中藥化學成分提取分離和鑒定的一般方法

關于中藥化學成分提取分離和鑒定的一般方法第1頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月目的要求了解中藥化學成分的類型及理化性質(zhì)。掌握中藥有效成分的提取、分離方法。了解中藥有效成分結構鑒定的方法。第2頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月教學內(nèi)容第1節(jié)中藥中所含各類化學成分簡介第2節(jié)中藥化學成分預試驗第3節(jié)提取、分離中藥有效成分常用的方法第4節(jié)中藥化學成分鑒定和結構研究簡介第5節(jié)藥理供試樣品的配制第3頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月第1節(jié)中藥中所含各類化學成分簡介生物堿糖和苷醌類苯丙素類黃酮類強心苷皂苷萜類和揮發(fā)油其他成分第4頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月生物堿（alkaloids）生物體內(nèi)的含氮有機物，有似堿的性質(zhì)（能與酸成鹽），有生理活性。鹽酸小檗堿(Berberinehydrochloride)第5頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月苷類（glycosides）

苷元與糖或糖的衍生物通過苷鍵（縮醛鍵）連接而成的化合物。苷易水解成苷元和糖。人參皂苷Rb1

(ginsenosideRb1)水解第6頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月糖類（saccharides）單糖：無色晶體，味甜。易溶于水，難溶于有機溶劑。低聚糖：2~10個單糖縮合而成。味甜，溶于水，難溶于有機溶劑。多糖：10個以上單糖脫水縮合而成。無甜味，大多不溶于水。

D-葡萄糖L－鼠李糖D－葡萄糖醛酸(D-glucose)(L-rhamnose)(D-glucuronicacid)α-D-Gal-(1→4)-β-D-Glc-[β-D-Fru-(1→6)]-(1→4)-β-D-Glc第7頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月醌類（quinones）具有醌式結構化合物。分子中多有酚－OH，有一定酸性。

大黃酚大黃酚-D-葡萄糖苷

(chrysophanol)(chrysophanol-8-D-glucoside)第8頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月苯丙素類（phenylpropanoids）以苯丙基（C6-C3）為基本骨架的化合物。

香豆素：具有苯駢α-吡喃酮母核的一類天然化合物。

木脂素：有兩分子苯丙素衍生物聚合而成的天然化合物。

七葉內(nèi)酯五味子酯甲

(aesculetin)(schisantherinA)第9頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月黃酮類（flavonoids）兩個苯環(huán)通過三碳鏈連接而成（C6-C3-C6）的化合物。多有酚－OH，有一定酸性。

黃芩素黃芩苷

(baicalein)(baicalin)第10頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月萜類和揮發(fā)油（terpeonidsandvolatileoils）萜類：由甲戊二羥酸衍生、分子式符合（C5H8）n的衍生物。

揮發(fā)油（精油）：可隨水蒸氣蒸餾的與水不相混溶的無色或淡黃色透明油狀液體。

薄荷醇細辛醚

(menthol)(asarone)第11頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月強心苷（cardicaglycosides）對心臟有顯著生理活性的甾體苷類。無色，有旋光性、對粘膜有刺激性。

洋地黃毒苷

(digitoxin)第12頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月皂苷（saponins）由螺甾烷類或三萜類化合物與糖結合的低聚糖苷，前者為甾體皂苷，后者為三萜皂苷。無色，對粘膜有刺激性，有吸濕性、發(fā)泡性和溶血性。

薯蕷皂苷人參皂苷Rb1

(dioscin)(ginsenosideRb1)第13頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月其他成分有機酸鞣質(zhì)氨基酸、蛋白質(zhì)和酶植物色素樹脂油脂和蠟無機成分微量元素第14頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月第2節(jié)中藥化學成分預試驗目的：初步判定中藥中含有哪些化學成分，為設計提取、分離方案奠定基礎。1.預試驗的分類2.預試驗的方法3.預試驗供試液的制備第15頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月1.預試驗的分類單項預試：重點檢查某類成分。系統(tǒng)預試：全面檢查各類成分。第16頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月2.預試驗的方法試管法紙片法薄層及紙色譜法第17頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月3.預試液的制備水浸液

