食品安全檢測(cè)技術(shù)2014

食品安全檢測(cè)技術(shù)2014第一頁(yè)，共49頁(yè)。第一節(jié)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法（Enzyme-linkedimmunosorbentassay，ELISA）是一種采用抗原與抗體的特異反應(yīng)將待測(cè)物與酶連接，然后通過(guò)酶與底物產(chǎn)生顏色反應(yīng)的定量測(cè)定技術(shù)。顏色反應(yīng)的深淺與標(biāo)本中相應(yīng)抗體或抗原的量呈正比。ELISA檢測(cè)儀。酶化學(xué)反應(yīng)的敏感性和抗原抗體反應(yīng)的特異性結(jié)合，使ELISA法既特異又敏感。2023/5/22第二頁(yè)，共49頁(yè)。第一節(jié)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法2023/5/23第三頁(yè)，共49頁(yè)。第一節(jié)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法2023/5/24第四頁(yè)，共49頁(yè)。第二節(jié)分光光度法一、白酒中甲醇的測(cè)定（品紅亞硫酸比色法）原理：酒中甲醇在磷酸溶液中被高錳酸鉀氧化成甲醛；過(guò)量的高錳酸鉀及在反應(yīng)中產(chǎn)生的二氧化錳用硫酸草酸溶液除去；甲醛與品紅亞硫酸作用生成藍(lán)紫色醌型色素，于其最大吸收波長(zhǎng)590nm下測(cè)吸光度值A(chǔ),與標(biāo)準(zhǔn)系列比較定量。2023/5/25第五頁(yè)，共49頁(yè)。第二節(jié)分光光度法一、白酒中甲醇的測(cè)定（品紅亞硫酸比色法）步驟：1、根據(jù)待測(cè)白酒中含乙醇多少適當(dāng)取樣（含乙醇30％取1.0ml；40％取0.8ml；50％取0.6ml；60％取0.5ml）于25ml比色管中。2、精確吸取0.0、0.20、0.40、0.60、0.80、1.00ml甲醇標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液（相當(dāng)于0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mg甲醇）分別置于25ml比色管中，各加入0.3ml無(wú)甲醇無(wú)甲醛的乙醇。2023/5/26第六頁(yè)，共49頁(yè)。第二節(jié)分光光度法一、白酒中甲醇的測(cè)定（品紅亞硫酸比色法）步驟：3、于樣品管及標(biāo)準(zhǔn)管中各加水至5ml，混勻，各管加入2ml高錳酸鉀－磷酸溶液，混勻，放置10min。4、各管加2ml草酸－硫酸溶液，混勻后靜置，使溶液褪色。5、各管再加入5ml品紅亞硫酸溶液，混勻，于20℃以上靜置0.5h。6、以0管調(diào)零點(diǎn)，于590nm波長(zhǎng)處測(cè)吸光度，與標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)比較定量。2023/5/27第七頁(yè)，共49頁(yè)。第二節(jié)分光光度法二、食品中亞硝酸鹽的測(cè)定原理：在弱酸條件下樣品中亞硝酸鹽與對(duì)氨基苯磺酸重氮化后，再與鹽酸萘乙二胺偶合形成紫紅色的染料，于其最大吸收波長(zhǎng)538nm下測(cè)吸光度值A(chǔ),與標(biāo)準(zhǔn)系列比較定量。

2023/5/28第八頁(yè)，共49頁(yè)。第二節(jié)分光光度法二、食品中亞硝酸鹽的測(cè)定步驟：1、樣品的處理：（1）取樣：準(zhǔn)確稱(chēng)取5.0g經(jīng)絞碎、混勻的樣品，置于50mL燒杯中。（2）沉淀蛋白質(zhì)：①加12.5mL硼砂飽和溶液，攪拌均勻，以70℃左右的水約300mL將樣品洗入500mL容量瓶中，置沸水浴中加熱15min，取出后冷卻至室溫。②一面轉(zhuǎn)動(dòng)一面加入5mL亞鐵氰化鉀溶液，搖勻，再加入5mL乙酸鋅溶液，以沉淀蛋白質(zhì)。

2023/5/29第九頁(yè)，共49頁(yè)。第二節(jié)分光光度法二、食品中亞硝酸鹽的測(cè)定1、樣品的處理：（3）過(guò)濾：加水定容，放置0.5h，除去上層脂肪，清液用濾紙過(guò)濾，棄去初濾液30mL，濾液備用。

