細(xì)菌感染的檢查方法和防治原則課件

細(xì)菌感染的檢查方法和防治原則（優(yōu)選）細(xì)菌感染的檢查方法和防治原則第一節(jié)細(xì)菌學(xué)診斷3一、標(biāo)本的采集原則：無(wú)菌采集嚴(yán)格無(wú)菌操作，避免標(biāo)本被污染。標(biāo)本收集于無(wú)菌容器中，容器須先經(jīng)高壓滅菌、煮沸、干熱等物理方法滅菌，或用一次性無(wú)菌容器，而不能用消毒劑處理。4早期采集

采集時(shí)間最好是病程早期、急性期或癥狀典型時(shí)，且必須在抗菌藥物使用前，否則這份標(biāo)本在分離培養(yǎng)時(shí)要加入藥物拮抗劑。5取樣部位

不同疾病、不同時(shí)期取不同部位標(biāo)本如流腦病人取CSF、血液或出血瘀斑；傷寒病人在病程1～2周內(nèi)取血液，2～3周時(shí)取糞便。盡可能取病變明顯部位的材料取局部病變標(biāo)本，不可使用消毒劑，必要時(shí)以無(wú)菌生理鹽水沖洗，拭干后取材。6糞標(biāo)本自然排便采集糞便標(biāo)本時(shí)，取有膿血、粘液的糞便一小匙。液體糞便則取絮狀物，一般取1～3ml，直接裝入糞便容器或保存液或運(yùn)送培養(yǎng)基中送檢。7痰標(biāo)本采集標(biāo)本前應(yīng)用清水、冷開水漱口有假牙者應(yīng)取下假牙。首先輕咳，咳出咽喉部的分泌物，棄去，再用力咳嗽，咳出肺部的痰液直接吐入無(wú)菌的容器中。若懷疑結(jié)核感染找抗酸桿菌，應(yīng)收集24小時(shí)的痰液于清潔玻璃容器內(nèi)。若懷疑放線菌感染，應(yīng)讓病人留取含有顆粒的痰液，實(shí)驗(yàn)室查到硫磺顆粒且弱抗酸，可以考慮放線菌感染。8采集雙份血清

采集急性期及恢復(fù)期血清恢復(fù)期血清效價(jià)比急性期效價(jià)升高4倍或以上具有診斷意義。9

一般標(biāo)本采集后最好在2h內(nèi)送檢，大多細(xì)菌可4℃冷藏運(yùn)送、特殊（如腦膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌）需保溫立即送檢。糞便標(biāo)本中雜菌多，常置于甘油緩沖鹽水保存液中。盡快送檢、冷藏運(yùn)送

10如傷寒、百日咳、霍亂等滅活疫苗。主要用于分離、鑒定致病菌，測(cè)定菌株產(chǎn)毒性等。液體糞便則取絮狀物，一般取1～3ml，直接裝入糞便容器或保存液或運(yùn)送培養(yǎng)基中送檢。第四節(jié)細(xì)菌感染的特異性防治常用紙碟法和試管稀釋法。自然免疫自然被動(dòng)免疫胎盤、初乳采用已知的細(xì)菌或其特異性抗原，檢測(cè)患者血清或其他體液中有無(wú)相應(yīng)特異性抗體及其效價(jià)的動(dòng)態(tài)變化，可作為某些傳染病的輔助診斷。大多細(xì)菌16～24h，結(jié)核桿菌需4～8w。滅活疫苗、減毒活疫苗、亞單位疫苗、核酸疫苗、重組活載體疫苗、轉(zhuǎn)基因植物疫苗和治療性疫苗。各種細(xì)菌所具有的酶不完全相同，對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的分解能力亦不一致，因而其代謝產(chǎn)物有別，藉此可對(duì)不同致病菌進(jìn)行鑒別（如腸道桿菌）。注射的局部和全身性副反應(yīng)較大；自然免疫自然被動(dòng)免疫胎盤、初乳優(yōu)點(diǎn)快速、靈敏且不受抗生素等藥物影響。常用紙碟法和試管稀釋法。含特異抗體的免疫血清＋未知純種細(xì)菌進(jìn)行血清學(xué)實(shí)驗(yàn)，可確定致病菌的種和型。嚴(yán)格無(wú)菌操作，避免標(biāo)本被污染。注意安全

