6.血細(xì)胞分析儀的校準(zhǔn)和質(zhì)控

血細(xì)胞分析儀的校準(zhǔn)和質(zhì)控內(nèi)容導(dǎo)學(xué)隨著血細(xì)胞分析儀越來越多的選擇，同一實驗室可能存在不同品牌的血細(xì)胞分析儀，由于各廠家采用的技術(shù)及標(biāo)準(zhǔn)均有一定的差異。因此，為保證實驗內(nèi)部不同品牌的血細(xì)胞分析儀具有統(tǒng)一性，建立一套完善的校準(zhǔn)與質(zhì)控系統(tǒng)是一個重要的手段。下面，我們將共同學(xué)習(xí)血細(xì)胞分析儀的校準(zhǔn)和質(zhì)控。一。概述L臨床標(biāo)本測定結(jié)果的可靠性包括兩方面的含義⑴精密度，即重復(fù)性，在相同測量條件下，對同一被測量物進行連續(xù)多次測量，所得結(jié)果之間的一致性。⑵準(zhǔn)確性，即一個測量值與可接受的參考值之間的一致程度。2.作好室內(nèi)質(zhì)控及儀器校準(zhǔn)的目的（圖1）室內(nèi)質(zhì)控校準(zhǔn)保證

室內(nèi)質(zhì)控校準(zhǔn)保證

測定結(jié)果保證

測定結(jié)果精密度準(zhǔn)確性1 作好室內(nèi)質(zhì)控及儀器校準(zhǔn)的目的1作好室內(nèi)質(zhì)控及儀器校準(zhǔn)的目的（一）血液分析儀校準(zhǔn)的一般要求L為了準(zhǔn)確性和可比性：要求對每一臺血液分析儀定期進行校準(zhǔn)。同一臺儀器使用不同吸樣模式時，應(yīng)分別進行校準(zhǔn)。儀器安裝時由廠家進行校準(zhǔn)，并提供校準(zhǔn)記錄。.建立校準(zhǔn)程序并寫成文件：校準(zhǔn)物的溯源性、來源名稱及其保存方法；校準(zhǔn)的具體方法和步驟；何時要求進行校準(zhǔn)、由何人負(fù)責(zé)實施。.儀器校準(zhǔn)后，必須開展室內(nèi)質(zhì)控：監(jiān)測結(jié)果是否發(fā)生漂移。（二）校準(zhǔn)物的來源L儀器的配套校準(zhǔn)物。2.新鮮血（圖2）。新鮮血校準(zhǔn)物間接國際標(biāo)準(zhǔn)新鮮血校準(zhǔn)物間接國際標(biāo)準(zhǔn)圖2新鮮血校準(zhǔn)物血液分析儀的國際標(biāo)準(zhǔn)檢測方法：校準(zhǔn)物：EDTA-K2,健康人的新鮮血。⑴RBC、WBC：：電阻抗法、單通道分析儀或用精密吸管手工稀釋標(biāo)本。⑵Hb：使用分光光度計，氟化高鐵血紅蛋白法。⑶Het：微量Het檢測法。（4）Pit：利用CD41及CD61單抗標(biāo)記血小板，使用流式細(xì)胞儀計數(shù)。（三）新鮮血作為校準(zhǔn)物的定值L直接溯源至國際標(biāo)準(zhǔn)的定值方法：血細(xì)胞分析的參考方法一一難以實施。2.間接溯源至國際標(biāo)準(zhǔn)的定值方法：二級標(biāo)準(zhǔn)檢測系統(tǒng)、規(guī)范操作的檢測系統(tǒng)。⑴二級標(biāo)準(zhǔn)檢測系統(tǒng)：1.直接溯源至參考方法；2.半自動或全自動儀器；3.具備較完善的質(zhì)量保證措施；④與具有權(quán)威性的參考實驗室定期進行比對的檢測系統(tǒng)。⑵規(guī)范操作的檢測系統(tǒng)：1.使用配套試劑；2.用配套校準(zhǔn)物定期進行儀器校準(zhǔn)；3.規(guī)范地開展室內(nèi)質(zhì)量控制；④參加室間質(zhì)量評價成績優(yōu)良；⑤人員經(jīng)過培訓(xùn)。3.室溫8h內(nèi)完成定值及校準(zhǔn)。（四）校準(zhǔn)方法L被校準(zhǔn)儀器的準(zhǔn)備⑴校準(zhǔn)前：用清潔劑對管道、測試室處理30分鐘。⑵本底計數(shù)、重復(fù)性（連續(xù)測10次）、攜帶污染均合格。2.校準(zhǔn)物的準(zhǔn)備⑴配套校準(zhǔn)物從冰箱內(nèi)取出，室內(nèi)放置15分鐘；檢查效期、是否變質(zhì)或污染；然后充分混勻；打開瓶塞時墊上紗布或軟紙；分裝于兩個瓶內(nèi)。（2）新鮮血校準(zhǔn)物：EDTA-K2,終濃度1.5~2.2mg/ml血，Hb、WBC、RBC、Het、Pit檢測結(jié)果在正常范圍內(nèi)；分裝，每管3ml血；然后定值校準(zhǔn)。⑶校準(zhǔn)（圖3）o校準(zhǔn)物被校準(zhǔn)儀器連續(xù)檢被校準(zhǔn)儀器連續(xù)檢81以取2?1以的均值圖3校準(zhǔn)⑷判別：根據(jù)校準(zhǔn)物的定值和被校準(zhǔn)儀的均值調(diào)整儀器。1）計算各參數(shù)的均值與定值相差的百分?jǐn)?shù)：計算公式：（均值-定值）/定值xlOO%。