2、標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的繪制和樣品的測(cè)定取樣品20ml于25ml比色管中；精確移取0.0、0.10、0.30、0.50、0.75、1.25ml亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液（0.20μg/ml）分別置于25ml比色管中；

2023/5/210第十頁(yè)，共49頁(yè)。第二節(jié)分光光度法二、食品中亞硝酸鹽的測(cè)定2、標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的繪制和樣品的測(cè)定各管加入1ml對(duì)氨基苯磺酸溶液（4.0g/ml），混勻，靜置3-5min；各管加入0.5ml鹽酸萘乙二胺溶液（2.0g/ml），加水至刻度（25ml)，混勻，靜置15min，以0管調(diào)節(jié)零點(diǎn)，于波長(zhǎng)538nm處測(cè)吸光度A，與標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)比較定量。

2023/5/211第十一頁(yè)，共49頁(yè)。一、蔬菜中有機(jī)磷和氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥殘留量的快速檢測(cè)原理：膽堿脂酶可催化靛酚乙酸脂（紅色）水解為乙酸與靛酚（藍(lán)色），有機(jī)磷或氨基甲酸脂類(lèi)農(nóng)藥對(duì)膽堿脂酶有抑制作用，使催化、水解、變色的過(guò)程發(fā)生改變，由此可判斷出樣品中是否有高劑量有機(jī)磷或氨基甲酸脂類(lèi)農(nóng)藥的存在。第三節(jié)現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)法2023/5/212第十二頁(yè)，共49頁(yè)。一、蔬菜中有機(jī)磷和氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥殘留量的快速檢測(cè)第三節(jié)現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)法2023/5/213第十三頁(yè)，共49頁(yè)。第三節(jié)現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)法使用方法:整體測(cè)定法1、選取有代表性的蔬菜樣品，擦去表面泥土，剪成1cm左右見(jiàn)方碎片，取5g放入帶蓋瓶中，加入10mL純凈水或緩沖溶液，震搖50次，靜置2min以上。

2、取一片速測(cè)卡，撕去上蓋膜，用白色藥片沾取提取液，放置10min以上進(jìn)行預(yù)反應(yīng)，有條件時(shí)，在37℃恒溫裝置中放置10min。預(yù)反應(yīng)后的藥片表面必須保持濕潤(rùn)。

2023/5/214第十四頁(yè)，共49頁(yè)。第三節(jié)現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)法使用方法:3、將速測(cè)卡對(duì)折，用手捏3min或用恒溫裝置恒溫3min，使紅色藥片與白色藥片疊合發(fā)生反應(yīng)。根據(jù)白色藥品的顏色變化判讀結(jié)果。4、每批測(cè)定應(yīng)設(shè)一個(gè)純凈水或緩沖液的空白對(duì)照卡。2023/5/215第十五頁(yè)，共49頁(yè)。一、蔬菜中有機(jī)磷和氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥殘留量的快速檢測(cè)表面測(cè)定法（粗篩法）1、擦去蔬菜表面泥土，滴2-3滴洗脫液在蔬菜表面，用另一片蔬菜在滴液處輕輕摩擦。2、取一片速測(cè)卡，撕去上蓋膜，將蔬菜上的液滴滴在白色藥片上。3、放置10min以上進(jìn)行預(yù)反應(yīng)，有條件時(shí)，在37℃恒溫裝置中放置10min。預(yù)反應(yīng)后的藥片表面必須保持濕潤(rùn)。

第三節(jié)現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)法2023/5/216第十六頁(yè)，共49頁(yè)。一、蔬菜中有機(jī)磷和氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥殘留量的快速檢測(cè)表面測(cè)定法（粗篩法）4、將速測(cè)卡對(duì)折，用手捏3min或用恒溫裝置恒溫3min，使紅色藥片與白色藥片疊合發(fā)生反應(yīng)。根據(jù)白色藥品的顏色變化判讀結(jié)果。5、每批測(cè)定應(yīng)設(shè)一個(gè)洗脫液的空白對(duì)照卡。第三節(jié)現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)法2023/5/217第十七頁(yè)，共49頁(yè)。二、硝酸鹽快速檢測(cè)試紙?jiān)恚涸谌跛釛l件下樣品中亞硝酸鹽與對(duì)氨基苯磺酸重氮化后，再與鹽酸萘乙二胺偶合形成紫紅色的染料。

