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文檔簡(jiǎn)介
生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)考核試題庫要求:參加考核的每位學(xué)生須從1-6號(hào)題中隨機(jī)抽1題,從7-12號(hào)題中隨機(jī)抽1題,從13-37號(hào)題中隨機(jī)抽1題,從38-46號(hào)題中隨機(jī)抽1題,共計(jì)4道考核題進(jìn)行考核,總分為60分。一、理論考核題1鹽析和鹽溶(3分)2電泳(3分)3層析(色譜)(3分)4酶的活力單位(3分)5比活力(3分)6分子篩效應(yīng)(3分)7電泳的原理(4分)8離子交換層析的原理(4分)9親和層析的原理(4分)10凝膠過濾層析的原理(4分)11吸附層析的原理(4分)12透析技術(shù)的基本原理及其應(yīng)用(4分)13聚丙烯酰胺凝膠電泳的主要優(yōu)點(diǎn)及用途(6分)14按層析過程的機(jī)理,層析法分哪四類?按操作形式不同又分哪三類?(7分)15普通離心機(jī)的使用注意事項(xiàng)?(6分)16可見分光光度計(jì)的使用注意事項(xiàng)?(6分)17蛋白質(zhì)含量測(cè)定的常用方法有那些?(6分)18粗脂肪的提取和含量測(cè)定的基本原理(6分)19索氏提取器是由哪幾部分組成的?(6分)20粗脂肪的提取和含量測(cè)定的簡(jiǎn)要操作步驟(6分)21粗脂肪的提取實(shí)驗(yàn)中如何減少誤差?(6分)22凱氏定氮法測(cè)定總氮量的基本原理(6分)祖23督凱氏競(jìng)定氮娛實(shí)驗(yàn)版中用從到的碌主要罩器材垮有哪雕些?渡(6龍分)燭24豬核酸設(shè)的含禮量測(cè)躁定常廉用的水方法概有哪態(tài)些?完(6割分)癢25摘雙倒豐數(shù)法妙測(cè)定警米氏勉常數(shù)快的基覺本原鍛理癢(6拉分)奇26艙雙倒瓶數(shù)法峽測(cè)定翼米氏國常數(shù)哀的實(shí)來驗(yàn)中諷,決證定實(shí)識(shí)驗(yàn)成產(chǎn)敗的技因素粘有哪振些?倆關(guān)鍵襯因素蓄是什渾么?縣(樹7黎分)逢27騙生物槍細(xì)胞描的破榆碎的謎常用坡方法暴有哪野些?海(6汗分)早28型酶的贏制備息及提造取過恭程中止常注侮意哪俯些事簽項(xiàng)?苦(6討分)笑29必蛋白谷質(zhì)的染分離玩常用癥的方鐮法有丹哪些頃?腦(6玻分)朗30若甲醛盟滴定隊(duì)法測(cè)懸定氨?;嵯傻幕罕驹鹄砣瑁?卵分)凱31武為什元么S仍DS督-聚瞇丙烯辨酰胺勢(shì)凝膠鄰電泳胖可以梁用來味測(cè)定虧未知日蛋白群質(zhì)的蹤相對(duì)塘分子數(shù)質(zhì)量尚?楚(6忙分)葵32匆連續(xù)梯聚丙峽烯酰挺胺凝擱膠電篩泳與耕不連膀續(xù)聚歌丙烯雹酰胺卸凝膠朽電泳調(diào)有什巨么不乘同?梨(6嚷分)尼33晉聚丙絡(luò)烯酰申胺凝送膠電伯泳的讓優(yōu)點(diǎn)李?胸(6國分)清34吸瓊脂安糖凝層膠電已泳的緣優(yōu)點(diǎn)子?灣(6水分)濕35征提取誤某種寫植物鞋組織叼中的榮總D腥NA再時(shí),教使用被的細(xì)低胞提攪取液千中的重主要錫試劑段成分梢是什關(guān)么?孟各有只什么自作用宜?羨(興7酬分)元36世如何找證明迷提取逐到的杠某種瞞核酸板是D崗NA顯還是景RN鏟A?摘(6田分)翁37夫聚丙塑烯酰削胺凝獄膠電干泳分茂離血毛清蛋冶白時(shí)叮,使模用的燙電泳夢(mèng)緩沖層液P兆H=蘋8.羊3,謊那么予樣品區(qū)應(yīng)點(diǎn)笑在哪盛端?巧為什肢么?棗(6灣分)是二、畢技能冤或?qū)崙楎?yàn)操方作考伍核題僅3另8瘡說明蹄紙層查析丙和斤離子卸交換齡層析抵分離夫氨基旋酸名混合園物的狡方法責(zé)是根診據(jù)氨站基酸醉的什附么性殃質(zhì)?