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文檔簡介
天津蘭博實驗儀器設備LabAlliace高效液相色譜系統(tǒng)培訓教材一、液相色譜系統(tǒng)的基本原理1、色譜法分類按兩相的物理狀態(tài)可分為:氣相色譜法(GC)和液相色譜法(LC)。氣相色譜法適用于分離揮發(fā)性化合物。GC根據(jù)固定相不同又可分為氣固色譜法(GSC)和氣液色譜法(GLC),其中以GLC應用最廣。液相色譜法適用于分離低揮發(fā)性或非揮發(fā)性、熱穩(wěn)定性差的物質(zhì)。LC同樣可分為液固色譜法(LSC)和液液色譜法(LLC)。此外還有超臨界流體色譜法(SFC),它以超臨界流體(界于氣體和液體之間的一種物相)為流動相(常用CO2),因其擴散系數(shù)大,能很快達到平衡,故分析時間短,特別適用于手性化合物的拆分。按原理分為吸附色譜法(AC)、分配色譜法(DC)、離子交換色譜法(IEC)、排阻色譜法(EC,又稱分子篩、凝膠過濾(GFC)、凝膠滲透色譜法(GPC)和親和色譜法。(此外還有電泳)。按操作形式可分為紙色譜法(PC)、薄層色譜法(TLC)、柱色譜法。2、液相色譜理論發(fā)展簡況色譜法的分離原理是:溶于流動相(mobilephase)中的各組分經(jīng)過固定相時,由于與固定相(stationaryphase)發(fā)生作用(吸附、分配、離子吸引、排阻、親和)的大小、強弱不同,在固定相中滯留時間不同,從而先后從固定相中流出。又稱為色層法、層析法。色譜法最早是由俄國植物學家茨維特(Tswett)在1906年研究用碳酸鈣分離植物色素時發(fā)現(xiàn)的,色譜法(Chromatography)因之得名。后來在此基礎上發(fā)展出紙色譜法、薄層色譜法、氣相色譜法、液相色譜法。液相色譜法開始階段是用大直徑的玻璃管柱在室溫和常壓下用液位差輸送流動相,稱為經(jīng)典液相色譜法,此方法柱效低、時間長(常有幾個小時)。高效液相色譜法(HighperformanceLiquidChromatography,HPLC)是在經(jīng)典液相色譜法的基礎上,于60年代后期引入了氣相色譜理論而迅速發(fā)展起來的。它與經(jīng)典液相色譜法的區(qū)別是填料顆粒小而均勻,小顆粒具有高柱效,但會引起高阻力,需用高壓輸送流動相,故又稱高壓液相色譜法(HighPressureLiquidChromatography,HPLC)。又因分析速度快而稱為高速液相色譜法(HighSpeedLiquidChromatography,HSLP)。也稱現(xiàn)代液相色譜。3、HPLC的特點和優(yōu)點HPLC有以下特點:高壓—壓力可達150~300kg/cm2。色譜柱每米降壓為75kg/cm2以上。高速—流速為0.1~100.0ml/min。高效—可達5000塔板每米。在一根柱中同時分離成份可達100種。高靈敏度—紫外檢測器靈敏度可達0.01ng。同時消耗樣品少。HPLC與經(jīng)典液相色譜相比有以下優(yōu)點:速度快—通常分析一個樣品在15~30min,有些樣品甚至在5min內(nèi)即可完成。泊分辨霜率高潮—可圾選擇蜘固定涌相和畫流動芬相以揪達到御最佳午分離應效果參。特靈敏傷度高兄—紫穴外檢尊測器享可達義0.煙01聰ng殿,熒巖光和撿電化版學檢計測器絞可達柴0.父1p躁g。奪柱子飲可反臥復使此用—需用一認根色摧譜柱紅可分降離不淘同的障化合為物。劑樣品依量少鋤,容朋易回若收—差樣品渠經(jīng)過俊色譜展柱后訊不被泄破壞霉,可會以收洋集單蠟一組解分或還做制掏備。窄4且、慕高效饒液相綿色譜捆分離更原理勢高效朵液相版色譜堂法按它分離淹機制客的不聽同分養(yǎng)為液鄙固吸濱附色虧譜法炕、液爸液分信配色禍譜法協(xié)(正漂相與評反相嘗)、扣離子沸交換伴色譜揭法、嘆離子更對色材譜法夸及分劍子排教阻色窗譜法趕。骨a肉.液蓮固色教譜法摟使械用固欣體吸愈附劑器,被明分離條組分邪在色槽譜柱爸上分部離原必理是暢根據(jù)詞固定曉相對成組分悲吸附伏力大購小不伯同而短分離涼。分疼離過耗程是說一個銷吸附因-解廁吸附夸的平熊衡過迷程。搬常用禁的吸秤附劑抬為硅撫膠或勁氧化四鋁,仔粒度底5~貪10機μm鑰。適礎用于秀分離任分子潮量2誰00宵~1通00濁0的亡組分山,大赴多數(shù)訴用于蘭非離福子型掠化合贊物,扒離子謀型化涌合物妥易產(chǎn)項生拖餐尾。濾常用含于分攔離同膛分異伯構體策。歲b儲.液匯液色艱譜法槽使竿用將尋特定葬的液閑態(tài)物監(jiān)質(zhì)涂觀于擔劇體表批面,描或化擴學鍵碗合于縮擔體污表面悟而形尊成的暫固定節(jié)相,壤分離蹦原理當是根擾據(jù)被密分離亂的組牙分在犧流動企相和補固定腐相中牙溶解鞏度不拐同而隔分離醋。分萄離過積程是仿一個疫分配抹平衡舉過程栗。鈔涂布裹式固冠定相索應具泉有良搏好的同惰性總;流腰動相穿必須佛預先幸用固知定相略飽和頌,以繼減少頑固定物相從鉤擔體逮表面脊流失泉;溫落度的胞變化距和不射同批地號流錄動相指的區(qū)覺別常獻引起月柱子水的變火化;賊另外取在流條動相攜中存夢在的場固定蒙相也邀使樣示品的殖分離砍和收愿集復冰雜化像。由梨于涂伶布式體固定勸相很針難避披免固捎定液斥流失傭,現(xiàn)集在已擋很少異采用磨?,F(xiàn)千在多劍采用題的是英化學猜鍵合足固定冠相,柴如C雨18慢、C然8參、氨獸基柱史、氰戒基柱顧和苯化基柱拌。接液液慈色譜虛法按轎固定溝相和幸流動座相的寧極性或不同絕可分億為正影相色擾譜法姥(N綢PC牢)和傲反相做色譜如法(紀RP宋C)度。循正相撒色譜憶法極采用象極性者固定棵相(冒如聚頓乙二愚醇、飄氨基圖與腈湊基鍵封合相休);賢流動離相為墳相對誘非極任性的鞭疏水仔性溶終劑(選烷烴衛(wèi)類如源正已功烷、鑼環(huán)已肅烷)惡,常道加入配乙醇勞、異鞋丙醇即、四爭氫呋赤喃、仇三氯興甲烷撥等以活調(diào)節(jié)紗組分邊的保等留時慧間。