臨床免疫學(xué)與免疫檢驗(yàn)概述

臨床免疫學(xué)與免疫檢驗(yàn)概述臨床免疫學(xué)與免疫檢驗(yàn)概述第1頁(yè)教學(xué)目標(biāo)與要求一、掌握臨床免疫學(xué)與臨床免疫檢驗(yàn)定義，掌握抗原、抗體及免疫細(xì)胞等免疫學(xué)基礎(chǔ)要素基礎(chǔ)特征。二、掌握臨床免疫檢驗(yàn)在臨床醫(yī)學(xué)中主要價(jià)值。三、熟悉臨床免疫檢驗(yàn)現(xiàn)實(shí)狀況。四、了解臨床免疫檢驗(yàn)中值得關(guān)注幾個(gè)問(wèn)題。五、了解臨床免疫檢驗(yàn)發(fā)展方向。臨床免疫學(xué)與免疫檢驗(yàn)概述第2頁(yè)CongenitalHarelip臨床免疫學(xué)與免疫檢驗(yàn)概述第3頁(yè)Causeofcongenitalharelip(1)nutrientdeficiency:vitamindeficiency(2)medicinetherapy:suchasaspirinandhormone.(3)depression(4)geneticfactors.

(5)infection:suchasrubellavirus.(6)otherfactors:suchasradioactivitysubstance,smokinganddrinketc.臨床免疫學(xué)與免疫檢驗(yàn)概述第4頁(yè)TORCH感染T：弓形蟲（toxoplasmagondii）O：其它病原微生物(others)R：風(fēng)疹病毒（rubellavirus）C：巨細(xì)胞病毒（cytomegalovirus）H：?jiǎn)渭儼捳畈《荆╤erpessimplexvirus）TORCH感染病原體常可經(jīng)過(guò)胎盤傳給胎兒，引發(fā)圍生期感染，造成流產(chǎn)、死胎、早產(chǎn)、先天畸形和智力障礙等各種異常結(jié)果。臨床免疫學(xué)與免疫檢驗(yàn)概述第5頁(yè)臨床免疫學(xué)與免疫檢驗(yàn)概述第6頁(yè)怎樣發(fā)覺TORCH感染呢？

臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)！臨床分子生物學(xué)檢驗(yàn)！病原體分離、培養(yǎng)與判定！臨床免疫學(xué)與免疫檢驗(yàn)概述第7頁(yè)免疫學(xué)（Immunology）研究免疫系統(tǒng)結(jié)構(gòu)與功效,研究免疫應(yīng)答機(jī)制,研究有效免疫辦法,實(shí)現(xiàn)以防病、治病為目標(biāo)一門當(dāng)代生命科學(xué)。感染性疾病疫苗肝臟疾病腫瘤

……臨床免疫學(xué)與免疫檢驗(yàn)概述第8頁(yè)臨床免疫學(xué)澳大利亞于30年前即成立了臨床免疫學(xué)科,將臨床免疫學(xué)工作定為三種形式,即(1)臨床診療和治療,(2)臨床試驗(yàn)免疫學(xué),(3)前二者兼而有之。英國(guó)將臨床免疫學(xué)定義為“對(duì)那些在發(fā)病或治療過(guò)程中包括免疫系統(tǒng)疾病診療和處理工作”。臨床免疫學(xué)是將免疫學(xué)基礎(chǔ)理論與免疫學(xué)技術(shù)相結(jié)合,用于研究臨床疾病發(fā)病機(jī)制、診療與判別診療、治療與預(yù)后判斷等領(lǐng)域新興邊緣學(xué)科。臨床免疫學(xué)與免疫檢驗(yàn)概述第9頁(yè)臨床免疫學(xué)范圍臨床免疫檢驗(yàn)內(nèi)科免疫學(xué)外科免疫學(xué)兒科免疫學(xué)生殖免疫學(xué)感染免疫學(xué)移植免疫學(xué)免疫病理學(xué)……臨床免疫學(xué)與免疫檢驗(yàn)概述第10頁(yè)臨床免疫檢驗(yàn)

