實驗細菌的接種及分離培養(yǎng)

目的要求1、學習和掌握細菌分離與培養(yǎng)的各種基本技術(shù)；2、進一步熟悉和掌握無菌操作技術(shù)。目前一頁\總數(shù)二十四頁\編于十點實驗材料標本和菌種：咽拭子、葡萄球菌培養(yǎng)物、變形桿菌培養(yǎng)物；實驗器材：接種環(huán)、接種針、酒精燈；培養(yǎng)基：普通瓊脂平板、試管斜面、液體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基；目前二頁\總數(shù)二十四頁\編于十點常用的有接種針、接種環(huán)、接種鉤、接種圈、接種鏟或接種鋤、玻璃涂棒等（見圖－6）。圖－6接種工具目前三頁\總數(shù)二十四頁\編于十點細菌接種的基本程序滅菌接種環(huán)沾取標本接種滅菌接種環(huán)殺滅接種環(huán)沾染的細菌，以免污染標本殺滅接種環(huán)沾染的細菌，以免污染環(huán)境目前四頁\總數(shù)二十四頁\編于十點（一）細菌的分離方法培養(yǎng)基：固體平板培養(yǎng)基分離方法：劃線分離法意義：該法主要是借助劃線而將混雜的細菌在瓊脂表面分散開，使單個細菌能固定在某一點，生長繁殖后形成單個菌落，以達到分離純種的目的。細菌的分離培養(yǎng)方法目前五頁\總數(shù)二十四頁\編于十點微生物的分離—平板劃線法1.分區(qū)劃線法：2.連續(xù)劃線法：目前六頁\總數(shù)二十四頁\編于十點微生物的分離—平板劃線法目前七頁\總數(shù)二十四頁\編于十點目前八頁\總數(shù)二十四頁\編于十點分區(qū)劃線法第一區(qū)劃線滅菌接種環(huán)第二區(qū)劃線滅菌接種環(huán)第三區(qū)劃線滅菌接種環(huán)目前九頁\總數(shù)二十四頁\編于十點連續(xù)劃線法目前十頁\總數(shù)二十四頁\編于十點（二）細菌的接種法當細菌分離成純種后，常需要接種到相關(guān)的培養(yǎng)基中，以測試其各種生物學性狀。一般可用斜面、半固體、液體培養(yǎng)基來檢驗細菌的培養(yǎng)特性，相應培養(yǎng)基的接種方法有三種。目前十一頁\總數(shù)二十四頁\編于十點斜面接種法培養(yǎng)基：斜面固體培養(yǎng)基；接種方法：斜面培養(yǎng)基接種法；用途：擴增細菌、保存菌種；或用于觀察其某些生化特性。目前十二頁\總數(shù)二十四頁\編于十點瓊脂斜面培養(yǎng)基接種法目前十三頁\總數(shù)二十四頁\編于十點穿刺接種半固體培養(yǎng)基：接種方法：穿刺接種法。用接種針垂直地穿入培養(yǎng)基中心至底部然后沿著原接種線將針拔出用途：檢驗細菌的運動性或觀察細菌的生化反應。目前十四頁\總數(shù)二十四頁\編于十點液體培養(yǎng)基接種法培養(yǎng)基：液體培養(yǎng)基：接種方法：液體接種法從斜面菌種接入液體培養(yǎng)液從液體培養(yǎng)液接入液體培養(yǎng)液用途：擴增細菌，用于觀察細菌的生長特性或測定其生化特性。目前十五頁\總數(shù)二十四頁\編于十點細菌培養(yǎng)法一般培養(yǎng)（需氧培養(yǎng)）：★培養(yǎng)溫度：37℃（采用恒溫培養(yǎng)箱）★培養(yǎng)時間：18～24h二氧化碳培養(yǎng)法：燭缸法、二氧化碳培養(yǎng)箱厭氧培養(yǎng)法：厭氧培養(yǎng)箱、厭氧袋、厭氧罐、皰肉培養(yǎng)法、硫乙醇酸鹽法等目前十六頁\總數(shù)二十四頁\編于十點細菌在固體培養(yǎng)基中的生長現(xiàn)象菌落：★定義：指單個細菌在平板培養(yǎng)基上生長繁殖，形成單一肉眼可見的細菌集團?！锞涮卣鳎捍笮?、形狀、邊緣、顏色、表面、透明度、濕潤度、黏度、溶血性★菌落類型：光滑型（S）、粗糙型（R）、黏液型（M）菌苔：指多個菌落融合在一起形成的細菌堆積物。目前十七頁\總數(shù)二十四頁\編于十點菌落目前十八頁\總數(shù)二十四頁\編于十點菌落與菌苔目前十九頁\總數(shù)二十四頁\編于十點細菌在液體培養(yǎng)基中的生長現(xiàn)象混濁沉淀：多見于鏈狀排列的細菌菌膜：多見于厭氧菌目前二十頁\總數(shù)二十四頁\編于十點細菌在液體培養(yǎng)基中的生長現(xiàn)象目前二十一頁\總數(shù)二十四頁\編于十點液體培養(yǎng)基的細菌生長目前二十二頁\總數(shù)二十四頁\編于十點細菌在半固體培養(yǎng)基中的生長現(xiàn)象有鞭毛細菌：在培養(yǎng)基中沿穿刺線并向外擴散生長，穿刺線邊緣模糊。無鞭毛細