柜常用想于分緩離中合等極間性和面極性動較強尸的化登合物德(如寺酚類扣、胺免類、飯羰基榴類及煙氨基揀酸類椒等)唱。子反相濟色譜輝法內(nèi)一般宅用非蔽極性塑固定若相(硬如C謀18喊、C靠8貌);許流動焰相為績水或宣緩沖泥液,乒常加捐入甲種醇、促乙腈兇、異提丙醇漲、丙鑒酮、牲四氫彈呋喃豪等與老水互宮溶的贊有機龜溶劑鈔以調(diào)珍節(jié)保椅留時創(chuàng)間。淘適用冊于分播離非霜極性蹤和極座性較樓弱的折化合蒙物。也RP槐C在券現(xiàn)代糊液相辜色譜侄中應抹用最夫為廣彼泛,蕩據(jù)統(tǒng)坦計,躺它占棒整個汽HP獻LC鋸應用沒的8孟0%倒左右尸。依隨著庸柱填掀料的緣快速糞發(fā)展怒,反聯(lián)相色孟譜法綠的應掠用范者圍逐訓漸擴醒大,辱現(xiàn)已想應用浪于某忍些無眨機樣桂品或砍易解最離樣椒品的駝分析勢。為反控制傷樣品項在分茅析過搜程的橋解離命,常道用緩追沖液掃控制哪流動碑相的煙pH熄值。輪但需謎要注植意的街是,忙C悉18鋸和C耽8傅使用釋的p晃H值咱通常獅為2鏡.5倍~7掩.5熱(2蓄~8蚊),茅太高廚的p交H值紙會使壘硅膠曠溶解櫻,太泥低的級pH控值會雄使鍵治合的砌烷基夾脫落集。有某報告纖新商曲品柱供可在畜pH貝1悟.5焰~1臥0范惕圍操觸作。余正相崖色譜算法與顧反相雄色譜齊法比茶較表旬正相拔色譜扎法炎宋綁派反相流色譜采法淚固定票相極效性尋高~茂中辭柔歐御梳脈享剛痰寸攀胸中~跳低抗流動瞞相極采性柏低~閘中咐京維捐拔弄致慧舍蛾敞弟中~賣高切組分捷洗脫耀次序逐極性酸小先臥洗出抱侮蛇敗穴煤這棵遲極響性大館先洗黃出狠從上泉表可仇看出鍛,當顏極性鞋為中融等時依正相皇色譜包法與撒反相咸色譜張法沒淡有明艇顯的濕界線控(如淚氨基氏鍵合吵固定嚷相)彼。辣c論.離神子交用換色膠譜法側(cè)固拿定相牌是離黑子交危換樹霸脂,漏常用奪苯乙廉烯與且二乙宏烯交爭聯(lián)形愚成的酬聚合介物骨患架,床在表價面未腦端芳念環(huán)上膨接上恢羧基逝、磺權酸基競(稱純陽離于子交誕換樹修脂)娛或季花氨基外(陰信離子慎交換速樹脂富)。雕被分疤離組戰(zhàn)分在融色譜也柱上碰分離洪原理效是樹丙脂上航可電額離離垂子與撤流動籍相中鉛具有話相同畜電荷斃的離活子及篇被測輕組分量的離抱子進資行可顛逆交踏換,才根據(jù)孟各離悠子與羅離子喂交換裙基團杏具有翻不同躍的電鼠荷吸荷引力飲而分糖離。庫緩沖巴液常煤用作構離子禿交換賣色譜宮的流童動相臺。被胸分離嚇組分姜在離釣子交月?lián)Q柱成中的先保留爪時間著除跟博組分晃離子澇與樹曾脂上誦的離絕子交酬換基悟團作忍用強噸弱有滾關外之,它軟還受許流動擾相的保pH哀值和運離子廁強度懂影響叼。p憂H值轟可改自變化撤合物驢的解愧離程奪度,干進而雖影響巖其與朝固定吃相的鋤作用攔。流匹動相銜的鹽量濃度含大,盯則離忍子強刺度高逢,不微利于蹦樣品未的解譜離,避導致宴樣品知較快總流出俗。貿(mào)離子矛交換斑色譜飲法主腸要用賣于分旬析有圣機酸蜂、氨百基酸相、多存肽及集核酸聲。淋d賽.離戒子對沸色譜鋪法豆又稱商偶離失子色再譜法斥,是稍液液霞色譜啄法的治分支墻。它番是根量據(jù)被責測組露分離酬子與霧離子告對試元劑離照子形夫成中迎性的撇離子冶對化衰合物椅后,妹在非除極性拜固定讀相中首溶解卷度增德大,瞇從而布使其煤分離偷效果今改善控。主壓要用皆于分左析離安子強鍛度大態(tài)的酸疤堿物淡質(zhì)。袍分析乘堿性臨物質(zhì)娛常用語的離誘子對涉試劑林為烷剪基磺俊酸鹽蹤,如發(fā)戊烷牲磺酸師鈉、靜辛烷蛋磺酸煤鈉等擺。另沖外高織氯酸必、三套氟乙欠酸也蔑可與之多種刊堿性籌樣品僵形成叫很強耗的離島子對造。嘉分析票酸性戴物質(zhì)扮常用歉四丁悲基季廢銨鹽疏,如熔四丁焰基溴克化銨春、四唇丁基體銨磷獨酸鹽田。蝴離子牢對色修譜法態(tài)常用丑OD披S柱眠(即音C思18秧)儲,流峰動相錦為甲皺醇-曉水或記乙腈隸-水松,水窄中加席入3瞞~1非0閣mo蠶l/后L的符離子羞對試約劑,占在一首定的研pH皂值范遭圍內(nèi)顆進行五分離算。被封測組掙分保喪時間庭與離構子對縱性質(zhì)驚、濃番度、搜流動浩相組翁成及甚其p正H值泉、離乏子強構度有鍵關。吉e覺.排等阻色孔譜法劉固川定相撲是有灰一定被孔徑針的多鐘孔性禿填料雷,流嘗動相廳是可旬以溶堵解樣商品的班溶劑熟。小兆分子頂量的計化合削物可煤以進向入孔歸中,武滯留稱時間幼長;劈大分善子量望的化掏合物粱不能歪進入斤孔中競,直慶接隨狗流動杜相流甘出。懲它利悟用分抹子篩圓對分怒子量倉大小緞不同指的各紐組分升排阻備能力拌的差其異而元完成土分離塘。常輛用于國分離鬧高分君子化約合物鐘,如截組織黑提取獻物、弦多肽疫、蛋照白質(zhì)傾、核翻酸等聯(lián)。盡5、甘固定統(tǒng)相和哥流動畜相它在色譜譜分句析中族,如闖何選蜓擇最兩佳的兆色譜澇條件站以實誦現(xiàn)最虹理想鬼分離秒,是棗色譜峽工作調(diào)者的工重要欣工作美,也媽是用餅計算悄機實愉現(xiàn)H瞧PL古C分困析方界法建帶立和符優(yōu)化刺的任咱務之傅一。練本貫節(jié)督著重箭討論城填料然基質(zhì)役、化濾學鍵修合固哨定相強和流距動相兔的性額質(zhì)及活其選道擇?;ⅲ?抖)穴基質(zhì)就(擔黃體)圍HP釘LC身填料坡可以盜是陶覺瓷性章質(zhì)的標無機僅物基透質(zhì),繡也可惠以是絹有機削聚合共物基竹質(zhì)。亡無機愧物基遼質(zhì)主研要是汽硅膠帝和氧朵化鋁缸。無緒機物仿基質(zhì)怖剛性倘大,膛在溶忠劑中摘不容蒸易膨睛脹。艷有機故聚合理物基龍質(zhì)主蚊要有壽交聯(lián)繁苯乙粒烯-表二乙朝烯苯猶、聚桶甲基獨丙烯注酸酯笛。有獸機聚串合物舅基質(zhì)挖剛性盯小、冶易壓擊縮,襲溶劑腐或溶杰質(zhì)容膜易滲嫩入有煉機基貴質(zhì)中援,導脾致填催料顆僑粒膨訴脹,四結(jié)果湯減少零傳質(zhì)炕,最濾終使汪柱效賢降低渠?;預徑基質(zhì)泳的種信類間1)首硅膠椒硅膠銅是H風PL枯C填筒料中退最普倉遍的半基質(zhì)刊。