炸列伏出紙井層析鋪和柱維層析隔的一片般操統(tǒng)作步淋驟。傾(1碗0分勸)凝3叛9系凝膠奏電泳什的一虜般操摔作步北驟細(xì)(1禮1幕分)診40糧普通乓離心花機(jī)的敢使用獎(jiǎng)操作娘(示敏范)線(1蜜0分賢)鉗4貼1右可見侵分光糞光度附計(jì)的斯使用嚼操作平(示睬范)評(píng)(1屢0分抵)究42搶如果察要1底05拌攝氏巴度干膜燥某慰種物幣質(zhì),拒如何滿使用智干燥省箱(僵示范受)?珠(1親0分收)臘43標(biāo)要稱這取某貴種藥梅品燕2.家0g僅,如況何使仆用天棒平(樣示范棵)?駱(1吃0分魄)杰44早要配運(yùn)制5秤00嶺ml征0懇.0已1m熊ol垃/L帽的N尼aO盲H溶叨液應(yīng)接如何伴配制例?槽(1先0分疫)奪45希配制史1L錢0棄.0供1m你ol外/L棟的H椒Cl陶溶液伙應(yīng)如勸何配盯制(歷已知屢濃鹽糠酸比吳重是銷1.更19顯g勒/L泰,重亭量百僚分比嗎濃度姑為3教6.棗5%椒)?竭(1性1分介)姥46譯分別駝配制拖出1碎0訂μ居g/縣ml招,5剛μ粘g/錫ml凍,2灘μ充g/塔ml偵,1奪μ賴g/辜ml臨的D漿NA勵(lì)標(biāo)準(zhǔn)烈溶液削,應(yīng)漆如何何配制耽?(牙盡可會(huì)能節(jié)均約)寫(1葡0分糾)柄答案昌:透1、很鹽析圓和鹽寬溶:宇鹽析年:愿在蛋館白質(zhì)橡溶液眉中加遼入一似定量勢(shì)的高加濃度申中性慢鹽(伐如硫回酸氨本),紅使蛋喬白質(zhì)廚溶解竄度降功低并制沉淀慈析出富的現(xiàn)杏象稱另為規(guī)鹽析杏。曲鹽溶食:罵加入脆少量舒中性襖鹽可目增加菊蛋白圾質(zhì)的懶溶解薦度,筒即番鹽溶?,F(xiàn)象聾。需2、宮電泳方:葡帶電證粒子太在直燃流電影場(chǎng)中直向著絨所獎(jiǎng)帶電拍性相擾反的矛電極生移動(dòng)停的現(xiàn)誦象察。務(wù)3、斑層析露(色蓋譜)料:務(wù)用不貞同物型質(zhì)在鍬不同載相態(tài)喬的選港擇性替分配桌,以頸流動(dòng)臉相對(duì)幣固定幻相中到的混流合物址進(jìn)行雜洗脫柜,使歪混合啦物各略組分探以不驢同速旺度移販動(dòng),掩從而少達(dá)到刺分離乓的一彎種物粗理方圓法。線4、厲酶的捎活力研單位顏:雙是指哥在特創(chuàng)定條榴件下挎(遼25遣℃胖、最飾適的酷pH糖值和遣底物遣濃度思),晨每分鞏鐘可旦催化攜1微拳摩爾秋(1途0-緣6摩闊爾)乞底物勤轉(zhuǎn)化慣所需法要控的酶壽量棵。紙5、證比活短力:副代表忽酶制充劑的棵純度考。根獻(xiàn)據(jù)國會(huì)際酶夜學(xué)委飛員會(huì)昂規(guī)定世比活賺力窄用每馳毫克聚蛋白超所含慘的酶雹活力完單位燙數(shù)表容示某。嬌6、召分子島篩效態(tài)應(yīng):旺凝膠礦本身蛇具有汽三維緩網(wǎng)狀胳結(jié)構(gòu)神,大地的分前子在聚通過鼻這種磨網(wǎng)狀羅結(jié)構(gòu)塌上的惕孔隙氣時(shí)阻腹力較廚大,畫小分寧子通廉過時(shí)論阻力年較小壘。分佳子量忙大小貢不同際的多蝦種成歲份在嚴(yán)通過乞凝膠根床時(shí)舒,按仆照分娛子量燒大小森“排平隊(duì),比凝膠害表現(xiàn)雁分子旱篩效憤應(yīng)蜜?;?、秩電泳羅的原膽理:顯電泳希是指矮帶電余顆粒果在電夕場(chǎng)的閉作用卸下發(fā)告生遷做移的蠶過程繭。許鞭多重尋要的偽生物宴分子懇,如魚氨基驚酸、勒多肽欺、蛋烤白質(zhì)替、核鞏苷酸吐、核兄酸等染都具振有可戲電離算基團(tuán)匪,它炭們?cè)诒饶硞€(gè)斗特定面的p盒H值壟下可壇以帶暗正電測(cè)或負(fù)搖電,趨在電口場(chǎng)的病作用絨下,泊這些步帶電瓦分子袍會(huì)向舅著與舟其所誕帶電處荷極享性相駱反的漫電極鞭方向克移動(dòng)虹。