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普通遺傳學第五章遺傳的分子基礎演示文稿本文檔共70頁;當前第1頁;編輯于星期日\16點13分(優(yōu)選)普通遺傳學第五章遺傳的分子基礎本文檔共70頁;當前第2頁;編輯于星期日\16點13分遺傳物質(zhì)必須具備的條件遺傳功能,即基因的復制遺傳物質(zhì)必須貯存遺傳信息,并能將其復制且一代一代精確地傳遞下去。

1變異功能遺傳物質(zhì)必須發(fā)生變異,以適應外界環(huán)境的變化,沒有變異就沒有進化。3表達功能能控制生物體性狀的發(fā)育和表達。2本文檔共70頁;當前第3頁;編輯于星期日\16點13分對遺傳物質(zhì)的早期推測20世紀20年代:人們認識到蛋白質(zhì)是由多種氨基酸連接而成的大分子,氨基酸多種多樣的排列順序,可能蘊含著遺傳信息20世紀30年代:人們認識到DNA是由許多脫氧核苷酸聚合而成的生物大分子。組成DNA分子的脫氧核苷酸有四種,每一種有一個特定的堿基。但由于對DNA分子的結(jié)構(gòu)沒有清晰的了解,人們認為蛋白質(zhì)是遺傳物質(zhì)的觀點仍占主導地位。為什么我們現(xiàn)在認為DNA是主要的遺傳物質(zhì)呢?本文檔共70頁;當前第4頁;編輯于星期日\16點13分

DNA作為主要遺傳物質(zhì)的間接證據(jù)大部分DNA存在于染色體上,而蛋白質(zhì)在細胞質(zhì)內(nèi)也很多。每個物種不通組織的細胞不論起大小和功能如何,它們的DNA含量是恒定的。配子中DNA的含量恰好是體細胞的一半。而細胞內(nèi)的蛋白質(zhì)量在不同細胞間變化很大。本文檔共70頁;當前第5頁;編輯于星期日\16點13分DNA結(jié)構(gòu)的變化與生物突變具有一致性。

用不同波長的紫外線誘發(fā)各種生物突變時,其最有效的波長均260nm。這與DNA所吸收的紫外線光譜是一致的。這證明基因突變是與DNA分子的變異密切相關。DNA在代謝上較穩(wěn)定。原子一旦組成DNA,則在細胞保持健全生長的情況下,保持穩(wěn)定,不會離開DNA.而蛋白質(zhì)分子卻不同,它在迅速形成的同時又不斷分解。DNA能自我復制,具有世代的延續(xù)性。而蛋白質(zhì)不能進行自我復制。

本文檔共70頁;當前第6頁;編輯于星期日\16點13分

DNA作為主要遺傳物質(zhì)的直接證據(jù)肺炎雙球菌轉(zhuǎn)化實驗1噬菌體侵染與繁殖實驗2本文檔共70頁;當前第7頁;編輯于星期日\16點13分肺炎雙球菌轉(zhuǎn)化試驗肺炎雙球菌體內(nèi)轉(zhuǎn)化實驗1928年,英國格里菲思(Griffith)的肺炎雙球菌感染小鼠實驗S型R型菌落表面光滑粗糙形態(tài)有多糖類莢膜無多糖類莢膜毒性有毒性,可致死無毒性本文檔共70頁;當前第8頁;編輯于星期日\16點13分實驗提示:加熱殺死的S型有毒品系中一定有一種因子能使無毒的R品系轉(zhuǎn)化為有毒的S品系(transformation)。本文檔共70頁;當前第9頁;編輯于星期日\16點13分肺炎雙球菌體外轉(zhuǎn)化實驗1944年,美國學者艾弗里(Avery)等證明將R無毒品系轉(zhuǎn)化為有毒S品系的物質(zhì)是DNA。

(S)