(Clinicalimmunoassay)采取免疫學(xué)技術(shù)與方法檢測(cè)人體內(nèi)免疫活性物質(zhì)或其它生命化學(xué)物質(zhì),為臨床疾病診療，治療方案選擇以及疾病預(yù)后判斷提供有效試驗(yàn)室依據(jù).臨床免疫學(xué)與免疫檢驗(yàn)概述第11頁(yè)SwineInfluenzaA(H1N1)outbreakVirusisbeingdescribedasanewsubtypeofA/H1N1notpreviouslydetectedinswineorhumans臨床免疫學(xué)與免疫檢驗(yàn)概述第12頁(yè)SwineFlu:CaseDefinitionsSource:AmericanCDC臨床免疫學(xué)與免疫檢驗(yàn)概述第13頁(yè)

學(xué)好臨床免疫檢驗(yàn)，必須掌握“一個(gè)關(guān)鍵，三個(gè)要素與四個(gè)標(biāo)識(shí)”。一個(gè)關(guān)鍵：抗原抗體反應(yīng)(Antigen-antibodyinteraction)三個(gè)要素：抗原、抗體和免疫細(xì)胞四個(gè)標(biāo)識(shí)：酶標(biāo)識(shí)技術(shù)、放射免疫標(biāo)識(shí)技術(shù)、熒光素標(biāo)識(shí)技術(shù)與化學(xué)發(fā)光標(biāo)識(shí)技術(shù)。臨床免疫學(xué)與免疫檢驗(yàn)概述第14頁(yè)抗原（Antigen）抗原：能夠刺激機(jī)體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生抗體和致敏淋巴細(xì)胞，并能在體內(nèi)外與抗體或致敏淋巴細(xì)胞發(fā)生特異性反應(yīng)物質(zhì)。蛋白質(zhì)脂多糖核酸等臨床免疫學(xué)與免疫檢驗(yàn)概述第15頁(yè)抗原基礎(chǔ)特征免疫原性(Immunogenicity):指抗原能夠刺激機(jī)體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生抗體和致敏淋巴細(xì)胞等免疫活性物質(zhì)特征.抗原性(Antigenicity):指抗原能在體內(nèi)外與抗體或致敏淋巴細(xì)胞發(fā)生特異性反應(yīng)特征。臨床免疫學(xué)與免疫檢驗(yàn)概述第16頁(yè)抗原特異性物質(zhì)基礎(chǔ)是抗原決定族（Antigenicitydeterminant）抗原決定族：指存在于抗原表面決定抗原特異性特殊化學(xué)基團(tuán)。是TCR/BCR及抗體特異性結(jié)合基礎(chǔ)單位，開啟免疫應(yīng)答，又稱表位（epitope）。其化學(xué)性質(zhì)、數(shù)目和空間構(gòu)象決定了該抗原特異性和免疫原性強(qiáng)弱。臨床免疫學(xué)與免疫檢驗(yàn)概述第17頁(yè)臨床免疫學(xué)與免疫檢驗(yàn)概述第18頁(yè)抗體

定義：抗體（Antibody，Ab）是機(jī)體在抗原刺激下，由漿細(xì)胞合成與分泌，能與抗原特異性結(jié)合含有免疫功效球蛋白。基礎(chǔ)結(jié)構(gòu)（1）四肽鏈（2）NH2-端和COOH-端（3）V區(qū)與C區(qū)臨床免疫學(xué)與免疫檢驗(yàn)概述第19頁(yè)臨床免疫學(xué)與免疫檢驗(yàn)概述第20頁(yè)可變區(qū)(variableregion):即VL和VH,位于Ig分子N端,,該區(qū)氨基酸組成與排列次序有較大差異,并決定Ag與Ab特異性.高變區(qū)(Hypervariableregion):VL和VH中3個(gè)區(qū)域氨基酸組成與排列次序尤其輕易改變,又稱互補(bǔ)決定區(qū)(CDR),此乃Ag與Ab特異性結(jié)合部位.恒定區(qū)(Constantregion):同一個(gè)屬中,恒定區(qū)氨基酸組成與排列次序恒定.臨床免疫學(xué)與免疫檢驗(yàn)概述第21頁(yè)臨床免疫學(xué)與免疫檢驗(yàn)概述第22頁(yè)多克隆抗體

