如何規(guī)范病原體檢測(cè)及結(jié)果的正確解讀

如何規(guī)范病原體檢測(cè)及結(jié)果的正確解讀演示文稿本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第1頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)12點(diǎn)37分（優(yōu)選）如何規(guī)范病原體檢測(cè)及結(jié)果的正確解讀本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第2頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)12點(diǎn)37分一.病原體檢測(cè)的目的本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第3頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)12點(diǎn)37分抗感染治療經(jīng)驗(yàn)治療(empiricaltherapy)推測(cè)可能的病原體及敏感性選用藥物；建立在流行病學(xué)資料之上（重要參考耐藥監(jiān)測(cè)資料）；建立在概率權(quán)衡上，為保證有效概率常常以選用廣譜、強(qiáng)效抗菌藥為代價(jià)；治療初始的必然選擇，亦用于非重癥感染。病原治療(目標(biāo)治療，targettherapy)根據(jù)病原學(xué)診斷、藥敏選擇藥物，是理想之選；醫(yī)院感染、重癥社區(qū)感染應(yīng)確保達(dá)到病原治療；臨床微生物室起關(guān)鍵作用；培養(yǎng)結(jié)果的準(zhǔn)確解讀。本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第4頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)12點(diǎn)37分臨床病原體檢查目的1.感染性疾病的明確診斷；2.通過(guò)藥敏試驗(yàn)指導(dǎo)臨床合理用藥；3.病原體監(jiān)控和耐藥性監(jiān)控。本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第5頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)12點(diǎn)37分臨床病原體檢查的意義病原學(xué)檢測(cè)是抗感染治療的基石，對(duì)提高療效、改善預(yù)后、降低費(fèi)用和減少不良反應(yīng)極其重要；臨床微生物實(shí)驗(yàn)室是臨床的重要“情報(bào)部門”，是抗感染治療的“眼睛”；臨床與實(shí)驗(yàn)室的充分溝通有助于改善雙方工作。本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第6頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)12點(diǎn)37分協(xié)助明確疾病診斷推測(cè)病程進(jìn)展

制定治療措施觀察病情病原體檢測(cè)的意義本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第7頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)12點(diǎn)37分各種不同病原體的實(shí)驗(yàn)診斷方法遵循以下基本原則1.正確、規(guī)范采集和運(yùn)送標(biāo)本。2.直接顯微鏡查見病原體或檢出病原體抗原，借助分子生物學(xué)的方法檢測(cè)病原體核酸，結(jié)合病人的病史、癥狀或體征，快速作出初步診斷。本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第8頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)12點(diǎn)37分各種不同病原體的實(shí)驗(yàn)診斷方法遵循以下基本原則3.初步診斷同時(shí)，對(duì)病原體進(jìn)行分離與鑒定。4.檢測(cè)機(jī)體對(duì)病原體的免疫產(chǎn)物。5.參與臨床選擇抗菌藥物，指導(dǎo)和監(jiān)控微生物的治療方案，避免耐藥菌株的產(chǎn)生。本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第9頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)12點(diǎn)37分二.臨床標(biāo)本的正確采集本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第10頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)12點(diǎn)37分臨床病原體檢查的基本程序醫(yī)生、護(hù)士、病人、檢驗(yàn)師：正確采集運(yùn)送標(biāo)本。檢驗(yàn)科：直接鏡檢、免疫學(xué)和分子生物檢測(cè)、病原體分離培養(yǎng)鑒定、藥敏實(shí)驗(yàn)——報(bào)告結(jié)果。醫(yī)生：明確診斷、合理用藥。有資料顯示，微生物室的誤差71%是實(shí)驗(yàn)前因素造成的。本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第11頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)12點(diǎn)37分標(biāo)本采集的基本原則無(wú)菌、及時(shí)、按照要求、標(biāo)注清晰根據(jù)病史與臨床表現(xiàn)確定標(biāo)本采集的類型與部位，盡量采集病變明顯部位標(biāo)本。在發(fā)病的早期或急性期采集標(biāo)本，最好在抗菌藥物使用前（如使用過(guò)抗菌藥物應(yīng)在申請(qǐng)單上注明）。采集標(biāo)本防止污染，并置于無(wú)菌容器，加蓋密封、立即送檢。標(biāo)本必須貼上標(biāo)簽，與檢驗(yàn)申請(qǐng)單同時(shí)送檢。本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第12頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)12點(diǎn)37分標(biāo)本送檢標(biāo)本要求在30min內(nèi)送檢，否則影響陽(yáng)性率。烈性傳染病標(biāo)本需專人護(hù)送。本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第13頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)12點(diǎn)37分

