紫外可見分光光度法測定條件的選擇

紫外-可見分光光度法測量條件選擇永州職業(yè)技術(shù)學院王文淵學習內(nèi)容Learningcontent01儀器測量條件的選擇02顯色條件的選擇03參比溶液的選擇測定波長

測定波長的選擇應(yīng)滿足：

⑴對光吸收充分（提高靈敏度）；⑵測定波長處附近的吸光系數(shù)變化不大（減少測定誤差）。

【結(jié)論】

選擇在被測物質(zhì)的最大吸收波長處（λmax）進行吸光度測定。吸光度

A波長λ（nm）1.測定波長的選擇λmax1λmax2一、儀器測量條件的選擇分析誤差大A＝K·C·LL濃度C吸光度A控制在0.2～0.8的范圍(透光率T控制在20%～65%之間)。2.吸光度值的選擇與控制（1）控制溶液的濃度；（2）改變吸收池的厚度。（1）吸光度測定值選擇范圍：（2）控制方法：吸光度太大吸光度太小二、顯色條件的選擇為什么要顯色？加入的試劑叫顯色劑。發(fā)生的反應(yīng)叫顯色反應(yīng)。紫外-可見光區(qū)無吸收（無顏色）的物質(zhì)，加入某種試劑與之反應(yīng)可生成有較強吸收的有色物，則可使用分光光度法進行測定。吸光度與顯色劑濃度變化曲線圖1.顯色劑用量的選擇方法：配制被測物濃度相同而顯色劑用量不同的溶液，分別測其吸光度，繪制A-CR曲線。曲線上吸光度較大且平穩(wěn)的區(qū)域就是顯色劑用量的選擇區(qū)域。A吸光度顯色劑濃度CaCb曲線平臺圖AA吸光度顯色劑濃度CaCb曲線平臺圖B吸光度A與溶液pH變化曲線圖A吸光度pH曲線平臺圖AA吸光度pH曲線平臺圖B2.顯色酸度條件的選擇

方法：在不同pH緩沖溶液中加入等量的被測物和顯色劑，分別測其吸光度，繪制A-pH變化曲線，曲線上吸光度較大且平穩(wěn)的區(qū)域就是酸度的選擇區(qū)域。吸光度與顯色時間變化曲線圖3.顯色時間的選擇方法：被測物與顯色劑混合后，分別在不同的時間點測定其吸光度，繪制A-t變化曲線。曲線上吸光度較大且相對穩(wěn)定的區(qū)域就是顯色時間的選擇區(qū)域。A吸光度顯色時間t圖AA吸光度顯色時間t圖B4.顯色溫度的選擇

方法：被測物與顯色劑于不同的溫度下反應(yīng)后，分別測其吸光度，繪制A-T曲線，曲線上吸光度較大且相對穩(wěn)定的區(qū)域就是顯色溫度的選擇區(qū)域。吸光度與顯色溫度的變化曲線圖tA吸光度顯色溫度T（℃）圖AA吸光度顯色溫度T（℃）t圖BA吸光度顯色溫度T（℃）t圖C三、參比溶液的選擇

消除其他成分（比色皿、溶劑、顯色劑等）的干擾，減少測定誤差。A（樣）=A（待測物）+A（池）+A（干擾）A（參比）=A（池）+A（干擾）參比溶液樣品溶液1.參比溶液的作用試樣顯色劑溶劑吸光物質(zhì)參比液選擇無吸收無吸收透明吸收溶劑基體吸收無吸收透明吸收不加顯色劑的試液無吸收吸收透明吸收顯色劑+溶劑基體吸收吸收透明吸收顯色劑+溶劑+待測組分的掩蔽劑參比溶液要根據(jù)待測溶液的組成和性質(zhì)來選擇，常有以下幾種：