（polyclonalantibody）用含各種抗原決定族抗原物質(zhì)免疫動(dòng)物，刺激多個(gè)B細(xì)胞克隆所取得免疫血清（含各種單克隆抗體混合物），此為多克隆抗體臨床免疫學(xué)與免疫檢驗(yàn)概述第23頁(yè)單克隆抗體

（monoclonalantibody,McAb）借助小鼠B細(xì)胞雜交瘤（hybridoma）技術(shù)，所制備高度均一（屬同一類、亞類、型別）、單一特異性（僅針對(duì)特定抗原表位）抗體。

臨床免疫學(xué)與免疫檢驗(yàn)概述第24頁(yè)臨床免疫學(xué)與免疫檢驗(yàn)概述第25頁(yè)基因工程抗體

（EngineerAntibody）借助于基因重組技術(shù)和蛋白表示技術(shù),按照大家意愿在基因水平對(duì)Ig進(jìn)行切割、連接或修飾，組裝成新奇Ab分子，稱為基因工程抗體。臨床免疫學(xué)與免疫檢驗(yàn)概述第26頁(yè)鼠IgGDNA人IgGDNA

VmCmVhCh

VmCh

鼠源性單抗V區(qū)，人IgC區(qū)。

人-鼠嵌合抗體(chimericantibody)

臨床免疫學(xué)與免疫檢驗(yàn)概述第27頁(yè)免疫細(xì)胞免疫細(xì)胞:包含全部參加免疫應(yīng)答或與免疫應(yīng)答相關(guān)細(xì)胞及其前體細(xì)胞.如造血干細(xì)胞、淋巴細(xì)胞，肥大細(xì)胞以及紅細(xì)胞等。免疫活性細(xì)胞：含有特異性抗原受體，被抗原刺激后能活化、增殖、分化并產(chǎn)生免疫物質(zhì)，發(fā)生特異性免疫應(yīng)答細(xì)胞。臨床免疫學(xué)與免疫檢驗(yàn)概述第28頁(yè)免疫細(xì)胞含有不一樣表面標(biāo)志

B細(xì)胞T細(xì)胞

BCRTCRCD19、CD21和CD81CD3，CD4或CD8

CD40CD40LB7CD28

補(bǔ)體受體CD2

絲裂原受體絲裂原受體

…………

臨床免疫學(xué)與免疫檢驗(yàn)概述第29頁(yè)臨床免疫學(xué)與免疫檢驗(yàn)概述第30頁(yè)免疫細(xì)胞數(shù)目標(biāo)檢測(cè)免疫細(xì)胞功效檢測(cè)免疫細(xì)胞分離臨床免疫學(xué)與免疫檢驗(yàn)概述第31頁(yè)二、臨床免疫檢驗(yàn)在臨床醫(yī)學(xué)中含有主要價(jià)值臨床免疫學(xué)與免疫檢驗(yàn)概述第32頁(yè)疾病診療療效觀察復(fù)發(fā)評(píng)定預(yù)后判斷臨床免疫學(xué)與免疫檢驗(yàn)概述第33頁(yè)hepatitisCausesofhepatitisViralHepatitis,A,B,C,D,E,F,G,TTVetc.Otherviruses-CMV,EBV,HSV,Dengueetc.DrugsAlcoholIschaemiaSystemicDiseasesandInfections臨床免疫學(xué)與免疫檢驗(yàn)概述第34頁(yè)HBVserologicmarker臨床免疫學(xué)與免疫檢驗(yàn)概述第35頁(yè)SLE(Systemiclupuserythematosus)SLEisanautoimmunediseasecharacterizedbyimmunedysregulationresultingintheproductionofantinuclearantibodies(ANA),generationofcirculatingimmunecomplexes,andactivationofthecomplementsystem.InSLEthereisapredilectionforclinicalinvolvementofthejoints,skin,kidney,brain,serosa,lug,heartandgastrointestinaltract.