遵照醫(yī)囑充分準(zhǔn)備

嚴(yán)格查對(duì)

正確采集

及時(shí)送檢標(biāo)本采集的原則本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第14頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)12點(diǎn)37分標(biāo)本的采集和送檢六原則避免雜菌污染不同期不同標(biāo)本用抗菌藥物前采集病變明顯部位運(yùn)送注意保存標(biāo)本必須新鮮本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第15頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)12點(diǎn)37分拒收標(biāo)本1.樣本上無(wú)病患標(biāo)簽或病患標(biāo)簽與檢驗(yàn)申請(qǐng)單不符合。2.樣本以不適當(dāng)?shù)臏囟取⑦\(yùn)送培養(yǎng)基及容器運(yùn)送。3.樣本的量不足、已被防腐劑固定和運(yùn)送時(shí)間過(guò)長(zhǎng)。4.樣本外漏、容器破損及明顯受污染的樣本。5.樣本的檢驗(yàn)項(xiàng)目申請(qǐng)不適合進(jìn)行。6.當(dāng)日重復(fù)送樣本（除血液培養(yǎng)外）。7.已接觸空氣的厭養(yǎng)菌檢測(cè)標(biāo)本。8.被正常厭養(yǎng)菌污染的標(biāo)本，要求檢測(cè)。本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第16頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)12點(diǎn)37分三.病原體檢測(cè)方法本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第17頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)12點(diǎn)37分臨床常見病原體檢查方法直接顯微鏡檢血清學(xué)診斷(查特異性抗原/抗體)病原體核酸檢測(cè)(PCR.DNA探針)病原體的分離培養(yǎng)和鑒定本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第18頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)12點(diǎn)37分致病菌的檢驗(yàn)程序標(biāo)本直接涂片染色鏡檢分離培養(yǎng)形態(tài)特征生化試驗(yàn)血清學(xué)試驗(yàn)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)明確診斷初步診斷血清學(xué)診斷細(xì)菌的快速鑒定形態(tài)學(xué)檢查（常規(guī)培養(yǎng)或特殊培養(yǎng)）（凝集試驗(yàn)、沉淀反應(yīng)、免疫標(biāo)記技術(shù)等）(微生物數(shù)字編碼分類鑒定法、血培養(yǎng)自動(dòng)化檢測(cè)系統(tǒng)、核酸雜交技術(shù)、PCR技術(shù)、DNA芯片技術(shù)等）藥物敏感試驗(yàn)本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第19頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)12點(diǎn)37分臨床感染常見病原體檢查細(xì)菌形態(tài)學(xué)檢查直接觀察法染色標(biāo)本鏡檢本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第20頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)12點(diǎn)37分革蘭氏陽(yáng)性球菌革蘭氏陰性桿菌本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第21頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)12點(diǎn)37分墨汁染色找新型隱球菌

抗酸染色陰性桿菌生長(zhǎng)速度快于陽(yáng)性球菌、念珠菌！本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第22頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)12點(diǎn)37分常用的血清學(xué)診斷方法類型診斷應(yīng)用舉例直接凝集試驗(yàn)傷寒和副傷寒（肥達(dá)試驗(yàn)）、立克次體（外斐試驗(yàn)）、鉤端螺旋體（顯微凝集試驗(yàn)）乳膠凝集試驗(yàn)檢測(cè)腦膜炎奈瑟菌、流感嗜血桿菌等抗體沉淀試驗(yàn)梅毒（VDRL、RPR試驗(yàn)）補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)檢測(cè)Q熱柯克斯體等抗體中和試驗(yàn)風(fēng)濕熱（抗O試驗(yàn)）ELISA廣泛用于病原體的診斷和流行病學(xué)調(diào)查本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第23頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)12點(diǎn)37分24病毒感染的微生物學(xué)檢查法

