芳酸類非甾體抗炎藥物的分析

關(guān)于芳酸類非甾體抗炎藥物的分析第1頁(yè)，課件共68頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月主要內(nèi)容：§1典型藥物分類與理化性質(zhì)§2鑒別試驗(yàn)§3特殊雜質(zhì)檢查§4含量測(cè)定§5體內(nèi)藥物分析第2頁(yè)，課件共68頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月醇羥基酚羥基醇酚第3頁(yè)，課件共68頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月羧酸芳酸酯游離羧基游離羧基第4頁(yè)，課件共68頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月按結(jié)構(gòu)分類水楊酸類鄰氨基苯甲酸類芳酸類非甾體藥物：分子結(jié)構(gòu)中含有取代苯基的一類羧酸化合物。鄰氨基苯乙酸類芳基丙酸類吲哚乙酸類苯并噻嗪甲酸類其他非甾體抗炎藥第5頁(yè)，課件共68頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月§1典型藥物分類與理化性質(zhì)一、水楊酸類典型藥物

水楊酸(salicylicacid)游離羧基酚羥基，發(fā)生三氯化鐵反應(yīng)苯環(huán)第6頁(yè)，課件共68頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月游離羧基阿司匹林(aspirin)酯鍵苯環(huán)pKa=3.49直接中和法兩步滴定法水解后生成水楊酸雜質(zhì)水解后才發(fā)生三氯化鐵反應(yīng)第7頁(yè)，課件共68頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月雙水楊酯第8頁(yè)，課件共68頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月甲芬那酸二、鄰氨基苯甲酸類有強(qiáng)烈綠色熒光第9頁(yè)，課件共68頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月三、鄰氨基苯乙酸類雙氯芬酸鈉有刺鼻感第10頁(yè)，課件共68頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月布洛芬ibuprofen四、芳基丙酸類第11頁(yè)，課件共68頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月五、吲哚乙酸類吲哚美辛第12頁(yè)，課件共68頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月六、苯并噻嗪甲酸類吡羅昔康第13頁(yè)，課件共68頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月其他非甾體抗炎藥對(duì)乙酰氨基酚第14頁(yè)，課件共68頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月結(jié)構(gòu)分析

包括：芳酸、芳酸酯、芳酸鹽共同點(diǎn)：苯環(huán)、羧基不同點(diǎn)：不同的取代基（如酚羥基、芳伯氨基、鹵原子、雜環(huán)等）第15頁(yè)，課件共68頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月主要理化性質(zhì)1.性狀：固體，有一定的熔點(diǎn)。2.溶解性：幾乎不溶于水，易溶于有機(jī)溶劑。堿金屬鹽易溶于水，難溶于有機(jī)溶劑。第16頁(yè)，課件共68頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月3.酸性：芳酸具游離羧基，呈酸性，其pKa在3～6之間，屬中等強(qiáng)度的酸或弱酸；—X、—NO2、—OH等吸電子取代基存在使酸性增強(qiáng)。水楊酸>阿司匹林>苯甲酸；

—CH3、—NH2等斥電子取代基存在使酸性減弱。第17頁(yè)，課件共68頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月鄰位取代>間位、對(duì)位取代，尤其是鄰位取代酚羥基，由于形成分子內(nèi)氫健，酸性大為增強(qiáng)。芳環(huán)取代的脂肪酸類，酸性較弱。如雙氯芬酸、布洛芬等。第18頁(yè)，課件共68頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月4.易水解具有酯鍵和酰胺鍵的藥物均可發(fā)生水解?？捎檬Ｓ鄩A量法測(cè)定含量，如美洛昔康。

5.紫外、紅外特征吸收光譜分子中具有苯環(huán)和特征官能團(tuán)，具有紫外和紅外特征吸收。6.基團(tuán)或元素特性酚羥基、芳伯氨基、鹵素、硫元素等。第19頁(yè)，課件共68頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

§2鑒別試驗(yàn)一、與三氯化鐵的反應(yīng)

1.水楊酸反應(yīng)紫堇色a.反應(yīng)極為靈敏。b.反應(yīng)適宜的pH值為4~6，在強(qiáng)酸性下配合物分解。第20頁(yè)，課件共68頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月阿司匹林+++Fecl3紫堇色配位化合物水解后鑒別?第21頁(yè)，課件共68頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月對(duì)乙酰氨基酚藍(lán)紫色

2.酚羥基反應(yīng)第22頁(yè)，課件共68頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月二、縮合反應(yīng)硫酸二硝基苯肼酮洛芬腙橙色第23頁(yè)，課件共68頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月三、重氮化－偶合反應(yīng)－－芳香第一氨的反應(yīng)NaNO2NaOHβ-萘酚

Ar-N2+Cl-Ar-N=N-ArHClAr-NH2

重氮鹽偶合紅色對(duì)乙酰氨基酚貝諾酯第24頁(yè)，課件共68頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月貝諾酯水解重氮化偶合第25頁(yè)，課件共68頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月四、氧化反應(yīng)甲芬那酸黃色(綠色熒光)(JP13)K2Cr2O7

