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和氣相色譜一樣，液相色譜分離系統(tǒng)也由兩相——固定相和流動(dòng)相組成。液相色譜的固定相可以是吸附劑、化學(xué)鍵合固定相（或在惰性載體表面涂上一層液膜）、離子交換樹脂或多孔性凝膠；流動(dòng)相是各種溶劑。被分離混合物由流動(dòng)相液體推動(dòng)進(jìn)入色譜柱。根據(jù)各組分在固定相及流動(dòng)相中的吸附能力、分配系數(shù)、離子交換作用或分子尺寸大小的差異進(jìn)行分離。

色譜分離的實(shí)質(zhì)是樣品分子（以下稱溶質(zhì)）與溶劑（即流動(dòng)相或洗脫液）以及固定相分子間的作用，作用力的大小，決定色譜過程的保留行為。高效液相色譜法基本原理

液相色譜所用基本概念：保留值、塔板數(shù)、塔板高度、分離度、選擇性等與氣相色譜一致。液相色譜所用基本理論：塔板理論與速率方程也與氣相色譜基本一致。但由于在液相色譜中以液體代替氣相色譜中的氣體作為流動(dòng)相，而液體和氣體的性質(zhì)不相同；此外，液相色譜所用的儀器設(shè)備和操作條件也與氣相色譜不同，所以，液相色譜與氣相色譜有一定差別：Csm為靜態(tài)流動(dòng)相傳質(zhì)阻力系數(shù)高效液相色譜法基本原理組分在色譜柱中運(yùn)行時(shí)間不同，導(dǎo)致色譜峰展寬。影響因素：固定相的粒度和填充均勻程度渦流擴(kuò)散項(xiàng)A減少方法：

a降低dp：目前商品柱多采用3-5μm粒徑

b降低λ：采用球形、均勻分布固定相。高效液相色譜法基本原理B=2γDmDm∝T/η2.縱向擴(kuò)散項(xiàng)B/u樣品分子沿流動(dòng)相方向產(chǎn)生擴(kuò)散，所引起峰展寬u是最佳流速的3-5倍B/u忽略液相色譜中Dm比GC中小105高效液相色譜法基本原理3.流動(dòng)的流動(dòng)相傳質(zhì)阻力項(xiàng)Cmu流動(dòng)相本身，處于不同層流的分子具有不同流速。Dm∝T/η減免方法：1）減少固定相顆粒直徑

2）減少流動(dòng)相液體黏度（甲醇）高效液相色譜法基本原理4.靜態(tài)流動(dòng)相傳質(zhì)阻力項(xiàng)Csmu原因：處于固定相顆粒內(nèi)部孔洞內(nèi)靜態(tài)流動(dòng)相引起影響Csmu的因素與Cm相同高效液相色譜法基本原理5.固定相的傳質(zhì)阻力項(xiàng)Csu影響因素：固定相內(nèi)部阻力影響減免方法：減少固定相液膜厚度——化

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