5g/50ml水，浸泡過夜，過濾。濾液A用以檢查氨基酸、多肽、蛋白質(zhì)；濾渣水浴60℃加熱10min，過濾。濾液B用以檢查糖、有機酸、苷、鞣質(zhì)、水溶性生物堿等。乙醇提取液中性醇提液：5g/50ml95%乙醇，水浴加熱回流20min，過濾。濾液用以檢查黃酮、蒽醌、香豆素、萜、苷等。酸性醇提液：2g/10ml0.5%鹽酸乙醇溶液，水浴加熱回流10min，過濾。濾液用以檢查生物堿等。石油醚提取液1g/10ml，浸泡2-3h，過濾。濾液用以檢查揮發(fā)油、萜類等。第18頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月常用顯色劑：生物堿：碘化鉍鉀試劑棕紅色酚：三氯化鐵試劑藍色有機酸：溴酚藍試劑藍色背景黃色斑點皂苷：磷鉬酸試劑藍-藍紫色內(nèi)酯、香豆素：異羥肟酸鐵試劑藍-紫黃酮：三氯化鋁試劑、鹽酸-鎂粉、乙酸鎂試劑+蒽醌：氫氧化鉀試劑紅色強心苷：3,5-二硝基苯甲酸試劑紫紅色氨基酸：茚三酮試劑+揮發(fā)油：油斑試驗無斑點有機化合物：硫酸試劑第19頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月第3節(jié)提取分離中藥有效成分常用的方法概述提取方法分離純化方法影響因素第20頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月1.概述（1）中藥化學成分的構成特點同種植物含有多種結構類型的化學成分總成分含量少而種類多有效成分含量低第21頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月（2）提取分離前進行文獻調(diào)研研究進展

a.做過否？

b.研究的深度和廣度如何？

c.如何開展？藥材鑒定

a.原植物的拉丁學名

b.采集地點和時間

c.藥及部位

d.民間藥用情況第22頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月（3）已知/未知成分研究策略已知成分：結構類型，確定提取、分離路線；未知成分：系統(tǒng)預試驗，活性跟蹤；

第23頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月2.提取方法溶劑提取法水蒸氣蒸餾法超臨界流體萃取法其他方法第24頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月（1）溶劑提取法

原理：相似相溶。溶劑穿透入藥材粉末的細胞膜，溶解溶質(zhì)，形成細胞內(nèi)外溶質(zhì)的濃度差，將溶質(zhì)滲出，進行提取。

范圍：所有化學成分。第25頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月溶

劑沸點介電常數(shù)(20℃)溶解度溶劑/水%水/溶劑%石

油

醚環(huán)

己

烷30-12080.71.892.02苯乙

醚氯

仿乙酸乙酯正

丁

醇

803561771182.294.344.816.0217.8

0.1756.040.8156.077.45

0.0631.4650.0722.9820.5丙

酮乙

醇甲

醇水

567865100

20.724.332.680.4任意混合石油醚>環(huán)己烷>苯>氯仿>乙醚>乙酸乙酯>丙酮>乙醇>甲醇>水常用溶劑的性質(zhì)第26頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月中藥各類成分的極性與提取溶劑的關系

植物成分極性強弱植物成分結構類型適于提取溶劑親脂性強葉綠素、脂肪油、揮發(fā)油石油醚親脂性較強游離生物堿、苷元、甾類、萜類、某些有機酸乙醚、氯仿中等極性中偏小某些苷類(如強心苷等)氯仿-乙醚(2:1)中等某些苷類(如黃酮苷類)乙酸乙酯中偏大某些苷類(如蒽醌苷、皂苷等)正丁醇親水性較強極性大的苷、糖類、氨基酸等丙酮、乙醇、甲醇親水性強蛋白質(zhì)、粘液汁、糖類、氨基酸、無機鹽、苷類水第27頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月（1）溶劑提取法選擇溶劑注意點：