除早具有花高強縣度外澡,還闖提供激一個表表面街,可線以通堅過成摟熟的技硅烷兩化技陽術鍵抱合上秩各種位配基輛,制奇成反望相、物離子諸交換查、疏陜水作棚用、蝕親水豎作用貝或分練子排合阻色寸譜用鑒填料賤。硅阻膠基館質(zhì)填鳳料適惠用于系廣泛歌的極報性和駝非極限性溶睡劑。鍵缺點勉是在現(xiàn)堿性譯水溶闖性流另動相鼠中不懶穩(wěn)定險。通酸常,逗硅膠牧基質(zhì)跳的填庫料推友薦的估常規(guī)饑分析形pH懼范圍噸為2際~8鞏。梅硅膠巴的主形要性承能參只數(shù)有潔:脖①平危均粒亡度及貢其分錯布。蘋②平鑰均孔偶徑及乘其分族布。維與比犯表面卵積成扔反比派。殼③比箏表面勒積。描在液荒固吸峽附色島譜法乓中,挪硅膠肉的比訴表面高積越阻大,疫溶質(zhì)蘇的k問值越帽大。臉④含荒碳量聲及表茂面覆屬蓋度北(率逼)。蔬在反闊相色瓣譜法特中,俗含碳可量越潛大,毅溶質(zhì)立的k倍值越緒大。鋤⑤含納水量璃及表猛面活民性??试谝簬X固吸肢附色處譜法騙中,餅硅膠撐的含泊水量烈越小笑,其欠表面茫硅醇尸基的泰活性刊越強株,對辦溶質(zhì)密的吸據(jù)附作那用越溜大。度⑥端給基封口尾。洽在反倍相色確譜法醉中,三主要作影響凳堿性驢化合供物的購峰形妻。俱⑦幾離何形筆狀。殖硅膠脈可分雀為無諷定形票全多醫(yī)孔硅帳膠和拾球形葬全多砌孔硅雄膠,醬前者禾價格惰較便村宜,蹲缺點絡是渦割流擴宮散項束及柱彼滲透繞性差分;后戶者無炕此缺慎點。隸⑧硅崖膠純拔度。剩對稱叛柱填鑄料使鹽用高膀純度非硅膠推,柱憶效高線,壽要命長雷,堿渾性成謝份不辨拖尾攔。魔2)辦氧化摧鋁慮具有悶與硅茫膠相己同的全良好芳物理夕性質(zhì)錘,也默能耐后較大耽的p團H范輔圍。拋它也亂是剛速性的芳,不辛會在護溶劑合中收倍縮或莫膨脹晨。但制與硅踐膠不貪同的爸是,危氧化織鋁鍵掩合相餃在水姑性流落動相康中不磚穩(wěn)定頌。不懂過現(xiàn)梅在已豈經(jīng)出惡現(xiàn)了蝕在水蜻相中頓穩(wěn)定琴的氧揪化鋁濃鍵合尚相,撫并顯約示出這優(yōu)秀驅(qū)的p駱H穩(wěn)彈定性乓。取3)迫聚合伴物帶以高雕交聯(lián)敏度的肯苯乙挺烯-域二乙派烯苯澤或聚倉甲基芝丙烯愛酸酯胞為基遍質(zhì)的極填料釀是用判于普復通壓額力下漁的H吳PL陷C,芽它們忌的壓瑞力限帆度比資無機概填料高低。牽苯乙姨烯-騾二乙瓦烯苯離基質(zhì)看疏水踢性強寄。使陪用任睛何流診動相需,在爽整個咽pH淋范圍勞內(nèi)穩(wěn)果定,嘉可以丙用N退aO詞H或雹強堿襪來清獲洗色稻譜柱它。甲多基丙淚烯酸館酯基忽質(zhì)本殼質(zhì)上粘比苯蚊乙烯李-二解乙烯輩苯疏明水性激更強詢,但聚它可森以通赤過適先當?shù)娜喂δ軙兓抟帮椬償爻捎H登水性餓的。少這種吳基質(zhì)使不如金苯乙殃烯-霧二乙固烯苯態(tài)那樣局耐酸弓堿,以但也炎可以率承受額在p童H1切3下絮反復拿沖洗公。桑所有無聚合挪物基器質(zhì)在笑流動棄相發(fā)念生變醫(yī)化時負都會挽出現(xiàn)勉膨脹警或收攀縮。明用于球HP集LC粒的高喚交聯(lián)季度聚篇合物杏填料泉,其繪膨脹非和收峰縮要御有限帝制。莖溶劑見或小脫分子嚇容易坡滲入嘴聚合圣物基劍質(zhì)中帥,因峰為小洪分子好在聚圾合物深基質(zhì)沸中的退傳質(zhì)私比在罩陶瓷受性基茄質(zhì)中集慢,惹所以贏造成欺小分拘子在百這種跌基質(zhì)階中柱闖效低市。對火于大逃分子傲像蛋淺白質(zhì)西或合烘成的銜高聚濕物,昏聚合的物基坡質(zhì)的爭效能柄比得鋤上陶哀瓷性僚基質(zhì)待。因騎此,練聚合授物基窄質(zhì)廣炎泛用出于分準離大僚分子耍物質(zhì)教。亦B鎖.基魯質(zhì)的號選擇萍硅膠孟基質(zhì)耗的填成料被回用于腔大部津分的溜HP臟LC級分析連,尤鞋其是遺小分姨子量栽的被集分析糖物,扣聚合吸物填盲料用廚于大暫分子柴量的宿被分棍析物亦質(zhì),公主要梳用來爛制成葛分子貿(mào)排阻社和離挺子交醋換柱公。澡硅膠至氧化速鋁蜓苯乙搏烯-恨二乙泡烯苯探甲基拍丙烯交酸酯出耐有禿機溶連劑踢++撫+稻++鐵+蘇++欄++推適用領pH被范圍灶+項++槳+汽++佛++宴抗膨據(jù)脹/價收縮仁++概+覽++雄+甲+疊+厲耐壓覆++凍+看++浴+退++準+賞表面驚化學督性質(zhì)勻++境+捆+頌++肝++終+述效能貝++影+君++陸+輔+辨注:壩++罵+好勸++豆一般酬+差習(2總)曉化學巴鍵合耳固定罩相銅將有奸機官傲能團撿通過證化學字反應社共價摔鍵合步到硅掙膠表汗面的崇游離到羥基粒上而姐形成職的固惰定相款稱為效化學嘆鍵合仿相。嗽這類犯固定肌相的守突出粉特點太是耐志溶劑伏沖洗翁,并吃且可驅(qū)以通計過改秋變鍵年合相種有機缺官能繁團的謠類型黎來改總變分徒離的宴選擇關性。齒A功.鍵旨合相上的性獸質(zhì)舅目前雨,化棵學鍵薄合相滲廣泛堂采用舉微粒震多孔請硅膠金為基鼓體,鳴用烷仁烴二炮甲基興氯硅適烷或欲烷氧暈基硅尋烷與默硅膠趴表面僵的游圖離硅烏醇基賓反應監(jiān),形尾成S存i-意O-承Si抄-C零鍵形鼓的單荒分子皇膜而忠制得杰。硅供膠表廟面的累硅醇姜基密毅度約骨為5救個/殃nm申2,詳由于違空間煌位阻味效應秩(不虜可能慌將較管大的曠有機股官能輛團鍵托合到奔全部當硅醇澤基上擊)和弊其它回因素且的影拖響,政使得咸大約著有4嘆0~隙50喪%的霉硅醇屯基未灘反應偏。購殘余帥的硅滾醇基蠶對鍵仁合相鍋的性疤能有征很大五影響米,特統(tǒng)別是弦對非圾極性壩鍵合徒相,慈它可碼以減浪小鍵菠合相清表面宋的疏技水性縣,對驅(qū)極性針溶質(zhì)急(特議別是任堿性龜化合勢物)阿產(chǎn)生價次級攝化學其吸附凱,從意而使泳保留喚機制蝦復雜俯化(椅使溶撿質(zhì)在險兩相盡間的些平衡深速度篩減慢永,降苦低了憂鍵合料相填鋤料的挖穩(wěn)定雞性。因結(jié)果豬使堿醒性組紋分的傘峰形庭拖尾姐)。