藥物分析-第2章-藥物的鑒別試驗課件

第二章

藥物的鑒別試驗Identificationtestofdrug1Contents概述1鑒別試驗的項目2鑒別試驗的方法3鑒別試驗的條件42023/5/102第一節(jié)概述藥物的鑒別試驗(IdentificationTest)

根據(jù)藥物的分子結構，采用物理、化學或生物學方法來判斷其真?zhèn)危撬帣z工作中的首項任務。鑒別試驗用方法僅用于證實貯藏在有標簽容器中的藥物是否為其所標示的藥物，而非對未知物的定性分析。2023/5/103性狀一般鑒別試驗

專屬鑒別試驗第二節(jié)鑒別試驗的項目2023/5/1051.外觀

藥物的聚集狀態(tài)、晶型、色澤以及臭、味等性質(zhì)。VB1的描述：本品為白色結晶或結晶型粉末；有微弱的特臭，味苦；干燥品在空氣中迅速吸收約4%的水分。撲米酮本品為白色結晶性粉末;無臭，味微苦。（一）性狀（Description）反映藥物特有的物理性質(zhì)2023/5/1062.

溶解度一定程度上反映了藥品的純度。2023/5/107試驗法：除另有規(guī)定外，稱取研成細粉的供試品或量取液體供試品，置于25±2℃一定容量的溶劑中，每隔5分鐘強力振搖30秒鐘，觀察30分鐘內(nèi)的溶解情況，如無目視可見的溶質(zhì)顆?；蛞旱?，即視為完全溶解。2023/5/108(1)熔點固體熔化成液體的溫度熔融同時分解的溫度自初熔至全熔的一段溫度《中國藥典》要求報告初融和全熔兩個溫度2023/5/1010

在一定波長與溫度下，偏振光透過長1dm且每1ml中含有旋光性物質(zhì)1g的溶液時測得的旋光度。g/ml100ml溶液中所含被測物質(zhì)的質(zhì)量（g）(2)比旋度

反映手性藥物特性及其純度的主要指標。2023/5/1012在給定的波長、溶劑和溫度等條件下，吸光物質(zhì)在單位濃度、單位液層厚度時的吸收度稱為吸收系數(shù)。(3)吸收系數(shù)100ml溶液中所含被測物質(zhì)的質(zhì)量（g）2023/5/1014鹽酸氨溴索吸收系數(shù)測定：照紫外-可見分光光度法，在244nm的波長處測定吸光度為0.61，已知溶液濃度為25μg/ml，問吸收系數(shù)是否符合藥典規(guī)定（233-247）？符合規(guī)定2023/5/1015（二）一般鑒別試驗（GeneralIdentificationTest）二、鑒別試驗的項目

依據(jù)某一類藥物的化學結構或理化性質(zhì)的特征，通過化學反應來鑒別藥物的真?zhèn)巍?/p>

無機藥物有機藥物陰離子和陽離子的特殊反應典型的官能團反應2023/5/1016中國藥典附錄收載項目

丙二酰脲類、托烷生物堿類、芳香第一胺類、有機氟化物類、無機金屬鹽類、有機酸鹽、無機酸鹽只能證實是某一類藥物，而不能證實是哪一種藥物！只適用于純品，混合藥物或有干擾時不適用！2023/5/1017１.有機氟化物６.無機酸根２.有機酸鹽３.芳香第一胺５.無機金屬鹽４.托烷生物堿類藥品2023/5/1018

例：氟康唑

【鑒別】(1)……

(2)……

(3)本品顯有機氟化物的鑒別反應(附錄Ⅲ)。

2023/5/10202.有機酸鹽水楊酸鹽、酒石酸鹽、苯甲酸鹽、乳酸鹽、枸櫞酸鹽2023/5/1021例：水楊酸鎂

【鑒別】(1)……(2)……

(3)本品的水溶液顯鎂鹽與水楊酸鹽的鑒別反應（附錄Ⅲ）。2023/5/1023（2）酒石酸鹽鑒別方法----銀鏡反應：

供試品的中性溶液，置試管中，加氨制硝酸銀試液數(shù)滴，置水浴中加熱，銀即游離并附在試管內(nèi)壁形成銀鏡。2023/5/10243.芳香第一胺取供試品約5mg，加稀鹽酸1ml，必要時緩緩煮沸使溶解，放冷，加0.1mol/L亞硝酸鈉液數(shù)滴，滴加堿性β－萘酚試液數(shù)滴視供試品不同，發(fā)生由橙黃到猩紅色沉淀。

