尼帕病毒病專題知識

主要內(nèi)容尼帕病概述尼帕病毒危害中國路徑尼帕病毒發(fā)覺尼帕病毒病原學(xué)特征尼帕病毒流行現(xiàn)實狀況我國尼帕病毒研究進展尼帕病毒預(yù)防與診療技術(shù)尼帕病毒病專題知識第1頁一、尼帕病毒?。∟ipahVirus，NiV）尼帕病毒病是1999年新發(fā)覺一個烈性人畜共患病，可引發(fā)豬呼吸道癥狀和人急性致死性腦炎，首次發(fā)覺于馬來西亞。主要臨診癥狀為神經(jīng)癥狀和呼吸道臨診癥狀為特征。尼帕病毒病是繼英國瘋牛病、臺灣島豬口蹄疫、香港禽流感后，又一引發(fā)世界廣泛關(guān)注和恐慌人畜共患病病毒。因為發(fā)病率和死亡率高，世界動物衛(wèi)生組織(OIE)將其列為生物安全防護四級(BSL4)病原體。即使當前在我國還沒有出現(xiàn)NVD疫情，不過在我國蝙蝠體內(nèi)檢測到NiV抗體，提醒我國蝙蝠體內(nèi)存在類似病毒。尼帕病毒病專題知識第2頁二、尼帕病毒發(fā)覺1995年在馬來西亞豬場首次發(fā)覺該病毒感染，但因為無顯著癥狀、死亡率很低,并未被覺察,直到1998、1999年發(fā)生了人暴發(fā)性腦炎才引發(fā)高度注意造成100多人死亡，116萬多頭豬被撲殺。1999年3月，馬來西亞學(xué)者利用細胞培養(yǎng)技術(shù)，從病人腦脊液中分離到一個病毒，在電鏡下觀察到細胞培養(yǎng)病毒展現(xiàn)副黏病毒樣形態(tài)，并進行序列分析發(fā)覺，此病毒基因組和1994年在澳大利亞發(fā)覺一個毒力很強叫亨德拉病毒（HeV）副黏病毒只有10%差異。1999年4月，CDC開始檢測馬和蝙蝠，尋找自然宿主。1999年4月11日，動物回歸試驗深入證實此種新病毒是元兇，新病毒被命名為尼帕病毒。尼帕病毒病專題知識第3頁三、尼帕病毒病原學(xué)特征尼帕病毒屬于副粘病毒科,含有經(jīng)典單股不分節(jié)負鏈RNA基因組,而且被蛋白質(zhì)完全包裹。螺旋形核衣殼結(jié)構(gòu)由病毒出芽所形成,來自細胞膜膜所包被。病毒粒子大小為126-150nm。病毒外膜含兩種穿膜糖蛋白，一個是細胞受體結(jié)合蛋白[G(糖蛋白)]、H(血凝素)或HN(血凝素/神經(jīng)氨酸酶),另一個穿膜蛋白是融合蛋白(F)。該病毒體外相當不穩(wěn)定，對熱和消毒藥品抵抗力不強，加熱56℃，30min即被破壞，用肥皂等清潔劑和普通消毒劑很輕易滅活。該病毒在VERO\BHK\PS細胞系中生長良好。尼帕病毒病專題知識第4頁當前NiV還沒有統(tǒng)一分型方法，經(jīng)過對GenBank內(nèi)全部分離病毒株開放閱讀框進行序列對比和遺傳進化分析，NiV可大致被分為3個進化分支：馬來西亞分離株源于馬來西亞豬、人以及狐蝠，各毒株之間相同性高達99%，為NiV經(jīng)典毒株，是NiV主要進化分支。尼帕病毒變異馬來西亞分離株孟加拉國分離株尼帕病毒分類柬埔寨分離株尼帕病毒病專題知識第5頁四、尼帕病流行病學(xué)依據(jù)世界動物衛(wèi)生組織資料記述,馬來西亞早在1995年就已感染尼帕病毒,1998、1999年暴發(fā)腦炎,造成265人感染NiV，其中105人死亡，為撲滅疫情，馬來西亞政府撲殺了116萬余頭豬，占該國當初存欄量48%;另外，還撲殺其它動物2萬多頭。1999年新加坡因為從馬來西亞進口生豬，將NVD帶入新加坡，引發(fā)11人感染，1人死亡。年在馬來西亞又發(fā)生2起NiV，共撲殺3千多頭豬。年，相繼在孟加拉國和印度亦發(fā)生人與人之間傳染，沒有豬群感染疫情。尼帕病毒病專題知識第6頁—年，孟加拉國先后暴發(fā)過5次NVD。第1次和第2次疫情分別是

