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1.(2009年高考浙江卷下列關(guān)于基因工程的敘述,錯(cuò)誤的是()A.目的基因和受體細(xì)胞均可來(lái)自動(dòng)、植物或微生物B.限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶是兩類(lèi)常用的工具酶C.人胰島素原基因在大腸桿菌中表達(dá)的胰島素原無(wú)生物活性D.載體上的抗性基因有利于篩選含重組DNA的細(xì)胞和促進(jìn)目的基因的表達(dá)解析:選D?;蚬こ讨心康幕騺?lái)源于自然界中的含有目的性狀的一切生物,可以是動(dòng)物、植物,也可以是真菌、細(xì)菌,還可以是人等;在基因工程中獲取目的基因以及將目的基因和載體結(jié)合構(gòu)成基因表達(dá)載體必須使用同一種限制酶進(jìn)行切割,已獲得相同的黏性末端,再在DNA連接酶的作用下,將目的基因和載體連接,構(gòu)成基因表達(dá)載體;人的胰島素原基因可以在大腸桿菌體內(nèi)得以表達(dá),但是由于大腸桿菌是原核生物沒(méi)有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)高爾基體等細(xì)胞器的加工合成的胰島素原不具有胰島素的功能即沒(méi)有生物活性作為標(biāo)記基因有利于重組基因在細(xì)胞內(nèi)表達(dá)的鑒定篩選,但對(duì)于目的基因的表達(dá)沒(méi)有促進(jìn)等調(diào)控作用。2(2009年高考安徽卷2008年諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)授予了“發(fā)現(xiàn)和發(fā)展了水母綠色熒光蛋白”的三位科學(xué)家。將綠色熒光蛋白基因的片段與目的基因連接起來(lái)組成一個(gè)融合基因再將該融合基因轉(zhuǎn)入真核生物細(xì)胞內(nèi)表達(dá)出的蛋白質(zhì)就會(huì)帶有綠色熒光。綠色熒光蛋白在該研究中的主要作用是)A.追蹤目的基因在細(xì)胞內(nèi)的復(fù)制過(guò)程B.追蹤目的基因插入到染色體上的位置C.追蹤目的基因編碼的蛋白質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)的分布D.追蹤目的基因編碼的蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)
解析:選C。綠色熒光蛋白基因指導(dǎo)合成的蛋白質(zhì)為綠色熒光蛋白,該基因與目的基因組成的融合基因指導(dǎo)合成的蛋白質(zhì)即含有綠色熒光蛋白綠色熒光蛋白基因可用來(lái)追蹤目的基因編碼的蛋白質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)的分布。3(2008年高考全國(guó)卷已知某種限制性核酸內(nèi)切酶在一線性DNA分子上有3個(gè)酶切位點(diǎn),如下圖中箭頭所指。如果該線性DNA分子在3個(gè)酶切位點(diǎn)上都被酶切斷,則會(huì)產(chǎn)生a、c、d種不同長(zhǎng)度的片段。現(xiàn)有多個(gè)上述線性DNA分子若在每個(gè)DNA分子上至少有1酶切位點(diǎn)被該酶切斷則從理論上講,經(jīng)該酶酶切后,這些線性DNA分子最多能產(chǎn)生長(zhǎng)度不同的片段種類(lèi)數(shù)是()A.3B.C.9D.12解析:選C。本題考查限制酶的作用與識(shí)圖分析能力。若該線性DNA分子在3個(gè)酶切位點(diǎn)切斷,得到長(zhǎng)度不同的DNA片段;若在2酶切位點(diǎn)切斷,得到3長(zhǎng)度不同的DNA片段;若在1酶切位點(diǎn)切斷,得到長(zhǎng)度不同的DNA片段。因此最多能產(chǎn)生4329(種)長(zhǎng)度不同的DNA片段。4現(xiàn)有一長(zhǎng)度為1000堿基對(duì)bp)的DNA分子,用限制性核酸內(nèi)切酶R酶切后得到的DNA分子仍是1000,用Kpn單獨(dú)酶切得到400和600bp兩種長(zhǎng)度的DNA分子用EcoRKpnⅠ同時(shí)酶切后得到bp和600bp兩種長(zhǎng)度的DNA分子。該DNA分子的酶切圖譜正確的是()解析:選D。長(zhǎng)度1000的DNA經(jīng)EcoR酶切后仍為bp說(shuō)明只有
