芳酸類非甾體抗炎藥物的分析

芳酸類非甾體抗炎藥物的分析第1頁/共88頁第六章芳酸類非甾體抗炎藥物的分析

第2頁/共88頁羧酸芳酸第3頁/共88頁胺芳胺芳伯氨基第4頁/共88頁常見的芳酸類非甾體抗炎藥物水楊酸類第5頁/共88頁第6頁/共88頁第7頁/共88頁貝諾酯第8頁/共88頁鄰氨基苯甲酸類甲芬那酸(mefenamicacid)第9頁/共88頁雙氯芬酸鈉鄰氨基苯乙酸類第10頁/共88頁布洛芬芳基丙酸類第11頁/共88頁酮洛芬第12頁/共88頁萘普生第13頁/共88頁吲哚乙酸類吲哚美辛第14頁/共88頁苯并噻嗪甲酸類吡羅昔康第15頁/共88頁美洛昔康第16頁/共88頁其他非甾體抗炎藥物對乙酰氨基酚第17頁/共88頁第一節(jié)結(jié)構(gòu)與性質(zhì)

一、結(jié)構(gòu)分析包括：芳酸、芳酸酯、芳酸鹽

共同點：苯環(huán)、羧基

不同點：不同的取代基（如酚羥基、芳伯氨基、雜環(huán)等）

第18頁/共88頁二、性質(zhì)

（一）物理性質(zhì)

（1）固體具有一定的熔點

（2）溶解性游離芳酸類藥物幾乎不溶于水，易溶于有機溶劑；芳酸堿金屬鹽及其它鹽易溶于水，難溶于有機溶劑。

第19頁/共88頁（二）化學(xué)性質(zhì)

1.芳酸具游離羧基，呈酸性，其pKa在3～6之間，屬中等強度的酸或弱酸；

—X、—NO2、—OH等吸電子取代基存在使酸性增強第20頁/共88頁—CH3、—NH2等斥電子取代基存在使酸性減弱

鄰位取代>間位、對位取代，尤其是鄰位取代了酚羥基，由于形成分子內(nèi)氫健，酸性大為增強第21頁/共88頁2.酯鍵、酰胺鍵可水解，利用其水解得到酸和醇的性質(zhì)可進行鑒別；利用芳酸酯水解定量消耗氫氧化鈉的性質(zhì)，芳酸酯類藥物可用水解后剩余滴定法測定含量；芳酸酯類藥物還應(yīng)檢查因水解而引入的特殊雜質(zhì)。3.UV第22頁/共88頁4.IR5.取代芳酸類藥物可利用其取代基的性質(zhì)進行鑒別和含量測定。如具有酚羥基的藥物可用FeCl3反應(yīng)鑒別；具芳伯氨基的藥物可用重氮化—偶合反應(yīng)鑒別、亞硝酸鈉滴定法測定含量。6.色譜法—制劑分析第23頁/共88頁第二節(jié)鑒別試驗

一、FeCl3反應(yīng)

具酚羥基或水解后能產(chǎn)生酚羥基的藥物第24頁/共88頁

直接：水楊酸、雙水楊酯、對乙酰氨基酚

水楊酸ChP（2010）[鑒別]（1）取本品的水溶液，加三氯化鐵試液1滴，即顯紫堇色。第25頁/共88頁

間接：阿司匹林、貝諾酯

阿司匹林ChP（2010）[鑒別]（1）取本品約0.1g，加水10ml，煮沸，放冷，加三氯化鐵試液1滴，即顯紫堇色。第26頁/共88頁二縮合反應(yīng)第27頁/共88頁第28頁/共88頁三、芳伯氨基反應(yīng)重氮化—偶合反應(yīng)

具芳伯氨基或潛在芳伯氨基的藥物，如對乙酰氨基酚

第29頁/共88頁四、氧化反應(yīng)第30頁/共88頁五、水解反應(yīng)

