反復(fù)應(yīng)激引起前額葉皮層上谷氨酸受體的表達(dá)

反復(fù)應(yīng)激引起前額葉皮層上谷氨酸受體的表達(dá)第一頁(yè)，共三十五頁(yè)，編輯于2023年，星期日Introduction:Adrenalcorticosterone,themajorstresshormone,throughtheactivationofglucocorticoidreceptor(GR)andmineralocorticoidreceptor(MR),caninducelong-lastingin?uencesoncognitiveandemotionalprocesses.

Mountingevidencesuggeststhatinappropriatestressresponsesactasatriggerformanymentalillnesses.Ithasbeenproposedthatglutamatereceptor-mediatedsynaptictransmissionthatcontrolsPFCneuronalactivityiscrucialforworkingmemoryInthisstudy,wesoughttodeterminewhetherrepeatedstressmightnegativelyin?uencePFC-mediatedcognitiveprocessesbydisturbingglutamatergicsignalinginjuvenileanimals第二頁(yè)，共三十五頁(yè)，編輯于2023年，星期日Repeatedrestraintstress:Juvenile(3-to4-week-old)SpragueDawleymaleratswereusedinthisstudy.Forrepeatedrestraintstress,ratswereplacedinair-accessiblecylindersfor2hrdaily(10:00a.m.to12:00p.m.)for5–7days.Thecontainersizewassimilartotheanimalsize,whichmadetheanimalalmostimmobileinthecontainer.第三頁(yè)，共三十五頁(yè)，編輯于2023年，星期日Results:Totesttheimpactofstressoncognitivefunctions,theymeasuredtherecognitionmemorytaskRU486:GRantagonist第四頁(yè)，共三十五頁(yè)，編輯于2023年，星期日ToexaminwhetherotherstressorscouldproduceasimilareffectRepeatedunpredictablestressRatsweresubjectedeachdaytotwostressorsthatwererandomlychosenfromsixdifferentstressors,includingforcedswim(RT,30min),elevatedplatform(30min),cagemovement(30min),lightsonovernight,immobilization(RT,1hr),andfoodandwaterdeprivationovernight.第五頁(yè)，共三十五頁(yè)，編輯于2023年，星期日Objectlocationtask:Totestthespeci?cityofthisstress-inducedmemoryde?cit,wealsosubjectedanimalstotheobjectlocationtask,aparadigmforthePFC-independentmemory第六頁(yè)，共三十五頁(yè)，編輯于2023年，星期日Openfieldtask:Incontrasttotheimpairedtemporalorderrecognitionmemory,ratsexposedtorepeatedrestraintstressshowednochangesinanxiety-relatedbehaviororlocomotiveactivity第七頁(yè)，共三十五頁(yè)，編輯于2023年，星期日TemporalOrderRecognitionMemoryTask:To?ndouttheonsetofthedetrimentaleffectsofstressoncognition,weexposedyoungmaleratstovariousdays(1,3,5and7)ofrestraintstress.第八頁(yè)，共三十五頁(yè)，編輯于2023年，星期日TemporalOrderRecognitionMemoryTask:TotestwhetherglutamatergictransmissioninPFCiscriticalfortheobjectrecognitionmemory,wegaveanimalsastereotaxicinjectionoftheNMDARantagonistAPVandAMPARantagonistCNQXtoPFCprelimbicregionsbilaterally.第九頁(yè)，共三十五頁(yè)，編輯于2023年，星期日TheconclusionoftheBehavioralTesting:Takentogether,itsuggeststhatrepeatedstresshasadetrimentaleffectonrecognitionmemory,whichmaybeduetothelossofglutamatergictransmissioninPFC.第十頁(yè)，共三十五頁(yè)，編輯于2023年，星期日TheElectrophysiologicalRecordings:To?ndouttheimpactofrepeatedstressonglutamatergictransmission,weexaminedtheinput/outputcurvesofAMPAR-andNMDAR-mediatedsynapticcurrents(EPSC)inPFCpyra-midalneuronsfromstressed,young(4-week-old)malerats.第十一頁(yè)，共三十五頁(yè)，編輯于2023年，星期日pairedpulseratio(PPR):Totestwhetherthereducedsynaptictransmissionbyre-peatedstressmayresultfromapresynapticmechanism,wemeasuredthepairedpulseratio(PPR)ofAMPAR-andNMDAR-EPSC.PPRwasnotdifferentincontrolversusstressedanimals,suggestingalackofgrosschangeinpresynapticfunction.