可通過生物化學、免疫學及分子生物學等方法進行定性或定量檢測，在腫瘤的輔助診斷、鑒別診斷、治療監(jiān)測及療效評估、預后判斷、復發(fā)監(jiān)測及高危人群隨訪觀察等方面都具有相應的應用價值。第二頁，共80頁。甲胎蛋白甲胎蛋白（alphafetoprotein，AFP），按照其余LCA（小扁豆凝集素）親和力大小分為AFP-L1、AFP-L2和AFP-L3三種異質體。其中AFP-L1主要存在于良性肝臟疾病，AFP-L2多由卵黃囊腫瘤產生，亦可見于孕婦血清中，AFP-L3為肝癌細胞所特有，與LCA親和力最強。第三頁，共80頁。甲胎蛋白ELISA法可用血清、含EDTA、檸檬酸或肝素的血漿標本，待測標本不可用NaN3防腐，檢測前應充分離心標本。ECLIA（電化學發(fā)光法）對于接受高劑量生物素（>5mg/d）治療的患者，必須在末次生物素治療8小時后才能采血；檢測結果不受類風濕因子影響（RF＜1500IU/ml）。第四頁，共80頁。甲胎蛋白主要用于原發(fā)性肝癌（HCC）的輔助診斷，血清含量大于400ng/ml為診斷閾值，其診斷原發(fā)性肝癌的陽性率可達60%~80%，但AFP陰性不能排除肝癌；AFP的濃度與HCC分化有關，HCC分化接近正?；蚍只瘶O低時、AFP常較低或測不出來，分化程度為Ⅱ、Ⅲ級時AFP濃度最高，肝壞死嚴重者AFP亦低。AFP濃度還與HCC大小有關，肝癌小于3cm者AFP陽性率為25%~50%，4cm者AFP多達400ng/ml以上，5cm時AFP常升高至700~1000ng/ml，為此AFP在HCC的診斷中強調動態(tài)觀察，小肝癌應輔以其他HCC標志物及超聲檢測。第五頁，共80頁。甲胎蛋白可用于肝癌高危人群的篩查，尤其是乙型肝炎性肝硬化患者；AFP還可用于肝癌治療效果及預后評估，如果AFP＞500ng/ml，提示患者存活期短；若手術切除肝癌后AFP下降，1周內可降至正常，提示預后好；若術后AFP＞200ng/ml，提示肝癌有殘留或有轉移；若下降后又升高則提示肝癌可能復發(fā)。肝良性病變和妊娠，AFP亦升高，但一般在400ng/ml以下。第六頁，共80頁。甲胎蛋白內胚層分化器官的良性疾病如酒精性肝炎、肝硬化、急性病毒性肝炎、慢性活動性肝炎、腸炎及遺傳性酪氨酸血癥等AFP也可呈中、低水平和暫時性或反復性升高，需加以鑒別伴有早期癌的肝病活動。其他疾病如胃癌或胰腺癌和結直腸癌等AFP亦可呈中、低水平和暫時性升高。第七頁，共80頁。甲胎蛋白胎兒出生12~18個月后外周血中AFP濃度小于10μg/L，，正常人肝細胞幾乎不產生AFP。當胎兒患低氧癥、宮內死亡、遺傳缺陷、先天性神經管畸形、無腦兒和脊柱裂等疾病時，母體血清AFP異常增高。若胎兒有先天性腎病綜合征、先天性食管及十二指腸閉鎖、性染色體異常、腦積水、法洛四聯(lián)癥等時，羊水中AFP亦明顯升高。第八頁，共80頁。甲胎蛋白血清AFP結合β-hCG還可用于生殖細胞瘤的鑒別診斷。生殖細胞瘤病理學上主要分為精原細胞瘤和非精原細胞生殖細胞瘤。精原細胞瘤β-hCG升高，AFP不升高。80%~85%的非精原細胞生殖細胞瘤AFP和β-hCG升高。當精原細胞瘤出現AFP升高時，應考慮存在非精原細胞生殖細胞瘤。血清AFP水平檢測有助于精原細胞瘤和非精原細胞生殖細胞瘤的治療方案選擇。第九頁，共80頁。甲胎蛋白AFP-L3（甲胎蛋白異質體，alpha-fetoproteinvariant），親和交叉免疫電泳法親和電泳免疫印跡法均要求待測血清或其他體液避免溶血、脂血或微生物污染，親和吸附離心管法血清要求清亮。第十頁，共80頁。甲胎蛋白AFP-L3在HCC診斷中特異性高于AFP，但敏感性與總AFP無明顯差異；與其他指標如AFP、AFPmRNA或α-L-巖藻糖苷酶（AFU）等聯(lián)合檢測，可提高對HCC診斷的準確率。第十一頁，共80頁。甲胎蛋白AFP-L3值與總AFP值無相關性，是獨立于總AFP值得肝癌輔助診斷指標。AFP-L3≮10%應高度懷疑肝癌的存在；AFP-L3為低值時也不能否定肝癌的存在，因為約有15%~30%的AFP陽性肝癌患者AFP-L3＜10%.此外，某些肝臟良性疾病如急性肝炎、暴發(fā)性或重癥肝炎、自身免疫性肝炎等也可能出現AFP-L3的升高，建議與其他檢查手段聯(lián)合使用，綜合判斷。