第三節(jié)現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)法2023/5/218第十八頁(yè)，共49頁(yè)。第三節(jié)現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)法2023/5/219第十九頁(yè)，共49頁(yè)。三、黃曲霉毒素B1檢測(cè)卡第三節(jié)現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)法2023/5/220第二十頁(yè)，共49頁(yè)。三、黃曲霉毒素B1檢測(cè)卡第三節(jié)現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)法2023/5/221第二十一頁(yè)，共49頁(yè)。三、黃曲霉毒素B1檢測(cè)卡第三節(jié)現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)法2023/5/222第二十二頁(yè)，共49頁(yè)。第四節(jié)其他儀器檢測(cè)法第二十三頁(yè)，共49頁(yè)。儀器檢測(cè)技術(shù)痕量無(wú)機(jī)物定量電感耦合等離子體質(zhì)譜(ICP-MS）原子發(fā)射光譜（AES）原子吸收光譜（AAS）毛細(xì)管電泳—質(zhì)譜（CE-MS）氣相色譜—串聯(lián)質(zhì)譜(GC-MS/MS)色譜—質(zhì)譜聯(lián)用高效液相色譜—串聯(lián)質(zhì)譜（LC-MS/MS）高效液相色譜—質(zhì)譜（LC-MS）氣相色譜—質(zhì)譜（GC-MS）色譜液相色譜氣相色譜第四節(jié)其他儀器檢測(cè)法第四節(jié)其他儀器檢測(cè)法第二十四頁(yè)，共49頁(yè)。高選擇性分離單組份定性定量高效能高靈敏度檢出限量低至10-1lg的物質(zhì)，適于微量和痕量分析。色譜法的特點(diǎn)第二十五頁(yè)，共49頁(yè)。氣相色譜分析系統(tǒng)構(gòu)成氣路系統(tǒng)，進(jìn)樣系統(tǒng)，分離系統(tǒng)，檢測(cè)系統(tǒng)工作原理樣品高溫瞬間汽化-色譜柱分離-檢測(cè)適用易揮發(fā)的小分子有機(jī)物難揮發(fā)性成分經(jīng)衍生化檢測(cè)第二十六頁(yè)，共49頁(yè)。氣相色譜-分離系統(tǒng)色譜柱填充柱，毛細(xì)管柱色譜柱選擇：按樣品極性

弱極性樣品，可選OV-1，SE-30，OV-101，SE-52，

SE-54

中極性樣品，可選OV-17，OV-1701，XE-60，OV-225，OV-210

極性樣品，可選PEG-20M,FFAP,OV-275,DEGS

第二十七頁(yè)，共49頁(yè)。氣相色譜-檢測(cè)系統(tǒng)氫火焰離子化檢測(cè)器（FID）：破壞型含碳的有機(jī)物電子捕獲檢測(cè)器（ECD）：非破壞型，選擇性

電負(fù)性強(qiáng)的化合物火焰光度檢測(cè)器（FPD）：破壞型，選擇性含硫磷的化合物熱導(dǎo)池檢測(cè)器（TCD）：非破壞型，選擇性

永久性氣體

第二十八頁(yè)，共49頁(yè)。氣相色譜在食品安全檢測(cè)中的應(yīng)用反式脂肪酸的檢測(cè)（衍生，F(xiàn)ID)苯，氯苯，氯酚類(lèi)（直接進(jìn)樣，F(xiàn)ID）有機(jī)氯農(nóng)藥（ECD)有機(jī)磷農(nóng)藥（FPD)第二十九頁(yè)，共49頁(yè)。氣相色譜分離與質(zhì)譜定性定量結(jié)合1.對(duì)食品中殘留物進(jìn)行分析

MS是一個(gè)通用型檢測(cè)器，對(duì)大多數(shù)有機(jī)化合物都有比較好的響應(yīng)，根據(jù)特征離子強(qiáng)度定量多種成分的同時(shí)分析--殘留分析的趨勢(shì)之一適合大批量農(nóng)殘檢測(cè)。2.對(duì)未知物分析準(zhǔn)確測(cè)定未知組分的相對(duì)分子質(zhì)量。