a.對有效成分溶解度大，對雜質(zhì)溶解度小

b.不與化學成分起化學變化

c.經(jīng)濟、易得、使用安全。常用操作方法：

浸漬法滲漉法煎煮法回流提取法連續(xù)回流提取法影響提取效率的

因

素原料粉碎度提取時間提取溫度設備條件第28頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月第29頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月第30頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月回流提取裝置冷凝管通氣側(cè)管藥材虹吸管溶劑水浴索氏提取裝置第31頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月優(yōu)劣對比：浸漬：簡便，但效率低，用水時易發(fā)霉。滲漉：效率高，效果好（較澄清）；但溶劑消耗大，費時。煎煮：簡便，但雜質(zhì)溶出多，難過濾?；亓魈崛。盒矢?，但溶劑消耗大，操作煩瑣。連續(xù)回流提?。盒矢?溶劑消耗少,但操作煩瑣。

*后三種不適宜加熱易分解成分的提取。第32頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月（2）水蒸氣蒸餾法原理：與水蒸氣產(chǎn)生共沸點。范圍：適用于具有揮發(fā)性的，能隨水蒸氣蒸餾而不被破壞，與水不發(fā)生反應，且難溶或不溶于水的成分的提取。如揮發(fā)油、小分子量的生物堿等。第33頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月第34頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月（3）超臨界流體提取法原理：用處于超臨界條件下的特殊流體（介于氣體和液體之間）為溶劑，具有更低的黏度和更高的擴散速度，對許多物質(zhì)有很強的溶解能力。如CO2：Tc31.4℃，Pc7.37Mpa

范圍：適用于對熱及化學不穩(wěn)定的成分、低極性的成分的提取。第35頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月特點：接近室溫工作，適用對熱不穩(wěn)定的成分，無有機溶劑殘留，對環(huán)境無公害，提取效率高，節(jié)約能耗等。但對設備要求高。第36頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月（4）其他方法升華法樟腦（樟木）咖啡因（茶葉）壓榨法固相提取法超聲提取法微波提取法酶提取法第37頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月3.分離純化方法利用溶解度差異進行分離利用分配系數(shù)差異進行分離利用吸附性能差異進行分離利用分子大小不同進行分離其他方法第38頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月（1）溶解度差異原理：相似相溶。方法：重結晶法、沉淀法等。第39頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月溶解度差異第40頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月原理：被分離組成在兩種互不相溶的溶劑中的分配系數(shù)（K）的不同達到分離。

K與萃取次數(shù)的關系：分離因子（b值）與分離難易的關系：方法：簡單萃取法、連續(xù)萃取法、液滴逆流法（DCCC）、高速逆流法（HSCCC）、氣相色譜法（GC）、液相色譜法（LC）等。b=KA/KBK值與萃取次數(shù)成反比。即K值越大，萃取次數(shù)越少，反之越多。b值越大，越易分離；b＝1時，無法分離（2）分配系數(shù)差異第41頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月

簡單萃取法第42頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月

用于比水輕的溶劑用于比水重的溶劑連續(xù)萃取器第43頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月液滴逆流分配裝置圖能在短時間內(nèi)分離成兩相，并可生成有效的液滴。由于流動相形成液滴，在較細的萃取管中與固定相有效接觸、不斷摩擦形成新的表面，促進溶質(zhì)在兩相溶劑中的分配，且不會產(chǎn)生乳化現(xiàn)象。第44頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月（3）吸附性能差異物理吸附（表面吸附）規(guī)律：“相似者易于吸附”特點：無選擇性、可逆吸附、快速原理：吸附與解吸附的往復循環(huán)三要素：吸附劑（硅膠、氧化鋁、活性炭）、溶質(zhì)(被分離物)、溶劑極性強弱的判斷：

(1)親水性基團與極性成正比，親脂性基團成反比；

(2)游離型化合物親脂、極性弱，解離型親水、極性強。溶劑的極性：依據(jù)介電常數(shù)來決定極性吸附劑：吸附劑一定時，溶質(zhì)極性越強，洗脫劑極性也應越強。非極性吸附劑：吸附劑一定時，溶質(zhì)極性越強，洗脫劑極性應越弱。第45頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月第46頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月（3）吸附性能差異化學吸附：特點：有選擇性、不可逆吸附原理：產(chǎn)生化學反應酸性物質(zhì)與氧化鋁發(fā)生化學反應堿性物質(zhì)與硅膠發(fā)生化學反應氧化鋁容易發(fā)生結構的異構化半化學吸附：特點：吸附力介于上述二者之間原理：氫鍵吸附，如聚酰胺、大孔樹脂等