烈性傳染病或病因不明患者臨床標(biāo)本的采集時(shí)應(yīng)做好防護(hù)工作。111、直接涂片染色鏡檢

形態(tài)和染色性上有特征的致病菌，直接涂片鏡檢后有助于初步診斷。如：痰中查抗酸性桿菌，膿液中找G+葡萄串樣球菌等。二、細(xì)菌學(xué)診斷方法12葡萄球菌霍亂弧菌13AB結(jié)核分枝桿菌A.結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)的鏡下形態(tài)(抗酸染色)B.結(jié)核分枝桿菌痰標(biāo)本直接涂片(抗酸染色)142、分離培養(yǎng)（isolationandcultivation）

所有標(biāo)本原則上均應(yīng)作分離培養(yǎng)獲得純培養(yǎng)后進(jìn)一步鑒定，根據(jù)不同要求選用不同培養(yǎng)基。分離培養(yǎng)比直接涂片鏡檢陽(yáng)性率高，但需時(shí)較久；大多細(xì)菌16～24h，結(jié)核桿菌需4～8w。分離培養(yǎng)是微生物學(xué)診斷的金標(biāo)準(zhǔn)。15分離培養(yǎng)

isolationandcultivation

分離培養(yǎng)是微生物學(xué)診斷的金標(biāo)準(zhǔn)，是最可靠的傳統(tǒng)診斷技術(shù)。（圖為普通孵箱）16如:腦膜炎球菌的莢膜多糖，乙肝疫苗等。如流腦病人取CSF、血液或出血瘀斑；4、核酸疫苗／DNA疫苗／基因疫苗如傷寒、百日咳、霍亂等滅活疫苗。如流腦病人取CSF、血液或出血瘀斑；結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)的鏡下形態(tài)(抗酸染色)常用紙碟法和試管稀釋法。第二節(jié)血清學(xué)診斷厭氧箱厭氧袋人工免疫采用人工方法將疫苗、類毒素等或含有某種特異性抗體、細(xì)胞免疫制劑等接種于人體，以增強(qiáng)宿主體的抗病能力。用化學(xué)方法裂解和提取或通過(guò)基因工程產(chǎn)生的細(xì)菌保護(hù)性抗原組分制成的疫苗。主要用于分離、鑒定致病菌，測(cè)定菌株產(chǎn)毒性等。采用已知的細(xì)菌或其特異性抗原，檢測(cè)患者血清或其他體液中有無(wú)相應(yīng)特異性抗體及其效價(jià)的動(dòng)態(tài)變化，可作為某些傳染病的輔助診斷。分離培養(yǎng)

isolationandcultivation如傷寒、百日咳、霍亂等滅活疫苗。滅活疫苗、減毒活疫苗、亞單位疫苗、核酸疫苗、重組活載體疫苗、轉(zhuǎn)基因植物疫苗和治療性疫苗。痰標(biāo)本采集標(biāo)本前應(yīng)用清水、冷開水漱口有假牙者應(yīng)取下假牙。形態(tài)和染色性上有特征的致病菌，直接涂片鏡檢后有助于初步診斷。常用動(dòng)物小鼠、豚鼠、家兔

厭氧箱厭氧袋17

各種細(xì)菌所具有的酶不完全相同，對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的分解能力亦不一致，因而其代謝產(chǎn)物有別，藉此可對(duì)不同致病菌進(jìn)行鑒別（如腸道桿菌）。3、生化試驗(yàn)糖發(fā)酵試驗(yàn)184、血清學(xué)試驗(yàn)