電勞泳技扁術(shù)就毛是利私用在伶電場(chǎng)國的作場(chǎng)用下蓬,由材于待花分離糞樣品誦中各慌種分毯子帶編電性兄質(zhì)以杰及分核子本屠身大尚小、射形狀武等性葉質(zhì)的鐵差異柳,使湯帶電蜘分子犧產(chǎn)生騰不同沃的遷菜移速姻度,韻從而氏對(duì)樣授品進(jìn)采行分寨離、討鑒定套或提享純的境技術(shù)牙。撲8、鏡離子線交換恢層析死的原招理:妥離子名交換修層析來法是遣以具獵有離差子交朋換性鏟能的劇物質(zhì)編作固歌定相莫,利幻用它腸與流驕動(dòng)相教中的舉離子炭能進(jìn)植行可行逆的覆交換典性質(zhì)鄙來分春離離伴子型遷化合順物的匆一種掏方法堅(jiān)。片9、剛親和蓬層析評(píng)的原佳理:貢親和欺層析與是應(yīng)廚用生狗物高芽分子哲與配種基可蛇逆結(jié)永合趣的原閱理割,將船配基關(guān)通過僑共價(jià)孫鍵牢肺固結(jié)孤合于醒載體唱上而薄制得栽的層虧析系檢統(tǒng)。椅這種挑可逆觀結(jié)合晚的作防用主領(lǐng)要是輸靠生蘆物高已分子倆對(duì)它糧的配屬基的再空間興結(jié)構(gòu)游的識(shí)梳別。遷10楊、班凝膠繼過濾述層析敢的原敞理壤:纏一種狐利用扮帶孔頌?zāi)z找珠作看基質(zhì)債,按賺照分橋子大沖小分摟離蛋崇白質(zhì)臨或其辣它分幅子混泥合物銜的層明析技下術(shù)。獻(xiàn)凝膠濃過濾政層析竊具有脾分子薄篩效雅應(yīng)。賊11奔、吸挨附層費(fèi)析的洽原理精:唯組份那在吸擋附劑末表面染吸附填固定配相是傲固體肆吸附灰劑,瞇各能吵力不泡同買而進(jìn)社行分濾離的擾方法株。葡12撈、屬透析爪技術(shù)習(xí)的基男本原去理及宣其應(yīng)濁用網(wǎng):嗓13各、聚雷丙烯走酰胺卡凝膠暗電泳腐的主或要優(yōu)葉點(diǎn)及胃用途叔:纖①撈聚丙信烯酰款胺凝舟膠是詳由丙取烯酰玩胺和捕N,艷N'遞甲叉龍雙丙王烯酰薯胺聚銹合而母成的相大分次子。碌凝膠懇有劣格子證是帶碌有酰小胺側(cè)罷鏈的聾碳-胳碳聚遵合物當(dāng),沒玩有或夠很少要帶有計(jì)離子喘的側(cè)券基,聯(lián)因而占電滲棚作用牧比較餅小,舍不易錯(cuò)和樣愚品相儉互作籌用。夾②提由于蠅聚丙親烯酰暮胺凝倍膠是秀一種脂人工站合成將的物稅質(zhì),蠅在聚凳合前庭可調(diào)臨節(jié)單堆體的臥濃度牌比,售形成各不腦同程瀉度交膏鏈結(jié)棋構(gòu),載其空視隙度輩可在駐一個(gè)慧較廣克的范怕圍內(nèi)賽變化鳥,可巖以根猾據(jù)要皺分離膠物質(zhì)蔽分子匯的逢大小侮,選暈擇合郊適的珠凝膠傅成分惕,使良之既階有適林宜的諸空隙庭度,戚又有扭比較現(xiàn)好的盛機(jī)械躺性質(zhì)券。一姥般春說來習(xí),含財(cái)丙烯謎酰胺桿7-長(zhǎng)7.叮5%翁的凝陪膠,辰機(jī)械符性能黑適用轉(zhuǎn)于分墓離分將子量騾范圍拜不1苗萬至侄10林0萬柜物萬質(zhì),型1萬介以下宇的蛋色白質(zhì)岔則采復(fù)用含振丙烯摟酰胺眠15宮-3毒0%雕的凝摟膠,俱而分挽子量贏特別遮大的揪可采濫用含肉丙敢烯酰餡胺4吳%的閣凝膠寒,大硬孔膠尋易碎敞,小仗孔膠尿則難須從管慨中取洞出,遠(yuǎn)因此疾當(dāng)丙普烯?;彀返膫螡舛仁T鋈技訒r(shí)辜可以線減少潛雙含墨丙烯撥酰胺忙,以益改進(jìn)患凝膠商的機(jī)蓮械性貍能。偽③播在一損定濃汽度范摧圍聚拉丙烯劈酰胺螺對(duì)熱留穩(wěn)定日。凝產(chǎn)膠無暗色透河明,溜易觀偶察,沒可用燦檢測(cè)忘儀直赤接測(cè)杰定。顯④牧丙烯絹酰胺笛是比背較純色的化壓合物佳,可麗以精鴿制,炕減少盛污染脹。合先成聚片丙烯磁酰胺焰凝膠罷的原默料是播丙烯翁酰胺唱和甲饅撐雙悄丙烯涂酰胺鋸。丙葛烯酰添胺稱甘單體遼,甲匪撐雙躺丙勾烯酰澆胺稱掛交聯(lián)踩劑,窮在水免溶液自中,藍(lán)單體氏和交盾聯(lián)劑爺通過冰自由現(xiàn)基引速發(fā)的煌聚合樸反應(yīng)色形成衫凝膠努。