第十二頁，共80頁。甲胎蛋白AFP-L3可區(qū)別原發(fā)性肝細胞癌與非原發(fā)性肝細胞癌、或者良性肝病引起的AFP升高；目前認為AFP-L3＞25%提示為原發(fā)性肝細胞癌。第十三頁，共80頁。甲胎蛋白通過動態(tài)分析AFP-L3的比率或絕對值變化，有助于HCC治療療效、復發(fā)轉移的監(jiān)測和預后的判斷（只有當待測標本中AFP-L3的含量≮1000ng/ml時，可直接用AFP-L3絕對值的變化進行監(jiān)測）。第十四頁，共80頁。癌胚抗原癌胚抗原（carcinoembryonicantigen，CEA）屬于非器官特異性腫瘤相關抗原。常用的檢測方法有ELISA、CLIA、ECLIA、金標記免疫滲濾層析、RIA、時間分辨熒光免疫分析法及流式熒光免疫檢測技術、其中以ELISA法最為常用。第十五頁，共80頁。癌胚抗原生理條件下，小腸、肝臟和胰腺細胞在胎兒早期合成CEA的能力較強，CEA濃度較高。胎齡6個月后，其合成CEA能力逐步減弱，CEA分泌量逐漸減少，出生后即與成人水平一致（＜5μg/L，吸煙者為15~20μg/L，6.5%的吸煙者可達20~40μg/L），正常情況下CEA經由胃腸代謝消除。病理條件下，位于胃腸道、呼吸道、泌尿道等空腔臟器部位的腫瘤大量分泌CEA，這些CEA隨即進入血和淋巴系統(tǒng)循環(huán)，引起血清CEA水平異常升高，血清CEA水平檢測結果呈陽性。第十六頁，共80頁。癌胚抗原CEA屬于非器官特異性腫瘤相關抗原，血清CEA升高主要見于：70%~90%的結腸癌患者CEA陽性，在其他惡性腫瘤中的陽性率順序為胃癌、胰腺癌、小腸腺癌、肺癌、肝癌、乳腺癌、泌尿系癌腫。在婦科惡性腫瘤中，卵巢黏液行囊腺癌CEA陽性率最高，其次是Brenner瘤；子宮內膜樣癌及透明細胞癌也有較高的CEA表達，漿液性腫瘤陽性率相對較低。第十七頁，共80頁。癌胚抗原良性腫瘤、炎癥和退行性疾?。ɡ缒懼俜e、結腸息肉、酒精性肝硬化患者、慢性肝炎、胰腺炎、潰瘍性結腸炎、克羅恩病、肺氣腫）CEA含量會輕度或中度上升，但通常不超過10ng/ml。吸煙者中約有30%CEA大于5ng/ml。CEA可作為良性與惡性腫瘤的鑒別診斷依據。第十八頁，共80頁。癌胚抗原CEA測定主要用于指導腫瘤治療及隨訪。能對病情判斷、預后及療效觀察提供重要的依據。CEA的檢測對腫瘤術后復發(fā)的敏感度極高，可達80%以上，往往早于臨床、病理檢查及X線檢查半年。CEA正常不能排除惡性腫瘤疾病存在的可能。與CEA發(fā)生反應的抗體與胎糞抗原（NCA2）也能反應。第十九頁，共80頁。CA19-9CA19-9（carbohydrateantigen19-9）是一種與胰腺癌、膽囊癌、結直腸癌和胃癌相關的腫瘤標志物，又稱胃腸癌相關抗原，與CEA的抗原決定簇相似。第二十頁，共80頁。CA19-9常用檢測方法有ELISA法、CLIA法（直接化學發(fā)光技術）、ECLIA（電化學發(fā)光技術）法。采用CLIA法若標本或系統(tǒng)一次性器材受到唾液或氣霧（例如打噴嚏引起）的污染，可能會造成CA19-9值得假性升高。處理標本、樣品杯、反應杯和軟蓋時，應佩戴手套。建議佩戴面罩。第二十一頁，共80頁。CA19-9CA19-9是細胞膜上的糖脂質，在血清中以唾液黏蛋白形式存在，主要分布于胎兒胰腺、膽囊、肝臟及腸等部位和正常成年人胰腺、膽管上皮等處。其在正常人血清中含量較低。第二十二頁，共80頁。CA19-9CA19-9是一種胃腸道腫瘤相關抗原，在胰腺癌和膽管癌中陽性率最高。CA19-9的檢測值可以幫助鑒別診斷胰腺癌，敏感性達到70%~87%，但其檢測值高低與腫瘤大小無相互關系，不能作為胰腺癌的早期檢查指標。其檢測值升高主要見于胰腺癌、膽管癌、結腸癌和胃癌等惡性消化道腫瘤，診斷膽管癌CA19-9的敏感性約為50%~75%。卵巢上皮性腫瘤，50%表達CA19-9.卵巢黏液行囊腺癌，CA19-9陽性率可達76%，漿液性腫瘤為27%。子宮內膜癌及宮頸管腺癌也有一定陽性表達。第二十三頁，共80頁。CA19-9良性疾病如慢性胰腺炎、膽石癥、肝炎及肝硬化等也有一定程度增高，但往往為一過性增高，且其濃度多低于120U/ml，必須加以鑒別。