結(jié)果與表1比較。表1 儀器校準(zhǔn)的判別標(biāo)準(zhǔn)參數(shù)百分?jǐn)?shù)差異：一列百分?jǐn)?shù)差異：二列WBC1.5%10%RBC1.0%10%Hb1.0%10%Het2.0%10%Pit3.0%15%表1儀器校準(zhǔn)的判別標(biāo)準(zhǔn)2）結(jié)果判別（見表2）o表2儀器校準(zhǔn)的結(jié)果判別表2儀器校準(zhǔn)的結(jié)果判別各叁數(shù)均值與定值相差的百分比決定不需調(diào)整 差異等于或小于第一列數(shù)值需調(diào)整 差異鑒于第一列與第二列之間需維修 差異大于第二列數(shù)值3）參數(shù)調(diào)整：L校準(zhǔn)系數(shù)二定值/均值；2,新系數(shù)二原系數(shù)x校準(zhǔn)系數(shù)⑸校準(zhǔn)結(jié)果的驗證（圖4）o圖4校準(zhǔn)結(jié)果的驗證（五）儀器需校準(zhǔn)的幾種情況L分析儀在投入使用前。.更換部件進行維修后。.室內(nèi)質(zhì)控結(jié)果有漂移時。.常規(guī)實驗室至少半年進行一次校準(zhǔn)。（六）校準(zhǔn)時相關(guān)問題L配套校準(zhǔn)品的效期：效期很短、提前3~6個月預(yù)訂。.全血校準(zhǔn)品的效期及來源：8小時、健康成人、不宜用獻血員。.全血校準(zhǔn)品所用的抗凝劑：EDTA-K2、保養(yǎng)液會使部分儀器MCV增高。三。室內(nèi)質(zhì)控（一）目的.控制本實驗室測定工作的精密度。.監(jiān)測其準(zhǔn)確度的改變。.提高常規(guī)檢驗工作的批間、批內(nèi)標(biāo)本檢驗結(jié)果的一致性。（二）實際操作設(shè)定靶值、設(shè)定控制限、記錄質(zhì)控結(jié)果并繪制質(zhì)控圖、應(yīng)用質(zhì)控規(guī)則進行分析。L質(zhì)控靶值和控制限的設(shè)定⑴廠商說明書中的標(biāo)定值及允許范圍只能作參考。⑵嚴(yán)格來講，各實驗室的檢測方法（檢測系統(tǒng)）一定不同于廠商定值的檢測方法。廠商提供的允許范圍是他們的〃保險〃范圍，不是應(yīng)控制范圍，一般都很大。它只是告訴用戶，您的測定值在此范圍內(nèi)，說明控制品沒問題，不說明其他。⑶每個實驗室必須自己通過測定，累積控制值來計算自己的均值和標(biāo)準(zhǔn)差，用于自己的控制圖上。.血常規(guī)質(zhì)控品定值做法⑴在你實驗室條件下（環(huán)境、溫度、電壓、試劑配套）等情況下進行定值。⑵選擇一份質(zhì)控品，每日測定3次，連續(xù)3天。⑶第4天測定一次后，共10個數(shù)據(jù)，統(tǒng)計平均值和標(biāo)準(zhǔn)差，設(shè)定該批次質(zhì)控品的X±2s范圍。（4）應(yīng)在上一批次質(zhì)控品用完至少3天前，開始進行新一批號質(zhì)控品的測定。⑸保持相應(yīng)定值過程的原始記錄。.Westgard多規(guī)則（表3）表3Westgard多規(guī)則常用質(zhì)控規(guī)13S 隨機誤差R4S 隨機誤差22S 系統(tǒng)誤差41S 系統(tǒng)誤差10X 系統(tǒng)誤差表3Westgard多規(guī)則.Westward六個質(zhì)控規(guī)則（表4）4.Westward六個質(zhì)控規(guī)則（表4）表4 Westward六個質(zhì)控規(guī)則符號 定義12S 1個質(zhì)控測定值超出均值±2SD控制限13S 1個質(zhì)控測定值超出均值±3SD控制F /22S 2個連續(xù)的質(zhì)控測定值同時超出均值+2SD或-2SD控制限R4S 同一批測定中，2個不同濃度質(zhì)控品測定值之間的差值超出4SD控制限41S 4個連續(xù)的質(zhì)控測定值同時超出均值+1SD或-1SD表4Westward六個質(zhì)控規(guī)則（三）失控情況處理及原因分析L填寫失控報告單，上報實驗室負(fù)責(zé)人。.由負(fù)責(zé)人作出是否發(fā)報告的決定。.分析失控原因（圖5）o圖5 分析失控原因圖5分析失控原因,完成失控報告單。四）室內(nèi)質(zhì)控數(shù)據(jù)管理1.每月室內(nèi)質(zhì)控數(shù)據(jù)處理：均值、標(biāo)準(zhǔn)差和變異系數(shù)；除外失控數(shù)據(jù)后的均值、標(biāo)準(zhǔn)差和變異系數(shù)；累積均值、標(biāo)準(zhǔn)差和變異系數(shù)。2?每月室內(nèi)質(zhì)控數(shù)據(jù)的保存