刷14眾、氧按層守析過茶程的附機(jī)理言,層纏析法窮分哪車幾便類?聯(lián)按操蟻?zhàn)餍蔚讲淮钔质谭帜拿比愯F?:趕根據(jù)脊分離川的原覆理不孤同分暖類,兩層析絞主要糕可以漂分為怪吸附蚊層析乘、分救配層暗析、褲凝膠繞過濾些層析嚇、離判子交模換層例析、項(xiàng)親和結(jié)層析鍵等。市按操暗作形樹式不圍同又燙分辣層析弓可以肯分為終紙層到析、迅薄層斃層析避和柱音層析謊。掉15能、壤普通鴨離心情機(jī)的舒使用涉注意押事項(xiàng)寄?:冬(1凱).筑離心校機(jī)要摟置水咽平位雞置,幅以保喉證旋費(fèi)轉(zhuǎn)軸腰垂直能地球干水平塊面。搜為惑遭拔禿栽(利2)皂.使分用前民應(yīng)檢難查套宴環(huán)是劍否平紗衡(獲臺(tái)稱她)??鍒?jiān)草抗服犧株(滋3)略.離當(dāng)心杯鬼及其冒外套易(離單心管具套)復(fù)是否除平衡晶(臺(tái)本稱)揭。劇姑述顏各池吸(障4)芽.樣野品傾神入離匪心杯清后應(yīng)傲與離士心管限套一音起兩愁兩平炭衡,評(píng)平衡頂后把詢它們竟放置冰于轉(zhuǎn)捎子的露對(duì)稱枝位置令。射值糟幻甲辣蛋(佩5)聲.蓋術(shù)好蓋經(jīng)子,預(yù)打開秘電源襖開關(guān)殃,調(diào)匆整離碰心時(shí)蝴間。垃稅默襯朋姑幟(滲6)紗.啟惰動(dòng)離罷心時(shí)然轉(zhuǎn)速因應(yīng)由撒小至洞大,之緩慢混升速陪(一循般要碗2~趨3m渴in辛)。沙餡叮洪偏居兇(仙7)譽(yù).達(dá)烈到預(yù)心定轉(zhuǎn)奔速后賀再調(diào)陽整離另心時(shí)饞間至牢預(yù)定撞時(shí)間傘(1礦0m劇in金)。蓬晚得喊待界異(腫8)脈.離臨心完料成后如要調(diào)蚊整調(diào)漿速連第桿至污零位甚,同濃時(shí)關(guān)倡上電園源。記它促留盤限用(殊9)貓.要拾等到梳轉(zhuǎn)速艘為零金時(shí)才角能打謙開離籠心機(jī)葵蓋,作取出鄰樣品橫。招16腦、可設(shè)見分絕光光截度計(jì)味的使泡用注慮意事債項(xiàng)?靈:(齡1)謊使用博過程宏中比暮色皿率的四羽個(gè)面俊在槽脊中針保持拴一定刺的位麻置,敢取用咐比色默皿時(shí)柜手應(yīng)齡該捏憑住四短個(gè)棱賺而不釀能碰栽到面新。亮比色央皿應(yīng)哥該避副免磨暢損透頓光面帶。澆(2農(nóng))采使用蠶過程館中不夏得打撓開蓋擊子尸,閃保持統(tǒng)儀器喊清潔刊,為辯避免研溶液葬灑落農(nóng)對(duì)儀般器造公成的策腐蝕揚(yáng),所卻有溶兆液的緞配置竿、傾搏倒都蝶不要陽在儀扇器附琴近操款作跪。幟比色草皿放婚進(jìn)樣銜品池昆之前高必須煮把外今表面等擦干征。逮(3鴨)慚當(dāng)(案僅當(dāng)紐)操素作者朋錯(cuò)誤敬操作伯或其挨他干括擾引團(tuán)起微籍機(jī)錯(cuò)蠢誤時(shí)財(cái),應(yīng)主該立磚即關(guān)奔斷主撲機(jī)電巴源,劑重新壞啟動(dòng)敲,但攝無須測(cè)關(guān)斷蹲燈源忽電源拔。趙(稅4摔)疲光學(xué)孝器件貓和儀與器運(yùn)桂行環(huán)吩境需強(qiáng)保護(hù)或清潔仔。清方潔儀隸器外鍋表時(shí)營,鏡請(qǐng)勿牽使用膜乙醇托乙醚知等標(biāo)有苗機(jī)溶半劑,輸請(qǐng)勿域在工猴作中疑清潔宿,不敲使用鋪時(shí)請(qǐng)鞏加防桃塵罩逐。年17或、套蛋白去質(zhì)含除量測(cè)暑定的饒常用醫(yī)方法抖有那使些?桌:(跪1)寨微量反凱式宵定氮銷法。渾(2攪)雙玩縮脲硬法。游(3專)令fo渡li爸n-異酚試久劑法減。(汁4)為紫外縮分光挽光度掙法。淚(5骨)考蜂馬斯成亮藍(lán)歉染色車法。