乙醇和硫酸△

（香味）

第31頁/共88頁1.測定λmax；λmin。

例如：布洛芬用0.4%NaOH溶液制備0.25mg/ml；

λmax；265nm,273nm;λmin。245nm,271nm。

2.測定λmax

例如：雙氯芬酸鈉，20μg/mlλmax=276nm;

3.在λmax處測定一定濃度供試液的吸收度A

。

例如：20μg/ml甲酚鈉酸甲醇液在λmax=279nm，A=0.69~0.74；在λmax=350nm，A=0.56~0.60。

紫外吸收光譜法第32頁/共88頁

4.在規(guī)定的波長測定吸收度比值（即雙波長吸收度比值法）

例如：對氨基水楊酸鈉10μg/ml;A265/A299=1.56~1.56

再例如：二氟尼柳20μg/ml（鹽酸乙醇液）;A251/A315=4.2~4.6

第33頁/共88頁紅外吸收光譜法水楊酸的紅外吸收圖譜3300~2500cm-1O-H1660cm-1C=O1610,15701480,1440苯環(huán)C=C775cm-1Ar-H第34頁/共88頁返回3700~2900cm-1N-H、O-H1640cm-1N-H1580cm-11500cm-1C=C1300cm-1C-N1188cm-1C-O對氨基水楊酸鈉的紅外吸收圖譜第35頁/共88頁八、色譜法

第36頁/共88頁一、阿司匹林（一）溶液的澄清度限制無羧基的雜質(zhì)檢查原理

阿司匹林可溶于碳酸鈉無羧基雜質(zhì)不溶于碳酸鈉第三節(jié)特殊雜質(zhì)檢查

第37頁/共88頁（二）、阿司匹林中水楊酸的檢查

1.雜質(zhì)來源原料殘存（生產(chǎn)過程中乙?；煌耆?、水解產(chǎn)生（貯存過程中水解產(chǎn)生）第38頁/共88頁2.檢查方法

ChP(2005):對照法

反應(yīng)原理三氯化鐵反應(yīng)限量原料：0.1%；阿司匹林片：0.3%；阿司匹林腸溶片：1.5%；阿司匹林栓：1.0%（HPLC法）第39頁/共88頁ChP(2010):HPLC法

色譜柱：ODS

流動相：乙腈-四氫呋喃-冰醋酸-水（20:5:5:70)

供試品溶液：10mg/L的1%冰醋酸甲醇溶液檢測波長：303nm

外標法以峰面積計，游離水楊酸≤0.1%第40頁/共88頁有關(guān)物質(zhì)：乙酰水楊酸酐（ASAN）、乙酰水楊酰水楊酸（ASSA）、水楊酰水楊酸（SSA）

ChP：HPLC法，ODS柱，流動相A:同游離水楊酸檢查；流動相B：乙腈，梯度洗脫檢測波長：276nm，供試液稀釋液（0.5%）為對照，雜質(zhì)峰（除水楊酸外）面積和≤對照液主峰面積。第41頁/共88頁二、雙水楊酯中有關(guān)物質(zhì)的檢查

水楊酸：雜質(zhì)對照品法ChP(2010)有關(guān)物質(zhì)：BP（2005）TLC，高低濃度對比法第42頁/共88頁

甲芬那酸是以鄰-氯苯甲酸和2，3-二甲基苯胺在Cu的催化下

縮合而成，因此成品藥物中要檢查銅鹽及有關(guān)物質(zhì)。

分光光度法：利用Cu2+與Na-DDC呈色后測定A

1.銅鹽檢查法

原子吸收分光光度法：BP（2000）

2.有關(guān)物質(zhì)的檢查

主要檢查的是酰胺、二甲基苯胺和鄰氯苯甲酸各國藥典均采用HPLC法中的自身高低濃度對照法。三、甲芬那酸中特殊雜質(zhì)的檢查第43頁/共88頁第四節(jié)含量測定一、中和法1.直接滴定法pKa3～6第44頁/共88頁阿司匹林ChP（2010）