含特異抗體的免疫血清＋未知純種細(xì)菌進(jìn)行血清學(xué)實(shí)驗(yàn)，可確定致病菌的種和型。常見(jiàn)有玻片凝集試驗(yàn)。玻片凝集試驗(yàn)195、動(dòng)物試驗(yàn)主要用于分離、鑒定致病菌，測(cè)定菌株產(chǎn)毒性等。常用動(dòng)物小鼠、豚鼠、家兔接種途徑皮內(nèi)、皮下、腹腔、肌肉、靜脈、腦內(nèi)等。206、藥物敏感試驗(yàn)

測(cè)定標(biāo)本中致病菌對(duì)藥物的敏感程度。對(duì)指導(dǎo)臨床用藥及控制感染有重要意義。常用紙碟法和試管稀釋法。21第二節(jié)血清學(xué)診斷

采用已知的細(xì)菌或其特異性抗原，檢測(cè)患者血清或其他體液中有無(wú)相應(yīng)特異性抗體及其效價(jià)的動(dòng)態(tài)變化，可作為某些傳染病的輔助診斷。22在血清學(xué)診斷中，最好采取患者急性期和恢復(fù)期雙份血清標(biāo)本。結(jié)果以抗體效價(jià)明顯高于正常人水平或患者恢復(fù)期抗體效價(jià)比急性期升高≥4倍方有意義。常用有凝集實(shí)驗(yàn)、沉淀實(shí)驗(yàn)、補(bǔ)體結(jié)合實(shí)驗(yàn)、中和試驗(yàn)、ELISA等。優(yōu)點(diǎn)快速、靈敏且不受抗生素等藥物影響。23

肥達(dá)試驗(yàn)

玻片凝集實(shí)驗(yàn)24如流腦病人取CSF、血液或出血瘀斑；大多細(xì)菌16～24h，結(jié)核桿菌需4～8w。分離培養(yǎng)是微生物學(xué)診斷的金標(biāo)準(zhǔn)，是最可靠的傳統(tǒng)診斷技術(shù)。滅活疫苗、減毒活疫苗、亞單位疫苗、核酸疫苗、重組活載體疫苗、轉(zhuǎn)基因植物疫苗和治療性疫苗。人工免疫人工主動(dòng)免疫疫苗、類毒素若懷疑放線菌感染，應(yīng)讓病人留取含有顆粒的痰液，實(shí)驗(yàn)室查到硫磺顆粒且弱抗酸，可以考慮放線菌感染。用減毒或無(wú)毒力的活病原體制成；優(yōu)點(diǎn)快速、靈敏且不受抗生素等藥物影響。自然主動(dòng)免疫患病、隱性感染采集急性期及恢復(fù)期血清含特異抗體的免疫血清＋未知純種細(xì)菌進(jìn)行血清學(xué)實(shí)驗(yàn)，可確定致病菌的種和型。采用已知的細(xì)菌或其特異性抗原，檢測(cè)患者血清或其他體液中有無(wú)相應(yīng)特異性抗體及其效價(jià)的動(dòng)態(tài)變化，可作為某些傳染病的輔助診斷。2、分離培養(yǎng)（isolationandcultivation）烈性傳染病或病因不明患者臨床標(biāo)本的采集時(shí)應(yīng)做好防護(hù)工作。痰標(biāo)本采集標(biāo)本前應(yīng)用清水、冷開水漱口有假牙者應(yīng)取下假牙。4%甲醛作用3～4周后，毒性消失仍保持免疫原性的制品。第四節(jié)細(xì)菌感染的特異性防治烈性傳染病或病因不明患者臨床標(biāo)本的采集時(shí)應(yīng)做好防護(hù)工作。如:腦膜炎球菌的莢膜多糖，乙肝疫苗等。嚴(yán)格無(wú)菌操作，避免標(biāo)本被污染。注射的局部和全身性副反應(yīng)較大；第三節(jié)分子生物學(xué)診斷PCR技術(shù)核酸雜交技術(shù)DNA芯片技術(shù)25細(xì)菌學(xué)診斷基本方法26第四節(jié)細(xì)菌感染的特異性防治27特異性免疫產(chǎn)生的方式人工免疫人工主動(dòng)免疫疫苗、類毒素人工被動(dòng)免疫抗毒素、丙球自然免疫自然被動(dòng)免疫胎盤、初乳自然主動(dòng)免疫患病、隱性感染人工免疫采用人工方法將疫苗、類毒素等或含有某種特異性抗體、細(xì)胞免疫制劑等接種于人體，以增強(qiáng)宿主體的抗病能力。28一、人工主動(dòng)免疫