系18似、粗鎮(zhèn)脂肪緩的提止取和鬧含量霉測(cè)定蒙的基甩本原覽理。誠:廊脂肪逢是丙驅(qū)三醇欠(甘給油)航和脂宋肪酸件結(jié)合逢成的澡脂類瓶化合頃物,絞能困溶于糧脂溶柄性有惑機(jī)溶侍劑。堅(jiān)本實(shí)史驗(yàn)用坦重量胸法,祖利用飾脂肪再能溶菠于脂吉溶性熄溶劑器這一焰特性淡,用極脂溶摘性溶懸劑將塌脂肪朱提取票出來東,借毀蒸發(fā)晶除去升溶劑崖后稱托量。伯整個(gè)冤提取社過程消均在劈索氏慰提取貨器中惠進(jìn)行鉗。通擇常使受用的執(zhí)脂溶速性溶惠劑為口乙醚場(chǎng)或沸揮點(diǎn)為隸30苦o齡C謀-6吳0環(huán)o旅C的貢石油搶醚。礙用此港法提埋取的磨脂溶振性物輕質(zhì)除趙脂肪扮外,苗還含放有游禿離脂貞肪酸竊、磷余酸、粥固醇樣、芳糟香油說及某盈些色裳素等厲,故馬稱為剃“烘粗脂感肪圖”劍。壓19復(fù)、索拳氏提答取器如是由替哪幾速部分班組成塵的?賊:兵提取呈瓶,懷提取餅管和嬌冷凝瞎管三忽部分適組成移。密20樂、粗食脂肪塞的提迎取和朽含量憑測(cè)定巧的簡(jiǎn)績(jī)要操兇作步術(shù)驟(杯6分提):邁1.希抽提刮瓶在妄10喚5凈℃楚±訂2港℃獨(dú)烘箱蟲中烘秧至恒溜重,意材料摘干燥兄至恒甲重。召2.劑稱取膊干燥貪后的牌材料肯1宇-2腰g疏,放綁入研軌缽中衛(wèi)研磨幣(越綿細(xì)越攏好)趁將研獎(jiǎng)磨好互的材片料用沃脫脂綿濾紙伙包住需,用第少許征脫脂逗棉擦揪拭研皺缽壁槐上粘羨的材位料及旬油脂替,也獸一并鮮放入業(yè)濾紙恨包.械用緊棉線溝拴住疤濾紙盜包,需將濾凝紙包置放入陸抽提仍管,宵在抽鐮提瓶床中加竊入2耍/3慶體積匆的無聯(lián)水乙爪醚在冒70臨-7歸5學(xué)℃疼的水累浴上拿加熱趁,使恢乙醚刃回流拐,控叼制乙屈醚回縱流次今數(shù)為隊(duì)每小順時(shí)約孝10乳次,恰共回麥流約店50污次,棟或檢下查抽瀉提管雨流出看的乙柴醚揮喂發(fā)后軍不留叼下油就跡為具抽提股終點(diǎn)核。攀3煮取出該試樣拾,仍顛用原壁提取睜器回少收乙梁醚直襲至抽全提瓶嬸全部援吸完亦,擦素凈瓶郵外壁極,將融抽提彈瓶放巴入仰10鍬5故℃遙±咐2學(xué)℃甜烘箱羽中烘與干至英恒重少。床21呆、粗晚脂肪染的提憑取實(shí)鮮驗(yàn)中排如何覽減少蔑誤差趙?(猛6分修):薯(1橋)材茅料和趣提取脊瓶充乒分干馳燥。嗚(2匯)材瞎料盡榨可能仗的不俗損失鏡。(仔3)速提取鄙充分蹤完全虜。(喉4)普提取內(nèi)后瓶題子還夠要充風(fēng)分的閣干燥廈。團(tuán)22縫、緩凱氏哭定氮燒法測(cè)渠定總師氮量?jī)r(jià)的基朱本原限理(脹6分憤):良樣品摔與濃貌硫酸護(hù)共熱澇,含灣氮有竟機(jī)物普即分餃解產(chǎn)觸生氨預(yù),氨陵又與爸硫酸德作用暈變成價(jià)硫氨群.經(jīng)炒強(qiáng)堿仇堿化璃使之可分解苗放出未氨,季借蒸享汽將匯氨蒸簡(jiǎn)至酸膠液中確,根姿據(jù)此規(guī)酸液鉤被訂中和醬的程纖度可尺計(jì)算潤得樣出品氮啟的含喉量.詢以甘貨氨酸盜為例壇:聞1.楊有機(jī)手物中豈的氮政在強(qiáng)雜熱和茶Cu勻SO痰4蝴,濃小H2屈SO稀4斧作用獨(dú)下,來消化枯生成秋(馳NH騰4績(jī))狹2S阻O4爐花反應(yīng)叛式為司:淘H提2S脾O4蔥==責(zé)SO攤2+馬H2渠O+員[O透]冒歪剖嚇蹈本釣瓣殃絹回R緊.騙CH并.C遷OO猜H+筆[O與]=幸=R為.C相O.貫CO衛(wèi)OH頸+N滅H3營口遷萄鏡袍終糧驗(yàn)僅壘餡賺N曬H3較過勤稻姻幼膊連藥渠懼R改.C團(tuán)O.脆CO第OH口+[渡O]逗==疫nC露O2度+m嫁H2繳O閃弄原疾鄙托蟲點(diǎn)仰斧改2樹NH帝3+柳H2臭SO羊4=驚=(但NH勻4)捏2S拼O4傘2.用在凱臘氏定兄氮器抬中與點(diǎn)堿作姑用,可通過驢蒸餾塌釋放渡出今NH晃3都,收兇集于限H邀3B則O3魄斷溶液潑中。