普魯卡因，苯佐卡因等藥物均呈此反應。重氮化-偶合反應2023/5/1026（橙黃色）2023/5/1027氨苯砜【鑒別】

(1)本品顯芳香第一胺類的鑒別反應（附錄Ⅲ）。

(2)……。2023/5/1028莨菪酸水解托烷類Vitali反應2023/5/1030COOHCHCH2OH+NO2NO2O2NH2OKOHNOOKNO2O2NCHCH2OHCO2++（深紫色）2023/5/1031后馬托品2023/5/1032例：氫溴酸山莨菪堿

【鑒別】

(1)本品顯托烷生物堿類的鑒別反應（附錄Ⅲ）

(2)……(3)……2023/5/10335.無機金屬鹽（１）鈉鹽、鉀鹽、鈣鹽、鋇鹽的焰色反應2023/5/1034取鉑絲，用鹽酸濕潤后，蘸取供試品，在無色火焰中燃燒，火焰即顯各離子的特征顏色。鈉離子顯鮮黃色，鉀離子顯紫色，鈣離子顯磚紅色，銅離子顯綠色。2023/5/1035例：

氨芐西林鈉

【鑒別】(1)……。(2)……。

(3)本品顯鈉鹽的火焰反應（附錄Ⅲ）2023/5/1036（2）銨鹽測定原理酰胺、內(nèi)酰胺、磺酰胺、胺類和銨鹽等在過量堿作用下水解，受熱時放出氨或胺、有氨或胺臭，并可使?jié)駶櫟募t色石蕊試紙變藍。氨與硝酸亞汞反應析出單質(zhì)汞。2023/5/10376.無機酸根（1）氯化物鑒別一：取供試品溶液，加硝酸使成酸性后，加硝酸銀試液，即生成白色凝乳狀沉淀；分離，沉淀加氨試液即溶解，再加硝酸，沉淀復生成。如供試品為生物堿或其他有機堿的鹽酸鹽，須先加氨試液使成堿性，將析出的沉淀濾過除去，取濾液進行試驗。

2023/5/1038鑒別二：取供試品少量，置試管中，加等量的二氧化錳,混勻,加硫酸濕潤,緩緩加熱，即發(fā)生氯氣，能使?jié)駶櫟牡饣浀矸墼嚰堬@藍色。2023/5/1039（2）硫酸鹽取供試品溶液，加氯化鋇試液，即生成白色沉淀；分離，沉淀在鹽酸或硝酸中均不溶解。取供試品溶液，加醋酸鉛試液，即生成白色沉淀；分離，沉淀在醋酸銨試液或氫氧化鈉試液中溶解。取供試品溶液，加鹽酸，不生成白色沉淀(與硫代硫酸鹽區(qū)別)。2023/5/1040（3）硝酸鹽

取供試品溶液，置試管中，加等量的硫酸，注意混合，冷后，沿管壁加硫酸亞鐵試液，使成兩液層，接界面顯棕色。

取供試品溶液，加硫酸與銅絲(或銅屑)，加熱，即發(fā)生紅棕色的蒸氣。取供試品溶液，滴加高錳酸鉀試液，紫色不應褪去(與亞硝酸鹽區(qū)別)。2023/5/1041１.有機氟化物６.無機酸根２.有機酸鹽３.芳香第一胺５.無機金屬鹽４.托烷生物堿類藥品2023/5/1042（三）專屬鑒別試驗（SpecificIdentificationTest）

是證實某一種藥物的依據(jù)，它是根據(jù)每一種藥物化學結構的差異及其所引起的物理化學特性的不同，選用某些特有的靈敏定性反應，來鑒別藥物真?zhèn)巍?023/5/10435實例1-巴比妥類藥物丙二酰脲母核2023/5/1044基本結構：環(huán)戊烷駢多氫菲ABCD12345678910111213141516171819實例2-甾體激素類藥物2023/5/1045

一般鑒別試驗——不同藥物類別的區(qū)別。

專屬鑒別試驗則是在一般鑒別試驗的基礎上，利用各種藥物的化學結構差異，來鑒別藥物，以區(qū)別同類藥物或具有相同化學結構部分的各個藥物單體，達到最終確證藥物真?zhèn)蔚哪康摹?023/5/1046三、鑒別試驗的方法鑒別方法化學鑒別法光譜鑒別法色譜鑒別法顯微鑒別法指紋圖譜與特征圖譜鑒別法生物學法2023/5/1047（一）化學鑒別法化學鑒別法是根據(jù)藥物與化學試劑在一定條件下發(fā)生離子反應或官能團反應生成不同顏色，不同沉淀，放出不同氣體，呈現(xiàn)不同熒光，從而做出定性分析結論的方法。特點：反應迅速、現(xiàn)象明顯2023/5/1048呈色反應鑒別法沉淀生成反應鑒別法氣體生成反應鑒別法測定生成物的熔點熒光反應鑒別法化學鑒別法2023/5/1049例：呋塞米【鑒別】(1)取本品約25mg，加水5ml，滴加氫氧化鈉試液使恰溶解，加硫酸銅試液1～2滴，即生成綠色沉淀。(2)取本品25mg，置試管中，加乙醇2.5ml溶解后，沿管壁滴加對二甲氨基苯甲醛試液2ml，即顯綠色，漸變深紅色。(3)UV。