陸為盡瞞量減耽少殘徑余硅慕醇基朵,一漂般在拉鍵合霉反應湯后,燥要用厘三甲畢基氯風硅烷持(T察MC折S)候等進屈行鈍比化處洲理,砍稱封報端(灘或稱推封尾北、封專頂,希en勒d-緩ca慮pp殊in蜜g)緒,以濕提高之鍵合秋相的澤穩(wěn)定薪性。創(chuàng)另一粥方面料,也暑有些彎OD既S填矩料是閣不封蘋尾的寶,以誕使其禽與水靜系流斑動相樹有更宇好的列“濕潛潤”右性能輝。竿由于惑不同準生產(chǎn)鎖廠家就所用聾的硅煉膠、共硅烷云化試念劑和據(jù)反應犬條件積不同攻,因鎖此具脅有相忍同鍵抓合基罪團的思鍵合令相,授其表杏面有疤機官饅能團禽的鍵址合量胡往往蛾差別井很大網(wǎng),使油其產(chǎn)沃品性眨能有粥很大似的不河同??劓I合哄相的局鍵合唐量常觸用含君碳量式(C監(jiān)%)姑來表馳示,嗎也可免以用貿(mào)覆蓋伸度來釋表示僚。所片謂覆判蓋度刺是指橡參與僅反應香的硅遲醇基干數(shù)目企占硅習膠表拆面硅俊醇基弟總數(shù)藥的比傍例。趨pH您值對何以硅蓬膠為胸基質(zhì)固的鍵女合相彼的穩(wěn)利定性肅有很傷大的踐影響秩,一簽般來舊說,便硅膠采鍵合辣相應牌在p槳H=還2~談8的瘋介質(zhì)窯中使稀用。瓣B餃.鍵穩(wěn)合相慣的種躁類灑化學克鍵合棄相按贏鍵合謊官能去團的誘極性呼分為彩極性忘和非守極性拼鍵合矮相兩地種。折常用豪的極筐性鍵鞠合相辦主要學有氰件基(裕-C禁N)外、氨睡基(裝-N瓶H2繪)和杠二醇茂基(抵DI叉OL皂)鍵票合相屆。極麗性鍵柔合相屈常用樣作正鄰相色司譜,臉混合胳物在頃極性稈鍵合住相上紙的分躍離主予要是奏基于彎極性承鍵合持基團那與溶佳質(zhì)分朋子間詢的氫腹鍵作錦用,盯極性滾強的遺組分科保留橡值較感大。妹極性倘鍵合降相有捏時也況可作垂反相撥色譜泳的固促定相氧。霉常用彈的非忌極性煤鍵合壁相主做要有捕各種撫烷基目(C靜1~鋤C1食8)贊和苯奉基、欠苯甲翁基等著,以色C1社8應柳用最天廣。付非極淺性鍵伙合相啄的烷隙基鏈方長對刷樣品警容量如、溶派質(zhì)的互保留惠值和熟分離胸選擇喂性都第有影象響,頌一般矮來說效,樣炭品容鐘量隨蛾烷基繼鏈長替增加怕而增朵大,廣且長睛鏈烷面基可川使溶鏈質(zhì)的稼保留疊值增桐大,綁并常叉常可航改善乘分離暈的選遠擇性梅;但頑短鏈廚烷基賤鍵合免相具魚有較峽高的書覆蓋俘度,紅分離米極性市化合詢物時鮮可得陵到對德稱性闖較好茄的色柳譜峰浮。苯留基鍵基合相越與短頂鏈烷度基鍵引合相昌的性發(fā)質(zhì)相樓似??淞硗饪綜1蒸8柱智穩(wěn)定樓性較柜高,鼓這是森由于扛長的般烷基卻鏈保療護了贏硅膠表基質(zhì)慣的緣禾故,辮但C荒18哥基團充空間研體積廢較大眨,使彎有效尺孔徑蠶變小幼,分栗離大蛾分子佛化合冒物時擱柱效爭較低譜。冒C輛.固聞定相間的選甲擇禍分離燃中等鼻極性搜和極逃性較院強的畢化合籃物可課選擇叉極性壺鍵合訴相。脆氰基睬鍵合躍相對艷雙鍵掀異構燈體或滿含雙仗鍵數(shù)獨不等針的環(huán)斑狀化問合物巾的分頃離有稈較好挽的選坐擇性予。氨啦基鍵寬合相秧具有巧較強例的氫哀鍵結(jié)犁合能照力,京對某落些多擊官能缸團化制合物話如甾乘體、脊強心她甙等啄有較怖好的腳分離浴能力??;氨攝基鍵贈合相朋上的朽氨基修能與剖糖類益分子滔中的直羥基馳產(chǎn)生殃選擇日性相封互作守用,辣故被普廣泛蓮用于吉糖類宋的分述析,餃但它驚不能未用于煌分離命羰基住化合猾物,涂如甾困酮、堂還原植糖等廊,因印為它吐們之緞間會誘發(fā)生糧反應醋生成脊Sc萬hi扯ff纏堿潔。二臣醇基股鍵合滲相適掩用于幫分離宏有機甚酸、瀉甾體盡和蛋咸白質(zhì)悼。特分離胃非極潤性和客極性吐較弱龜?shù)幕魏衔锢⒖蛇x頂擇非膏極性燭鍵合宴相。艘利用熔特殊反的反饑相色益譜技爭術,困例如殖反相秘離子鑒抑制負技術京和反丸相離姿子對閘色譜合法等婦,非歉極性司鍵合父相也稠可用我于分旬離離葛子型莫或可診離子展化的血化合魔物。姻OD販S(嶼O被ct期ad染ec鑒yl穴s們il絡an野e)臉是應宅用最保為廣森泛的告非極束性鍵窩合相傅,它幫對各快種類飼型的控化合號物都表有很玻強的俘適應短能力帆。短許鏈烷遠基鍵鑼合相默能用雕于極加性化浴合物姓的分胳離,搏而苯槍基鍵滋合相柱適用烈于分躬離芳農(nóng)香化岸合物拍。壯另外痰,美煩國藥果典對田色譜煌法規(guī)童定較蹤嚴,迫它規(guī)煤定了橫柱的殃長度讓,填運料的開種類蓮和粒班度,哪填料委分類傭也較桶詳細率,這背樣使佩色譜機圖易跳于重呢現(xiàn);秘而中莊國藥廟典僅志規(guī)定憂填料束種類癢,未思規(guī)定遞柱的便長度榴和粒遠度,慢這使種檢驗贈人員猶難于綢重現(xiàn)之實驗省,在熔某些腥情況般下還斃浪費捷時間附和試縣劑。電(3震)側(cè)、流添動相刺A允.流炸動相凡的性衫質(zhì)要沙求腳一個握理想賞的液厘相色惠譜流拋動相習溶劑拉應具枕有低提粘度途、與鄰檢測翁器兼榴容性叔好、悉易于振得到杜純品況和低洗毒性補等特疾征。帽選好序填料慌(固潤定相紗)后蹲,強喜溶劑奏使溶存質(zhì)在宅填料舉表面爭的吸銜附減太少,旁相應莫的容逗量因值子k禍降低術;而拆較弱則的溶奮劑使勢溶質(zhì)燕在填售料表截面吸頑附增希加,正相應聲的容防量因希子k敢升高稱。因圓此,臺k值嫌是流徹動相減組成大的函易數(shù)。抬塔板致數(shù)N理一般裙與流哭動相紋的粘揚度成兇反比描。所凡以選傷擇流應動相單時應誠考慮舅以下瞞幾個絕方面都:松①流宴動相也應不溉改變育填料踏的任漂何性米質(zhì)。際低交竄聯(lián)度爹的離叫子交喝換樹嘴脂和道排阻敞色譜丑填料預有時輪遇到示某些貼有機責相會波溶脹榨或收喇縮,曾從而豪改變岡色譜悄柱填仔床的少性質(zhì)根。堿箭性流洋動相揀不能烤用于籃硅膠遮柱系貝統(tǒng)。冰酸性吧流動味相不睬能用錘于氧育化鋁柔、氧敬化鎂稱等吸惠附劑箭的柱么系統(tǒng)拳。并②純暗度。固色譜痛柱的湯壽命霧與大盈量流豎動相響通過續(xù)有關播,特捷別是驚當溶陳劑所需含雜秤質(zhì)在貢柱上擔積累局時。糞③必協(xié)須與話檢測秀器匹赴配。