加熱殺死

多糖脂類RNA蛋白質(zhì)DNADNA+DNA水解酶↓↓↓↓↓↓分別與R型細菌混合培養(yǎng)↓↓↓↓↓

SR

RRRRRR本文檔共70頁;當前第10頁;編輯于星期日\16點13分結(jié)論:在S型細胞的各種組分中,只有DNA能引起R型細胞的轉(zhuǎn)化,DNA是S型細胞多糖莢膜和病源特征的決定因子,只要給R型細胞提供S型細菌的DNA,就等于是提供了S基因。

意義:第一次直接證明基因是由DNA組成的,DNA是遺傳物質(zhì)。盡管Avery等人的肺炎雙球菌體外轉(zhuǎn)化實驗非常精確和嚴密,但當時仍有很多科學家不相信DNA是遺傳物質(zhì)。1952年Hershey和Chase的噬菌體侵染實驗證實DNA是主要的遺傳物質(zhì),才使人們普遍認同主要的遺傳物質(zhì)是DNA,而不是蛋白質(zhì)。本文檔共70頁;當前第11頁;編輯于星期日\16點13分噬菌體侵染與繁殖實驗噬菌體是感染細菌、真菌、放線菌或螺旋體等微生物的病毒的總稱,因部分能引起宿主菌的裂解,故稱為噬菌體。噬菌體個體微小,主要由蛋白質(zhì)外殼和核酸組成

。噬菌體只能利用宿主的核糖體、蛋白質(zhì)合成時所需的各種因子、各種氨基酸和能量產(chǎn)生系統(tǒng)來實現(xiàn)其自身的生長和增殖。一旦離開了宿主細胞,噬菌體既不能生長,也不能復制。

T2噬菌體侵染與繁殖基本過程:1.T2噬菌體吸附大腸桿菌后,將遺傳物質(zhì)注入細菌細胞;2.利用大腸桿菌的遺傳復制系統(tǒng)復制噬菌體遺傳物質(zhì);3.利用大腸桿菌的遺傳信息表達系統(tǒng)合成噬菌體組件;4.最后組裝形成完整的T2噬菌體。因此只要弄清侵染時進入細菌的是噬菌體的哪一部分,就可能證明哪種物質(zhì)是遺傳物質(zhì)。本文檔共70頁;當前第12頁;編輯于星期日\16點13分35S32P同位素示蹤:蛋白質(zhì)的組成元素:C、H、O、N、SDNA的組成元素:C、H、O、N、P標記噬菌體:在分別含有放射性同位素32P和35S的培養(yǎng)基中培養(yǎng)細菌。分別用上述細菌培養(yǎng)T2噬菌體,制備含32P的噬菌體和含35S的噬菌體本文檔共70頁;當前第13頁;編輯于星期日\16點13分1952年,赫爾希(Hershey)和蔡斯(Chase)的噬菌體侵染與繁殖試驗本文檔共70頁;當前第14頁;編輯于星期日\16點13分實驗過程及結(jié)果總結(jié)第一組實驗第二組實驗親代噬菌體35S標記蛋白質(zhì)32P標記DNA

寄主細胞內(nèi)無35S標記蛋白質(zhì)有32P標記DNA子代噬菌體外殼蛋白質(zhì)無35SDNA有32P標記結(jié)論:噬菌體侵入細菌時,DNA進入到細菌的細胞中,而蛋白質(zhì)外殼仍留在外面。因此子代噬菌體的各種性狀,是通過親代噬菌體的DNA遺傳的。DNA才是真正的遺傳物質(zhì)。本文檔共70頁;當前第15頁;編輯于星期日\16點13分DNA是唯一的遺傳物質(zhì)嗎?DNA——主要的遺傳物質(zhì)目前,已有充分的科學研究資料證明,絕大多數(shù)生物都是以DNA作為遺傳物質(zhì)的。RNA(核糖核酸)有些病毒(如煙草花葉病毒),它不含有DNA,只含有RNA。在這種情況下,RNA就起著遺傳物質(zhì)的作用。本文檔共70頁;當前第16頁;編輯于星期日\16點13分煙草花葉病毒拆分感染實驗

1956年格勒(Girer)和施拉姆(Schramm)