年和年發(fā)生于Meherpur和Naogaon地域，共有17人死亡。第3次疫情于年1月發(fā)生于Mani－kgan和Ｒajbri地域，共有42人感染，其中14人死亡。第4次疫情于年2—4月發(fā)生于Faridpur地域，有36人感染，其中27人死亡。第5次疫情于年1月發(fā)生于Tangail地域，有32人感染，其中11人死亡。年印度孟加拉邦發(fā)生5例人感染NiV病例中，主要經(jīng)過人與人之間傳輸，其中4人為近親關(guān)系，1位患者為醫(yī)護人員，發(fā)病前曾為最先感染患者做檢驗。年2月，孟加拉再次發(fā)生NiV感染，造成最少9人死亡。該疫病在繼續(xù)流行著,預(yù)計馬來西亞、新加坡、孟加拉國、印度北部約有400人患病、其中200人死亡。泰國和柬埔寨沒有發(fā)覺人或者豬感染NiV報道，不過在該國境內(nèi)果蝠中均能檢測到病毒核酸。尼帕病是新發(fā)覺嚴重人獸共患傳染病,該病可能有各種傳染路徑,這對防控帶來很大困難,當前對該病尚無有效防治伎倆(如疫苗),必須采取最嚴格辦法對待和處理,年，中國中科院武漢病毒所石正麗研究員領(lǐng)導(dǎo)研究組首次發(fā)覺中國大陸蝙蝠體內(nèi)存在尼帕病毒或尼帕樣病毒抗體，提醒我國存在尼帕或類似病毒自然疫源地，并向國家相關(guān)部門提出了預(yù)警。尼帕病毒病專題知識第7頁表1:ＮｉＶ相關(guān)疾病主要發(fā)生時間和區(qū)域尼帕病毒病專題知識第8頁自然宿主：NVD自然宿主十分廣泛，主要感染豬、人、馬、山羊、獵犬、貓、果蝙蝠、鼠類。傳染源：果蝙蝠和野豬是豬群發(fā)生NVD最可能傳染源。野豬也可能成為主要傳輸媒介。潛伏期：（從感染到出現(xiàn)癥狀之間間隔）從4天到45天不等。傳輸速度：NVD在感染豬場之間傳輸很快，同一豬場內(nèi)傳輸可能是直接經(jīng)過身體接觸，也可能是健康豬直接接病豬尿、唾液、氣管分泌物等而引發(fā)。也可經(jīng)過垂直傳輸，另外也可能是經(jīng)過使用同一針頭、人工受精等方式傳輸。尼帕病毒病專題知識第9頁傳輸路徑：NiV在動物間及動物與人之間傳輸方式尚不明確。經(jīng)過果蝠．豬．人傳輸者，人類感染可能主要是經(jīng)過呼吸道和親密接觸傳輸．發(fā)病者多與豬有親密接觸；經(jīng)過人一人直接傳輸者多有與患者有親密接觸史：也有報道因飲用被果蝠污染椰棗樹汁而感染者。易感人群：養(yǎng)豬場或屠宰場工人因為職業(yè)原因，與病豬接觸機會較多．所以是本病高危人群。尼帕病毒病專題知識第10頁人群之間傳輸：（1）在NVD對人感染方面，豬起了關(guān)鍵作用。豬感染后，病毒可在豬體內(nèi)大量繁殖，病毒血癥連續(xù)時間較長，并可經(jīng)過呼吸道、尿液、糞便等路徑向外界散播病原。（2）病人主要是經(jīng)過傷口與豬分泌液、排泄液以及呼出氣體等接觸而受感染。而豬肉或豬其它產(chǎn)品作為傳輸媒介還未見報道。