第二十四頁，共80頁。CA19-9CA19-9可用于病程評估、預后判斷和轉移復發(fā)監(jiān)測，若手術治療后2~4周CA19-9不能將至正常常提示手術失?。蝗艚档秃笥稚哒哳A示腫瘤復發(fā)；當CA19-9＞1000U/ml時，幾乎均存在外周轉移。與AFP、CEA聯(lián)合檢測可提高胃腸道腫瘤的檢出率。第二十五頁，共80頁。CA125CA125主要存在于胎兒體腔上皮分化而來的心包膜、腹膜和胸膜等組織，在正常女性輸卵管、子宮內膜和子宮頸上皮細胞中亦可見表達，CA125高水平表達主要見于上皮卵巢癌組織及其患者血清中。CA125對來源于上皮細胞的非黏液性卵巢腫瘤患者血清中有很高的檢測率，而正常卵巢（成人及胎兒）的上皮細胞則不表達。CA125存在于卵巢、輸卵管、子宮內膜和子宮頸的上皮細胞中，是診斷卵巢癌并檢測其復發(fā)最敏感的指標，是上皮性卵巢癌與子宮內膜癌的良好腫瘤標志物，可用于卵巢包塊的良惡性鑒別。動態(tài)監(jiān)測其水平有助于卵巢癌的預后分析及治療控制。卵巢癌經治療有效者CA125很快下降；復發(fā)時，CA125升高可先于臨床癥狀出現。CA125聯(lián)合CA19-9可用于子宮內膜癌的病情評估。第二十六頁，共80頁。CA125CA125升高還可見于卵巢囊腫、卵巢化生、子宮內膜異位、子宮肌瘤和子宮頸炎、乳腺癌、胃腸道癌和其他惡性腫瘤，懷孕初期和一些良性疾病（如急、慢性胰腺炎、良性胃腸道疾病、腎衰竭、自身免疫疾病等）CA125也會輕度升高，良性肝臟疾?。ㄈ绺斡不⒏窝祝〤A125會中度升高。各種惡性腫瘤引起的腹水也可見CA125升高。CA125升高還可見于多種婦科良性疾病，如卵巢囊腫、子宮內膜病、宮頸炎及子宮肌瘤等。第二十七頁，共80頁。CA15-3CA15-3是一種由腺體分泌的多形態(tài)上皮糖蛋白，在多種腺癌（乳腺癌、肺腺癌、胰腺癌等）細胞中表達。CA15-3可用于判斷乳腺癌的進展、轉移及療效監(jiān)測，它對轉移性乳腺癌的敏感性和特異性高于CEA，可作為診斷轉移性乳腺癌的首選指標。30%~50%乳腺癌患者CA15-3增高，有轉移灶者增高可達80%，發(fā)現癌轉移的敏感性比癌胚抗原和組織多肽抗原高，且早于臨床發(fā)現轉移。CA15-3亦是檢測乳腺癌術后復發(fā)情況及轉移的重要指標，血清CA15-3水平增高，提示乳腺癌的局部或全身復發(fā)，且增高早于核素檢查和臨床檢查。CA15-3與CA125聯(lián)合檢查，用于卵巢癌復發(fā)的早期診斷。CA15-3與CEA聯(lián)合檢測時，可提高乳腺癌早期診斷的敏感性和特異性。但對早期腫瘤陽性檢出率低，不宜作為早期篩查指標。第二十八頁，共80頁。CA15-3CA15-3血清增高亦可見于肺癌、卵巢癌、結腸癌、肝癌等其它惡性腫瘤。某些良性乳腺疾病，卵巢疾病等非惡性腫瘤疾病亦可引起CA15-3水平的增高。第二十九頁，共80頁。CA242CA242(carbohydrateanigen242)水平在正常人和良性腫瘤患者中很低，但在消化道等多種器官惡性腫瘤患者中CA242的水平很高，特別是胰腺癌、結直腸腫瘤中呈高表達，因此對胰腺和結直腸癌具有很高的特異性和靈敏度，是胰腺癌和結直腸癌的第三代腫瘤標志物。第三十頁，共80頁。CA242對胰腺癌的診斷，CA242優(yōu)于CA19-9，敏感性可達66%~100%，對大腸癌的敏感性也達60%~72%.與CEA、CA19-9聯(lián)合應用可以提高胰腺癌、結、直腸癌診斷的敏感性。CA242是肺癌、胃癌等惡性腫瘤的輔助診斷標志物。CA242可用于正常人群的腫瘤早期篩查。第三十一頁，共80頁。CA72-4CA72-4（carbohydrateantigen72-4）是一種對胃癌具有較高敏感性和特異性的血清腫瘤標志物，它可以提高對胃腸癌的檢出率，并且與胃癌的淋巴結轉移有較高相關性，其在血清中的水平與胃癌的分期有明顯的相關性，有助于正確評估臨床分期。其對胃癌診斷靈敏度為40%~46%.而對良性胃腸疾病的診斷特異性＞95%.CA72-4升高的程度與胃癌的疾病分期有關系。外科手術后，CA72-4水平可迅速下降至正常值。