本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第24頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)12點(diǎn)37分臨床感染常見病原體檢查真菌感染(fungiinfection)1.直接檢查：孢子與菌絲2.分離培養(yǎng)3.血清學(xué)檢測(cè)4.分子生物學(xué)檢查本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第25頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)12點(diǎn)37分G試驗(yàn)(1-3)-β-D-葡聚糖是真菌的重要組成成份,廣泛存在于除接合菌之外的真菌細(xì)胞壁中,占真菌細(xì)胞壁成分的50%以上。深部真菌感染時(shí),(1-3)-β-D-葡聚糖可從胞壁中釋放出來(lái),進(jìn)入血液及其他體液中,即可以檢測(cè)到其中的(1-3)-β-D-葡聚糖水平異常升高。而淺表真菌感染或真菌定植時(shí)血清(1-3)-β-D-葡聚糖則常不會(huì)升高。通過(guò)對(duì)血清中(1-3)-β-D-葡聚糖的檢測(cè),發(fā)現(xiàn)其對(duì)系統(tǒng)性真菌感染的診斷有重要價(jià)值,為早期快速確診深部真菌感染提供有力證據(jù)。含量大于50pg/ml判為陽(yáng)性本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第26頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)12點(diǎn)37分GM試驗(yàn)GM試驗(yàn)檢測(cè)的是半乳甘露聚糖，曲霉菌特有的細(xì)胞壁多糖成分是β（1-5）呋喃半乳糖殘基，菌絲生長(zhǎng)時(shí)，半乳甘露聚糖從薄弱的菌絲頂端釋放，是最早釋放的抗原。GM釋放量與菌量成正比，可以反映感染程度。連續(xù)檢測(cè)GM可作為治療療效的監(jiān)測(cè)。以下情況可出現(xiàn)假陽(yáng)性：⑴已使用半合成青霉素尤其是哌拉西林/他唑巴坦；⑵新生兒和兒童；⑶血液透析；⑷自身免疫性肝炎等；⑸食用可能含有GM的牛奶等高蛋白食物和污染的大米等。以下情況可出現(xiàn)假陰性：⑴釋放入血循環(huán)中的曲霉GM（包括甘露聚糖）并不持續(xù)存在而是會(huì)很快清除；⑵以前使用了抗真菌藥物；⑶病情不嚴(yán)重；⑷非粒細(xì)胞缺乏的患者。陽(yáng)性：≥0.5本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第27頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)12點(diǎn)37分臨床感染常見病原體檢查其他病原體感染：1.支原體檢測(cè)：分離培養(yǎng)和分子生物學(xué)技術(shù)2.螺旋體檢測(cè)：暗視野顯微鏡檢、血清學(xué)檢測(cè)3.立克次體檢測(cè)4.衣原體檢測(cè)：分離培養(yǎng)5.原蟲檢測(cè)螺旋體本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第28頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)12點(diǎn)37分四.檢測(cè)結(jié)果的正確解讀本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第29頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)12點(diǎn)37分1.細(xì)菌培養(yǎng)的意義培養(yǎng)陽(yáng)性≠感染排除污染排除定植任何結(jié)果都必須結(jié)合臨床癥狀及其它相關(guān)檢查進(jìn)行綜合分析本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第30頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)12點(diǎn)37分培養(yǎng)陰性≠排除感染標(biāo)本采集部位和方法是否在使用抗菌藥物時(shí)留取的標(biāo)本？標(biāo)本運(yùn)送時(shí)間和方法是否正確標(biāo)本接種、培養(yǎng)基及培養(yǎng)方法的選擇是否正確是否可能是厭氧菌或其它難培養(yǎng)的細(xì)菌感染細(xì)菌培養(yǎng)的意義本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第31頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)12點(diǎn)37分本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第32頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)12點(diǎn)37分當(dāng)前血培養(yǎng)存在的問(wèn)題采樣時(shí)污染嚴(yán)重培養(yǎng)一次陰性作為診斷依據(jù)血液與培養(yǎng)基比例不正確采樣時(shí)間不正確少做厭氧培養(yǎng)不能及時(shí)報(bào)告國(guó)際上仍然公認(rèn)血培養(yǎng)是診斷血流感染的金標(biāo)準(zhǔn)！