煙草花葉病毒(TMV)是由RNA與蛋白質(zhì)組成的管狀微粒,它的中心是單螺旋的RNA,外部是蛋白質(zhì)的外殼。感染煙草后,葉片出現(xiàn)花葉癥狀,生長處于不良狀態(tài),葉常呈畸形。

RNA接種到煙葉→發(fā)病RNARNA酶處理RNA→不發(fā)病TMV蛋白質(zhì):接種后不形成新的TMV不發(fā)病表明在不含DNA的TMV中,RNA就是遺傳物質(zhì)。本文檔共70頁;當前第17頁;編輯于星期日\16點13分煙草花葉病毒重組試驗以上實例直接證明DNA是生物主要的遺傳物質(zhì),而在缺少DNA的生物中,RNA則為遺傳物質(zhì)。佛蘭科爾-康拉特與辛格爾(Frankel-Conrat,H.和Singer,B.)把TMV的RNA與另一個病毒品系車前草病毒(HR,Holmesribgrass)的蛋白質(zhì),重新混合形成一種雜種病毒,用它感染煙草葉片時,所產(chǎn)生的新病毒顆粒與提供RNA的品系完全一樣,亦即親本的RNA決定了后代的病毒類型。本文檔共70頁;當前第18頁;編輯于星期日\16點13分絕大多數(shù)生物都是以DNA作為遺傳物質(zhì)的,因此DNA是主要的遺傳物質(zhì)。某些病毒不含有DNA,只含有RNA,在這種情況下,RNA就起著遺傳物質(zhì)的作用。核酸是一切生物的遺傳物質(zhì),核酸包括脫氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)。本文檔共70頁;當前第19頁;編輯于星期日\16點13分中心法則及其發(fā)展遺傳信息DNAmRNA蛋白質(zhì)DNA的復制RNA的反轉(zhuǎn)錄RNA的自我復制DNA指導的蛋白質(zhì)合成本文檔共70頁;當前第20頁;編輯于星期日\16點13分第二節(jié)核酸的化學組成與分子結(jié)構(gòu)核酸:以核苷酸為基本結(jié)構(gòu)單位構(gòu)成的多聚體,是一種高分子化合物。磷酸五碳糖環(huán)狀的含氮堿基核苷酸脫氧核糖核糖腺嘌呤A鳥嘌呤G胞嘧啶C胸腺嘧啶T尿嘧啶U本文檔共70頁;當前第21頁;編輯于星期日\16點13分本文檔共70頁;當前第22頁;編輯于星期日\16點13分DNA:磷酸+脫氧核糖+堿基(A/T/C/G)RNA:磷酸+核糖+堿基(A/U/C/G)高等動植物:DNA存在于染色體,葉綠體、線粒體中

RNA在細胞核(核仁、染色體)、細胞質(zhì)細菌:DNA和RNA。噬菌體:多數(shù)DNA,少數(shù)RNA。植物病毒:多數(shù)只有RNA。動物病毒:有些含RNA、有些含DNA。本文檔共70頁;當前第23頁;編輯于星期日\16點13分DNA右手雙螺旋結(jié)構(gòu)模型1953年Watson/Crick主要依據(jù):堿基互補配對的規(guī)律DNA分子的X射線衍射結(jié)果脫氧核糖和磷酸基通過3’,5’磷酸二酯鍵連接形成主鏈。主鏈以反向平行方式組成雙螺旋。兩條長鏈以互補堿基之間的氫鍵相連。堿基配對原則為:A=T、G=C3.雙螺旋直徑約20A,螺距為34A(10個堿基對)。本文檔共70頁;當前第24頁;編輯于星期日\16點13分細胞采取的主要構(gòu)象B-DNA:生理狀態(tài)下,每螺圈10.4個堿基對,右手螺旋。A-DNA:高鹽濃度下,每螺圈11個堿基對,右手螺旋。Z-DNA:序列富含GC,嘌呤和嘧啶交替出現(xiàn),每螺圈12個堿基對,左手螺旋。本文檔共70頁;當前第25頁;編輯于星期日\16點13分RNA的分子結(jié)構(gòu)