個(gè)EcoRⅠ酶切割位點(diǎn)KpnⅠ酶切割得到400bp和bp種長(zhǎng)度的DNA分子,說(shuō)明該分子有2KpnⅠ酶切割位點(diǎn),但使用兩種酶同時(shí)作用,則得到200bp和bp的DNA分子說(shuō)明該DNA分子為環(huán)狀,且酶切割位點(diǎn)位于EcoRⅠ酶切割點(diǎn)兩側(cè)。據(jù)此推知,項(xiàng)正確。5如圖是獲得抗蟲(chóng)棉的技術(shù)流程示意圖??敲顾乜剐曰騥anr)常作為標(biāo)記基因只有含卡那霉素抗性基因的細(xì)胞才能在卡那霉素培養(yǎng)基上生長(zhǎng)下列敘述正確的是()A.構(gòu)建重組質(zhì)粒過(guò)程中需要限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶B.愈傷組織的分化產(chǎn)生了不同基因型的植株C.卡那霉素抗性基因(kanr)中有該過(guò)程所利用的限制性核酸內(nèi)切酶的識(shí)別位點(diǎn)D.抗蟲(chóng)棉有性生殖后代能保持抗蟲(chóng)性狀的穩(wěn)定遺傳答案:A6在基因工程中,把選出的目的基因(共1000個(gè)脫氧核苷酸對(duì),其中腺嘌呤脫氧核苷酸460個(gè)放在擴(kuò)增儀中擴(kuò)增4,那么,在擴(kuò)增儀中應(yīng)放入胞嘧啶脫氧核苷酸的個(gè)數(shù)是()A.540個(gè)B.8100個(gè)C.17280個(gè)D.7560個(gè)解析:選B。擴(kuò)增4代即擴(kuò)增,共產(chǎn)生新的DNA為(2n-1)個(gè),即15個(gè),其中每個(gè)DNA中含有的胞嘧啶為1000-=540個(gè),所以需要的胞嘧啶脫氧
核苷酸的個(gè)數(shù)為15540=8100。7(2008年高考上海卷以重組DNA技術(shù)為核心的基因工程正在改變著人類(lèi)的生活。請(qǐng)回答下列問(wèn)題。(1)獲得目的基因的方法通常包括____________和____________。(2)切割和連接DNA分子所使用的酶分別是________________和________________。(3)運(yùn)送目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體一般選用病毒或________,后者的形狀呈________。(4)由于重組DNA分子成功導(dǎo)入受細(xì)胞的頻率_______所以在轉(zhuǎn)化后通常需要進(jìn)行________操作。(5)將人胰島素基因分別導(dǎo)入大腸桿菌與酵母菌,從兩者中生產(chǎn)的胰島素在功能和________序列上是相同的。解析:該題考查基因工程的操作,屬于記憶性的內(nèi)容,見(jiàn)答案。答案:(1)化學(xué)合成(人工合成酶切獲取(從染色體DNA分離從生物細(xì)胞分離)(2)限制性核酸內(nèi)切酶(制酶)DNA連接酶(3)質(zhì)粒
小型環(huán)狀(雙鏈環(huán)狀、環(huán)狀)(4)低
篩選(5)氨基酸8.(2008年高考海南卷右圖為某種質(zhì)粒表達(dá)載體簡(jiǎn)圖,小箭頭所指分別為限制性核酸內(nèi)切酶EcoRBamHⅠ的酶切位點(diǎn)ampR為青霉素抗性基因tctR為四環(huán)素抗性基因,P為啟動(dòng)子,為終止子,ori為復(fù)制原點(diǎn)。已知目的基因的兩端分別有包括EcoR、BamH在內(nèi)的多種酶的酶切位點(diǎn)。
據(jù)圖回答:(1)將含有目的基因的與質(zhì)粒表達(dá)載體分別用EcoR酶切產(chǎn)物用DNA連接酶進(jìn)行連接后,其中由兩個(gè)DNA片段之間連接形成的產(chǎn)物有________________________________________________三種若要從這些連接產(chǎn)物中分離出重組質(zhì)粒,需要對(duì)這些連接產(chǎn)物進(jìn)行_______。(2)用上述3種連接產(chǎn)物與無(wú)任何抗藥性的原核宿主細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)。之后將這些宿主細(xì)胞接種到含四環(huán)素的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)的原核宿主細(xì)胞所含有的連接產(chǎn)物是______________________________;若接種到含青霉素的培養(yǎng)基中,能生長(zhǎng)的原核宿主細(xì)胞所含有的連接產(chǎn)物是________________________________________________(3)目的基因表達(dá)時(shí),RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的位點(diǎn)是_______,其合成的產(chǎn)物是________。(4)在上述實(shí)驗(yàn)中,為了防止目的基因和質(zhì)粒表達(dá)載體在酶切后產(chǎn)生的末端發(fā)生任意連接,酶切時(shí)應(yīng)選用的酶是____________________解析在基因表達(dá)載體的構(gòu)建過(guò)程中用同種限制酶來(lái)切割目的基因和質(zhì)粒使之產(chǎn)生相同的黏性末端,以利于DNA片段的連接。