素使用翻UV謙檢測渣器時箱,所仆用流樸動相惕在檢責測波淘長下季應沒吐有吸勢收,搏或吸究收很目小。卸當使成用示末差折有光檢混測器米時,膨應選懼擇折濾光系鎮(zhèn)數(shù)與組樣品贈差別匆較大顯的溶殖劑作諷流動鎮(zhèn)相,跪以提庸高靈廁敏度傅。校④粘孤度要悄低(口應<羞2c跪p)際。高倒粘度鞠溶劑群會影正響溶嚼質(zhì)的魚擴散疏、傳歐質(zhì),伍降低僅柱效釋,還答會使除柱壓錘降增鳳加,章使分梢離時竟間延啟長。梢最好趙選擇授沸點恥在您10框0℃喂以下將的流啦動相浴。將⑤對賠樣品場的溶幕解度驅(qū)要適屑宜。失如果柴溶解赴度欠愈佳,掀樣品察會在訓柱頭夾沉淀報,不淡但影駝響了驅(qū)純化膠分離全,且遞會使駱柱子施惡化槍。紛⑥樣見品易獵于回燭收。傍應選邪用揮巧發(fā)性烈溶劑筒。雜B崗.流匹動相語的選牽擇吐在化擾學鍵承合相宅色譜幕法中劃,溶昨劑的遇洗脫市能力復直接冊與它透的極兆性相泰關。損在正渡相色兇譜中悠,溶技劑的領強度糾隨極霜性的釀增強倉而增貫加;性在反辣相色斤譜中喊,溶魄劑的援強度旁隨極怖性的手增強前而減跨弱。程正相暈色譜乳的流彩動相西通常既采用衛(wèi)烷烴索加適比量極響性調(diào)擠整劑肚。稀反相童色譜濱的流費動相純通常挺以水跳作基似礎溶斬劑,帆再加倒入一戴定量價的能毀與水申互溶鏡的極海性調(diào)留整劑起,如麗甲醇蠟、乙觀腈、系四氫亂呋喃窗等。恭極性度調(diào)整斥劑的免性質(zhì)匆及其幣所占喉比例戚對溶敲質(zhì)的紫保留貍值和指分離悄選擇晶性有洽顯著低影響上。一繁般情焰況下廢,甲欺醇-逐水系風統(tǒng)已頑能滿孤足多炸數(shù)樣畝品的亮分離深要求艙,且啊流動欄相粘轟度小違、價漢格低膨,是夾反相朵色譜板最常燃用的子流動績相。謊但S熄ny烘de券r則問推薦墻采用禾乙腈避-水說系統(tǒng)鋤做初盜始實哭驗,勻因為掀與甲段醇相桿比,挺乙腈駐的溶云劑強傍度較柱高且接粘度夠較小應,并疏可滿窩足在啦紫外躬18曠5~姥20最5n匪m處于檢測蠻的要凍求,祖因此踐,綜零合來箭看,改乙腈析-水馳系統(tǒng)紙要優(yōu)直于甲蓋醇-尋水系丹統(tǒng)。并在分梨離含喜極性群差別晝較大點的多與組分伙樣品僻時,木為了由使各棕組分架均有塵合適辣的k義值并濁分離冒良好丟,也駛需采更用梯笨度洗倉脫技萍術。它參考滲資料解:吃乙腈旺的毒賄性是舒甲醇坑的5郊倍,搬是乙興醇的勞25兔倍。按價格賢是甲完醇的腸6~平7倍攻。眉反相騾色譜益中,棵如果堪要在議相同溉的時填間內(nèi)享分離必同一殖組樣旅品,添甲醇柏/水估作為倉沖洗推劑時棗其沖灑洗強茅度配蠟比與殿乙腈畝/水駐或四襖氫呋吐喃/思水的瑞沖洗田強度絕配比烈有如畏下關欠系:炭C眾乙腈磁=漁0.場32頓C販2元甲醇汗+即0.距57朗C臭甲醇數(shù)C斬四氫攪呋喃濃=訂0.勢66鼓C努甲醇唯C為棉不同懶有機神溶劑璃與水滴混合霧的體煌積百借分含楚量。醬10藝0%修甲醇仍的沖脾洗強談度相遲當于具89莖%的惑乙腈續(xù)/水往或6季6%義的四蘆氫呋殺喃/峽水的控沖洗泄強度爐。抓C潤.流斃動相愚的p足H值脾采用樂反相司色譜肝法分旺離弱俗酸(駛3≤份pK禮a≤枕7)四或弱遵堿(冶7≤腔pK寺a≤偉8)怨樣品劫時,芬通過鉗調(diào)節(jié)煩流動摘相的速pH支值,倚以抑輪制樣與品組餅分的指解離悲,增籍加組護分在寺固定您相上稻的?;瘟簦⒏南品逭夹蔚膽]技術確稱為忍反相燕離子尾抑制村技術塵。對虹于弱括酸,號流動烈相的榨pH廟值越境小,亮組分綁的k棍值越梯大,援當p蜻H值組遠遠犯小于墳弱酸點的p歸Ka效值時押,弱尼酸主頸要以谷分子觀形式悼存在艱;對健弱堿至,情掃況相麥反。救分析灶弱酸跌樣品覺時,落通常半在流鹿動相蔽中加輸入少癥量弱憲酸,杠常用雖50芳mm賭ol潑/L由磷酸爽鹽緩旋沖液境和1餃%醋調(diào)酸溶格液;牙分析掉弱堿兵樣品神時,集通常勝在流廚動相止中加藥入少情量弱升堿,廣常用俗50關mm上ol臣/L游磷酸百鹽緩繳沖液深和3把0m肯mo掌l/女L三筒乙胺豐溶液兵。撫注:鵝流動付相中適加入模有機轉(zhuǎn)胺可蹲以減很弱堿由性溶閑質(zhì)與掀殘余悔硅醇夸基的網(wǎng)強相掛互作灰用,雖減輕敘或消邁除峰瑞拖尾和現(xiàn)象決。所悄以在尺這種銅情況壽下有美機胺機(如封三乙頑胺)吸又稱揚為減廢尾劑萌或除底尾劑愧。娃D(zhuǎn)千.流朋動相童的脫渾氣部HP壘LC酒所用另流動鍋相必啦須預尾先脫染氣,圣否則漆容易勒在系讓統(tǒng)內(nèi)迫逸出品氣泡詞,影這響泵流的工叮作。河氣泡辱還會返影響習柱的荒分離節(jié)效率尖,影趣響檢付測器澡的靈熟敏度注、基券線穩(wěn)跳定性紙,甚扮至使牲無法憑檢測焰。(蔥噪聲戀增大互,基我線不蛇穩(wěn),燦突然懼跳動算)。順此外寇,溶天解在湖流動劈相中嫂的氧遵還可投能與快樣品冰、流而動相腐甚至咳固定酬相(政如烷率基胺嬌)反呆應。閘溶解據(jù)氣體笑還會罷引起過溶劑俊pH臣的變嗚化,盾對分欠離或途分析錯結(jié)果括帶來年誤差肺。澤溶解福氧能游與某守些溶渠劑(澤如甲攏醇、甩四氫稠呋喃忌)形今成有構紫外拾吸收腔的絡賢合物茶,此岔絡合砍物會臟提高迎背景疊吸收牛(特耕別是方在2匠60腰nm炎以下掛),譯并導祥致檢晝測靈兆敏度捐的輕嚇微降蘭低,乒但更斯重要絲的是貍,會罵在梯饑度淋稼洗時告造成葉基線高漂移斥或形緩成鬼效峰(渣假峰寇)。鹽在熒誤光檢拼測中系,溶攻解氧餅在一書定條造件下勁還會貨引起痰淬滅襯現(xiàn)象心,特邪別是采對芳掩香烴練、脂良肪醛砍、酮江等。纖在某富些情及況下業(yè),熒陡光響擴應可除降低航達9諸5%擋。在返電化詞學檢搞測中果(特鎖別是腐還原緣電化大學法持),蠶氧的廁影響磨更大囑。沙除去竿流動敵相中先的溶指解氧秀將大湯大提塘高U路V檢玉測器還的性猾能,軋也將僚改善鳥在一牧些熒屑光檢奮測應授用中淘的靈園敏度偶。常階用的寧脫氣鴉方法怎有:賀加熱睜煮沸圓、抽振真空線、超脆聲、傷吹氦圣等。研對混悅合溶搬劑,貢若采著用抽屬氣或攔煮沸咬法,襲則需保要考財慮低攻沸點破溶劑鵲揮發(fā)敗造成丸的組等成變縣化。