第47頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月（4）分子大小差異原理透析法（半透膜膜孔的分子篩作用）凝膠濾過法(三維網(wǎng)狀結構的分子篩作用)

超濾法(分子大小不同引起的擴散速度的差別)

超速離心法(溶質(zhì)在超速離心作用下沉降性的差別）三要素載體(葡聚糖凝膠)、溶質(zhì)(被分離物)、洗脫劑應用蛋白質(zhì)的脫鹽精制；蛋白、多糖的分離；大分子化合物如糖苷類成分的精制第48頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月第49頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月（5）離解度不同（離子交換樹脂）原理利用酸、堿化合物在解離狀態(tài)時與陰、陽離子樹脂產(chǎn)生離子交換的原理達到分離的方法。三要素固定相(離子交換樹脂)、溶質(zhì)(被分離物)、洗脫劑應用酸、堿類化合物如氨基酸、生物堿、有機酸的分離第50頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月常用色譜分離方法介紹：

吸附劑分離原理吸附規(guī)律應用硅膠吸附原理弱酸性、極性吸附劑廣泛（酸、堿及化合物極性越大、中性成分均可）吸附能力強（難洗脫）溶劑極性越小，吸附力越強

氧化鋁吸附原理堿性、極性吸附劑堿性、中性成分吸附規(guī)律同上（酸性成分與鋁絡合）活性炭吸附原理非極性吸附劑從稀水溶液中富集微量物質(zhì)吸附規(guī)律與上相反脫色（脂溶性色素）聚酰胺氫鍵吸附形成氫鍵越多，吸附力越強黃酮、蒽醌的分離大孔吸附樹脂吸附原理非極性化合物易被非極性樹脂吸附糖與苷的分離

吸附色譜第51頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月類型固定相流動相應用正相色譜水>BAW系統(tǒng)極性、中極性物質(zhì)分離（以PPC為例）反相色譜ODS<甲醇-水、乙腈-水最廣泛，非極性、中極性各類物質(zhì)的分離

加壓液相色譜類型壓力（Pa）分離規(guī)模分析用高壓液相色譜（HPLC）>20.2×1051mg左右制備用高壓液相色譜（HPLC）>5mg中壓液相色譜(MPLC)5.05~20.2×105>100mg低壓液相色譜(LPLC)<5.05×10510mg~1g快速色譜約2.02×105>10mg液-液分配色譜（分配原理）第52頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月葡聚糖凝膠色譜

類型原理溶脹溶劑應用

葡聚糖凝膠分子篩（大→?。┧嗵?、多肽、（SephadexG）蛋白質(zhì)分離羥丙基葡聚糖凝膠分子篩（糖苷）水、極性有機溶劑不同類型（SephadexLH-20）吸附原理（苷元）或二者的混合溶劑化合物分離離子交換吸附樹脂樹脂類型原理應用陽離子交換樹脂離子交換從酸水溶液中吸附堿性成分（生物堿）強酸性（R-SO3-H+）（陽離子）（除去酸性、中性成分）弱酸性（-COO-H+）陰離子交換樹脂離子交換從堿水溶液中吸附酸性成分（有機酸）強堿性（RN+(CH3)3CI-）（陰離子）（除去堿性、中性成分）弱堿性(伯、仲、叔胺)第53頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月（6）其他純化方法鹽析法中藥水提液，加無機鹽達到一定濃度（飽和），有些成分則分離。常用鹽：NaCl,Na2SO4,MgSO4,(NH4)2SO4等。例，三顆針提取小檗堿加NaCl。分餾法利用不同成分的沸點不同而分離。常用于揮發(fā)油、生物堿等。例，毒芹總堿中毒芹堿166-167℃，羥基毒芹堿226℃。第54頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月4.影響因素光照酸堿溫度溶劑層析過程第55頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月光照第56頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月酸堿第57頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月溶劑第58頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月層析過程第59頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月第4節(jié)中藥化學成分鑒定和結構研究簡介化合物的純度測定結構研究的主要程序結構研究的主要方法結構研究實例第60頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月1.化合物的純度測定晶形