Butterflyerythema臨床免疫學(xué)與免疫檢驗(yàn)概述第36頁(yè)TheAmericanRheumatologyAssociation(ARA)criteria

臨床免疫學(xué)與免疫檢驗(yàn)概述第37頁(yè)ANA

臨床免疫學(xué)與免疫檢驗(yàn)概述第38頁(yè)ArealstoryabouttumormarkerPlace:ThecityofBirmingham,AL,U.S.ACharacter:ApastcolleagueworkingintheUniversityofAlabamaatBirmingham.Hydatidiformmole(葡萄胎)?Suggection:TimeThefrequencyofdetectingβ-hCGFirstthreemonth1/weekNextninemonth1/monthNextyear1/halfyear臨床免疫學(xué)與免疫檢驗(yàn)概述第39頁(yè)臨床免疫學(xué)與免疫檢驗(yàn)概述第40頁(yè)HIVandAIDS臨床免疫學(xué)與免疫檢驗(yàn)概述第41頁(yè)CD4+CellcountandCD4+/CD8+InpatientswithAIDS,totalTcellsand

CD4+Cellsdecreasesignificance(<1.5×109/Land<2.0~4.0×108/L,furthermore,

CD4+/CD8+<1.0.)Monitorcurativeeffect.臨床免疫學(xué)與免疫檢驗(yàn)概述第42頁(yè)臨床免疫學(xué)與免疫檢驗(yàn)概述第43頁(yè)臨床免疫學(xué)與免疫檢驗(yàn)概述第44頁(yè)對(duì)應(yīng)章節(jié)二十二章:感染免疫及其免疫檢測(cè)二十三章:超敏反應(yīng)疾病及其免疫檢測(cè)二十四章:本身免疫性疾病及其免疫檢測(cè)二十五章:免疫增殖性疾病及其免疫檢測(cè)二十六章:免疫缺點(diǎn)性疾病及其免疫檢測(cè)二十七章:腫瘤免疫及其免疫檢測(cè)二十八章:移植免疫及其免疫檢測(cè)臨床免疫學(xué)與免疫檢驗(yàn)概述第45頁(yè)三、臨床免疫檢測(cè)現(xiàn)實(shí)狀況多年來(lái)，伴隨生物學(xué)、基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)和計(jì)算機(jī)技術(shù)，尤其是單克隆抗體技術(shù)與免疫標(biāo)識(shí)技術(shù)快速發(fā)展，免疫學(xué)檢驗(yàn)取得了顯著進(jìn)步，大量新檢測(cè)方法及檢測(cè)指標(biāo)不停出現(xiàn)，并向自動(dòng)化、微量化及定量化方向飛速發(fā)展.臨床免疫學(xué)與免疫檢驗(yàn)概述第46頁(yè)早期免疫檢驗(yàn)方法逐步退出檢驗(yàn)市場(chǎng)。免疫標(biāo)識(shí)技術(shù)在免疫檢測(cè)中占主導(dǎo)地位。免疫檢驗(yàn)自動(dòng)化已逐步普遍。免疫檢驗(yàn)對(duì)象不停增加。臨床免疫學(xué)與免疫檢驗(yàn)概述第47頁(yè)早期免疫檢驗(yàn)方法逐步退出檢驗(yàn)市場(chǎng)早期一些免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù)，常經(jīng)過(guò)肉眼觀察是否有沉淀、凝集以及溶血現(xiàn)象發(fā)生來(lái)進(jìn)行免疫學(xué)分析，如免疫擴(kuò)散、凝集試驗(yàn)以及經(jīng)典補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)等，盡管這些方法含有成本低廉，操作簡(jiǎn)單等優(yōu)點(diǎn)，不過(guò)大個(gè)別只是半定量、定性試驗(yàn)，且需要花費(fèi)較長(zhǎng)時(shí)間，越來(lái)越難以滿足臨床診療需要，已慢慢地被隨即發(fā)展起來(lái)各種先進(jìn)免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù)所代替。臨床免疫學(xué)與免疫檢驗(yàn)概述第48頁(yè)凝集反應(yīng)（Agglutinationreaction）臨床免疫學(xué)與免疫檢驗(yàn)概述第49頁(yè)臨床免疫學(xué)與免疫檢驗(yàn)概述第50頁(yè)免疫標(biāo)識(shí)技術(shù)