mRNAtRNArRNASnRNAMiRNA

除tRNA外,不具有穩(wěn)定的二級結(jié)構(gòu),無統(tǒng)一模式,由分子內(nèi)部堿基互補配對形成。數(shù)百種。只有73-93個核苷酸組成,主要特點為含稀有核苷。3'端都為CCA,用以接受氨基酸,叫葉柄;5'端都為pG四臂四環(huán)反密碼環(huán):7個核苷酸D環(huán)(二氫尿嘧啶)TψC環(huán)(ψ為假尿嘧啶核苷酸)可變環(huán):3-18個核苷酸t(yī)RNA二級結(jié)構(gòu):三葉草結(jié)構(gòu)tRNA三級結(jié)構(gòu):倒L型tRNA本文檔共70頁;當前第26頁;編輯于星期日\16點13分rRNA原核生物:5S/16S/23S

12015402900個核苷酸真核生物:5S/5.8S/18S/28S

12016019004700個核苷酸占細胞內(nèi)總RNA的80%左右,由120-5000個核苷酸組成,但種類很少本文檔共70頁;當前第27頁;編輯于星期日\16點13分第三節(jié)核酸的復制以親代DNA或RNA為模板,根據(jù)堿基配對的原則,在一系列酶的作用下,生成與親代相同的子代DNA或RNA的過程。本文檔共70頁;當前第28頁;編輯于星期日\16點13分1953年,Watson/Crick提出一、DNA的半保留復制以親代DNA雙鏈為模板,以堿基互補的方式合成子代DNA,這樣形成的子代DNA中,一條鏈來自親代DNA,另一條鏈是新合成的,這種復制方式叫半保留復制。本文檔共70頁;當前第29頁;編輯于星期日\16點13分1958年,Meselsen/Stahl證實E.coli穩(wěn)定同位素15N、14N培養(yǎng)基CsCl梯度離心

表明:DNA在代謝上是穩(wěn)定的,能保證親代的遺傳信息能穩(wěn)定地傳遞給后代。本文檔共70頁;當前第30頁;編輯于星期日\16點13分復制起點:AT富集區(qū)1.DNA復制的原點、方向與方式本文檔共70頁;當前第31頁;編輯于星期日\16點13分方向:雙向(真核生物,多數(shù)細菌、病毒)單向(噬菌體P2)原核生物:一個復制原點真核生物:多個復制原點本文檔共70頁;當前第32頁;編輯于星期日\16點13分DNA復制方式

從頭起始即復制叉式復制在復制原點解開成兩條單鏈,分別作為模板,合成互補鏈,出現(xiàn)復制叉。共價延伸先導鏈共價結(jié)合在一條親本鏈上滾環(huán)式復制切斷其中一條單鏈,5’端與蛋白質(zhì)結(jié)合,3’端DNA聚合酶催化加核苷酸。3’端不斷延長,5’端不斷甩出。甩出單鏈到一定長度后,開始復制其互補鏈。本文檔共70頁;當前第33頁;編輯于星期日\16點13分DNA聚合酶共同點:原料:脫氧核苷酸三磷酸(dNTP)模板:DNA需要RNA引物:含3’-OH合成方向:5’-3’2.與DNA復制相關的酶和蛋白質(zhì)本文檔共70頁;當前第34頁;編輯于星期日\16點13分真核細胞:5種DNA聚合酶

