實驗四 糖發(fā)酵實驗

實驗四糖發(fā)酵實驗

2021/10/101一、目的要求1.了解糖發(fā)酵的原理和在腸道細(xì)菌鑒定中的重要作用。2.掌握通過糖發(fā)酵鑒別不同微生物的方法。2021/10/102二、基本原理

糖發(fā)酵試驗是最常用的生化反應(yīng)，在腸道細(xì)菌的鑒定上尤為重要。絕大多數(shù)細(xì)菌都能利用糖類作為碳源和能源，但是它們在分解糖的能力上有很大的差異，有些細(xì)菌能分解某種糖并產(chǎn)酸（如乳酸、醋酸、丙酸等）和氣體（如氫、甲烷、二氧化碳等）；有些細(xì)菌只產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。例如大腸桿菌能分解乳糖和葡萄糖產(chǎn)酸并產(chǎn)氣；傷寒桿菌能分解葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，不能分解乳糖；普通變形桿菌分解葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣，不能分解乳糖。2021/10/103二、基本原理酸的產(chǎn)生可利用指示劑來斷定。在配制培養(yǎng)基時預(yù)先加入溴甲酚紫[Ph5.2（黃色）-6.8（紫色）]，當(dāng)發(fā)酵產(chǎn)酸時，可使培養(yǎng)基由紫色變?yōu)辄S色。氣體的產(chǎn)生可由發(fā)酵管中倒置的德漢氏小管中有無氣泡來證明。2021/10/104三、實驗材料1.大腸桿菌，普通變形桿菌（Proteusvulgaris）斜面各1支；2.盛有葡萄糖發(fā)酵培養(yǎng)基的試管和乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基的試管各3支（內(nèi)裝有倒置的德漢氏小管），試管架，接種環(huán)等。2021/10/105圖1糖類發(fā)酵試驗

2021/10/106四、操作步驟1、編號用記號筆在各試管上分別標(biāo)明發(fā)酵培養(yǎng)基名稱和所接種的菌名。2、接種取盛有葡萄糖發(fā)酵培養(yǎng)基的試管3支，按編號1支接種大腸桿菌，另1支接種普通變形桿菌，第3支不接種，作為對照。另取乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基試管3支，同樣1支接種大腸桿菌，1支接種普通變形桿菌，第3支不接種，作為對照。3．將上述已接種的葡萄糖和乳糖發(fā)酵試管和對照管置37℃溫室中培養(yǎng)24小時。2021/10/107注意事項：接種后應(yīng)輕輕搖動試管，使其均勻，防止倒置的小管進(jìn)入氣泡。否則會造成假象，得出錯誤答案。2021/10/1082021/10/1092021/10/10102021/10/1011觀察結(jié)果:觀察結(jié)果時，看各管顏色變化及杜氏小管有無氣泡。產(chǎn)酸產(chǎn)氣用“⊕”表示；只產(chǎn)酸不產(chǎn)氣用“+”表示；不產(chǎn)酸也不產(chǎn)氣用“—”表示。2021/10/10122021/10/1013