在免疫檢測(cè)中占主導(dǎo)地位

標(biāo)識(shí)免疫技術(shù):所謂免疫標(biāo)識(shí)技術(shù)是將可微量檢測(cè)標(biāo)識(shí)物，如放射性核素、熒光素以及酶等，標(biāo)識(shí)一定抗原或抗體，用以檢測(cè)未知抗體或抗原,如放射免疫技術(shù),酶標(biāo)識(shí)免疫技術(shù),熒光素標(biāo)識(shí)免疫技術(shù)等.臨床免疫學(xué)與免疫檢驗(yàn)概述第51頁(yè)臨床免疫學(xué)與免疫檢驗(yàn)概述第52頁(yè)FIGURE6-15Separationoffluorochrome-labeledcellswiththeflowcytometerwhichusesalaserbeam&lightdetector.:differentAgindifferentcells/differentlevelsofAginthesametypeofcell→fluorescenceintensity/thesizeofcells.labeledwithfluorescein(green)labeledwithrhodamine(red)eachdotrepresentsacell(smallelectricalchange)(excitingthefluorochrome)↓eachdroplet(cell)emitsthefluorescence10.Flowcytometry&Fluorescence臨床免疫學(xué)與免疫檢驗(yàn)概述第53頁(yè)免疫檢驗(yàn)自動(dòng)化已逐步普遍免疫自動(dòng)化分析是指用自動(dòng)化儀器對(duì)待測(cè)物進(jìn)行分析，它應(yīng)包含兩方面內(nèi)容：一是加樣、測(cè)定以及儀器洗滌自動(dòng)化；二是數(shù)據(jù)處理自動(dòng)化。當(dāng)前中國(guó)已能見到一系列全自動(dòng)免疫分析儀，

臨床免疫學(xué)與免疫檢驗(yàn)概述第54頁(yè)臨床免疫學(xué)與免疫檢驗(yàn)概述第55頁(yè)免疫自動(dòng)化分析與傳統(tǒng)手工操作

相比較含有顯著優(yōu)勢(shì)

免疫自動(dòng)化分析快速、標(biāo)本匯報(bào)時(shí)間縮短，普通數(shù)小時(shí)內(nèi)即可向臨床匯報(bào)檢驗(yàn)結(jié)果。免疫自動(dòng)化分析尤適合用于大批量樣品測(cè)定，可節(jié)約大量人力、物力，而且同一標(biāo)本可同時(shí)用于檢測(cè)幾個(gè)待測(cè)物，血清用量少，通常以μl計(jì)。免疫自動(dòng)化分析重復(fù)性好、干擾原因少，結(jié)果判斷愈加準(zhǔn)確、客觀，更有利于質(zhì)量控制。免疫自動(dòng)化分析能夠防止標(biāo)本對(duì)人感染及標(biāo)本之間相互污染。臨床免疫學(xué)與免疫檢驗(yàn)概述第56頁(yè)免疫檢驗(yàn)對(duì)象不停增加

