上海交通大學(xué)微生物實(shí)驗(yàn)課件實(shí)驗(yàn)四培養(yǎng)基的使用特點(diǎn)和微生物接種方法2

上海交通大學(xué)微生物實(shí)驗(yàn)課件實(shí)驗(yàn)四培養(yǎng)基的使用特點(diǎn)和微生物接種方法演示文稿當(dāng)前第1頁\共有23頁\編于星期四\15點(diǎn)（優(yōu)選）上海交通大學(xué)微生物實(shí)驗(yàn)課件實(shí)驗(yàn)四培養(yǎng)基的使用特點(diǎn)和微生物接種方法當(dāng)前第2頁\共有23頁\編于星期四\15點(diǎn)微生物培養(yǎng)Culture：在一定的條件下培養(yǎng)、繁殖得到的微生物群體混合培養(yǎng)物：含有多種微生物的培養(yǎng)物；純培養(yǎng)物：只有一種微生物的培養(yǎng)物；Pureculture通常情況下只有純培養(yǎng)物才能提供可以重復(fù)的結(jié)果純培養(yǎng)技術(shù)是進(jìn)行微生物學(xué)研究的基礎(chǔ)！當(dāng)前第3頁\共有23頁\編于星期四\15點(diǎn)一、用固體培養(yǎng)基分離純培養(yǎng)培養(yǎng)基：液體培養(yǎng)基；固體培養(yǎng)基；1.5%-2.5%半固體培養(yǎng)基；0.2%-0.75%瓊脂當(dāng)前第4頁\共有23頁\編于星期四\15點(diǎn)一、用固體培養(yǎng)基分離純培養(yǎng)菌落（colony）：

單個(gè)（或聚集在一起的一團(tuán)）微生物在適宜的固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部生長(zhǎng)、繁殖到一定程度可以形成肉眼可見的、有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細(xì)胞生長(zhǎng)群體眾多菌落連成一片菌苔（lawn）當(dāng)前第5頁\共有23頁\編于星期四\15點(diǎn)無菌操作：火焰附近（酒精燈、煤氣燈）進(jìn)行當(dāng)前第6頁\共有23頁\編于星期四\15點(diǎn)

不同微生物在特定培養(yǎng)基上生長(zhǎng)形成的菌落或菌苔一般都具有穩(wěn)定的特征（形狀、顏色等），可以成為對(duì)該微生物進(jìn)行分類、鑒定的重要依據(jù)當(dāng)前第7頁\共有23頁\編于星期四\15點(diǎn)菌落的描述：形態(tài)、表面和邊緣特征當(dāng)前第8頁\共有23頁\編于星期四\15點(diǎn)當(dāng)前第9頁\共有23頁\編于星期四\15點(diǎn)同一細(xì)菌在不同的培養(yǎng)平板上形成不同的特征菌落當(dāng)前第10頁\共有23頁\編于星期四\15點(diǎn)一、用固體培養(yǎng)基分離純培養(yǎng)使微生物在固體培養(yǎng)基平板上形成單個(gè)菌落的基本方法：1、稀釋倒平板法2、涂布平板法3、平板劃線法4、厭氧微生物的分離當(dāng)前第11頁\共有23頁\編于星期四\15點(diǎn)當(dāng)前第12頁\共有23頁\編于星期四\15點(diǎn)一、用固體培養(yǎng)基分離純培養(yǎng)1、稀釋倒平板法2、涂布平板法操作較麻煩，對(duì)好氧菌、熱敏感菌效果不好！使用較多的常規(guī)方法，但有時(shí)涂布不均勻！當(dāng)前第13頁\共有23頁\編于星期四\15點(diǎn)利用L棒進(jìn)行涂布當(dāng)前第14頁\共有23頁\編于星期四\15點(diǎn)3、平板劃線法當(dāng)前第15頁\共有23頁\編于星期四\15點(diǎn)3、平板劃線法當(dāng)前第16頁\共有23頁\編于星期四\15點(diǎn)二、選擇培養(yǎng)分離

抑制大多數(shù)其它微生物的生長(zhǎng)；

使待分離的微生物生長(zhǎng)更快；對(duì)微生物群落中數(shù)量占少數(shù)的微生物的分離純化沒有一種培養(yǎng)基或一種培養(yǎng)條件能夠滿足自然界中一切生物

生長(zhǎng)的要求，在一定程度上所有的培養(yǎng)基都是選擇性的。當(dāng)前第17頁\共有23頁\編于星期四\15點(diǎn)三、選擇培養(yǎng)分離1.利用選擇平板進(jìn)行直接分離待分離的微生物生長(zhǎng)，其它微生物的生長(zhǎng)被抑制

高溫下培養(yǎng)：分離嗜熱細(xì)菌；

培養(yǎng)基中不含N：分離固氮菌；

培養(yǎng)基加抗生素：分離抗性菌；當(dāng)前第18頁\共有23頁\編于星期四\15點(diǎn)1.利用選擇平板進(jìn)行直接分離

顏色反應(yīng)：分離特定的菌株；

牛奶平板：分離蛋白酶產(chǎn)生菌；待分離的微生物的生長(zhǎng)特征明顯不同于其它微生物當(dāng)前第19頁\共有23頁\編于星期四\15點(diǎn)常用的選擇培養(yǎng)基沙門菌常用的培養(yǎng)基：亞硫酸鉍瓊脂平板(BS):含有煌綠、檸檬酸鉍銨、亞硫酸鈉、硫酸亞鐵，具有強(qiáng)選擇性，分離沙門氏菌HE（Heetoen)：檸檬酸鐵銨、去氧膽酸鹽、硫代硫酸鈉、麝香草酚藍(lán)和復(fù)紅，分離腸道致病菌當(dāng)前第20頁\共有23頁\編于星期四\15點(diǎn)麥康凱培養(yǎng)基乳糖、膽鹽，弱選擇性，中性紅,分離腸道致病菌中性紅指示劑pH感應(yīng)范圍6.8（紅色）到8.0（黃色）分解乳糖產(chǎn)酸，菌落顏色呈紅色沙門氏菌、志賀氏菌不分解乳糖，菌落顏色與培養(yǎng)基相同膽鹽有助于沙門氏菌的生長(zhǎng)，抑制其他細(xì)菌大腸桿菌？沙門氏菌？常用的選擇培養(yǎng)基當(dāng)前第21頁\共有23頁\編于星期四\15點(diǎn)克氏雙糖鐵蛋白胨；牛肉膏；酵母膏；乳糖；葡萄糖；氯化鈉；檸檬酸鐵銨；硫代硫酸鈉；瓊脂；酚紅為指示劑，黃色為產(chǎn)酸，紅色為產(chǎn)堿觀察克氏雙糖接種后斜面、底層產(chǎn)酸、產(chǎn)氣、產(chǎn)H2S的情況，大腸桿菌斜面？沙門氏菌斜面？當(dāng)前第22頁\共有23頁\編于星期四\15點(diǎn)接種劃線菌種：大腸桿菌、沙門菌、