（3）馬來西亞檢驗人員發(fā)覺患者唾液和尿液中都帶有NV，即使其家庭組員均未受到感染，但有3個醫(yī)護人員被檢測出NiV抗體陽性，說明人與人之間也存在著較低傳輸機會，但經(jīng)過何種路徑傳輸當前還不清楚。（4）因為患者多個內(nèi)臟器官有病變，而生殖器官未見異常，所以教授推測尼帕病毒從母體傳給胎兒以及經(jīng)過性交傳染可能性較小。尼帕病毒病專題知識第11頁尼帕病毒可引發(fā)人類腦炎，進展快，病死率高。潛伏期為4d-2個月，90%病例少于2周。不一樣年紀豬臨床癥狀有所不一樣，普通主要表現(xiàn)為神經(jīng)癥狀和呼吸道癥狀，50％以上病例有意識減退和顯著腦干功效障礙。其它癥狀還有節(jié)段性肌痙攣、反射消失、肌張力減退、高血壓、心動過速等。還有一些病例有呼吸道癥狀，如呼吸困難、咳痰，胸部聽診雙側(cè)肺部有羅音。五、臨床癥狀尼帕病毒病專題知識第12頁母豬和公豬：臨床癥狀愈加顯著，母豬和公豬發(fā)病相同，高燒（≥39.90℃）、肺炎和流出粘性膿性分泌物，病豬常因為嚴重呼吸困難、局部痙攣、麻痹而死亡。懷孕早期豬還可能出現(xiàn)早產(chǎn)。另外，病豬常出現(xiàn)眼球震顫、用力咀嚼，流涎或口吐泡沫，舌頭外伸等神經(jīng)癥狀。哺乳仔豬：哺乳仔豬感染后死亡率高達40％，受感染仔豬大多出現(xiàn)呼吸困難，后肢軟弱無力及抽搐等癥狀。尼帕病毒病專題知識第13頁斷奶仔豬和肉豬：4周齡至6月齡豬通常表現(xiàn)為急性高熱（≥39.90℃），呼吸困難、伴有輕度或嚴重咳嗽，呼吸音粗厲等癥狀，嚴重病例可見病豬咳血。病豬通常還出現(xiàn)震顫、肌肉痙攣和抽搐等神經(jīng)癥狀，行走時步伐不協(xié)調(diào)，后肢軟弱并伴有不一樣程度局部痙攣、麻痹或者跛行。

野豬：急性發(fā)病，鼻腔有少許膿性、粘性分泌物，肺炎，常于發(fā)病后數(shù)小時內(nèi)死亡。尼帕病毒病專題知識第14頁人類感染者最初出現(xiàn)流感樣癥狀：發(fā)燒、頭痛、肌肉痛、嘔吐和喉嚨痛。之后可能出現(xiàn)頭暈，嗜睡，意識混亂，以及表明急性腦炎神經(jīng)系統(tǒng)跡象。還有，NVD患者特征癥狀是頸部和腹部痙攣，這是與其它腦炎病毒相區(qū)分含有診病意義癥狀。有些人還可能出現(xiàn)非經(jīng)典肺炎和嚴重呼吸道疾患，包含急性呼吸窘迫。嚴重病例會發(fā)生腦炎和癲癇，進而在24至48小時內(nèi)陷入昏迷，并有三分之一病人會在昏迷中死亡，耐過昏迷患者出現(xiàn)永久性腦損傷。也有部分人無臨床癥狀，但血清學(xué)檢測呈陽性反應(yīng)。

尼帕病毒病專題知識第15頁病毒在豬扁桃體、呼吸道上皮組織和呼吸道受感染細胞碎片中繁殖，并經(jīng)過咽喉部和氣管分泌物傳輸可能性較大。尼帕病毒毒力強，含有嗜神經(jīng)性和嗜細胞性。病毒進入體內(nèi)直接侵入內(nèi)皮細胞，進入血管內(nèi)皮細胞之后，病毒快速復(fù)制，細胞發(fā)生融合，產(chǎn)生異常巨大細胞，隨即細胞發(fā)生壞死、破裂，病毒被釋放出來，然后侵入大腦神經(jīng)元、中樞神經(jīng)系統(tǒng)、呼吸道上皮細胞及淋巴細胞，隨之產(chǎn)生一系列病理改變。病毒也能夠直接感染神經(jīng)元并生長增殖，影響神經(jīng)系統(tǒng)功效。