如果腫瘤組織被完全切除，CA72-4可持續(xù)維持在正常水平。在70%復發(fā)病例中，CA72-4濃度升高先于臨床診斷。第三十二頁，共80頁。CA72-4CA72-4對黏液樣卵巢癌的診斷靈敏度高于CA125.兩者結合起來可使初診的診斷靈敏度提高到73%；動態(tài)監(jiān)測的診斷靈敏度可提高到67%.第三十三頁，共80頁。CA72-4結直腸癌完全切除后CA72-4可顯著下降，長期隨訪發(fā)現CA72-4持續(xù)升高提示有殘余的腫瘤存在，與CEA聯(lián)合檢測能使術后腫瘤復發(fā)的診斷靈敏度從78%提高到87%.第三十四頁，共80頁。CA72-4一些良性疾病如風濕病和卵巢囊腫也發(fā)現有CA72-4的升高。第三十五頁，共80頁。神經元特異烯醇化酶糖分解烯醇酶有多種二聚異構體，由α、β和γ三種亞單位組成。其中α亞單位見于哺乳動物多種類型組織，β亞單位主要見于心臟和肌肉組織。αγ和γγ兩種酶異構體被稱為神經元特異烯醇化酶（neuron-specificenolase，NSE），高濃度存在于神經細胞和神經內分泌細胞以及由這些細胞所引發(fā)的腫瘤細胞中。NSE是烯醇化酶的同工酶，其酶異構體為αγ何γγ。第三十六頁，共80頁。神經元特異烯醇化酶（NSE）待測標本避免溶血，因紅細胞與血小板中含有大量的NSE，會產生假陽性結果。第三十七頁，共80頁。神經元特異烯醇化酶（NSE）正常人群或良性疾病患者中，NSE水平很低。而在患有神經內分泌分化的惡性腫瘤的患者中NSE的水平增高。在患小細胞肺癌（SCLC）和神經母細胞瘤（NB）的患者中尤為明顯。NSE是SCLC和NB主要的腫瘤標志物，SCLC患者血清NSE明顯增高，其靈敏度達80%，特異性達80%~90%，而非小細胞肺癌（NSCLC）NSE并無明顯增高，可作為SCLC與NSCLC的鑒別診斷指標，NSE是目前公認的SCLC高特異性和高靈敏性的腫瘤標志物。NSE水平與SCLC轉移程度和治療反應性有良好相關性，動態(tài)監(jiān)測可判斷SCLC的病情進展和治療效果。NSE水平在嗜鉻細胞瘤、胰島細胞瘤、甲狀腺髓樣癌和黑色素瘤等腫瘤中亦可升高。第三十八頁，共80頁。細胞角蛋白19片段細胞角蛋白組成上皮細胞的中層絲狀結構。細胞角蛋白絲狀結構本身不易溶解，但隨著蛋白變性，能夠形成可溶性細胞角蛋白成分，并釋放進入體液循環(huán)。在病理條件下，上皮細胞發(fā)生惡行性變，蛋白酶激活加速細胞降解，大量細胞角蛋白片段釋放入血。細胞角蛋白19（cytokeratin19，CYK-19）是角蛋白家族中最小的成員。CYK-19廣泛分布于正常組織表面，如層狀或鱗狀上皮中。病理條件下其可溶性片段（CYFRA21-1）釋放入血并可與兩株單克隆抗體KS19.1和BM19.21特異性結合，是檢測非小細胞肺癌的首選腫瘤標志物。第三十九頁，共80頁。細胞角蛋白19片段（CYFRA21-1）CYFRA21-1主要用于監(jiān)測非小細胞性肺癌（NSCLC）的病程。CYFRA21-1也適用于監(jiān)測橫紋肌浸潤性膀胱癌的病程。CYFRA21-1較好的特異性可鑒別診斷肺部良性疾病（如：肺炎、結節(jié)病、結核病、慢性支氣管炎、支氣管哮喘、肺氣腫）。CYFRA21-1水平在個別良性肝臟疾病和腎衰竭輕微上升（小于10ng/ml）。其與性別、年齡或吸煙習慣無相關性，不受妊娠影響。第四十頁，共80頁。細胞角蛋白19片段（CYFRA21-1）肺癌的臨床診斷主要根據臨床癥狀、影像學或內鏡檢查和外科手術。肺部不能明確診斷的病灶，如果伴有CYFRA21-1檢測結果的增高（＞30ng/ml），預示患原發(fā)性支氣管肺癌的可能性相當高。血清高水平的CYFRA21-1提示腫瘤晚期和預后較差。血清CYFRA21-1水平正?；蜉p微上升，不能排除腫瘤存在的可能。患者治療中，血清CYFRA21-1水平快速下降到正常范圍內提示治療有效。血清CYFRA21-1水平持續(xù)性保持、輕微改變或緩慢下降提示腫瘤可能切除不完全。在疾病進展過程中，CYFRA21-1水平的升高往往早于臨床癥狀及影像學檢查。第四十一頁，共80頁。