卵超聲吼脫氣吉比較滲好,舌10輕~2稈0分而鐘的立超聲怨處理畫對許熱多有給機溶選劑或化有機被溶劑惠/水砌混合徑液的罰脫氣栗是足囑夠了嚼(一購般5皆00腎ml埋溶液憤需超艙聲2悄0~抓30撒mi曲n方鞭可)吉,此觀法不森影響困溶劑執(zhí)組成束。超輔聲時況應注賭意避抵免溶緞劑瓶會與超瑞聲槽猴底部火或壁折接觸哀,以真免玻蝶璃瓶墨破裂束,容享器內(nèi)胡液面譽不要耀高出畝水面堂太多術。種離線奉(系今統(tǒng)外尿)脫亭氣法情不能菊維持知溶劑昏的脫析氣狀什態(tài),派在你結(jié)停止鐘脫氣竊后,奔氣體任立即莫開始還回到辯溶劑尿中。因在1惜~4主小時改內(nèi),寬溶劑河又將助被環(huán)筑境氣瓶體所仙飽和與。撕在線纖(系碧統(tǒng)內(nèi)再)脫晶氣法啊無此即缺點作。最正常用纏的在寺線脫叛氣法邊為鼓筐泡,考即在鍬色譜蠢操作誘前和慮進行浮時,春將惰憶性氣士體噴劣入溶涌劑中費。嚴擠格來亂說,謀此方德法不慣能將精溶劑擴脫氣犧,它主只是樂用一鉆種低傾溶解煎度的綿惰性仙氣體東(通嘴常是航氦)持將空稼氣替始換出灑來。升此外流還有來在線終脫氣雀機。礙一般道說來弟有機毫溶劑記中的喊氣體極易脫迷除,謊而水遍溶液影中的秋氣體煌較頑褲固。筋在溶緊液中段吹氦沒是相蹄當有掉效的倘脫氣軟方法向,這春種連離續(xù)脫酸氣法徐在電社化學陳檢測蛾時經(jīng)叫常使椒用。滔但氦飯氣昂域貴,塔難于刮普及常。兩E脖.流構動相云的濾斜過壘所有燥溶劑的使用伸前都給必須準經(jīng)0悄.4意5&哈mi茅cr回o;嫁m(毯或0裝.2幻2&惹mi圾cr助o;就m)河濾過的,以惰除去櫻雜質(zhì)揪微粒弄,色漲譜純蘆試劑花也不狡例外拼(除封非在榆標簽候上標同明“灶已濾魯過”坊)。煙用濾業(yè)膜過茂濾時辯,特奸別要野注意排分清識有機旁相(期脂溶央性)偏濾膜梁和水釀相(寺水溶挨性)暢濾膜器。有掛機相刻濾膜碼一般靈用于爬過濾任有機憐溶劑饑,過芳濾水膏溶液吊時流舊速低耳或濾仆不動誦。水藥相濾胡膜只高能用命于過暢濾水體溶液計,嚴騎禁用傲于有寒機溶庸劑,測否則般濾膜應會被黎溶解變!溶播有濾印膜的逐溶劑撈不得笑用于僻HP漢LC銀。對鏟于混槍合流查動相繩,可拾在混奶合前咳分別獅濾過值,如妻需混犬合后置濾過餃,首叛選有茫機相匪濾膜口?,F(xiàn)己在已雞有混炊合型他濾膜愚出售慘。飛F輕.流前動相功的貯胞存欺流動晚相一匹般貯脊存于腿玻璃火、聚穿四氟葛乙烯況或不遠銹鋼技容器聰內(nèi),桐不能臺貯存趕在塑步料容喂器中皮。因駱許多前有機糖溶劑蔑如甲失醇、拖乙酸脾等可閃浸出誕塑料崇表面狹的增栽塑劑江,導悅致溶葛劑受枕污染膽。這撇種被英污染灣的溶燒劑如改用于羨HP駝LC溪系統(tǒng)聞,可吩能造瑞成柱紹效降叔低。踏貯存蠻容器啄一定濟要蓋餅嚴,賠防止露溶劑間揮發(fā)倚引起岸組成盼變化宣,也昆防止使氧和技二氧交化碳湊溶入威流動蛙相??剂姿嶂辂}、北乙酸橋鹽緩隙沖液侍很易油長霉孫,應福盡量念新鮮釣配制漂使用喚,不明要貯環(huán)存。堅如確垃需貯窮存,握可在棄冰箱顆內(nèi)冷別藏,州并在拉3天蠅內(nèi)使宰用,替用前啦應重皇新濾抽過。邁容器舍應定完期清江洗,扶特別購是盛兆水、減緩沖完液和邀混合揮溶液善的瓶禍子,狐以除畫去底白部的止雜質(zhì)洽沉淀著和可忌能生茫長的藏微生貫物。膊因甲不醇有苗防腐饅作用曠,所抹以盛夾甲醇軟的瓶搬子無五此現(xiàn)家象。季G喜.鹵切代有喝機溶有劑應屢特別火注意疾的問富題螞鹵代袖溶劑課可能栗含有剛微量預的酸咽性雜眼質(zhì),怨能與貨HP堂LC縫系統(tǒng)土中的漸不銹寬鋼反稼應。靈鹵代教溶劑償與水厘的混尤合物逐比較桃容易寨分解驗,不扶能存誘放太熊久。啞鹵代明溶劑域(如易CC臘l4獻、C它HC饑l3價等)熟與各報種醚心類(己如乙廣醚、熱二異案丙醚桂、四軟氫呋役喃等博)混鑰合后壩,可費能會哈反應聞生成饞一些例對不校銹鋼塔有較羨大腐姻蝕性依的產(chǎn)痕物,便這種袋混合代流動升相應汪盡量兵不采含用,蝕或新吸鮮配莊制。緩此外殺,鹵盯代溶沉劑(卷如C劉H2齒Cl揭2)極與一根些反棄應性垮有機論溶劑挖(如您乙腈旁)混申合靜臣置時候,還串會產(chǎn)述生結(jié)箏晶。飼總之靈,鹵阻代溶怪劑最謎好新之鮮配腎制使桂用。填如果勻是和鼻干燥淚的飽籍和烷買烴混后合,嫁則不俊會產(chǎn)馳生類弓似問合題。設H喘.H向PL土C用狡水挎HP如LC祥應用舉中要構求超除純水繳,如繳檢測歸器基競線的剝校正訂和反抖相柱扁的洗剪脫。朵進行切HP郵LC敢、G腫C、爪電泳例和熒賴光分蹲析,萍或在黑涉及合組織揮培養(yǎng)灑時,活沒有公有機青物污千染是較非常絹重要摧的。愧測高拉錳酸辨鉀顏駱色保燙留時棵間的仔定性殃方法督反應伐慢,季對很晉低水耀平的齒有機號物(融對H輪PL倆C可狹能還生是太涉高了絲)不卻夠靈皆敏,裳特別造是不枕能定魄量。停總有炸機碳診(T辦OC辰)分播析儀聞(把孕有機投物氧穴化成鋸CO姥2,要測游亮離的加CO釀2)猶常用仗于I孔類(督NC磚CL堤S)謙水中妙低濃浮度有暮機物藍的測呢定。勒I類浸水標槽準:逗NC群CL托S牲AS疲TM推電阻濟率,月MΩ臣·c涼m,殘25如℃釋,最寬小鋪10否.0莊18沖.0扯硅酸偏鹽,種mg職/L怕,最分大辦0.逗05輔0.轎00蒼3嘆微粒舌,&佳mi唉cr棋o;經(jīng)m濾渴器瑞0.巧22贊0.尺2需微生免物,坡CF陡U/倉ml養(yǎng)10慚分三仔檔亂美國稍藥典價24荷版(畢20盟00防年)棒要求葬TO柔C<青0.鋒5泥mg由/L版(用造標準逮蔗糖界溶液傷1.陷19吩m喚g/為L)裕,電騙導率壓在室的溫p倒H勺6時服≤2辜.4積&鐵mi謎cr娃o;堆S/筋cm糾(即消≥森0.懇42圾M縣Ω·單cm虎)。炭HP頂LC銜級水慈增加機吸收僵特性圾:在移1c輝m現(xiàn)池中智,用秋超純贊水作副空白賞,在漲19輸0n福m、井20稻0n被m和究25毫0~銷40腸0n蓋m的償吸收暈度分跨別不殃得過素0.治01誦、0奧.0誦1和鍛0.少05卸。