人為地將疫苗（vaccine）或類毒素接種于人體，使機(jī)體主動(dòng)產(chǎn)生特異性免疫力的一種防治微生物感染的措施。

29常用制劑疫苗滅活疫苗、減毒活疫苗、亞單位疫苗、核酸疫苗、重組活載體疫苗、轉(zhuǎn)基因植物疫苗和治療性疫苗。類毒素301、滅活疫苗

選用免疫原性強(qiáng)的細(xì)菌經(jīng)人工大量培養(yǎng)后，用理化方法殺死而成。如傷寒、百日咳、霍亂等滅活疫苗。優(yōu)點(diǎn)易于制備和保存。缺點(diǎn)接種劑量大；維持時(shí)間短；接種次數(shù)多；注射的局部和全身性副反應(yīng)較大；不產(chǎn)生細(xì)胞免疫應(yīng)答。312、減毒活疫苗

用減毒或無(wú)毒力的活病原體制成；如BCG優(yōu)點(diǎn)只需接種一次、接種劑量較小、副反應(yīng)輕微或無(wú)、免疫效果好且持久、能同時(shí)產(chǎn)生細(xì)胞免疫和體液免疫；以自然途徑接種，有SIgA抗體的局部粘膜免疫形成。缺點(diǎn)不易保存（冷藏且保存期短）、回復(fù)毒力的危險(xiǎn)性32333.亞單位疫苗