2023/5/1050例：硫酸奎寧

【鑒別】

(1)取本品約20mg，加水20ml溶解后，分取溶液10ml，加稀硫酸使成酸性，即顯藍色熒光。(2)顯色反應(3)沉淀反應(4)IR

2023/5/1051例：維生素Ｃ

【鑒別】取本品0.2g，加水10ml溶解后，照下述方法試驗。(1)沉淀反應。

(2)取溶液5ml，加二氯靛酚鈉試液1～2滴，試液的顏色即消失。(3)IR。2023/5/1052光譜鑒別法紫外光譜法紅外光譜法原子吸收法核磁共振法近紅外光譜法法質(zhì)譜法X射線粉末衍射法2023/5/1053（二）光譜鑒別法1、紫外光譜鑒別法(Ultravioletspectrophotometry)測定λmax，或同時測定λmin；測定一定濃度的供試液在λmax處的A規(guī)定λ和E規(guī)定λ和Aλ1/Aλ2經(jīng)化學處理后，測定其反應產(chǎn)物的吸收光譜特性。2023/5/10542023/5/10552023/5/1056例1：布洛芬

【鑒別】(1)取本品，加0.4％氫氧化鈉溶液制成每1ml中含0.25mg的溶液，照分光光度法（附錄ⅣA）測定，在265nm與273nm的波長處有最大吸收，在245nm與271nm的波長處有最小吸收，在259nm的波長處有一肩峰。

(2)本品的紅外吸收圖譜應與對照的圖譜（光譜集85圖）一致。

2023/5/1057例2：

維生素Ｂ2

【鑒別】(1)……。(2)取含量測定項下的溶液，照分光光度法（附錄ⅣA）測定，在267nm、375nm、與444nm的波長處有最大吸收。375nm波長處的吸收度與267nm波長處的吸收度的比值應為0.31～0.33；444nm波長處的吸收度與267nm波長處的吸收度的比值應為0.36～0.39。2023/5/10582、紅外光譜鑒別法(Infraredspectrophotometry)用于組分單一、結構明確的原料藥，特別適合不易區(qū)別的同類藥物，專屬性強，應用廣泛。Ch.P和BP均采用標準圖譜對照法USP采用對照品法2023/5/10592023/5/1060例1：布洛芬

【鑒別】(1)UV.

(2)本品的紅外吸收圖譜應與對照的圖譜（光譜集85圖）一致。

2023/5/1061（三）色譜鑒別法利用不同物質(zhì)在不同色譜條件下，產(chǎn)生各自的特征色譜行為（比移值或保留時間）進行的鑒別試驗。采用與對照品在相同條件下進行色譜分離，并進行比較，根據(jù)兩者保留行為和檢測結果是否一致來驗證藥品的真?zhèn)?。TLCHPLC、GC2023/5/10621.薄層色譜鑒別法

(Thin-LayerChromatography)Rf2023/5/1063一般采用對照品（或標準品）比較法，要求供試品與對照品主斑點的顏色與位置應一致。2023/5/1064同等條件下供試品與對照品的對比；供試品與對照品等體積混合；與供試品化學類似結構的樣品與對照品的對比；與供試品化學類似結構的溶液與供試品溶液混合；(1)(2)(3)(4)2023/5/1065例：硫酸阿米卡星

【鑒別】(1)取本品與阿米卡星標準品適量，分別加水制成每1ml中含10mg的溶液，照薄層色譜法（附錄ⅤB）試驗，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點于同一硅膠Ｈ薄層板上，以氯仿-甲醇-濃氨溶液-水(1:4:2:1)為展開劑，展開后，晾干，顯色，供試品溶液與標準品溶液所顯主斑點的顏色與位置應相同。2023/5/10662.GC和HPLC鑒別法一般規(guī)定按供試品含量測定項下的色譜條件進行試驗。要求供試品和對照品色譜峰的保留時間應一致。內(nèi)標法時，要求藥物與內(nèi)標物峰的保留時間比值也應相同。2023/5/1067HPLC實例2023/5/1068（五）生物學法利用藥效學和分子生物學等有關技術來鑒定藥物品質(zhì)的一種方法，主要用于抗生素、生化藥物及中藥的鑒別。2023/5/1069第四節(jié)鑒別試驗的條件溶液的濃度溶液的溫度溶液的酸