胃泌素釋放肽前體（Pro-gastrin-releasingpeptide，ProGRP）胃泌素釋放肽前體（ProGRP）可由小細胞肺癌（SCLS）腫瘤細胞分泌，是SCLS的重要血清診斷標志物，其特異性和敏感性均高于其他肺癌相關指標如NSE和CYFRA21-1等，在SCLS的診斷、復發(fā)轉移判斷、療效監(jiān)測以及預后評價中有重要的指導價值。第四十二頁，共80頁。胃泌素釋放肽前體（ProGRP）CLIA法（化學發(fā)光法）或ELISA法（酶聯(lián)免疫吸附試驗）1、建議使用血漿標本，因為在血液凝固過程中產生的內源性蛋白酶可能會降解血清中的ProGRP。2、血清標本采集后應盡快檢測：為了減少血清標本中ProGRP的降解量，應當縮短標本在室溫中的放置時間，不能超過3小時（包括血液凝固、存放和檢測所需的時間）。血清標本在完全凝固后進行分離檢測，如不能立即檢測，應將其轉移至2~8℃下存儲，從2~8℃冷藏環(huán)境中取出后也應立即進行檢測。3、如果血清在室溫或2~8℃下3小時內、血漿在室溫下8小時或2~8℃下24小時內不能檢測，應將血清或血漿從血細胞、凝塊或分離膠中分離出來，凍存于-20℃下，并在7天內檢測（避免反復凍融）；標本的長期儲存應置于-70℃下。第四十三頁，共80頁。胃泌素釋放肽前體（ProGRP）CLIA法（化學發(fā)光法）或ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗）4、患者標本中的人抗小鼠抗體或嗜異性抗體可能會干擾檢測；標本中含有纖維蛋白、紅細胞和其他顆粒物質，或凍融的標本、或標本需要重復檢測時，均需進行離心。5、不能使用以下標本：熱滅活標本、嚴重溶血標本（Hb＞500mg/dl）、明顯微生物污染、尸檢標本或其他體液。6、采自同一個體的血清和血漿標本得到的檢測結果可能不同，應當在結果報告中說明標本類型；同一患者ProGRP連續(xù)監(jiān)測時，必須使用相同類型的標本基質，以監(jiān)控治療反應或疾病進展狀況。7、如果ProGRP檢測結果與臨床表現不符時，建議通過附加試驗來驗證檢測結果。第四十四頁，共80頁。胃泌素釋放肽前體（ProGRP）臨床應用ProGRP作為腫瘤標志物時，必須檢查患者的腎功能以排除腎小球濾過率降低所導致的血清/漿ProGRP增高，血清肌酐＞353.6mmol/L，可出現血清/漿ProGRP增高。第四十五頁，共80頁。胃泌素釋放肽前體（ProGRP）SCLC患者血清ProGRP陽性率約68.6%；與其它檢測指標聯(lián)合（如NSE和CYFRA21-1等），有助于對肺部腫塊進行小細胞癌和非小細胞癌的分類診斷，尤其是對于那些不能獲得病理檢查結果的患者。第四十六頁，共80頁。胃泌素釋放肽前體（ProGRP）如果非小細胞肺癌（NSCLC）患者血清ProGRP＞100pg/ml，則在排除腎功能影響后，應進一步檢查腫瘤組織是否含有小細胞成分或存在神經內分泌分化。第四十七頁，共80頁。胃泌素釋放肽前體（ProGRP）對于治療前血清/漿ProGRP水平增高的SCLC肺癌患者，該指標的動態(tài)分析有助于療效監(jiān)測、復發(fā)轉移判斷和預后評價，需要結合患者的臨床信息和其他診斷手段，綜合評判。第四十八頁，共80頁。胃泌素釋放肽前體（ProGRP）其他神經內分泌源性腫瘤如類癌、具有神經內分泌特征的肺未分化大細胞癌、甲狀腺髓樣癌，以及具有神經內分泌特征的亞群雄激素非依賴性前列腺癌等，也會出現ProGRP水平的增高，因此，ProGRP檢測不是判斷SCLC的絕對指標，必須結合其他的檢測手段綜合評判；另外，SCLC在一般人群中的發(fā)病率低，因此ProGRP也不適用于該病的篩查。第四十九頁，共80頁。前列腺特異抗原（prostatespecificantigen，PSA）前列腺特異抗原（PSA）是一種與前列腺癌相關的抗原，生理條件下主要由前列腺導管上皮細胞合成，分泌如精漿，微量進入血液循環(huán)。PSA的測定目前廣泛應用于前列腺患者的檢查和治療，被認為是首選的前列腺癌血清診斷指標。第五十頁，共80頁。前列腺特異抗原（prostatespecificantigen，PSA）ELISA法在進行前列腺檢測之前應檢測總PSA（t-PSA）和游離PSA（f-PSA）含量，建議在進行外科直腸檢測之前抽血。