取本品約0.4g，精密稱定，加中性乙醇（對酚酞指示液顯中性）20ml，溶解后，加酚酞指示液3滴，用氫氧化鈉滴定液（0.1mo1/L）滴定。每lml的氫氧化鈉滴定液（0.1mo1/L）相當于18.02mg的C9H8O4。第45頁/共88頁第46頁/共88頁（1）測定方法及計算

Ka=3.27×10-4

反應(yīng)摩爾比為1∶1

（2）討論①中性乙醇溶解阿司匹林且防止酯鍵水解。“中性”是對中和法所用的指示劑而言第47頁/共88頁②優(yōu)點：簡便、快速缺點：酯鍵水解干擾（不斷攪拌、快速滴定）酸性雜質(zhì)干擾（如水楊酸）③適用范圍：不能用于含水楊酸過高或制劑分析，只能用于合格原料藥的含量測定第48頁/共88頁2.剩余滴定法

美洛昔康含量測定ChP（2010）：供試品加25ml氫氧化鈉滴定液（0.1mol/l）25ml，采用溴麝香草酚藍指示液，鹽酸滴定液（0.1mol/l）回滴。

第49頁/共88頁3.水解后剩余滴定法酯的一般含量測定方法阿司匹林第50頁/共88頁USP（32）方法：取本品約1.5g，精密稱定,加入氫氧化鈉滴定液（0.5mo1/L）50.0m1，混合，緩緩煮沸10min，放冷，加酚酞指示液，用硫酸滴定液（0.25mo1/L）滴定剩余的氫氧化鈉，并將滴定結(jié)果用空白試驗校正。每1ml的氫氧化鈉滴定液（0.5mol/l）相當于45.04mg的C9H8O4。第51頁/共88頁2NaOH（過量）＋H2SO4

＝Na2SO4＋2H2O剩余滴定：水解：第52頁/共88頁

反應(yīng)摩爾比為1∶2

優(yōu)點：消除了酯鍵水解的干擾缺點：酸性雜質(zhì)干擾第53頁/共88頁4.兩步滴定法阿司匹林片、阿司匹林腸溶片（ChP2005采用，2010改用HPLC法）

如阿司匹林片的測定：第54頁/共88頁

取本品10片，精密稱定，研細，精密稱取適量（約相當于阿司匹林0.3g），置錐形瓶中，加中性乙醇（對酚酞指示液顯中性）溶解后，振搖使阿司匹林溶解，加酚酞指示液3滴，滴加氫氧化鈉滴定液（0.1mol/L）至溶液顯粉紅色，再精密加氫氧化鈉滴定液（0.1mol/L）40m1，置水浴上加熱15分鐘并時時振搖，迅速放冷至室溫，用硫酸滴定液（0.05mol/L）滴定，并將滴定的結(jié)果用空白試驗校正。每lml的氫氧化鈉滴定液（0.1mo1/L）相當于18.02mg的C9H8O4。

第55頁/共88頁第一步中和第56頁/共88頁第二步水解后剩余滴定水解：第57頁/共88頁2NaOH（過量）＋H2SO4

＝Na2SO4＋2H2O

反應(yīng)摩爾比為1∶1

本法消除了酸性雜質(zhì)的干擾，降低了酯鍵水解的干擾

剩余滴定：第58頁/共88頁片劑含量測定結(jié)果的計算

第59頁/共88頁5.非水堿量法如吡羅昔康

冰醋酸作溶劑高氯酸的冰醋酸溶液作滴定劑結(jié)晶紫作指示劑指示終點或電位法指示終點

第60頁/共88頁二、紫外分光光度法1.直接紫外分光光度法二氟尼柳、美洛昔康、尼美舒利、對乙酰氨基酚制劑.ChP（2010）第61頁/共88頁

精密量取本品適量（約相當于二氟尼柳0.1g），置100ml量瓶中，用0.1mol/l鹽酸乙醇溶液稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液5m1，置100ml量瓶中，稀釋至刻度，搖勻。在1cm吸收池中，以溶劑為空白，于315nm的波長處測定吸收度，按對照法計算含量。第62頁/共88頁第63頁/共88頁2.柱分配色譜—紫外分光光度法USP（32）阿司匹林膠囊可同時定量測定阿司匹林和水楊酸（1）水楊酸的限量測定固定相：FeCl3