深藍(lán)色→棕綠色H2SO4

第26頁(yè)，課件共68頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月五、水解反應(yīng)1.阿司匹林－－酯結(jié)構(gòu)水解第27頁(yè)，課件共68頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月2.雙水楊酯雙水楊酯NaOH煮沸水楊酸鈉稀HCl水楊酸（白色）沉淀在醋酸銨試液中可溶解第28頁(yè)，課件共68頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月六、特征元素的分析1.氯元素雙氯芬酸鈉+碳酸鈉熾灼灰化加水煮沸過(guò)濾濾液顯氯化物鑒別反應(yīng)2.硫元素美洛昔康于試管中熾灼，產(chǎn)生的氣體能使?jié)駶?rùn)的醋酸鉛試紙顯黑色。第29頁(yè)，課件共68頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月1.紫外分光光度法最大吸收波長(zhǎng)（和/或最小吸收波長(zhǎng)）吸光度法吸光度比值法七、光譜法第30頁(yè)，課件共68頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月對(duì)照?qǐng)D譜對(duì)照《藥品紅外光譜集》水楊酸的紅外吸收光譜圖2.紅外分光光度法第31頁(yè)，課件共68頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月八、薄層色譜法比較供試品溶液與對(duì)照品溶液的比移值九、HPLC比較供試品溶液與對(duì)照品溶液的保留時(shí)間第32頁(yè)，課件共68頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

§3特殊雜質(zhì)檢查阿司匹林中游離水楊酸及有關(guān)物質(zhì)的檢查1.阿司匹林中游離水楊酸的檢查來(lái)源：生產(chǎn)過(guò)程中乙?；煌耆蛸A藏過(guò)程中水解產(chǎn)生。乙酰化70~75℃第33頁(yè)，課件共68頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月ChP2005方法：鐵鹽比色法（稀硫酸鐵銨

）

原理：阿司匹林結(jié)構(gòu)中無(wú)酚羥基，不與高鐵鹽反應(yīng);水楊酸有酚羥基，則可與高鐵反應(yīng)呈紫堇色。

缺點(diǎn)：供試品溶液制備過(guò)程中阿司匹林可水解生成新的游離水楊酸。ChP2010采用HPLC檢查。原料藥和制劑均需檢查游離水楊酸，限量各不相同。第34頁(yè)，課件共68頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月2.阿司匹林中有關(guān)物質(zhì)的檢查指除游離水楊酸外的合成原料苯酚及其他合成副產(chǎn)物。色譜條件：與檢查“游離水楊酸”的流動(dòng)相不同。要求：除水楊酸峰外，其他各雜質(zhì)峰面積的和不得大于對(duì)照溶液主峰面積（0.5%）。第35頁(yè)，課件共68頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月第36頁(yè)，課件共68頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月第37頁(yè)，課件共68頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月第38頁(yè)，課件共68頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

雜質(zhì)對(duì)照品法

方法：供試品→供試品溶液雜質(zhì)對(duì)照品→對(duì)照品溶液

第39頁(yè)，課件共68頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月供試品對(duì)照品第40頁(yè)，課件共68頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

判斷：供試品中所含雜質(zhì)斑點(diǎn)不得超過(guò)相應(yīng)的雜質(zhì)對(duì)照斑點(diǎn)。優(yōu)點(diǎn)：同一物質(zhì)，同一Rf值比較，準(zhǔn)確度高、直觀性強(qiáng)。缺點(diǎn)：需要雜質(zhì)對(duì)照品。

第41頁(yè)，課件共68頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

2.主成分自身對(duì)照法（高低濃度對(duì)比法）

方法：

第42頁(yè)，課件共68頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月（×）第43頁(yè)，課件共68頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

判斷：

供試品溶液所顯雜質(zhì)斑點(diǎn)不得深于對(duì)照溶液的主斑點(diǎn)（或熒光強(qiáng)度）第44頁(yè)，課件共68頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月§4含量測(cè)定本類藥物原料藥的含量測(cè)定：酸堿滴定法制劑的含量測(cè)定：紫外-可見(jiàn)分光光度法和HPLC法第45頁(yè)，課件共68頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

一、酸堿滴定法

1.直接滴定法－－阿司匹林原理:阿司匹林分子中有游離羧基，具弱酸性，可用標(biāo)準(zhǔn)堿溶液直接滴定。第46頁(yè)，課件共68頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月方法:取本品約0.4g,精密稱定,加中性乙醇

(對(duì)酚酞指示液顯中性)20mL溶解后,加酚酞指示液3滴,用氫氧化鈉滴定(0.1mol/L)滴定。每1ml的氫氧化鈉滴定(0.1mol/L)相當(dāng)于18.02mg的C9H8O4

。

第47頁(yè)，課件共68頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月生成的鈉鹽是強(qiáng)堿弱酸鹽，偏堿性。（2）指示劑為何選用酚酞？討論:（1）溶劑為何使用中性乙醇？