增暮加不瀉揮發(fā)粒物,應≤3滔pp鑰m(忠中國霉藥典嬌純水滋≤1告0p悄pm死)。斬二脈、L戀ab安Al態(tài)li庫an式ce哲液礦相色立譜米系統(tǒng)驕組成泵愚進樣效器呢色譜多柱(倦柱溫嚼箱)駁檢測纖器奮工作豎站殼柱后譯衍生蛛裝置調(diào)節(jié)流速調(diào)節(jié)流速開泵/關泵模式切換出口單向閥入口單向閥泵頭旁通閥出口過濾器域Se肝ri翼es追Ⅲ詢泵蒼前視造圖勒手動轉(zhuǎn)進樣縣閥投AS族10令00適/3充00頁0自孔動進卸樣器鏈色譜負柱媽20縫1型成檢測違器賠La念bA抄ll棚ia俘nc踩e均工作膛站界崗面圈三次、什La駱bA勝ll并ia宏nc漢e痛液相凱色譜奸系統(tǒng)裕常見藍使用腥故障躺及維寺護眨1、亡泵的適使用途和維地護注毫意事貢項毯為了王延長韻泵的束使用晌壽命抓和維之持其亂輸液漢的穩(wěn)冒定性絞,必添須按盒照下勻列注五意事吹項進搶行操抽作:走①防陳止任而何固占體微漠粒進乳入泵憂體,尸因為母塵埃淋或其愚它任便何雜隙質(zhì)微際粒都轎會磨巨損柱腳塞、障密封凳圈妻、缸乳體和獅單向柳閥,思因此夕應預饑先除結(jié)去流美動相頓中的拿任何疊固體餃微粒牌。流匯動相慌最好糖用尼微孔箭濾膜支(努0.炊2唱或夠0.呢45匯um奉)旨過濾原。泵唐的入起口都矩應連禮接紙0.蛋2u仙m過文濾頭灶(或園片)升。泵舞的濾萌頭菠應經(jīng)盒常清粥洗或?qū)幐鼡Q邀。陵②流鞭動相棉不應袍含有笑任何豆腐蝕宋性物斥質(zhì),建含有竹緩沖士液的騰流動氧相不抱應保備留在耳泵內(nèi)嘩,尤佛其是障在停扎泵過例夜或波更長壩時間浙的情貌況下嗽。如情果將應含緩知沖液睛的流搞動相錯留在京泵內(nèi)果,由中于蒸遷發(fā)或俯泄漏貓,甚捧至只遭是由火于溶窗液的落靜置王,就極可能基析出源鹽的寒微細串晶體那,這揉些晶肚體將蟻和上訂述固想體微距粒一同樣損法壞密劑封環(huán)社和柱丟塞等奮。因竭此,媽必須壯泵入更純水獲將泵脈充分血清洗涼后,拐再換禿成適洽合于肺色譜葉柱保束存和刑有利帖于泵認維護攔的溶扮劑(灘對于艦反相改鍵合右硅膠互固定圣相,器可以樓是甲奸醇或喇甲醇察-水瞧)。輛③泵嗓工作侵時要漁留心患防止綢溶劑重瓶內(nèi)串的流學動相夕被用尤完,戰(zhàn)否則物空泵鋪運轉(zhuǎn)真也會績磨損邀柱塞儀、缸潮體或就密封粱環(huán),怕最終緊產(chǎn)生宴漏液膽。誕④輸西液泵狼的工杏作壓刷力決君不要恭超過緣規(guī)定純的最幟高壓賴力,望否則塊會使礙高壓你密封妨環(huán)變怨形,辮產(chǎn)生卵漏液帶。胳⑤流獲動相笛應該修先脫懇氣,恥以免辯在泵院內(nèi)產(chǎn)繭生氣圈泡,偶影響伏流量維的穩(wěn)篇定性芳,如快果有誠大量她氣泡聲,泵低就無徒法正文常工到作。煙如果凈輸液虎泵產(chǎn)柿生故委障,加須查貴明原喪因,異采取談相應耗措施堂排除扇故障?。汉]有班流動快相流財出,慎又無方壓力呼指示伸。原硬因可燭能是罰泵內(nèi)躲有大令量氣梁體,準這時帝可打致開鄉(xiāng)排氣隸閥,提用一匙個5餓0m稿l針浴筒在挺泵出混口處亞抽出軌氣體配。另約一個閃可能欺原因爆是密撿封環(huán)謙磨損穴,需沒更換腳。氏②壓耕力和虹流量悅不穩(wěn)盈。原句因可差能是執(zhí)氣泡條,需舊要排惹除;盾或者丹是單順向閥容內(nèi)有蹦異物旁,可馳卸下?lián)釂蜗蜓亻y,夸浸入跡甲醇栽水溶羊液中絞超聲辨清洗店。有嶺時可字能是窗流動龍相董濾取頭房內(nèi)有茫氣泡快,或讓被鹽罵的微句細晶點?;虼钭躺俚奈⒏焐锬糠謾n堵塞逮,這商時,肉可卸禽下煎濾帶頭憲浸入孤甲醇加水溶要液泉內(nèi)超塌聲除格氣泡畢。撲③壓撈力過耀高的虧原因然是管釣路被暴堵塞頌,需發(fā)要清慌除和腥清洗體。壓易力降顫低的出原因淚則可育能是諷管路隨有泄屠漏。柱檢查啦堵塞缺或泄背漏時兼應逐椒段進斤行。艦2仔、點手動丈進樣眼閥和譽自動屆進樣君器寒。粱現(xiàn)在競大都單使用夢六通沈進樣林閥或柏自動倒進樣效器。片進樣是裝置拳要求蝶:密桑封性叢好,精死體幟積小艇,重襪復性惰好,行保證朽中心份進樣誼,進迫樣時紛對色災譜系粒統(tǒng)的紅壓力汪、流日量影商響小統(tǒng)。戒手動徐進樣購閥和知自動竟進樣別器的辣維護其注意箏事項金包括灶:①效樣品慧溶液典進樣動前必糧須用扭0.剩45段um勇濾膜鍋過濾示,以園減少抹微粒步對進銀樣閥舅的磨丑損。譜②轉(zhuǎn)適動閥發(fā)芯時敲不能慨太慢闖,更毯不能傻停留葛在中巧間位鑰置,希否則茄流動賢相受巡阻,恐使泵嚷內(nèi)壓慧力劇輔增,漿甚至蟲超過開泵的挺最大啊壓力置;再獄轉(zhuǎn)到派進樣刃位時狠,過劣高的駐壓力報將使瘋柱頭谷損壞排。③夫為防囑止緩忘沖鹽桃和樣拳品殘翻留在徹進樣榨閥中被,每怪次分僑析結(jié)甘束后刺應沖號洗進彈樣閥樹。通陷??傻斡盟箾_洗拌,或徐先用餃能溶石解樣址品的屈溶劑善沖洗帽,再先用水梢沖洗毫。橫3缸、色撞譜柱弱的維些護起色譜紫是一贈種分咽離分滲析手宅段,播分離伸是核響心,叢因此靠擔負籍分離座作用腸的色丙譜柱每是色運譜系港統(tǒng)的榨心臟扛。對誠色譜瞎柱的雀要求兵是柱返效高菊、選肢擇性松好,照分析頭速度撒快等貸。市去售的軟用于蠢HP艷LC男的各沸種微雨粒填犯料如斑多孔戰(zhàn)硅膠斬以及榨以硅朱膠為膛基質(zhì)羨的鍵才合相授、氧僅化鋁身、有序機聚富合物盜微球巧(包振括離暢子交志換樹騰脂)仙、多沃孔碳圈等,夠其粒道度一夕般為召3,躺5,殃7,卵10敢μm尾等,顯柱效召理論隨值可搖達5咬~1美6萬孔/米咽。對伍于一椅般的陶分析氏只需啊50旗00踩塔板犧數(shù)的互柱效傲;對角于同拍系物誦分析稠,只標要5攜00俯即可橡;對愚于較鏡難分槳離物圾質(zhì)對積則可預采用麻高達益2萬奸的柱勵子,草因此超一般錘10裕~繡30搜cm聯(lián)左右祖的柱塵長就范能滿堵足復睜雜混螺合物梁分析生的需旦要。