秒反應(yīng)蠟式為役:頂掩2N爆H4椒++揪OH究-=岸=N某H3窗+H徐2O敲遼堤姥冠消袋廢編總牽NH憐3+裳H3稠BO撿3=屠=N摟H4訓(xùn)++老H2尊B(yǎng)O中3-貸3.趨死再用賣已知打濃度例的趙HC濕I壁標(biāo)準(zhǔn)妹溶液常滴定沙,根瘋據(jù)正HC紛I坑消耗壟的量柴計(jì)算水出氮街的含饅量,載然后盒乘以釀相應(yīng)恥的換位算因浪子,教既得裂蛋白思質(zhì)的濾含量廈。妨23扣、凱呢氏定車氮實(shí)桌驗(yàn)中數(shù)用到黃的主工要器妖材有紡哪些主?(禾6分拔):旁凱氏疑燒瓶郵,驕容量稍瓶寺凱氏厲定氮踢裝置棒豆移陽液管閑時(shí)酸式踢滴定便管盼分兄析天拳平套電雀爐吳烘擁箱筒24水、核縮酸的及含量澤測(cè)定兩常用四的方商法有雪哪些辯?(弄6分膛)殼(1慎)紫常外分襪光光殖度法何;同(柳2)華定磷慕法:扮鉬藍(lán)暑比色姜法孕(集3)強(qiáng)定糖呢法:庸乳扇膚R竟NA鄉(xiāng)+鹽誕酸—恩—糠藥醛+埋地衣揪酚—胃—A臘67痕0,抗鮮綠節(jié)色;麥拿奔濱D畝NA組+二顏苯胺奸——帳A5狂95糞,藍(lán)您色化注合物螞墻(仔4)因瓊脂的糖凝宮膠電賀泳法分25男、撕雙倒降數(shù)法都測(cè)定襖米氏忌常數(shù)釘?shù)幕奖驹恚ㄗ?分己):涼L族in盤ew董ea員ve湖r引和很Bu店rk駐將米缸氏方持程改涼寫成婚倒數(shù)伴形式寸:詠26滔、傍雙倒炭數(shù)法嫂測(cè)定用米氏古常數(shù)投的實(shí)算驗(yàn)中捎,決搭定實(shí)綠驗(yàn)成渣敗的宇因素黎有哪蟲些?湊關(guān)鍵塞因素禍?zhǔn)鞘擦济??栗?部分)遣:餐27欺、姑生物屯細(xì)胞繼的破籠碎的刊常用瞧方法棄有哪籃些?蒼(6綿分)冊(cè):機(jī)苗械法很:研攔磨,依高速排搗碎漢機(jī);處物理鏟法:蠻反復(fù)堵凍溶破,超臂聲波盟破碎科,壓恰榨法點(diǎn);化禁學(xué)雨亮生物腫化學(xué)盯法:種自溶抄,溶燈脹法袋,酶雪解法卻,有長(zhǎng)機(jī)溶勞劑處蚊理?;?8墳、酶花的制種備及嘴提取晃過程剃中常惕注意示哪些為事項(xiàng)彼?(帝6分喪):誼29漆、蛋昏白質(zhì)折的分梳離??佑玫柠}方法欣有哪晉些?扒(6撓分)漫:1康、前奇處理縫:選酸擇適努當(dāng)?shù)耐扑檫吋?xì)胞待的方測(cè)法破參碎細(xì)綢胞,短組織機(jī)細(xì)胞吼破碎辦后,嚷選擇穿適當(dāng)貧的介港質(zhì)(椅一般乓用緩違沖液刪)把網(wǎng)所要野的蛋集白質(zhì)夕提取蔽出來運(yùn)。2姨、粗獎(jiǎng)分離描:當(dāng)責(zé)蛋白幻質(zhì)混活合物董提取番液獲憶得后妥,選哪用一饒?zhí)走m坑當(dāng)?shù)膬H方法熊,將仙所要印的蛋岡白質(zhì)距與其奪他雜辜蛋白膏質(zhì)分冊(cè)離開梁來。屠一般干這一鄰步的鞏分級(jí)猛用鹽嘴析、哲等電驢點(diǎn)沉翁淀和悉有機(jī)熱溶劑版分級(jí)搏分離謹(jǐn)?shù)确阶苑?。?zhèn)這種導(dǎo)方法董的特昨點(diǎn)是響簡(jiǎn)便莫、處舉理量伍大,蟻既能府除去矮大量捧雜質(zhì)飾,又勢(shì)能濃穿縮蛋竭白質(zhì)協(xié)溶液微。猴3、話細(xì)分摧離:怒也就愧是樣降品的血進(jìn)一賭步提款純,雨一般孝使用冒層析魄法,呆包括惑凝膠狡過濾闖層析蛙,離懸子交王換層叨析,歌吸附食層析腐以及忘親和悠層析魯?shù)?。狠必要矮時(shí)還酒可以貓選擇示電泳溫法。辣30丈、甲荒醛滴航定法史測(cè)定沾氨基屆酸的沖基本貪原理挎(6聾分)婚:旨31救、為爐什么野SD膨S-湊聚丙呼烯酰捧胺凝芳膠電吸泳可風(fēng)以用跨來測(cè)超定未膠知蛋銅白質(zhì)衫的相盲對(duì)分仆子質(zhì)辭量?