使用乙醇：a.使供試品易于溶解;b.防止酯水解使用中性乙醇：乙醇對(duì)酚酞顯酸性，扣除乙醇的酸性對(duì)測(cè)定的影響。

（3）操作事項(xiàng)滴定過(guò)程中不斷振搖，防止局部水解。

（4）特點(diǎn)操作簡(jiǎn)便，但缺乏專屬性，酸性物質(zhì)有干擾。不適合用于水楊酸含量較高的樣品測(cè)定。（5）滴定度的計(jì)算第48頁(yè)，課件共68頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月第49頁(yè)，課件共68頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月2.剩余量滴定法美洛昔康有烯醇式結(jié)構(gòu)，顯酸性，可用氫氧化鈉滴定液滴定，但在一般溶劑中溶解性差。用定量過(guò)量的氫氧化鈉滴定液溶解后，用鹽酸滴定液回滴定剩余的氫氧化鈉。第50頁(yè)，課件共68頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月美洛昔康【含量測(cè)定】取本品約0.4g，精密稱定，精密加氫氧化鈉滴定液（0.lmol/L)25ml，微溫溶解，放冷，加中性乙醇（對(duì)溴麝香草酚藍(lán)指示液顯中性）100ml，加溴麝香草酚藍(lán)指示液10滴，用鹽酸滴定液（0.lmol/L)滴定，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每lml氫氧化鈉滴定液（0.lmol/L)相當(dāng)于35.14mg的C14H13N3O4S2。

第51頁(yè)，課件共68頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月3.水解后剩余滴定法－－阿司匹林原理:阿司匹林酯結(jié)構(gòu)在堿性條件下易于水解,

加入定量過(guò)量的氫氧化鈉滴定液,加熱水解,剩余的堿用硫酸滴定液回滴定。

第52頁(yè)，課件共68頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月方法：取本品約1.5g，精密稱定，置燒杯中，加氫氧化鈉滴定液(0.5mol/L)50.0ml，混合，緩緩煮沸10min加酚酞指示液，用硫酸滴定液(0.25mol/L)滴定，并將滴定結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每lml的氫氧化鈉滴定液(0.5mol/L)相當(dāng)于45.04mg的C9H8O4

。討論：（1）為何做空白試驗(yàn)？如何操作？

氫氧化鈉在加熱時(shí)易吸收CO2，生成碳酸鹽。使測(cè)定結(jié)果偏高。不加入樣品，其余操作步驟和加樣一致。（2）滴定度如何計(jì)算？第53頁(yè)，課件共68頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月阿司匹林：氫氧化鈉=1:2

T=0.5×180.16×1/2=45.04(mg/ml)

F：硫酸滴定液的校正因子×第54頁(yè)，課件共68頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月4.

兩步滴定法－－ChP2005阿司匹林片和腸溶片原理:

阿司匹林片中加入少量穩(wěn)定劑（酒石酸或枸櫞酸）,制劑過(guò)程中分解產(chǎn)物（水楊酸、醋酸）均消耗氫氧化鈉。因此，不能采用直接滴定法，采用先“中和”再“水解滴定”的兩步滴定法。

第55頁(yè)，課件共68頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月第一步中和酒石酸枸櫞酸水楊酸醋酸+NaOH→酒石酸鈉枸櫞酸鈉水楊酸鈉醋酸鈉不用于含量計(jì)算第56頁(yè)，課件共68頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月第二步水解后剩余滴定

反應(yīng)摩爾比為1∶1+NaOH定量過(guò)量第57頁(yè)，課件共68頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月方法中和:取本品10片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取片粉適量(約相當(dāng)于阿司匹林0.3

g)，置錐形瓶中，加入中性乙醇20ml，振搖使溶解，加酚酞指示液3滴，滴加氫氧化鈉滴定液(0.1mol/L)至溶液顯粉紅色。此時(shí)中和了存在的游離酸，阿司匹林也同時(shí)成為鈉鹽。第58頁(yè)，課件共68頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

水解和測(cè)定:

在中和后的供試品溶液中，精密加氫氧化鈉滴定液(0.1mol/L)40ml，置水浴上加熱15min并時(shí)時(shí)振搖，迅速放冷置室溫，用硫酸滴定液(0.05mol/L)滴定，結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每1ml氫氧化鈉滴定液(0.1mol/L)相當(dāng)于18.02

mg的C9H8O4。第59頁(yè)，課件共68頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

討論:

（1）優(yōu)點(diǎn)消除了酸性雜質(zhì)的干擾（2）反應(yīng)的摩爾比阿司匹林:氫氧化鈉＝1:1T=0.1×180.16=18.02mg/ml（3）含量計(jì)算

F：硫酸滴定液的校正因子第60頁(yè)，課件共68頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月5.非水溶液滴定法吡羅昔康具有吡啶環(huán)，顯堿性?！竞繙y(cè)定】取本品約0.2g，精密稱定，加冰醋酸20ml使溶解，加結(jié)晶紫指示液1滴，用高氯酸滴定液（0.lmol/L)滴定至溶液顯藍(lán)綠色，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每l

ml高氯酸滴定液（0.lmol/L)相當(dāng)于33.14

mg的C15H13N3O4S。第61頁(yè)，課件共68頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月二、紫外-可見(jiàn)分光光度法1.直接紫外-可見(jiàn)分光光度法原理:藥物在某一波長(zhǎng)