微生物生長(zhǎng)量的測(cè)定（微生物學(xué)與操作技術(shù)）

微生物量的測(cè)定方法微生物學(xué)及操作技術(shù)

微生物生長(zhǎng)量測(cè)定義1

方法一

測(cè)定生長(zhǎng)量2

方法二

計(jì)繁殖數(shù)3目錄頁(yè)CONTENTSPAGE1微生物生長(zhǎng)量測(cè)定評(píng)價(jià)培養(yǎng)條件、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)等對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響；評(píng)價(jià)不同的抗菌物質(zhì)對(duì)微生物產(chǎn)生抑制(或殺死)作用的效果；客觀地反映微生物生長(zhǎng)的規(guī)律；過(guò)渡頁(yè)TRANSITIONPAGE單位時(shí)間里微生物數(shù)量或生物量（Biomass）的變化2測(cè)定生長(zhǎng)量法

測(cè)體積法

直接法測(cè)定生長(zhǎng)量

稱干重法

比濁法

間接法測(cè)定生長(zhǎng)量過(guò)渡頁(yè)TRANSITIONPAGE生理指標(biāo)法一、測(cè)生長(zhǎng)量直接測(cè)生長(zhǎng)量的方法1、直接法粗放型，在刻度離心管中測(cè)沉降量。測(cè)體積法測(cè)定多細(xì)胞及絲狀真菌生長(zhǎng)情況的有效方法稱干重法在精確型，離心法和過(guò)濾法獲得菌體細(xì)胞，微生物的干重一般為其濕重的10％～20％。一、測(cè)生長(zhǎng)量

直接測(cè)生長(zhǎng)量方法1、直接法測(cè)體積法刻度離心管中離心，測(cè)定沉淀多少來(lái)確定微生物的生長(zhǎng)情況。測(cè)干重法將細(xì)胞培養(yǎng)液離心或過(guò)濾后，洗滌除去培養(yǎng)基成分后轉(zhuǎn)移到適當(dāng)?shù)娜萜鳎?00~105℃干燥箱烘干或低溫低壓干燥（60~80℃）至恒重后，稱重。一、測(cè)生長(zhǎng)量

間接測(cè)定生長(zhǎng)量方法2、間接測(cè)定法比濁法用分光光度法對(duì)無(wú)色的微生物懸浮液進(jìn)行測(cè)定，一般選用450～650nm波段。

生理指標(biāo)法一種特定的微生物，每一個(gè)細(xì)胞中的ATP濃度幾乎是一個(gè)常數(shù)，所以測(cè)定這種微生物的ATP含量，即可知其細(xì)胞數(shù)。3計(jì)繁殖數(shù)法計(jì)繁殖數(shù)直接法計(jì)繁殖數(shù)間接法過(guò)渡頁(yè)TRANSITIONPAGE一、計(jì)繁殖數(shù)直接法計(jì)繁殖數(shù)法其中最重要的是計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)法。：

指采用計(jì)數(shù)板（細(xì)菌計(jì)數(shù)板或血球計(jì)數(shù)板），在光學(xué)顯微鏡下直接觀察微生物細(xì)胞并進(jìn)行計(jì)數(shù)的方法。（計(jì)算一定容積里樣品中微生物的數(shù)量）計(jì)數(shù)板直接計(jì)數(shù)方法1.計(jì)數(shù)板直接計(jì)數(shù)法2.染色后活菌計(jì)數(shù)法3.

比例計(jì)數(shù)法4.過(guò)濾計(jì)數(shù)法一、計(jì)繁殖數(shù)直接法計(jì)繁殖數(shù)法1.計(jì)數(shù)板直接計(jì)數(shù)方法——采用血球計(jì)數(shù)板測(cè)定細(xì)胞個(gè)數(shù)一、計(jì)繁殖數(shù)直接法計(jì)繁殖數(shù)法缺點(diǎn)：不能區(qū)分死菌與活菌；不適于對(duì)運(yùn)動(dòng)細(xì)菌的計(jì)數(shù)；需要相對(duì)高的細(xì)菌濃度；個(gè)體小的細(xì)菌在顯微鏡下難以觀察。1.計(jì)數(shù)板直接計(jì)數(shù)方法——計(jì)算細(xì)胞個(gè)數(shù)一、計(jì)繁殖數(shù)直接法計(jì)繁殖數(shù)法

采用特定的染色技術(shù)進(jìn)行活菌染色，然后用光學(xué)顯微鏡計(jì)數(shù)的方法?？煞謩e對(duì)活菌和死菌進(jìn)行計(jì)數(shù)。例：美藍(lán)→酵母→

活細(xì)胞→無(wú)色死細(xì)胞→藍(lán)色2.染色后活菌計(jì)數(shù)法1.計(jì)數(shù)板直接計(jì)數(shù)法2.染色后活菌計(jì)數(shù)法3.

比例計(jì)數(shù)法4.過(guò)濾計(jì)數(shù)法染色后活菌計(jì)數(shù)法二、計(jì)繁殖數(shù)間接法真核微生物的細(xì)胞構(gòu)造是一種活菌計(jì)數(shù)法，這是一種依據(jù)活菌在液體培養(yǎng)基中會(huì)使其變混或在固體培養(yǎng)基上（內(nèi)）形成菌落的原理而設(shè)計(jì)。最常用的是菌落計(jì)數(shù)法（colony-countingmethods）。二、計(jì)繁殖數(shù)間接法計(jì)繁殖數(shù)法可用澆注平板（pourplate）或涂布平板（spreadplate）等方法進(jìn)行。此法適用于各種好氧菌或厭氧菌。采用培養(yǎng)平板計(jì)數(shù)法要求操作熟練、準(zhǔn)確，否則難以得到正確的結(jié)果。1.平板菌落計(jì)數(shù)法1.2.膜過(guò)濾培養(yǎng)菌落計(jì)

數(shù)法平板菌落計(jì)數(shù)法二、計(jì)繁殖數(shù)間接法計(jì)繁殖數(shù)法樣品充分混勻；每支移液管及涂布棒只能接觸一個(gè)稀釋度的菌液；同一稀釋度三個(gè)以上重復(fù),取平均值；每個(gè)平板上的菌落數(shù)目合適，便于準(zhǔn)確計(jì)數(shù)；二、計(jì)繁殖數(shù)間接法計(jì)繁殖數(shù)法1.平板菌落計(jì)數(shù)法一個(gè)菌落可能是多個(gè)細(xì)胞一起形成，所以在科研中一般用菌落形成單位（colonyformingunits，CFU）來(lái)表示，而不是直接表示為細(xì)胞數(shù)。二、計(jì)繁殖數(shù)間接法計(jì)繁殖數(shù)法2.膜過(guò)濾培養(yǎng)菌落計(jì)數(shù)法