氣相色譜與質(zhì)譜的聯(lián)用分析第三十頁(yè)，共49頁(yè)。增塑劑：鄰苯二甲酸酯類(lèi)氣相色譜與質(zhì)譜的聯(lián)用第三十一頁(yè)，共49頁(yè)。食品中42種農(nóng)藥的氣相色譜-質(zhì)譜選擇離子測(cè)定樣品處理方法液液萃取-固相萃取聯(lián)用：樣品中農(nóng)藥經(jīng)二氯甲烷提取后，Envi-Carb柱和Sep-Pak-NH2柱雙柱凈化，凈化后直接進(jìn)樣分析

色譜條件色譜柱:HP-5MS(30m×0.125mm×0.125μm);載氣:高純氦氣,流量1ml/min;柱溫:70℃,保持2min,以25℃/min升至150℃,再以3℃/min升至200℃,再以8℃/min升至260℃,保持10min;進(jìn)樣口溫度:250℃;進(jìn)樣方式:不分流進(jìn)樣,1.15min后打開(kāi)分流閥和隔墊吹掃。

質(zhì)譜條件

離子源(EI)溫度:230℃,電子轟擊能量70ev,GC-MS接口溫度:280℃。氣相色譜與質(zhì)譜的聯(lián)用-分析實(shí)例1第三十二頁(yè)，共49頁(yè)。分析特征量

42中農(nóng)藥的線(xiàn)性范圍:0.001～1.0μg/mL

樣品的加標(biāo)回收率：89%-94%,RSD<10%

方法的最低檢出限：0.001～0.005mg/kg(S/N=3)

檢測(cè)農(nóng)藥種類(lèi)

有機(jī)磷、擬除蟲(chóng)菊酯、有機(jī)氯、氨基甲酸酯和除草劑

檢測(cè)的樣品種類(lèi)

肉類(lèi)，蛋類(lèi)，乳品，蔬菜和水果氣相色譜與質(zhì)譜的聯(lián)用-分析實(shí)例1第三十三頁(yè)，共49頁(yè)。加速溶劑萃取-氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法測(cè)定食品中指示性多氯聯(lián)苯樣品前處理

加速溶劑萃取-固相萃取聯(lián)用：加速溶劑萃取條件壓力:10Mpa(1500psi);溫度:125℃;

加熱時(shí)間:6min;穩(wěn)定時(shí)間:5min;

清洗體積:占萃取池體積的60%;吹掃時(shí)間:120s;

靜態(tài)循環(huán)次數(shù):2次。固相萃取柱：酸性硅膠柱和堿性硅膠柱聯(lián)用氣相色譜與質(zhì)譜的聯(lián)用-分析實(shí)例2第三十四頁(yè)，共49頁(yè)。色譜條件

HP-5MS毛細(xì)管色譜柱(30m×0.125mm×0.125μm);進(jìn)樣口溫度:300℃;升溫程序:初始溫度100℃保持2min,以15℃/min升溫至180℃,以3℃/min升溫至240℃,再以10℃/min升溫至285℃,保持10min;載氣:氦氣,流速1ml/min;進(jìn)樣:不分流進(jìn)樣,1μL質(zhì)譜條件

電子轟擊(EI)離子源:70eV;接口溫度:280℃;離子源溫度:250℃;四級(jí)桿溫度:100℃;定量方式:選擇離子監(jiān)測(cè)(SIM)

氣相色譜與質(zhì)譜的聯(lián)用-分析實(shí)例2第三十五頁(yè)，共49頁(yè)。分析特征量

最低檢測(cè)限：水產(chǎn)品0.1051～0.1286，肉松0.1003～0.1146μg/kg

添加回收率：86.4%～125.1%,RSD在1.1%～19.6%之間

檢測(cè)的目標(biāo)有害物質(zhì)

20種多氯聯(lián)苯

檢測(cè)的樣品種類(lèi)

水產(chǎn)品，肉松氣相色譜與質(zhì)譜的聯(lián)用-分析實(shí)例2第三十六頁(yè)，共49頁(yè)。高效液相色譜法第三十七頁(yè)，共49頁(yè)。高效液相色譜儀的應(yīng)用

分離熱不穩(wěn)定和非揮發(fā)性的、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質(zhì)。蘇丹紅三聚氰胺合成色素生物毒素?cái)硵澄冯p酚A