如果外科檢查前列腺，比如活檢或經尿道的切除手術等，必須在不少于6周后方可抽血檢查PSA，否則有可能會因此導致PSA水平升高。使用CLIA法或ECLIA法檢測時，直腸指診、直腸內超聲檢查、前列腺按摩、前列腺穿刺和膀胱鏡均可致血清PSA明顯升高，應確保在任何有關前列腺的活動之前進行血樣的抽取。第五十一頁，共80頁。前列腺特異抗原（prostatespecificantigen，PSA）CLIA法檢測結合PSA，溶血或脂血標本應避免使用。標本置-20℃存放，避免反復凍融。采血前48小時內不得做灌腸，前列腺指診或穿刺等檢查治療，否則測定結果會增高。第五十二頁，共80頁。前列腺特異抗原（prostatespecificantigen，PSA）PSA具有較強的器官特異性，雖在前列腺肥大及前列腺炎等良性前列腺疾病有升高，但在前列腺癌的篩查、輔助診斷、療效監(jiān)測及復發(fā)預測等方面仍發(fā)揮重要作用，可用于前列腺良惡性疾病的鑒別輔助診斷。第五十三頁，共80頁。前列腺特異抗原（prostatespecificantigen，PSA）PSA升高可見于前列腺癌、前列腺肥大及前列腺炎等疾病。前列腺癌手術后，t-PSA可降至正常，若術后t-PSA濃度不降或降后又升高，提示腫瘤轉移或復發(fā)。前列腺癌患者的f-PSA低于正常和良性疾病，因此f-PSA/t-PSA比值可作為前列腺癌的診斷指標，當f-PSA/t-PSA＜15%，高度提示前列腺癌變，是前列腺良惡性疾病的鑒別點。第五十四頁，共80頁。前列腺特異抗原（prostatespecificantigen，PSA）PSA水平隨年齡的增長而增加，一般以每年0.04ng/ml的速度遞增。與前列腺增生的程度有關，但兩者并不具有相關性?？赡芤鹎傲邢贀p傷的各種檢查均可引起PSA的明顯升高。第五十五頁，共80頁。前列腺特異抗原（prostatespecificantigen，PSA）PSA是目前可用于篩查的標志物。但是PSA在低濃度時和良性前列腺增生（BPH）有重疊。為了改善PSA早期診斷能力，學術界提出了幾個辦法：1、以年齡調整參考范圍上限，40~49歲為2.5μg/L，50~59歲為3.5μg/L，60~69歲為4.5μg/L，70~79歲為6.5μg/L；2、PSA增長的速率，高速增長者（0.75μg/L/y）為癌癥；3、PSA密度，即PSA濃度/超聲測量前列腺體積，如PSA為4~10μg/L，直腸指征陰性，但密度陽性[陽性判斷值為>0.15/ng/(ml·cm)]，則可能是癌癥；4、f-PSA和t-PSA比值具有重要的診斷價值。特別是當t-PSA在4.0~10.0μg/L時，血清中f-PSA/t-PSA比值為0.15，可作為前列腺肥大和前列腺癌的鑒別要點，比值<0.15時前列腺癌的可能性大。臨床大多應用血清中f-PSA/t-PSA比值來鑒別良、惡性前列腺腫瘤。第五十六頁，共80頁。人絨毛膜促性腺激素（humanchorionicgonadotropin，hCG）人絨毛膜促性腺激素（hCG）是人胚胎滋養(yǎng)層細胞分泌的一種糖蛋白類激素，有α和β兩種亞單位，β亞基為hCG所特有，可通過免疫試驗測定。第五十七頁，共80頁。人絨毛膜促性腺激素（humanchorionicgonadotropin，hCG）血清hCG是診斷早期妊娠的常用指標，也用于異位妊娠性疾病的早期發(fā)現和鑒別診斷。血清hCG升高常見于育齡婦女。正常受孕后，血中hCG含量迅速增加，孕60~80天達到最高峰，隨后逐漸下降，孕160~180天時降到最低，但仍明顯高于正常，此后又稍回升繼續(xù)保持到分娩；雙胎妊娠時，血清hCG比單胎妊娠增加一倍以上，血清hCG異常升高也可見于絨毛膜癌和葡萄胎；宮外孕時，血清hCG則低于同期正常妊娠值。第五十八頁，共80頁。人絨毛膜促性腺激素（humanchorionicgonadotropin，hCG）若早孕婦女血清hCG明顯偏低或連續(xù)監(jiān)測呈下降趨勢，則預示先兆流產；實施人工流產手術后，若血清hCG值仍明顯高于正常或呈上升趨勢，則提示手術不徹底；hCG升高還可見于生殖細胞、卵巢、膀胱、胰腺、胃、肺和肝臟腫瘤的患者。第五十九頁，共80頁。