結晶均勻、一致熔點

熔點明確、敏銳，熔距0.5-1.0℃薄層色譜或紙色譜

三種以上不同展開劑展開，均呈現(xiàn)單一斑點HPLC、GC等色譜方法

呈現(xiàn)單一色譜峰第61頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月2.結構研究的主要程序初步推斷化合物類型測定分子式，計算不飽和度確定官能團、結構片斷、骨架推斷平面結構確定主體結構1.觀察樣品在提取、分離過程中的行為2.測定理化常數(shù)，如溶解度、色譜行為、定性反應等3.結合文獻調(diào)研1.高分辨質(zhì)譜（HR-MS）2.元素分析（EA）3.同位豐度比法1.測定解析波譜數(shù)據(jù)（UV,IR,NMR,MS）2.官能團定性定量分析1.綜合分析譜學數(shù)據(jù)及定性、定量分析結果2.與已知化合物進行比較1.測定CD或ORD2.測定NOE或2D－NMR3.X－射線衍射分析4.人工合成第62頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月3.結構研究的主要方法（1）確定分子式、分子量，計算不飽和度分子式的確定元素分析法→實驗式（結合分子量）→分子式同位素豐度比法（﹤500）↑

HR-MS→分子量、分子式

不飽和度的計算

U=1+n4-0.5(n1-n3)MS冰點下降法沸點上升法粘度法凝膠濾過法第63頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月3.結構研究的主要方法（2）化學法確定化合物結構骨架與官能團顏色反應化學反應第64頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月3.結構研究的主要方法（3）波譜法研究化合物結構

UV

IR

NMR

MS

ORD

CD

X-射線單晶衍射第65頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月紫外－可見吸收光譜（UV-vis）定義分子中的電子可因光線照射從基態(tài)躍遷至激發(fā)態(tài)，其中π-π*、n-π*躍遷由吸收紫外光或可見光引起，此區(qū)域測得的光譜為紫外－可見光譜。測定樣品量很少。應用已知化合物：化合物的初步鑒定及含量測定。未知化合物：推斷骨架，如含共軛雙鍵、α,β-不飽和羰基、芳香化合物等。第66頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月電子躍遷與UV-vis光譜第67頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月β－藏茴香酮的UV光譜第68頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月定義分子中價鍵的伸縮及彎曲振動在光的紅外區(qū)域（4000-500cm-1）引起吸收，測得的圖譜為紅外光譜。反映功能團與波長的關系。只需5-10μg。4000-1500cm-1為特征區(qū)，1500-500cm-1為指紋區(qū)。應用已知化合物：測定紅外光譜疊圖或檢索紅外光譜數(shù)據(jù)。未知化合物：用于確定官能團以及芳環(huán)取代的判斷等。紅外光譜（IR）第69頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月s-(-)-藏茴香酮的IR光譜第70頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月定義化合物分子在磁場中受電磁波的輻射，有磁距的1H原子核吸收一定能量產(chǎn)生能級的躍遷，即發(fā)生核磁共振，以吸收峰的頻率對吸收強度作圖所得。氫同位素中，1H豐度最大，信號靈敏，1H-NMR易測，應用廣。應用測定化學位移（δ0-20ppm）、譜線的積分面積及裂分情況（重峰數(shù)及偶合常數(shù)），提供分子中1H的類型、數(shù)目及相鄰原子或原子團的信息。核磁共振氫譜（1H-NMR）第71頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月