將切割后的目的基因和質(zhì)粒,用DNA連接酶進(jìn)行連接,它們之間隨機(jī)連接,可有三種產(chǎn)物:目的基因—載體連接物載體—載體連接物和目的基因—目的基因連接物從圖中可以看出目的基因的插入位點(diǎn)在抗四環(huán)素基因上可推知目的基因—載體連接物的抗四環(huán)素基因被破壞喪失了抗四環(huán)素的能力但保留了抗青霉素的能力載體—載體連接物既保留了抗四環(huán)素的能力也保留了抗青霉素的能力的基因—目的基因連接物既無(wú)抗青霉素基因也無(wú)抗四環(huán)素基因,不具備抗性。獲得連接產(chǎn)物
以后必須通過(guò)篩選方能獲得所需的基因表達(dá)載體導(dǎo)入宿主細(xì)胞后方能表達(dá)獲得基因產(chǎn)物。目的基因表達(dá)過(guò)程中,RNA聚合酶首先與啟動(dòng)子結(jié)合,指導(dǎo)目的基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生mRNA,再導(dǎo)蛋白質(zhì)的合成。從圖中可看出抗四環(huán)素基因上有兩個(gè)不同的切割位點(diǎn)所以在實(shí)際操作過(guò)程中為避免切割后的末端任意連接,可用EcoR和BamHⅠ同時(shí)對(duì)目的基因和質(zhì)粒進(jìn)行切割,使同一切割產(chǎn)物的黏性末端不同。答案:(1)目的基因—載體連接物
載體—載體連接物
目的基因—目的基因連接物分離純化(2)載體—載體連接物目的基因—載體連接物、載體—載體連接物(3)啟動(dòng)子mRNA(4)EcoRⅠ和BamHⅠ9如圖為利用生物技術(shù)獲得生物新品種的過(guò)程,據(jù)圖回答:(1)在基因工程中,A→B為過(guò)程。
技術(shù),利用的原理是,其中①為(2)加熱至94℃的目的是使DNA中的
鍵斷裂,這一過(guò)程在細(xì)胞內(nèi)是通過(guò)
的作用來(lái)完成的。(3)當(dāng)溫度降低時(shí),引物與模板末端結(jié)合,在DNA合酶的作用下,引物沿模板鏈延伸,最終合成兩條DNA分子,此過(guò)程中原料是,遵循的原則是。(4)目的基因?qū)刖d羊受體細(xì)胞常用
技術(shù)。(5)B→D為抗蟲(chóng)棉的培育過(guò)程④過(guò)程常用的方法是,要確定目的基因(抗蟲(chóng)基因)導(dǎo)入受體細(xì)胞后,是否能穩(wěn)定遺傳并表達(dá),需進(jìn)行檢測(cè)和鑒定工作,請(qǐng)寫(xiě)出在個(gè)體生物學(xué)水平上的鑒定過(guò)程:
______________________________________________________________________________________________答案:(1)PCRDNA復(fù)制DNA解旋(2)氫
解旋酶(3)4種脫氧核苷酸(4)顯微注射(5)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法
堿基互補(bǔ)配對(duì)原則讓害蟲(chóng)吞食轉(zhuǎn)基因棉花的葉子,觀察害蟲(chóng)的存活情況,以確定性狀10如圖表示從蘇云金芽孢桿菌分離出殺蟲(chóng)晶體蛋白基因簡(jiǎn)稱(chēng)Bt因)及形成轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)植物的圖解。請(qǐng)分析回答:(1)寫(xiě)出b過(guò)程的表達(dá)式__________________________________。(2)人工合成目的基因的方法有:①____________________________________________________②_____________________________________________________(3)將目的基因和載體(粒)結(jié)合的工具酶有
酶和
酶。(4)科學(xué)家計(jì)劃從哺乳動(dòng)物的乳汁中提取某種抗體,應(yīng)將控制抗體合成的基因?qū)朐摲N動(dòng)物的
中,導(dǎo)入基因成功表達(dá)的標(biāo)志是。解析:應(yīng)用基因工程技術(shù),從蘇云金芽孢桿菌中提取殺蟲(chóng)晶體蛋白基因目的基因)導(dǎo)入棉花細(xì)胞中形成轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉,Bt基因的表達(dá)使棉花細(xì)胞中合成原毒
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