α(定位于胞核,參與復制引發(fā),不具5’-3’外切酶活性)β(定位于核內(nèi),參與修復,不具5’-3’外切酶活性)γ(定位于線粒體,參與線粒體復制,不具5’-3’,有3’-5’外切活性)δ(定位核,參與復制,具有3’-5’,不具5’-3’外切活性)ε(定位于核,參與損傷修復,具有3’-5’,不具5’-3’外切活性)原核細胞:(大腸桿菌為例)5種DNA聚合酶DNA聚合酶Ⅰ(1956年Kornberg)、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ(1999年),都與DNA鏈的延長有關。本文檔共70頁;當前第35頁;編輯于星期日\16點13分大腸桿菌的3種DNA聚合酶DNA聚合酶ⅠDNA聚合酶ⅡDNA聚合酶Ⅲ5’-3’聚合酶活性弱弱強3’-5’外切酶活性有有有5’-3’外切酶活性有(雙鏈有效)無有(單鏈有效)亞基單體酶多亞基酶多亞基酶主要功能修復DNA損傷/復制時RNA引物切除及其缺口填補修復紫外線引起的DNA損傷DNA鏈的延長本文檔共70頁;當前第36頁;編輯于星期日\16點13分DNA聚合酶催化反應本文檔共70頁;當前第37頁;編輯于星期日\16點13分其他酶和蛋白功能拓撲異構(gòu)酶引入或松開超螺旋DNA解旋酶使雙鏈DNA解鏈單鏈結(jié)合蛋白穩(wěn)定單鏈區(qū)引物合成酶合成RNA引物DNA連接酶連接DNA雙鏈中的單鏈切口本文檔共70頁;當前第38頁;編輯于星期日\16點13分3.DNA的復制過程(大腸桿菌為例)⑴

DNA復制的起始①拓撲異構(gòu)酶解開DNA超螺旋。②DnaA蛋白識別復制的起始位點(復制原點)。本文檔共70頁;當前第39頁;編輯于星期日\16點13分③DNA解旋酶在ATP供能下,每分鐘旋轉(zhuǎn)3000次解開雙螺旋。④單鏈結(jié)合蛋白結(jié)合在分開的單鏈上,避免產(chǎn)生單鏈內(nèi)配對。⑤DNA拓撲異構(gòu)酶解決由于復制叉推進產(chǎn)生的超螺旋問題。⑥引物合成酶合成RNA引物。本文檔共70頁;當前第40頁;編輯于星期日\16點13分⑵DNA鏈的延長

在DNA聚合酶Ⅲ作用下,以四種脫氧核苷三磷酸(dATP,dGTP,dCTP,dTTP)為底物,在RNA引物的3’端以磷酸二酯鍵連接上脫氧核糖核苷酸并釋放出焦磷酸。

DNA聚合酶Ⅲ5’-3’聚合酶活性

前導鏈:連續(xù)合成

滯后鏈:分段合成

岡崎片段:在3′5′方向鏈上,仍按從5′

3′的方向一段段地合成的DNA單鏈小片段(1000~2000bp)。本文檔共70頁;當前第41頁;編輯于星期日\16點13分DNA聚合酶Ⅰ:切除RNA引物(5’-3’外切酶活性)填補缺口(5’-3’聚合酶活性)連接酶:連接岡崎片段形成一條連續(xù)的單鏈。本文檔共70頁;當前第42頁;編輯于星期日\16點13分⑶DNA復制的終止復制原點對面600kb終止區(qū)Ter序列(終止陷阱):引起復制終止的序列。終止子利用物質(zhì)Tus可識別并結(jié)合形成Ter–Tus復合物,阻止解旋酶的解旋,從而阻斷復制本文檔共70頁;當前第43頁;編輯于星期日\16點13分4.真核生物DNA復制的特點原核生物真核生物DNA合成的時期整個細胞生長過程細胞周期S期復制起點單個多個(自主復制序列ARS)RNA引物長度10-60bp10bp岡崎片段長度1000-2000bp100-150bp前導鏈與滯后鏈的合成聚合酶Ⅲ聚合酶δ控制前導鏈聚合酶α控制后隨鏈復制速度100kb/min1-5kb/min端粒酶無有本文檔共70頁;當前第44頁;編輯于星期日\16點13分端粒(Telomere):真核細胞染色體末端的特殊結(jié)構(gòu),具有穩(wěn)定染色體的功能,防止染色體DNA降解、末端融合。人端粒是由6個堿基重復序列(TTAGGG)和結(jié)合蛋白組成。端粒酶(Telomerase):反轉(zhuǎn)錄酶,由蛋白質(zhì)和RNA兩部分組成核糖蛋白復合體,其中RNA是一段模板序列,指導合成端粒DNA的重復序列片段。本文檔共70頁;當前第45頁;編輯于星期日\16點13分RNA病毒中RNA的復制方式:RNA復制酶