化學位移（Chemicalshift,δ）

1H核因周圍化學環(huán)境不同，其外圍電子云密度以及繞核旋轉(zhuǎn)時產(chǎn)生的磁的屏蔽效應也不同。不同類型的1H共振信號出現(xiàn)在不同的區(qū)域，可識別。峰面積由于1H譜上積分面積與分子中的總質(zhì)子數(shù)相當，故如知分子式，可據(jù)此算出每個信號所相當?shù)?H數(shù)。信號的裂分及偶合常數(shù)磁不等同的兩個或兩組1H核在一定距離內(nèi)會因相互自旋偶合干擾而使信號發(fā)生分裂，表現(xiàn)出不同的裂分，如singlet、doublet、triplet、quartet、multiple等。第72頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月不同類型氫核化學位移的大致范圍第73頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月NOE效應當兩個質(zhì)子HA和HB在空間非常接近時，對HA做飽和照射時，HB的信號強度會增加，這種現(xiàn)象稱為NOE效應。當照射3.84ppm（OCH3）信號時，6.88ppm處5-H的信號增強，判斷－OCH3應處于6-C上。第74頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月2D－NMR

1H-1HCOSY：相鄰質(zhì)子間的偶合關系。

13C-1HCOSY：HMQC，1H和與其直接相連的13C的偶合關系。HMBC，1H和與其遠程偶合的13C的關系。

第75頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月乙酸乙酯的1H-1HCOSY圖譜第76頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月定義化合物分子在磁場中受電磁波的輻射，有磁距的13C原子核吸收一定能量產(chǎn)生能級的躍遷，即發(fā)生核磁共振，以吸收峰的頻率對吸收強度作圖所得。應用提供的結構信息是分子中各種不同類型及化學環(huán)境的碳核化學位移（δ0-200ppm），異核偶合常數(shù)及弛豫時間，其中利用度最高的是化學位移。核磁共振碳譜（13C-NMR）第77頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月噪音去偶譜（全氫去偶譜COM或?qū)拵ヅ甲VBBD）

采用寬頻的電磁輻射照射所有1H使之飽和后測定13C-NMR譜。1H對13C的偶合全部消除，所有13C信號在圖譜上均作為單峰出現(xiàn)，無法確定連接的1H數(shù)，但對判斷13C信號的化學位移很方便。選擇氫核去偶譜（SPD）或遠程選擇氫核去偶譜（LSPD）對某個或某幾個氫核進行照射，以消除其偶合影響。此時峰形發(fā)生改變的信號只是與之有偶合關連的13C信號。

DEPT通過改變照射1H核的脈沖寬度（θ）或設定不同的馳豫時間，使不同類型的1H信號在譜圖上呈單峰并分別呈現(xiàn)正向峰或倒置峰，靈敏度高，信號間重疊少，一種常規(guī)測定方法。第78頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月β-紫羅蘭酮的質(zhì)子非去偶譜β-紫羅蘭酮的噪音去偶譜第79頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月β-紫羅蘭酮9位羰基的LSPD譜a.質(zhì)子非去偶譜b.照射7-H,8-Hc.照射7-H,10-Hd.質(zhì)子噪音去偶譜e.照射10-Hf.照射8-H,10-H第80頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月β-紫羅蘭酮的DEPT譜第81頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月定義

MS是記錄分析樣品在質(zhì)譜儀中經(jīng)高溫氣化（300℃），在離子源受一定能量沖擊產(chǎn)生陽離子，同時發(fā)生某些化學鍵的有規(guī)律的斷裂，而后在穩(wěn)定磁場中按質(zhì)量和電荷之比（m/z）順序進行分享并通過檢測器表達的圖譜。

應用（測定分子式和分子量）已知化合物：通過比較質(zhì)譜圖進行鑒定。未知化合物：由碎片峰及裂解特征推定或復核分子的部分結構。質(zhì)譜（MS）第82頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月第83頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月EI-MS（電子轟擊電離,electronimpactionization）測定時需先加熱氣化再電離，故易熱分解或難氣化的化合物，測不到分子離子峰。

FD-MS（場解析電離,fielddesorptionionization）將試樣稀溶液涂在鎢絲發(fā)射極上，通過真空密封系統(tǒng)進入離化室作為陽極，再安裝陰極，加10kV的高電壓使其電離。適用于熱不穩(wěn)定、極性大、難揮發(fā)的化合物。高質(zhì)量區(qū)的信息較為詳盡。