第三十八頁(yè)，共49頁(yè)。

GB/T5009.99-2003食品容器及包裝材料用聚碳酸酯樹(shù)脂衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)的分析方法我國(guó)的衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定碳酸酯樹(shù)脂和成型品中酚（蒸餾水，回流6h）的溶出量不大于0.05mg/kg，是采用滴定的方法對(duì)溶液中游離的酚進(jìn)行定量計(jì)算。歐盟

歐盟2002/72/EC法則規(guī)定雙酚A在塑料食品接觸材料中的遷移限量為3mg/kg。歐盟采用液相色譜對(duì)雙酚A的遷移量進(jìn)行檢測(cè)（檢出限為0.2～0.7mg/kg）。美國(guó)

美國(guó)食品與藥品管理局（FDA）規(guī)定雙酚A可作為食品接觸材料的原料使用。

EPA(1993)規(guī)定最大可接受劑量或者參考劑量是0.05mg/kg.bw。日本

《食品衛(wèi)生法》規(guī)定聚碳酸酯食品容器中的雙酚A溶出限量為2.5mg/kg。第三十九頁(yè)，共49頁(yè)。液質(zhì)聯(lián)用HLPC-MS以液相色譜作為分離系統(tǒng)，質(zhì)譜為檢測(cè)系統(tǒng)。樣品在液相色譜部分分離，經(jīng)質(zhì)譜離子化，質(zhì)量分析器將離子碎片按質(zhì)量數(shù)分開(kāi)，經(jīng)檢測(cè)器得到質(zhì)譜圖。色譜和質(zhì)譜優(yōu)勢(shì)結(jié)合，應(yīng)用廣泛。

第四十頁(yè)，共49頁(yè)。適用于高沸點(diǎn)、大分子、強(qiáng)極性和熱穩(wěn)定性差的化合物的分析。適于復(fù)雜基質(zhì)樣品,特別是食品，生物樣品中的農(nóng)獸藥殘留的定性定量分析。利于多組分分析。

高效液相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用分析第四十一頁(yè)，共49頁(yè)。樣品前處理液液萃取-固相萃?。簶悠方?jīng)過(guò)乙腈和二氯甲烷提取后，過(guò)C18固相萃取柱凈化色譜條件色譜柱:AgilentSB-C18,211mm×10mm,1.18μm;

柱溫:50℃;進(jìn)樣量:20μL;

流動(dòng)相A:0.1%甲酸-10mmol/L乙酸銨;

流動(dòng)相B:乙腈;流速:0.13mL/min;

梯度洗脫條件:0～4min,A由99%變化至50%,4～15min,A由50%變化至40%,15～20min,A由40%變化至20%,20～25min,A由20%變化至1%,25～30min,A保持1%,30～35min,A由1%變化至99%后運(yùn)行8min高效液相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用-分析實(shí)例1液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用對(duì)復(fù)雜食品基質(zhì)中407種多農(nóng)藥殘留量的測(cè)定第四十二頁(yè)，共49頁(yè)。質(zhì)譜條件

電離源模式:電噴霧離子化電離源極性:正模式霧化氣:氮?dú)忪F化氣壓力:2.18×105

離子噴霧電壓:4000V干燥氣溫度:350℃

分析特征量

407種農(nóng)藥的線(xiàn)性范圍為0.5～500μg/L，RSD<10%檢測(cè)目標(biāo)有害物

多效唑，乙草胺等407種農(nóng)藥檢測(cè)的樣品

蘋(píng)果、蜂蜜、谷物和肉類(lèi)高效液相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用-分析實(shí)例1第四十三頁(yè)，共49頁(yè)。多環(huán)芳烴

FDA提出有威脅的多環(huán)芳烴主要有16種。

歐盟指令2005/69/EC對(duì)輪胎橡膠中的8種PAHs的含量提出了法規(guī)上的要求；8種物質(zhì)之和不超過(guò)10mg/kg，其中，BaP(苯并芘)不得超過(guò)1

mg/kg。第四十四頁(yè)，共49頁(yè)。電泳技術(shù)和現(xiàn)代微柱分離相結(jié)合的分析技術(shù)高分辨率，高速度，樣品用量少，成本低非常適合水溶性或醇溶性成分的多組分分離分析

應(yīng)用領(lǐng)域化學(xué)，生命科學(xué)，臨床醫(yī)學(xué)和藥學(xué)，特別是藥物分析和分離方面得到廣泛的應(yīng)用