第十二頁(yè)，共三十五頁(yè)，編輯于2023年，星期日miniatureEPSC(mEPSC):Tofurthercon?rmtheinvolvementofpostsynapticglutamatereceptors,wemeasuredminiatureEPSC(mEPSC),asynapticresponseresultingfromquantalreleaseofsingleglutamatevesicles,inPFCslices.第十三頁(yè)，共三十五頁(yè)，編輯于2023年，星期日Whole-cellioniccurrent:Moreover,wemeasuredwhole-cellioniccurrentelicitedbyAMPA(100mM)orNMDA(100mM)applicationinacutelydissociatedPFCneurons(apurepostsynapticpreparation).第十四頁(yè)，共三十五頁(yè)，編輯于2023年，星期日InjecttheGRantagonistRU486:SystemicinjectionsofRU486LocalinjectionsofRU486tothePFC第十五頁(yè)，共三十五頁(yè)，編輯于2023年，星期日Theralationshipwiththetimeofstress:Tounderstandthecomplexactionsofstresshormones,weexposedanimalstovariousdaysofrestraintstress.第十六頁(yè)，共三十五頁(yè)，編輯于2023年，星期日Totestthedifferentregions:Totesttheregionalspeci?cityoftheeffectofrepeatedstress,wealsoexaminedglutamatergictransmissioninstriatumandhippocampusfromyoungmalerats.第十七頁(yè)，共三十五頁(yè)，編輯于2023年，星期日BiochemicalMeasurementofSurfaceandTotalProteins:WeperformedwesternblottingandsurfacebiotinylationexperimentstodetectthetotalandsurfacelevelsofAMPARandNMDARsubunitsinPFCslicesfromstressed,young(4-week-old)malerats.第十八頁(yè)，共三十五頁(yè)，編輯于2023年，星期日Theamountoftheglutamaterecptors:第十九頁(yè)，共三十五頁(yè)，編輯于2023年，星期日InjecttheGRantagonistRU486:第二十頁(yè)，共三十五頁(yè)，編輯于2023年，星期日Totestthedifferentregions:Nosigni?cantchangeswerefoundinotherbrainareas,includingstriatumandhippocampus.第二十一頁(yè)，共三十五頁(yè)，編輯于2023年，星期日Theresultsinvitro:Wenextexaminedwhethertheeffectofrepeatedstressinvivomaybemimickedbycorticosterone(CORT)applicationinvitro.第二十二頁(yè)，共三十五頁(yè)，編輯于2023年，星期日InjecttheGRantagonistandMRantagonist:RU486:TheGRantagonist;RU28318:TheMRantagonist第二十三頁(yè)，共三十五頁(yè)，編輯于2023年，星期日Measuretheclusterdensity:第二十四頁(yè)，共三十五頁(yè)，編輯于2023年，星期日Ubiquitin/Proteasome-dependentDegradation:SincethetotallevelofNR1andGluR1wasreducedinrepeatedlystressedanimals,weexaminedwhetheritcouldbeduetothedecreasedsynthesisorincreaseddegradationofglutamatereceptors.第二十五頁(yè)，共三十五頁(yè)，編輯于2023年，星期日Ubiquitin/Proteasome-dependentDegradation:ThelevelofubiquitinatedGluR2,NR2A,orNR2Bsubunitsremainedunchanged.RepeatedstressalsofailedtoaltertheubiquitinationofSAP97(aGluR1bindingprotein)andPSD-95.第二十六頁(yè)，共三十五頁(yè)，編輯于2023年，星期日Testotherproteasomeinhibitor:MG132:proteasomeinhibitorLact:anotherproteasomeinhibitorChloro:generallysosomalenzymeinhibitorLeupeptin:lysosomalproteaseinhibitor11R-CS:membrane-permeablecalpainproteaseinhibitor第二十七頁(yè)，共三十五頁(yè)，編輯于2023年，星期日Testtheeffectofproteasomeinhibitor:第二十八頁(yè)，共三十五頁(yè)，編輯于2023年，星期日ShRNALentiviralKnockdown:Giventheroleofproteasome-dependentdegradationofgluta-matereceptorsinthedetrimentaleffectsofrepeatedstress,wewouldliketoknowwhichE3ubiquitinligasesarepotentiallyinvolvedinthestress-inducedubiquitinationofGluR1andNR1subunitsinPFC.Nedd4-1:anE3ligasenecessaryforGluR1ubiquitinationinresponsetotheagonistAMPA.Fbx2:anE3ligaseintheERthatubiquitinatesNR1subunits.第二十九頁(yè)，共三十五頁(yè)，編輯于2023年，星期日ShRNALentiviralKnockdowninvitro:第三十頁(yè)，共三十五頁(yè)，編輯于2023年，星期日ShRNALentiviralKnockdowninvivo:第三十一頁(yè)，共三十五頁(yè)，編輯于2023年，星期日