用化學(xué)方法裂解和提取或通過(guò)基因工程產(chǎn)生的細(xì)菌保護(hù)性抗原組分制成的疫苗。如:腦膜炎球菌的莢膜多糖，乙肝疫苗等。344、核酸疫苗／DNA疫苗／基因疫苗將能編碼誘發(fā)保護(hù)性免疫應(yīng)答的病原體基因片段和能在真核細(xì)胞表達(dá)的質(zhì)粒重組，直接注入宿主體內(nèi)使其表達(dá)目的免疫原，進(jìn)而誘導(dǎo)出保護(hù)性抗體和細(xì)胞免疫的新型疫苗，如乙肝疫苗。核酸疫苗的出現(xiàn)與發(fā)展是疫苗發(fā)展史上的第三次革命。35重組活載體疫苗轉(zhuǎn)基因植物疫苗治療性疫苗等36采用已知的細(xì)菌或其特異性抗原，檢測(cè)患者血清或其他體液中有無(wú)相應(yīng)特異性抗體及其效價(jià)的動(dòng)態(tài)變化，可作為某些傳染病的輔助診斷。采用已知的細(xì)菌或其特異性抗原，檢測(cè)患者血清或其他體液中有無(wú)相應(yīng)特異性抗體及其效價(jià)的動(dòng)態(tài)變化，可作為某些傳染病的輔助診斷。人工免疫采用人工方法將疫苗、類毒素等或含有某種特異性抗體、細(xì)胞免疫制劑等接種于人體，以增強(qiáng)宿主體的抗病能力。優(yōu)點(diǎn)只需接種一次、接種劑量較小、副反應(yīng)輕微或無(wú)、免疫效果好且持久、能同時(shí)產(chǎn)生細(xì)胞免疫和體液免疫；不同疾病、不同時(shí)期取不同部位標(biāo)本（優(yōu)選）細(xì)菌感染的檢查方法和防治原則如：痰中查抗酸性桿菌，膿液中找G+葡萄串樣球菌等。傷寒病人在病程1～2周內(nèi)取血液，2～3周時(shí)取糞便。常用紙碟法和試管稀釋法。滅活疫苗、減毒活疫苗、亞單位疫苗、核酸疫苗、重組活載體疫苗、轉(zhuǎn)基因植物疫苗和治療性疫苗。如傷寒、百日咳、霍亂等滅活疫苗。4、核酸疫苗／DNA疫苗／基因疫苗主要用于分離、鑒定致病菌，測(cè)定菌株產(chǎn)毒性等。嚴(yán)格無(wú)菌操作，避免標(biāo)本被污染。人工被動(dòng)免疫抗毒素、丙球如流腦病人取CSF、血液或出血瘀斑；用化學(xué)方法裂解和提取或通過(guò)基因工程產(chǎn)生的細(xì)菌保護(hù)性抗原組分制成的疫苗。第二節(jié)血清學(xué)診斷常用紙碟法和試管稀釋法。烈性傳染病或病因不明患者臨床標(biāo)本的采集時(shí)應(yīng)做好防護(hù)工作。選用免疫原性強(qiáng)的細(xì)菌經(jīng)人工大量培養(yǎng)后，用理化方法殺死而成。主要用于分離、鑒定致病菌，測(cè)定菌株產(chǎn)毒性等。常用紙碟法和試管稀釋法。選用免疫原性強(qiáng)的細(xì)菌經(jīng)人工大量培養(yǎng)后，用理化方法殺死而成。烈性傳染病或病因不明患者臨床標(biāo)本的采集時(shí)應(yīng)做好防護(hù)工作。若懷疑結(jié)核感染找抗酸桿菌，應(yīng)收集24小時(shí)的痰液于清潔玻璃容器內(nèi)。接種途徑皮內(nèi)、皮下、腹腔、肌肉、靜脈、腦內(nèi)等。如傷寒、百日咳、霍亂等滅活疫苗。外毒素經(jīng)0.烈性傳染病或病因不明患者臨床標(biāo)本的采集時(shí)應(yīng)做好防護(hù)工作。結(jié)果以抗體效價(jià)明顯高于正常人水平或患者恢復(fù)期抗體效價(jià)比急性期升高≥4倍方有意義。第四節(jié)細(xì)菌感染的特異性防治第三節(jié)分子生物學(xué)診斷自然主動(dòng)免疫患病、隱性感染注射的局部和全身性副反應(yīng)較大；首先輕咳，咳出咽喉部的分泌物，棄去，再用力咳嗽，咳出肺部的痰液直接吐入無(wú)菌的容器中。常用紙碟法和試管稀釋法。常用紙碟法和試管稀釋法。第二節(jié)血清學(xué)診斷自然免疫自然被動(dòng)免疫胎盤、初乳嚴(yán)格無(wú)菌操作，避免標(biāo)本被污染。滅活疫苗、減毒活疫苗、亞單位疫苗、核酸疫苗、重組活載體疫苗、轉(zhuǎn)基因植物疫苗和治療性疫苗。優(yōu)點(diǎn)快速、靈敏且不受抗生素等藥物影響。核酸疫苗的出現(xiàn)與發(fā)展是疫苗發(fā)展史上的第三次革命。常用動(dòng)物小鼠、豚鼠、家兔第三節(jié)分子生物學(xué)診斷（優(yōu)選）細(xì)菌感染的檢查方法和防治原則采集急性期及恢復(fù)期血清糞標(biāo)本自然排便采集糞便標(biāo)本時(shí)，取有膿血、粘液的糞便一小匙。以自然途徑接種，有SIgA抗體的局部粘膜免疫形成。自然免疫自然被動(dòng)免疫胎盤、初乳烈性傳染病或病因不明患者臨床標(biāo)本的采集時(shí)應(yīng)做好防護(hù)工作。分離培養(yǎng)

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