SA保留，冰醋酸洗脫，306nm測水楊酸的量（2）含量測定固定相：NaHCO3AAS、SA保留冰醋酸洗脫，280nm測AAS量第64頁/共88頁供試品液：CHCl3液洗脫液1：CHCl3洗脫液2：HAC-

乙醚硅藻土，F(xiàn)eCl3-尿素

玻璃棉硅藻土，NaHCO3供試品液：CHCl3-HCl液洗脫液1：HAC-CHCl3

(1:10)10ml洗脫液2：HAC-CHCl3(1:100)85ml

1-雜質(zhì)先洗脫2-SA后洗脫max=306nmAu＜As1-雜質(zhì)先洗脫2-ASA后洗脫max=280nmASA(mg)=C(Au/As)第65頁/共88頁三、HPLC

阿司匹林栓劑

ChP（2010）離子抑制RP色譜法外標法定量

流動相：乙腈-四氫呋喃-冰醋酸-水（20:5:5:70)檢測波長：276nm第66頁/共88頁第67頁/共88頁第68頁/共88頁例1．鑒別水楊酸及其鹽類，最常用的試液是

A.碘化鉀B.碘化汞鉀C.三氯化鐵D.硫酸亞鐵E.亞鐵氰化鉀

第69頁/共88頁例2.乙酰水楊酸片劑可采用的測定方法為

A.非水滴定法B.水解后剩余滴定法C.兩步滴定法D.柱色譜法E.雙相滴定法

第70頁/共88頁例3．測定阿司匹林片和栓中藥物的含量可采用的方法是

A.重量法B.酸堿滴定法C.高效液相色譜法D.絡(luò)合滴定法E.高錳酸鉀法

第71頁/共88頁例4.兩步滴定法測定阿司匹林片的含量時，每1ml氫氧化鈉溶液（0.1mol/L）相當于阿司匹林（分子量=180.16）的量是

A.18.02mgB.180.2mgC.90.08mgD.45.04mgE.450.0mg

第72頁/共88頁反應(yīng)摩爾比為1∶1T——滴定度，每1ml滴定液相當于被測組分的mg數(shù)c——滴定液濃度，mol/LM——被測物的摩爾質(zhì)量，g/moln——1mol樣品消耗滴定液的摩爾數(shù)，常用反應(yīng)摩爾比體現(xiàn)，即反應(yīng)摩爾比為1∶n第73頁/共88頁例5.阿司匹林加碳酸鈉試液加熱后，再加稀硫酸酸化，此時產(chǎn)生的白色沉淀應(yīng)是

A.苯酚B.乙酰水楊酸C.水楊酸D.醋酸鈉

E.醋酸苯酯

第74頁/共88頁例6.水楊酸與三氯化鐵試液生成紫堇色產(chǎn)物的反應(yīng)，要求溶液的pH值是A.pH10.0B.pH2.0C.pH7～8D.pH4～6E.pH2.0±0.1

第75頁/共88頁例7.兩步滴定法測定阿司匹林片或阿司匹林腸溶片時，第一步滴定反應(yīng)的作用是A.測定阿司匹林含量B.消除共存酸性物質(zhì)的干擾C.使阿司匹林反應(yīng)完全D.便于觀測終點

E.有利于第二步滴定

第76頁/共88頁例8.采用雙步滴定法測定阿司匹林制劑含量時，被測組分與標準溶液的反應(yīng)摩爾比為

A.2:1B.1:2C.1:1D.3:1E.以上都不對

第77頁/共88頁例9.阿司匹林中含量最高的雜質(zhì)為A.乙酰水楊酸酐B.乙酰水楊酸水楊酸C.水楊酸D.水楊酰水楊酸

E.以上都不對

第78頁/共88頁例10.用直接滴定法測定阿司匹林含量

A.反應(yīng)摩爾比為1：1B.在中性乙醇溶液中滴定

C.