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PAGEPAGE1牙膏中沃氏葡萄球菌的分離與鑒定牙膏中沃氏葡萄球菌的分離與鑒定沃氏葡萄球菌是一種常見的細菌,可以在人體的口腔、呼吸道、消化系統(tǒng)中找到。它是引起感染的重要因素,尤其是口腔感染和細菌性肺炎。為了了解牙膏中是否存在沃氏葡萄球菌,需要進行分離與鑒定。一、實驗材料1.牙膏樣品。2.草莓糖瓊脂(trypticsoyagar,TSA)平板。3.空氣消毒器、無菌勻滑板、鑒定試紙等無菌器具。4.乙醇燈(或酒精燈)。5.顯微鏡。6.比色計。二、實驗步驟1.樣品采集用無菌方法取下大約一克的牙膏,懸于10毫升的滅菌水中,徹底混合。將0.1毫升混合物接種于平板上,用無菌勻滑板均勻涂抹。盡快將平板倒置,避免在表面的水滴蒸發(fā)。2.革蘭染色在牙膏懸液上涂取一小段,用火烤干,染上革蘭染油,然后用蒸餾水輕輕洗去多余的染料,再在顯微鏡下觀察細菌的形態(tài)和染色特點。3.生理生化特性測試?yán)醚栏鄳乙航臃N其他需要的生理生化特性測試,包括氧氣利用情況、酶的產(chǎn)生和碳源利用情況等,以進一步分析分離的沃氏葡萄球菌種類。4.鑒定將提取的菌落接種到乳糖發(fā)酵試驗脫氧膽汁瓊脂培養(yǎng)基(LDB)上,并在7.0至7.5的溫度下溫育24小時,檢查對瓊脂的顏色反應(yīng),例如產(chǎn)生黑色素的陽性反應(yīng)。5.比色計檢測通過比色計檢測牙膏樣品中沃氏葡萄球菌的含量。三、實驗結(jié)果分析1.如果革蘭染色顯示大量革蘭氏陽性球菌,則進一步進行各項生理生化測試后,結(jié)合查閱鑒定手冊,鑒定結(jié)果可能是沃氏葡萄球菌。2.利用乳糖發(fā)酵試驗脫氧膽汁瓊脂培養(yǎng)基進行酶切,可以更好地鑒別沃氏葡萄球菌。3.比色計檢測需要將細菌培養(yǎng)基中的沃氏葡萄球菌通過蛋白水解釋放的氨基酸與磷酸鈷形成深藍色定量檢測。四、實驗注意事項1.所有器材在實驗前需消毒并干燥。2.制備培養(yǎng)基時要嚴(yán)格按照指示操作,保持無菌狀態(tài)。3.操作過程要嚴(yán)格避免外界細菌污染。4.需要耐心而小心地進行細胞的染色和顯微鏡檢查,以免造成誤判。5.嚴(yán)格遵守實驗室安全規(guī)定,避免意外發(fā)生。通過以上實驗,可以比較準(zhǔn)確地分離和鑒定牙
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