反轉(zhuǎn)錄酶(1)含正鏈RNA(+)的病毒(例如,噬菌體Q):(+)RNA充當mRNA,合成蛋白,以(+)RNA為模板,復制,合成(-)RNA,再以(-)RNA為模板合成(+)RNA組裝成病毒顆粒。(2)含負鏈RNA(-)的病毒(例如狂犬病):由(-)RNA合成(+)RNA,再由(+)RNA合成蛋白質(zhì)、(-)RNA,組裝成病毒。(3)含雙鏈RNA的病毒(例如呼腸孤病毒):以(-)RNA為模板合成(+)RNA,以(+)RNA為模板合成(-)RNA和蛋白,組裝病毒顆粒。(4)逆轉(zhuǎn)錄病毒(例如白血病毒):由RNA反轉(zhuǎn)錄為DNA,以DNA為模板合成RNA,翻譯蛋白質(zhì)。

本文檔共70頁;當前第46頁;編輯于星期日\16點13分PCR(PolymeraseChainReaction)

聚合酶鏈式反應

本文檔共70頁;當前第47頁;編輯于星期日\16點13分第四節(jié)DNA的轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)錄(transcription)是以DNA中的一條單鏈為模板,游離堿基為原料,在DNA依賴的RNA聚合酶催化下合成RNA鏈的過程。三種RNA分子:mRNA、tRNA、rRNA本文檔共70頁;當前第48頁;編輯于星期日\16點13分DNA轉(zhuǎn)錄為RNADNA的自我復制原料NTP(核苷三磷酸)dNTP(脫氧核苷三磷酸)模板數(shù)目一條DNA雙鏈引物引導不需要需要酶RNA聚合酶DNA聚合酶區(qū)域特定區(qū)域全部DNA校對活性缺乏有一、DNA轉(zhuǎn)錄的一般特點本文檔共70頁;當前第49頁;編輯于星期日\16點13分二、原核生物DNA轉(zhuǎn)錄1.原核生物RNA聚合酶5種亞基α2ββ’ωσ兩個α(與核心酶形成有關)β(NTP結(jié)合位點)β′(DNA模板結(jié)合位點)ω(DNA結(jié)合)σ(起始因子,識別模板上的信息鏈和啟動子,一旦轉(zhuǎn)錄開始就被釋放。)本文檔共70頁;當前第50頁;編輯于星期日\16點13分2.原核生物DNA轉(zhuǎn)錄的步驟

起始----延伸----終止起始:RNA聚合酶正確識別DNA模板上的啟動子并形成由酶、DNA和核苷三磷酸(NTP)構(gòu)成的三元起始復合物。啟動子(promoter):是指DNA分子上被RNA聚合酶識別并結(jié)合形成起始轉(zhuǎn)錄復合物的區(qū)域,它還包括一些調(diào)節(jié)蛋白因子的結(jié)合位點。本文檔共70頁;當前第51頁;編輯于星期日\16點13分啟動區(qū)域:Pribonow盒-10區(qū)域(TATAAT序列)Sextama盒-35區(qū)域(TTGACA)核苷三磷酸:一般為GTP,少數(shù)為ATP第一個核苷三磷酸與第二個核苷三磷酸縮合生成3′-5′磷酸二酯鍵后,啟動階段結(jié)束,進入延伸階段。