本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第33頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)12點(diǎn)37分痰培養(yǎng)陽(yáng)性結(jié)果分析常見有三種情況第一種情況：患者有典型的呼吸道感染癥狀，按細(xì)菌藥敏報(bào)告選抗菌藥物療效明顯這類患者的痰標(biāo)本共同特征：痰涂片革蘭染色:見大量的白細(xì)胞，并見白細(xì)胞吞噬或伴行大量形態(tài)一致的非上呼吸道正常菌；痰培養(yǎng)：生長(zhǎng)大量非上呼吸道正常菌，痰培養(yǎng)與痰涂片所見一致結(jié)論：報(bào)告的細(xì)菌為病原菌。本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第34頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)12點(diǎn)37分痰培養(yǎng)陽(yáng)性結(jié)果分析第二種情況：患者有典型的呼吸道感染癥狀，按細(xì)菌報(bào)告選用的抗菌藥物治療無(wú)效，改為憑經(jīng)驗(yàn)聯(lián)合用藥這類患者痰細(xì)菌檢驗(yàn)時(shí)有如下特征：痰涂片：大量白細(xì)胞，吞噬或伴行的是革蘭陽(yáng)性球菌（形似葡萄球菌）、革蘭染色陰陽(yáng)不定的小球菌或桿菌（形似厭氧菌）、出芽的念珠菌，偶見革蘭陰性桿菌；痰培養(yǎng)：生長(zhǎng)大量陰性桿菌，痰涂片所見的大量細(xì)菌不生長(zhǎng)或少量生長(zhǎng)，痰涂片鏡檢與痰培養(yǎng)結(jié)果不一致。結(jié)論：報(bào)告的細(xì)菌為定植菌本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第35頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)12點(diǎn)37分痰培養(yǎng)陽(yáng)性結(jié)果分析第三種情況：患者的感染已基本治愈，做痰檢的目的是希望得到一張陰性報(bào)告作為停止治療、出院的憑證這類患者的痰做細(xì)菌檢驗(yàn)時(shí)的特征：痰涂片：顯示標(biāo)本來(lái)自上呼吸道,大量上皮細(xì)胞,大量陰性桿菌，少量白細(xì)胞。痰培養(yǎng)：生長(zhǎng)大量陰性桿菌，較常見的是綠膿桿菌和不動(dòng)桿菌結(jié)論：報(bào)告的細(xì)菌為定植菌。本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第36頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)12點(diǎn)37分痰標(biāo)本涂片檢查合格痰液標(biāo)本鱗狀上皮<10個(gè)/低倍視野、白細(xì)胞>25個(gè)/低倍視野不合格痰液標(biāo)本大量鱗狀上皮細(xì)胞未見吞噬細(xì)胞本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第37頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)12點(diǎn)37分本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第38頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)12點(diǎn)37分細(xì)菌分離培養(yǎng)與鑒定的結(jié)果評(píng)價(jià)正常人群的無(wú)菌體液中檢測(cè)到細(xì)菌，應(yīng)考慮細(xì)菌為感染的病原體。存在正常菌群的標(biāo)本檢測(cè)到細(xì)菌，應(yīng)結(jié)合細(xì)菌的量考慮是否為致病菌。如臨床表現(xiàn)支持感染，但培養(yǎng)陰性，應(yīng)考慮為標(biāo)本不合格、培養(yǎng)不恰當(dāng)?shù)纫蛩?。直接鏡檢找到病原體，而培養(yǎng)陰性，應(yīng)考慮有L細(xì)菌、厭氧菌或苛氧菌感染。本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第39頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)12點(diǎn)37分2.病毒分離培養(yǎng)與鑒定的意義必須結(jié)合流行病學(xué)資料、臨床表現(xiàn)、標(biāo)本來(lái)源及病毒種類加以分析。從組織、血液以及腦脊液中分離到病毒可明確診斷。從呼吸道、腸道等分離到病毒，如該病毒人體不能長(zhǎng)期攜帶，有診斷價(jià)值，如麻疹病毒、流感病毒等。反之需相應(yīng)的臨床表現(xiàn)，才有病原學(xué)意義，如巨細(xì)胞病毒，腸道病毒等。陰性不能排除病毒感染。本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第40頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)12點(diǎn)37分病原體核酸檢測(cè)結(jié)果評(píng)價(jià)是檢測(cè)病原體微生物最靈敏的方法，但具有一定的假陽(yáng)性與假陰性。陽(yáng)性只表明存在某種病原體的核酸，是否正被感染應(yīng)結(jié)合臨床具體分析。本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第41頁(yè)；編輯于星期日\(chéng)12點(diǎn)