尼帕病毒V蛋白可間接地影響干擾素抗病毒感染功效。六、致病機理尼帕病毒病專題知識第16頁病豬病理剖檢可見不一樣程度肺部病變，如充血、氣腫和淤血，氣管、支氣管出現(xiàn)滲出，充滿泡沫樣液體，肺小葉增厚。腦組織出現(xiàn)廣泛性充血、水腫。病理檢驗可見出血性間質(zhì)肺炎，肺血管內(nèi)皮細胞形成合胞體；肺臟、腎臟和腦可見顯著廣泛出血、單核細胞浸潤或血栓形成。七、病理改變尼帕病毒病專題知識第17頁尼帕病毒病專題知識第18頁死亡病例（人）尸檢發(fā)覺，主要病理改變發(fā)生在腦部，以及肺部、心臟和腎臟等，主要表現(xiàn)為充血，組織學(xué)檢驗可見血管炎，小動脈、靜脈與毛細血管內(nèi)皮損傷，血管壁壞死、出血和血栓形成。腦、肺和腎血管內(nèi)皮有大融合細胞形成。出現(xiàn)血管炎血管周圍有微小壞死和缺血灶尼帕病毒病專題知識第19頁本病與日本腦炎病毒有相同臨床癥狀，但也有一定區(qū)分。日本腦炎常發(fā)生于蚊蟲季節(jié)，主要感染兒童，成年人對其含有一定免疫力。最主要是，尼帕病毒患者還會出現(xiàn)頸部和腹部痙攣特征癥狀，這是與其它腦炎病毒相區(qū)分含有診病意義癥狀。八、診療尼帕病毒病專題知識第20頁OIE要求或推薦試驗室檢驗方法病原判定:病原判定必須在絕對安全(BSL2-4)試驗室中進行。檢驗方法包含病毒分離、免疫染色、中和試驗和分子生物學(xué)技術(shù),外來病中心已建立了檢測尼帕病毒國際標準RT-PCR診療技術(shù),可檢測到最低170拷貝RNA模版,陽性檢出率重復(fù)性和穩(wěn)定性均達100%。抗體檢測:當前有病毒中和試驗(VNT)和酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA),這都要求在生物安全符合要求條件下進行。尼帕病毒病專題知識第21頁病毒分離:病毒分離是最主要、最基本診療方法，對于一新型病例，分離病毒是最理想。病毒分離株深入判定，還需做電鏡或免疫電鏡、特異性抗血清中和試驗、PCR等嚴格質(zhì)量控制試驗。免疫組織化學(xué):抗兔抗鼠多聚葡聚糖連接堿性磷酸酶，取代了生物素一親和素過氧化物酶檢測系統(tǒng)，經(jīng)濟、方便。免疫電鏡技術(shù):免疫電鏡技術(shù)盡管繁瑣，但對研究致病機理。病理改變是最適當。尼帕病毒病專題知識第22頁血清中和試驗:有報道血清可能引發(fā)細胞毒性，但對血清質(zhì)量要求低，是可靠試驗方法。間接ELISA法檢測：特異性高于95%，但有時也存在假陽性問題。即使如此，ELISA仍可作為一個非常有效篩選工具，用于日常監(jiān)測。對于ELISA檢測結(jié)果呈陽性病例，必須送到澳大利亞動物健康試驗室（AAHL）進行血清中和試驗（VN）加以深入判定。PCR技術(shù)：發(fā)展時間較短，但此技術(shù)應(yīng)用范圍非常廣泛，此方法靈敏度高，機體在免疫抗體產(chǎn)生之前或甚微時，即可檢測到RNA病毒，及早發(fā)覺問題，防患于未然。尼帕病毒病專題知識第23頁封鎖感染豬場，捕殺病豬和疑是感染豬及其同群豬，加以深埋處理，燒毀豬舍，并對感染豬場進行全方面、徹底消毒，以毀滅或降低傳染原。禁止疫區(qū)豬只向外轉(zhuǎn)運，以防制疫情蔓延；并對豬、馬等易感動物，以及養(yǎng)豬從業(yè)人員和與豬親密接觸人員進行緊急免疫接種。