β2-微球蛋白（β2-microglobulin，β2-MG）β2-微球蛋白（β2-microglobulin，β2-MG）是由血小板、淋巴細胞和多形核白細胞產生的一種小分子球蛋白。其分子量11800，由99個氨基酸組成。它是細胞表面人類組織相容性抗原（LIA）的β鏈部分，分子內含一對二硫鍵，與免疫球蛋白穩(wěn)定區(qū)結構相似。第六十頁，共80頁。β2-微球蛋白（β2-microglobulin，β2-MG）由于β2-MG在酸性環(huán)境中不穩(wěn)定，疑為尿中酸性蛋白酶分解所致，故取樣不宜采用清晨第一次尿，且標本采集后使用K2HPO4調整pH7.8后進行測定，2~8℃保存可以穩(wěn)定2天或-20℃保存可以穩(wěn)定2個月。在使用CLIA法收集尿液時應棄晨尿，喝500ml水60分鐘后留尿。第六十一頁，共80頁。β2-微球蛋白（β2-microglobulin，β2-MG）腎功能是影響血β2-MG濃度的最主要因素，可用血β2-MG估測腎功能。血β2-MG是反映腎小球濾過功能的靈敏指標，各種原發(fā)性或繼發(fā)性腎小球病變如累及腎小球濾過功能，均可致血β2-MG升高；血β2-MG是反映高血壓和糖尿病腎功能受損的敏感指標；長期血液透析患者血β2-MG升高與淀粉樣變、淀粉骨關節(jié)病及腕綜合征的發(fā)生相關；血β2-MG有助于動態(tài)觀察、診斷早期腎移植排斥反應。第六十二頁，共80頁。β2-微球蛋白（β2-microglobulin，β2-MG）血β2-MG是淋巴細胞增殖性疾病的主要標志物。多發(fā)性骨髓瘤、慢性淋巴性白血病者血β2-MG濃度明顯增加。其β2-MG血清水平可用于評價骨髓瘤的預后及治療效果。人巨細胞病毒、EB病毒、乙肝或丙肝病毒及HIV感染時血β2-MG亦可增高。第六十三頁，共80頁。β2-微球蛋白（β2-microglobulin，β2-MG）自身免疫性疾病時血β2-MG增高，尤其是系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）活動期。50%類風濕關節(jié)炎患者血β2-MG升高，并且和關節(jié)受累數目呈正相關。目前認為測定血β2-MG可用于評估自身免疫性疾病的活動程度，并可作為觀察藥物療效的指標。第六十四頁，共80頁。β2-微球蛋白（β2-microglobulin，β2-MG）檢測尿β2-MG是診斷近曲小管損害敏感而特異的方法。當近曲小管輕度受損時，尿β2-MG明顯增加，且與腎小管重吸收率呈正相關。尿蛋白/尿β2-MG比值有助于鑒別腎小球或腎小管病變。單純腎小球病變尿蛋白/尿β2-MG比值大于300，單純腎小管病變比值小于10，而混合性病變其比值介于兩者之間。尿β2-MG用于鑒別尿路感染，上尿路感染時尿液β2-MG濃度明顯增加，而下尿路感染時則基本正常；糖尿病、高血壓患者早期尿β2-MG與其腎功能損害程度顯著相關；惡性腫瘤、自身免疫性疾病腎損害時尿中β2-MG明顯增高；尿β2-MG檢測可用于判斷腎移植的排斥反應，腎移植患者血、尿β2-MG明顯增高常提示機體發(fā)生排斥反應。第六十五頁，共80頁。鱗狀上皮細胞癌抗原（squamouscellcarcinomaantigen，SCC-Ag或SCC）鱗狀上皮細胞癌抗原（SCC）在正常鱗狀上皮細胞中表達極微，其主要功能為抑制細胞凋亡和參與鱗狀上皮層的分化；在腫瘤細胞中表達增高，通過細胞凋亡通路對機體的幾種細胞自殺機制產生抵抗并參與細胞外基質的降解，從而促進腫瘤細胞的增殖和浸潤。血清SCC檢測常用于以宮頸鱗癌為代表的所有鱗狀上皮細胞起源的輔助診斷和監(jiān)測，特異性高。血清中SCC至少有四種形式存在：游離SCC1、游離SCC2，以及相對應的絲氨酸蛋白酶結合物。第六十六頁，共80頁。鱗狀上皮細胞癌抗原（squamouscellcarcinomaantigen，SCC-Ag或SCC）CLIA法與MEIA法檢測時，SCC廣泛存在于皮膚、汗液和唾液中，因而標本應避免汗液、唾液或氣溶膠（噴嚏）污染，以防止假陽性結果；對于SCC陽性結果、特別是其結果與臨床表現不符時，需要再次試驗予以確認?；颊邩吮局械娜丝故罂贵w或異嗜性抗體可能會干擾檢測。