經(jīng)典免疫活性物質(zhì)其它生命化學(xué)物質(zhì)

IgGCERIgMTrfIgACRPC3AATC4α1MG臨床免疫學(xué)與免疫檢驗(yàn)概述第57頁(yè)

HAPATITISCANCERFERTILITYPROTEINSTDMs/DRUGSTYROID,ANEMIAHBV

HCVM1071010-1510-4

g/L

AFPFERCEACA199PRLHCGLHFSHGHMyoglobinRHFIgGC3ASOCERTRFAAGQUIGENAMIPHYFT3FT4DigT3T4TSHProg

免疫分析譜臨床免疫學(xué)與免疫檢驗(yàn)概述第58頁(yè)對(duì)應(yīng)章節(jié)第二章~二十二章臨床免疫學(xué)與免疫檢驗(yàn)概述第59頁(yè)四、臨床免疫檢驗(yàn)中

值得關(guān)注幾個(gè)問(wèn)題臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)怎樣快速應(yīng)對(duì)重大突發(fā)性傳染??？蛋白芯片用于免疫檢測(cè)值得期待。應(yīng)建立有免疫檢驗(yàn)特色質(zhì)量控制體系。

臨床免疫學(xué)與免疫檢驗(yàn)概述第60頁(yè)免疫學(xué)檢驗(yàn)怎樣快速應(yīng)對(duì)重大突發(fā)性傳染??？多年來(lái)，重大突發(fā)性傳染病偶有發(fā)生，如SARS，禽流感以及豬鏈球菌感染等。這些疾病不但嚴(yán)重危害人體健康，而且含有極高傳染性。怎樣盡快準(zhǔn)確地為臨床提供病原體感染標(biāo)志物，成為廣大醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)工作者主要任務(wù)。因?yàn)閱慰寺】贵w飛速發(fā)展，眾多床旁測(cè)試也采取免疫學(xué)檢測(cè)，如HCG、HBsAg以及TB-AB檢測(cè)等。所以建立重大突發(fā)性傳染病快速檢測(cè)或床旁測(cè)試試劑值得免疫學(xué)檢驗(yàn)工作人員關(guān)注。臨床免疫學(xué)與免疫檢驗(yàn)概述第61頁(yè)SARS（severeacuterespiratory

syndrome

）病原體確實(shí)定與檢測(cè)現(xiàn)實(shí)狀況臨床免疫學(xué)與免疫檢驗(yàn)概述第62頁(yè)電子顯微鏡發(fā)覺為

某種冠狀病毒臨床免疫學(xué)與免疫檢驗(yàn)概述第63頁(yè)基因組測(cè)序鎖定為

新型冠狀病毒臨床免疫學(xué)與免疫檢驗(yàn)概述第64頁(yè)復(fù)制出對(duì)應(yīng)動(dòng)物模型臨床免疫學(xué)與免疫檢驗(yàn)概述第65頁(yè)建立新檢測(cè)方法PCR法間接免疫熒光法ELISA臨床免疫學(xué)與免疫檢驗(yàn)概述第66頁(yè)臨床免疫學(xué)與免疫檢驗(yàn)概述第67頁(yè)快速免疫檢驗(yàn)與重大突發(fā)性傳染病臨床免疫學(xué)與免疫檢驗(yàn)概述第68頁(yè)過(guò)敏原千千萬(wàn)???臨床免疫學(xué)與免疫檢驗(yàn)概述第69頁(yè)蛋白芯片用于免疫檢測(cè)值得期待蛋白芯片是將大量蛋白質(zhì)分子按預(yù)先設(shè)置排列固定于一個(gè)載體表面行成微陣列，依據(jù)蛋白質(zhì)分子間