FAB-MS（快原子轟擊電離,fastatombombardment）從離子槍射出的一次離子經(jīng)加速后在碰撞室通過交換電荷，產(chǎn)生高速中性離子，該中性離子撞擊試樣即可使之電離，得到分子離子及進一步裂解的碎片。碎片類型與FD-MS相同，但低質(zhì)量區(qū)的結構信息也較為詳盡。第84頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月桂皮酸乙酯EI-MS圖第85頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月Balanitin-1的FD-MS圖第86頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月ORD（旋光譜，OpticalRotatoryDispersion）

定義用不同波長的偏振光照射光學活性化合物，并用波長對比旋光度或摩爾旋光度作圖所得的曲線。應用推斷不對稱分子的構型和構象。第87頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月CD（圓二色譜，CircularDichroism）定義記錄化合物在紫外光與可見光區(qū)所產(chǎn)生的橢圓偏振光的橢圓度與波長的關系。CD譜是透過介質(zhì)后的光的吸收曲線，而ORD則是它的分散曲線。應用測定手性化合物的構型、構象、確定某些官能團在手性分子中的位置等。第88頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月X－射線單晶衍射定義通過測定化合物晶體對X射線的衍射譜，再通過計算機用數(shù)學方法解析衍射譜，再還原為分子中各原子的排列關系，最后獲得每個原子在某一坐標系中的分布，給出化合物化學結構，獲得分子的全貌，是一種很好的測定化合物分子結構的方法。同時還能測定出化合物結構中的鍵長、鍵角、構象、絕對構型等結構細節(jié)。應用測定大分子物質(zhì)結構。第89頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月4.結構研究舉例今由某藥材中分離得到一種成分A，測得下列數(shù)據(jù)：無色針晶，mp154-156℃，[a]–59°(EtOH)

易溶于MeOH,EtOH,H2O，難溶于CHCl3,Et2OMolish反應（＋），F(xiàn)eCl3反應（－）IR(cm-1):3250~3500,1610,1590,1575,1075,1045,1020,1010,860,830MS(m/z):286(M+),163,145,127,124(100%)；其乙酰物m/z496（M+）

苦杏仁酶水解后得一個溶于乙醚的針晶B及D-葡萄糖酶水解后所得針晶B，測得下列數(shù)據(jù)：mp112~115℃元素分析C67.4%H6.50%

Gibb’s反應（－），F(xiàn)eCl3

反應（+）MS(m/z):124(M+)

1H-NMR(d):3.97(1H,t,D2O交換消失)4.51(2H,d)6.78,7.18(4H,AA’,BB’系統(tǒng))8.20(1H,s,D2O交換消失)第90頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月第91頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月第5節(jié)

中藥藥理供試樣品的配制常用制劑中藥制劑濃度表示法

第92頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月1.常用制劑（1）水溶液

易溶于水的成分用蒸餾水或生理鹽水配制,用稀酸或稀堿溶液時pH4-9為宜。可加熱或加增溶劑。（2）低濃度有機溶劑

適用于易溶于有機溶劑，而難溶于水的提取物。常用乙醇、丙二醇等，含量<10%。可加入增溶劑，有機溶劑:增溶劑:水=1:1:8。

第93頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月（3）油劑適用于不溶于水而易溶于油的成分，用精制植物油配制。（4）乳劑適用于脂溶性物質(zhì)。用精制植物油配制，常用吐溫-80、PEG-400等。油:乳化劑:水=1:1:8。

第94頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月（5）混懸劑適用于油、水中均不溶的提取物。常用助懸劑5%淀粉、0.5%CMC-Na、1%西黃芪膠等。（6）凍干劑適用于對熱不穩(wěn)定的成分如蛋白質(zhì)、鞣質(zhì)等。提取物經(jīng)冷凍干燥，臨用前用水配制。（7）固體制劑難于制成上述劑型的中藥提取物，直接粉碎。

第95頁，課件共103頁，創(chuàng)作于2023年2月2.中藥制劑濃度表示法（1）生藥量單味中藥：如生附子水煎液0.125g/ml中藥復方：如麻黃湯水煎液3g/ml

（2）有效部位含量