心(6譽(yù)分)鄙:暫在聚桃丙烯膜酰胺斗凝膠鵲系統(tǒng)冊(cè)中,損加入后一定仆量的悶十二絮烷基疫硫酸捏鈉(習(xí)SD己S德),土形成壺蛋白眠質(zhì)-原SD哥S濟(jì)復(fù)合澤物,稼這種煮復(fù)合畢物由柔于結(jié)絡(luò)合了杜大量識(shí)的架SD昨S抽,使混蛋白笛質(zhì)喪該失了剝?cè)懈獾碾娂{荷狀靠態(tài),狂形成傅了僅授保持磚原有憤分子恨大小搜為特腸征的辯負(fù)離臟子團(tuán)槍塊,垮從而濁降低扭或消倚除了食各種與蛋白眠質(zhì)分內(nèi)子之殺間的尺天然粥的電懶荷差欲異,液此時(shí)掏,蛋隊(duì)白質(zhì)礦分子憂的電爆泳遷較移率畫主要也取決厭于它箏的分紀(jì)子量幣大小誠,而繪其它銹因素純對(duì)電笑泳遷泊移率址的影開響幾張乎可任以忽彼略不禾計(jì)。小當(dāng)?shù)白诎踪|(zhì)徹的分拍子量招在仔15失00夫0腳~罪20凈00頃00目之間毀時(shí),肥電泳屬遷移忠率與獸分子菠量的恩對(duì)數(shù)野值呈怨直線建關(guān)系酬,符明合下復(fù)列方嶼程:就㏒互10第Mr冶要=螺-打b·我mR狂愛+蛛K桃32弓、連涉續(xù)聚益丙烯短酰胺離凝膠遷電泳船與不乎連續(xù)朽聚丙巖烯酰毛胺凝流膠電月泳有材什么狐不同銹?(邁6分衛(wèi)):手不連集續(xù)聚鞭丙烯饒酰胺炊凝膠殼電泳謝包含烏了兩輪種以別上的練緩沖茄液成惠分、敵pH駕值和汁凝膠聾孔徑瓜,而衣且在志電泳北過程共中形竟成的痰電位漆梯度解亦不李均勻薄。由慘此產(chǎn)賽生的妨濃縮桌效應(yīng)班、電稼荷效營應(yīng)和突分子職篩效移應(yīng)漁。懼33未、車聚丙漲烯酰語胺凝鎮(zhèn)膠電辭泳的淘優(yōu)點(diǎn)捉?(常6分靈):孫①勵(lì)聚丙意烯酰芬胺凝攤膠是攤由丙情烯酰治胺和宮N,玻N'脫甲叉壽雙丙意烯酰底胺聚在合而臉成的恭大分基子。浩凝膠洲有時(shí)格子跡是帶隨有酰成胺側(cè)迎鏈的樓碳-遙碳聚絡(luò)合物餃,沒遼有或臣很少疫帶有哈離子滑的側(cè)綱基,爆因而乏電滲似作用急比較孔小,哄不易號(hào)和樣息品相缺互作傻用?;蛐垄谧S捎谟懢郾跋H腊纺z是斥一種汗人工百合成逃的物極質(zhì),翠在聚飽合前季可調(diào)模節(jié)單坊體的復(fù)濃度似比,兇形成筍不祝同程裂度交熊鏈結(jié)還構(gòu),戲其空逝隙度泰可在淘一個(gè)銜較廣貨的范扎圍內(nèi)翼變化甲,可誰以根求據(jù)要銷分離椅物質(zhì)個(gè)分子畝的冰大小灰,選匹擇合徐適的財(cái)凝膠楊成分串,使粒之既帥有適鑄宜的導(dǎo)空隙柏度,烘又有鴨比較潮好的乞機(jī)械機(jī)性質(zhì)腎。一微般咳說來?xiàng)l,含六丙烯嚴(yán)酰胺貢7-蛋7.嬸5%皆的凝許膠,存機(jī)械某性能停適用房于分震離分篩子量益范圍格不1姻萬至酷10社0萬朽物掠質(zhì),緞1萬傾以下蹄的蛋漫白質(zhì)存則采棍用含柱丙烯猶酰胺喉15推-3前0%好的凝僵膠,仔而分脾子量偏特別桃大的穿可采既用含帖丙辣烯酰翅胺4梯%的蔥凝膠存,大原孔膠終易碎隊(duì),小盯孔膠剩則難筐從管罪中取代出,挖因此購當(dāng)丙路烯酰蔬胺的蜓濃度局增納加時(shí)糞可以耳減少斜雙含蟲丙烯俘酰胺陡,以祖改進(jìn)郵凝膠啦的機(jī)裝械性購能。餡壯③扮在一在定濃走度范復(fù)圍聚鍛丙烯率酰胺奏對(duì)熱乎穩(wěn)定沉。凝盲膠無送色透善明,太易觀慘察,胖可用枕檢測(cè)爛儀直誦接測(cè)蔬定。島欲④獲丙烯撲酰胺黑是比許較純睜的化睬合物太,可迷以精斬制,離減少板污染涼。合嫁成聚窩丙烯影酰胺瞇凝膠沾的原保料是惕丙烯撿酰胺中和甲沸撐雙設(shè)丙烯總酰胺松。丙約烯酰屈胺稱捆單體攪,甲斗撐雙輕丙虛烯酰例胺稱史交聯(lián)隊(duì)劑,禾在水酸溶液滾中,刷單體缸和交凡聯(lián)劑樸通過盛自由原基引為發(fā)的后聚合村反應(yīng)爭(zhēng)形成號(hào)凝加膠。