本文檔共70頁;當前第52頁;編輯于星期日\16點13分延伸:σ亞基脫離酶分子,留下的核心酶與DNA的結(jié)合變松,因而較容易繼續(xù)往前移動。DNA雙鏈順次被打開,并接受新來的堿基配對,合成新的磷酸二酯鍵后,核心酶向前移去,已使用過的模板重新關閉起來,恢復原來的雙鏈結(jié)構(gòu)。原核RNA合成的速度:25~50nt/s本文檔共70頁;當前第53頁;編輯于星期日\16點13分終止:包括停止延伸及釋放RNA聚合酶和合成的RNA。在原核生物基因末端通常有一段終止序列即終止子,RNA合成就在這里終止。不依賴于終止因子ρ的終止體外實驗中,只有核心酶和終止子就足以使轉(zhuǎn)錄終止。依賴于終止因子ρ的終止ρ因子存在時,核心酶終止轉(zhuǎn)錄兩者有共同的結(jié)構(gòu)特征(序列差異)本文檔共70頁;當前第54頁;編輯于星期日\16點13分不依賴于終止因子ρ的終止子形成一個發(fā)夾結(jié)構(gòu),可阻止轉(zhuǎn)錄的終止。莖(7~20bp,富含G/C)+環(huán)發(fā)夾結(jié)構(gòu)末端:6~8個連續(xù)的U串依賴于ρ因子的終止子發(fā)夾結(jié)構(gòu)中的G/C對含量較少,發(fā)夾結(jié)構(gòu)末端沒有固定特征,靠與ρ的共同作用而實現(xiàn)終止。本文檔共70頁;當前第55頁;編輯于星期日\16點13分三、真核生物DNA的轉(zhuǎn)錄及轉(zhuǎn)錄后RNA的加工

真核生物與原核生物DNA轉(zhuǎn)錄的區(qū)別真核生物原核生物轉(zhuǎn)錄翻譯位置轉(zhuǎn)錄:細胞核翻譯:細胞質(zhì)核區(qū)一條mRNA編碼一個基因編碼多個基因RNA聚合酶Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ一種轉(zhuǎn)錄起始復雜簡單轉(zhuǎn)錄因子協(xié)助需要不需要轉(zhuǎn)錄后加工需要不需要(邊轉(zhuǎn)錄邊翻譯)本文檔共70頁;當前第56頁;編輯于星期日\16點13分真核生物RNA聚合酶Ⅱ啟動子結(jié)構(gòu)TATA盒上游調(diào)控區(qū):CAAT盒、GC盒(-90附近,GGGCGG)遠端調(diào)控區(qū):增強子本文檔共70頁;當前第57頁;編輯于星期日\16點13分增強子:存在于基因組中的對基因表達有調(diào)控作用的DNA調(diào)控元件。位置不定,結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子后,可增強基因表達。

本文檔共70頁;當前第58頁;編輯于星期日\16點13分真核生物的RNA聚合酶

RNApolⅠ、Ⅱ、Ⅲ、線粒體RNApol、葉綠體RNApol

種類分布合成的RNA類型對α-鵝膏蕈堿的敏感程度Ⅰ核仁45SrRNA前體(5.8S\18S\28S)不敏感Ⅱ核質(zhì)hnRNA(核不均一RNA,

mRNA前體)、部分snRNAs敏感Ⅲ核質(zhì)tRNA、部分snRNAs、5SrRNA存在物種特異性本文檔共70頁;當前第59頁;編輯于星期日\16點13分真核生物RNA聚合酶:8-14個亞基組成本文檔共70頁;當前第60頁;編輯于星期日\16點13分酵母RNA聚合酶Ⅱ的結(jié)構(gòu)(12個亞基)本文檔共70頁;當前第61頁;編輯于星期日\16點13分真核生物轉(zhuǎn)錄的三種RNApol對啟動子特異序列都沒有識別能力,轉(zhuǎn)錄起始過程需要很多的輔助因子(轉(zhuǎn)錄因子)參與,并且按一定順序與DNA形成復合物,協(xié)助RNApol定位于轉(zhuǎn)錄起始點。轉(zhuǎn)錄因子:能夠結(jié)合在某基因上游特異核苷酸序列上的蛋白質(zhì),活化后從胞質(zhì)轉(zhuǎn)位至胞核,通過識別和結(jié)合基因啟動子區(qū)的順式作用元件,啟動和調(diào)控基因表達。與RNA聚合酶Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ相對應的有三類轉(zhuǎn)錄因子:TFⅠ、TFⅡ、TFⅢ

本文檔共70頁;當前第62頁;編輯于星期日\16點13分與RNAPolⅡ聯(lián)合的轉(zhuǎn)錄因子(6種

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