不能使用以下標本：熱滅活標本、嚴重溶血標本（Hb>500mg/dl）、尸檢標本或其它體液。在療效或隨訪監(jiān)測中，檢測值的比較必須使用相同的檢測方法，否則，必須對新舊兩種方法進行平行比對檢測。第六十七頁，共80頁。鱗狀上皮細胞癌抗原（squamouscellcarcinomaantigen，SCC-Ag或SCC）ELISA法標本應避免汗液、唾液或氣溶膠（噴嚏）污染；打開試劑盒及試驗全過程需要戴手套操作，以防止假陽性結果。第六十八頁，共80頁。鱗狀上皮細胞癌抗原（squamouscellcarcinomaantigen，SCC-Ag或SCC）血清中SCC水平升高，可見于約83%的宮頸鱗癌、25%~75%的肺鱗狀細胞癌、30%的Ⅰ期和89%的Ⅲ期食管鱗癌；也可見于部分卵巢癌、子宮癌和頸部鱗狀上皮細胞癌。1、對宮頸鱗癌有較高的輔助診斷價值原發(fā)性宮頸鱗癌敏感性為44%~69%，特異性為90%~96%，早期診斷價值有限；其臨床意義主要體現在對治療療效以及復發(fā)和轉移的監(jiān)控上，必須定期檢測、動態(tài)觀察，并與其他診斷或治療檢測手段結合評判。2、輔助診斷肺鱗癌其水平與腫瘤的進展程度相關，與CYFRA21-1、NSE和CEA聯(lián)合檢測可提高肺癌患者診斷的敏感性。3、輔助診斷食管鱗癌不能單獨作為早期診斷指標，陽性率隨病情發(fā)展而上升，對于晚期患者，其靈敏度可達73%，與CYFRA21-1聯(lián)合檢測可提高診斷的敏感性。第六十九頁，共80頁。鱗狀上皮細胞癌抗原（squamouscellcarcinomaantigen，SCC-Ag或SCC）4、其它鱗癌如頭頸癌、外陰癌、膀胱癌、肛管癌和皮膚癌等，SCC也有一定的療效和病程監(jiān)測價值。5、良性疾病如表皮過度角化的皮膚疾病、子宮內膜異位、肺炎、腎衰竭、結核、肝炎和肝硬化等SCC水平也會有不同程度升高。因此，SCC檢測不是診斷鱗狀細胞癌的絕對指標，必須結合其他的檢查手段：也不能作為鱗狀細胞癌的篩查指標。第七十頁，共80頁。人表皮生長因子受體-2蛋白胞外區(qū)（humanepidermalgrowthfactorreceptor-2extracellulardomain，HER-2ECD）人表皮生長因子受體-2蛋白胞外區(qū)（HER-2ECD）是HER-2蛋白的胞外區(qū)受蛋白酶裂解，從細胞表面脫落至血液中形成的可溶性糖蛋白（分子量約為105kD，故又被稱為p105）。血清HER-2ECD檢測具有與腫瘤組織HER-2相關性好且易于實時動態(tài)監(jiān)測的優(yōu)點，是組織學檢測的一種重要補充。第七十一頁，共80頁。人表皮生長因子受體-2蛋白胞外區(qū)（humanepidermalgrowthfactorreceptor-2extracellulardomain，HER-2ECD）CLIA法：規(guī)范實驗室標本采集流程，血清標本采集后應盡快分離和檢測（3小時內），否則將血清分離后放置2~8℃，或-20℃下貯存并避免反復凍融。待測標本和質控物禁用疊氮化物防腐，含有沉淀物的待測標本檢測前需充分離心。正在接受眼底熒光血管造影的患者，在治療后36~48小時內會在體內保留大量熒光素，腎功能不全者可能會停留更長時間，這類患者使用該檢測方法時可能會產生錯誤的數值降低，需要謹慎解釋結果。第七十二頁，共80頁。人表皮生長因子受體-2蛋白胞外區(qū)（humanepidermalgrowthfactorreceptor-2extracellulardomain，HER-2ECD）實驗室檢測HER-2狀態(tài)已成為乳腺癌臨床評估的常規(guī)項目，是對適宜患者采取HER-2基因靶向藥物治療的先決條件，同時也是判斷預后和制定有效治療方案（包括激素治療和化療）的重要參考指標。臨床上通常使用免疫組織化學法檢測HER-2蛋白的表達或原位熒光雜交法檢測HER-2基因的擴增，具有取材受限（需手術或活檢）、無法跟蹤監(jiān)測，以及判斷方法尚未標準化、易受檢測者主觀干擾等缺點；因此，血清標本HER-2ECD的檢測受到重視。第七十三頁，共80頁。人表皮生長因子受體-2蛋白胞外區(qū)（humanepidermalgrowthfactorrece