棍34犧、可瓊脂朋糖凝擔(dān)膠電豪泳的對(duì)優(yōu)點(diǎn)爐?(姐6分些):仔(1鍛)瓊線脂含怒液體泰量拜大,探可達(dá)匯98俗-9搞9%唱,近道似自男由電暗泳,敗但是你樣品怕的擴(kuò)窄散度昂比自這由電鉤泳小捏,對(duì)硬蛋白籠質(zhì)的修吸附撓極澡微。災(zāi)(2雙)瓊紗脂作反為支械持體桐有均廣勻,傅區(qū)帶貞整齊階,分踏辨率花高,桃重復(fù)掛性好趴等優(yōu)雪點(diǎn)。仗(3射)忘電泳鳳速度方快。描(4舍)透旱明而件不吸處收紫夕外線凱,可縫以直撲接用翁紫外狠檢測(cè)紫儀作滅定量場(chǎng)測(cè)定荷。(好5)趣區(qū)英帶易召染色層,樣魄品易父回收部,有流利于釋制止棟備。究然而摸瓊脂雖中有擺較多奔硫酸久根,杏電滲認(rèn)作用視大。競(jìng)瓊脈脂糖臂是從廳瓊脂桶中提紡取出混來的江,是窩由半敵乳糖勿和3化.6猛-脫其水-產(chǎn)L-騾半顏乳糖窮相互灶結(jié)合永的鏈務(wù)狀多元糖惕。含剛硫酸揚(yáng)根比蛇瓊脂難少,浩因而財(cái)分離覽效果擴(kuò)明顯窩提高臺(tái)。搞碧瓊脂金(糖腰)電即泳常泄用緩橋沖液毛的p吐H在袍6-法9之嘴間,真離子干強(qiáng)度煉為0百.0必2-篩0.而05平。離旨子強(qiáng)飯度過孩高腥時(shí),鑼會(huì)有攔大量汁電流煎通過椒凝膠苗,因勝而產(chǎn)女生熱元量,息使凝館膠的勤水份玩量蒸文發(fā),葵析出限鹽的忠結(jié)間晶,憑甚至撿可使涼凝膠切斷裂帶,電稅流中捉斷。珍常用格的緩衡沖液貞有硼賴酸鹽粘緩沖哥液與趨巴比梅妥緩翠沖液葉。渣為了凳防止頂電泳疫時(shí)兩時(shí)極緩乏沖液口槽內(nèi)瓦pH等和離立子強(qiáng)載度的菠改變悲,可系在每漏次電摘泳后想合并抽兩極核槽內(nèi)腔的泄緩沖歉液,寒混勻穴后再肆用。摸35列、雖提取想某種弟植物譜組織跨中的選總D賊NA蝴時(shí),短使用忙的細(xì)擦胞提寇取液替中的察主要惹試劑精成分突是什艷么?芽各有乓什么穗作用機(jī)?(改7分障):角36附、如瑞何證煩明提持取到倦的某裕種核康酸是恭DN棒A還鳴是R鞏NA鼻?(詢6分通):樣(1回)用因定糖科法檢亡測(cè)。三(2伴)用炮紫外對(duì)分光佳光度姻計(jì)檢幅測(cè)。兇(3座)用賠瓊脂籃糖凝熊膠電嘩泳檢神測(cè)。震等痰37否、聚魂丙烯壺酰胺籠凝膠亮電泳干分離鬼血清報(bào)蛋白摘時(shí),唉使用瀉的電雀泳緩刻沖液著PH芝=8遲.3押,那盒么樣尊品應(yīng)摔點(diǎn)在墓哪端肯?為眼什么跡?(掏6分啟):勵(lì)樣品額應(yīng)點(diǎn)柱在負(fù)亡極端斬,因鬼為電飄泳緩澡沖液燥PH把=8佛.3得,在對(duì)這樣決的環(huán)纖境中濱,血聲清蛋導(dǎo)白的桂幾種典蛋白倒質(zhì)電洗離后冰都帶晝上負(fù)其電荷犁,所雅以只膜有點(diǎn)照樣在芳負(fù)極卡端,遍外加型電壓皺后,閉才能野向正芝極移死動(dòng),蛙彼此蹦才能允分開刃。奴38搏、賽說明懂紙層惹析麗和皆離子李交換務(wù)層析淹分離仔氨基吩酸框混合吧物的匆方法僻是根單據(jù)氨忽基酸叔的什快么性僅質(zhì)?愚列看出紙末層析陵和柱勢(shì)層析社的一麥般操儀作步表驟。釣(1沉0分贊)沖紙層謊析是放分配瓦層析短,利尚用分舊配系緒數(shù)不座同,圾即氨匙基酸誤在兩隊(duì)相中蓋的溶蒜解能攻力不臭同。陣離子腳交換紙層析蹈利用謊氨基秧酸是紐兩性耳物質(zhì)遞,在技一定妄pH長(zhǎng)下不皮同氨態(tài)基酸尤帶電東性質(zhì)挺和帶需電量違不同寸,因昂此交室換能熄力不膛同。鵲紙層聚析步斥驟:窩濾紙勤準(zhǔn)備頭、樣床品處貴理、抖點(diǎn)樣拉、平
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