開展大量宣傳教育，在與豬接觸時注意衛(wèi)生。疫情控制后，對以前發(fā)病場周圍豬場豬群進行尼帕病毒抗體檢測，3周內(nèi)監(jiān)測2次，只要有一次為抗體陽性豬群必須被銷毀。九、尼帕病預(yù)防尼帕病毒病專題知識第24頁十、尼帕病毒危害中國路徑自然發(fā)生尼帕病毒疫情：尼帕病毒主要出現(xiàn)于東南亞以及南亞地域，我國華南以及西南等地毗鄰該地域，尤其是西藏亞東市距離該地更近，僅有300多公里。所以從地理上來講，我國完全存在自然發(fā)生尼帕病毒疫情風(fēng)險。再加之狐蝠是該病毒主要儲主在馬來西亞以及柬埔寨等地狐蝠中均發(fā)覺了尼帕病毒抗體，而我國華南以及東南沿海島嶼都有狐蝠存在,且狐蝠與人畜都有接觸海年被狐蝠吃掉水果造成經(jīng)濟損失就有數(shù)億元，所以我國自然出現(xiàn)尼帕病毒可能性依舊較大。尼帕病毒病專題知識第25頁中國人出國旅行時，感染尼帕病毒：近幾年來，中國公民到東南亞國家旅游人數(shù)增加率幾乎每年都30%左右，年，中國到東南亞國家旅游人數(shù)已經(jīng)超出了150萬人。盡管其感染尼帕病毒可能性不大不過只要發(fā)生,則是致命危險。中國從國外進口一些產(chǎn)品時，將尼帕病毒帶入中國：比如，新加坡1999年就是因為從馬來西亞進口生豬時，將尼帕病毒病引入新加坡，造成1人感染淇中1人死亡。當前，我國進出口衛(wèi)生檢驗檢疫部門和我國動物進出口檢驗檢疫部門都沒有開展針對尼帕病毒病檢驗檢疫。尼帕病毒病專題知識第26頁敵對勢力將尼帕病毒帶入中國并使之感染人或豬：國際教授普遍認為尼帕病毒適合作為生物武器。其輕易生產(chǎn)并攜帶方便，培養(yǎng)病毒在進出境和旅行檢驗時難以查出，而且釋放時難以覺察，病毒釋放到豬場或豬交易市場非常輕易。試驗室散毒：同SARS一樣，試驗室散毒也會引發(fā)尼帕病毒疫情。當前我國一些單位可能已經(jīng)引進了尼帕病毒，不過相關(guān)操作又難以在符合生物安全要求條件下進行，所以也不能排除試驗室感染和散毒可能。尼帕病毒病專題知識第27頁總而言之，我國有可能傳入NiV，而且具備大規(guī)模流行條件，我們必須嚴格檢疫，預(yù)防該病以任何路徑傳入；組織相關(guān)研究單位對蝙蝠等野生動物是否攜帶NiV進行全方面流行病學(xué)調(diào)查；加強檢測工作，在進出口衛(wèi)生檢驗檢疫部門和動物進出口檢驗檢疫部門開展NiV檢疫，及時發(fā)覺調(diào)查可疑病例；建立快速準確可靠檢測技術(shù)。孟加拉等國疫情表明，NiV也在發(fā)生變異，有些人與人之間傳輸跡象，一旦傳入新地域就有可能在動物和人間大流行，而且難以控制。NiV已成為主要全球性公共衛(wèi)生問題。尼帕病毒病專題知識第28頁NiV發(fā)覺和尼帕病毒病在一些國家流行，引發(fā)了我國相關(guān)部門高度重視，相繼建立了一些NiV研究小組。其中上海巴斯德研究所把在法國巴斯德研究所相關(guān)NiV研究結(jié)果移植到中國；中國動物衛(wèi)生和流行病學(xué)中心NiV研究小組側(cè)重于NiV診療技術(shù)和防控策略研究；中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研