草柱效膚受柱驅(qū)內(nèi)外求因素搭影響濃,為貿(mào)使色門譜柱趁達到搬最佳梯效率宮,除乘柱外診死體劍積要啦小外忙,還叨要有河合理澆的柱顛結(jié)構盼(盡搜可能壞減少布填充堤床以滔外的豈死體么積)賄及裝許填技叔術。乞即使附最好秧的裝摔填技農(nóng)術,詢在柱蝶中心孩部位津和沿咳管壁鎖部位桌的填大充情褲況總靈是不鞠一樣療的,否靠近億管壁際的部戒位比仗較疏嗓松,末易產(chǎn)靈生溝俘流,浴流速盒較快仗,影風響沖貸洗劑損的流茫形,雪使譜念帶加璃寬,冶這就棕是管縮壁效陣應。周這種筆管壁倦?yún)^(qū)大魂約是渾從管本壁向圈內(nèi)算脫起3香0倍燥粒徑媽的厚勉度。衣在一閱般的烏液相飽色譜抄系統(tǒng)糧中,爽柱外達效應債對柱頃效的會影響伐遠遠枝大于礦管壁祥效應符。鵲1.申柱的都構造頓色譜限柱由牙柱管鎖、壓乎帽、話卡套惕(密典封環(huán)餡)、伍篩板戰(zhàn)(濾藥片)弊、接谷頭、屯螺絲撤等組傅成。架柱管籍多用最不銹醋鋼制昏成,寺壓力唇不高已于裕70娃k怎g催/c財m2坊時,婦也可碼采用溉厚壁亮玻璃簡或石泊英管電,管滋內(nèi)壁必要求燕有很西高的段光潔淺度。妨為提惜高柱營效,租減小汁管壁友效應萬,不擠銹鋼數(shù)柱內(nèi)桌壁多姨經(jīng)過奴拋光紐。也項有人傻在不鮮銹鋼首柱內(nèi)偏壁涂看敷氟芹塑料耕以提斯高內(nèi)級壁的秘光潔錯度,匠其效衡果與番拋光土相同新。還狗有使食用熔追融硅駐或玻匹璃襯塞里的裁,用申于細拒管柱質(zhì)。色品譜柱棚兩端贈的柱誦接頭草內(nèi)裝廢有篩王板,肢是燒譽結(jié)不愉銹鋼土或鈦羅合金疾,孔魔徑0愉.2析~2海0&殘mi營cr現(xiàn)o;淚m(賤5~杜10睛&m嚇ic萬ro獨;m茅),猴取決紫于填堤料粒爛度,兄目的樸是防卻止填單料漏民出。抱色譜卻柱按皮用途橋可分縫為分所析型摩和制蛾備型屠兩類像,尺樹寸規(guī)垂格也董不同豎:①柳常規(guī)獨分析榆柱(省常量會柱)塌,內(nèi)舟徑2鳥~啦5m位m直(常薯用霞4.奸6m瞎m附,國死內(nèi)有榨4m喪m賴和皇5m慢m束),驢柱長棄10慮~奸30糊cm悶;②誤窄徑訪柱(濕na爺rr構ow壯b駐or挪e,吉又稱繁細管冤徑柱端、半猴微柱似se到mi慈-m字ic衡ro后co粥l(xiāng)u片mn奏),海內(nèi)徑媽1~增2m鋒m槳,柱騾長1紡0~礎20喬cm閥;③閃毛細鍛管柱睡(又積稱微克柱m價ic德ro購co喘lu歐mn捉),鹽內(nèi)徑覺0.策2~紗0.哲5m交m艦;④愚半制窯備柱得,內(nèi)古徑>戒5m話m鎖;⑤示實驗蘋室制張備柱室,內(nèi)更徑2晴0~菠40結(jié)mm運,柱惜長1而0~粗30炸cm帝;⑥刊生產(chǎn)館制備傻柱內(nèi)蔑徑可聽達幾鼓十厘欄米。徹柱內(nèi)冷徑一司般是壯根據(jù)齊柱長討、填燦料粒笨徑和麻折合瑞流速孔來確租定,師目的寇是為把了避檢免管財壁效做應。避2.術柱的取發(fā)展節(jié)方向膛因強潤調(diào)分乘析速三度而贈發(fā)展媽出短管柱,寧柱長盆3~摧10露cm菌,填象料粒拘徑2茄~3循&m睜ic注ro咐;m辜。為寇提高奪分析混靈敏淹度,育與質(zhì)頓譜(痕MS秩)聯(lián)易接,避而發(fā)良展出淹窄徑周柱、奪毛細冊管柱橫和內(nèi)倦徑小占于捉0.公2m爛m碎的微恭徑柱刑(m嘩ic止ro您bo鐘re句)。養(yǎng)細管句徑柱斯的優(yōu)品點是嶼:①滲節(jié)省幻流動賊相;村②靈業(yè)敏度說增加員;③相樣品薪量少嘆;④巨能使嘩用長鴿柱達某到高程分離艱度;奮⑤容喝易控關制柱富溫;鮮⑥易信于實防現(xiàn)L齒C-贊MS界聯(lián)用劣。胞但由你于柱澤體積謙越來嘩越小離,柱賭外效歡應的塔影響曲就更葵加顯更著,末需要脫更小器池體角積的燦檢測圓器(極甚至須采用墳柱上晶檢測聚),座更小鳥死體鐮積的勸柱接紀頭和農(nóng)連接氣部件稍。配愛套使筐用的饒設備慶應具燥備如示下性濃能:你輸液引泵能喚精密起輸出緣1~浴10礎0&鼻mi躬cr井o;劃l/傘mi付n的厭低流刻量,倡進樣濁閥能接準確崗、重畏復地命進樣淹微小票體積淚的樣摟品。借且因蛛上樣例量小仿,要據(jù)求高惜靈敏發(fā)度的挺檢測偵器,族電化皺學檢地測器宿和質(zhì)哈譜儀舟在這加方面罵具有竟突出嬸優(yōu)點租。臟3鎮(zhèn).瘦色譜膨柱的丹使用拍和維援護注銹意事習項片色譜評柱的楊正確判使用威和維救護十戲分重泛要,澇稍有把不慎我就會獨降低肅柱效券、縮贏短使狂用壽讀命甚粥至損恐壞。革在色薦譜操弓作過輩程中崗,需浸要注腔意下處列問非題,為以維粗護色瞞譜柱童。標①愛避免濟壓力輕和溫逢度的嚴急劇爐變化啊及任案何機掠械震圓動。梯溫度灰的突結(jié)然變何化或叉者使爺色譜己柱從掩高處嘴掉下倆都會刃影響使柱內(nèi)羅的填鬧充狀因況;塔柱壓丘的突豬然升捆高或動降低恒也會濁沖動辮柱內(nèi)葡填料浸,因穩(wěn)此在蘇調(diào)節(jié)捕流速巴時應足該緩倍慢進破行,猾在閥箏進樣眼時閥摸的轉(zhuǎn)銅動不法能過蠻緩(沾如前駝所述超)。攝②孝應逐劑漸改障變?nèi)芤詣┑脑航M成的,特猶別是擴反相捐色譜茫中,茫不應阻直接睜從有撒機溶規(guī)劑改冊變?yōu)闈袢凯h(huán)是水勞,反胞之亦妖然。攝③厭一般螞說來代色譜杏柱不網(wǎng)能反狗沖,細只有秩生產(chǎn)譜者指顆明該板柱可輛以反茶沖時牽,才講可以絞反沖混除去蠻留在瘦柱頭彎的雜濃質(zhì)。掀否則場反沖璃會迅駝速降膏低柱渡效。前④開選擇助使用紀適宜納的流蔬動相怖(尤艇其是舌pH敞),族以避拌免固餃定相陰被破前壞。幫有時掏可以孩在進粉樣器懲前面她連接落一預拴柱,該分析峰柱是藥鍵合擦硅膠斜時,魂預柱鍛為硅鋤膠,腐可使久流動距相在般進入季分析宇柱之泊前預留先被薪硅膠蜘“飽罩和”診,避弱免分蕩析柱麗中的克硅膠脆基質(zhì)河被溶旦解。蓋⑤姥避免謙將基戒質(zhì)復蛋雜的花樣品務尤其
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