丙肝抗體檢測的困惑與對(duì)策

背景1我國HCV感染以1型為主80%其中以1b型多見64%慢性化率60%-80%肝硬化10%-15%肝細(xì)胞癌1%-7%無預(yù)防性疫苗本文檔共29頁；當(dāng)前第1頁；編輯于星期三\0點(diǎn)14分1背景2最有效治療方案：聚乙二醇長效a-干擾素（PEG-IFN-a）聯(lián)合利巴韋林（Ribavirin)持續(xù)免疫學(xué)應(yīng)答（SVR）基因1型患者低于50%HCV抗體陽性率隨年齡增加而上升男女間無明顯差異本文檔共29頁；當(dāng)前第2頁；編輯于星期三\0點(diǎn)14分2Nature.Reviews.March2005Volume5本文檔共29頁；當(dāng)前第3頁；編輯于星期三\0點(diǎn)14分3Nature.Reviews.March2005Volume5本文檔共29頁；當(dāng)前第4頁；編輯于星期三\0點(diǎn)14分4實(shí)驗(yàn)診斷-2004版丙型肝炎防治指南一、常規(guī)指標(biāo)ALTAST白蛋白膽堿酯酶PT二、HCV抗體以EIA法對(duì)高危人群篩查免疫功能缺陷、自免病、易假陽性，HCVRNA有助于確診HCV感染第三代試劑敏感性、特意性高，可不用重組免疫印跡法（RIBA）驗(yàn)證本文檔共29頁；當(dāng)前第5頁；編輯于星期三\0點(diǎn)14分56/24/2023臨界值、灰區(qū)概念

應(yīng)結(jié)合臨床情況，慎重考慮灰區(qū)樣本的檢驗(yàn)結(jié)果本文檔共29頁；當(dāng)前第6頁；編輯于星期三\0點(diǎn)14分66/24/2023HCV抗體S/CO比值分布載自ClinicalChemistry49:6940–944(2003)本文檔共29頁；當(dāng)前第7頁；編輯于星期三\0點(diǎn)14分76/24/2023舉例：HCV抗體陽性標(biāo)本做確認(rèn)實(shí)驗(yàn)S/CO比值陰性n(%)不確定n(%)陽性n(%)1.0-4.0(n=98)69(70%)20(20%)9(9%)4.1-8.0(n=31)14(45%)13(42%)4(13%)8.1-12.0(n=32)5(16%)13(41%)14(44%)12.1-20.0(n=63)0(0%)3(5%)60(95%)載自ClinicalChemistry49:6940–944(2003)本文檔共29頁；當(dāng)前第8頁；編輯于星期三\0點(diǎn)14分86/24/2023HCV抗體陽性標(biāo)本做HCV-RNA檢測S/CO比值陽性n(%)陰性n(%)1.0-8.0(n=30)2(11%)28(89%)8.1-20(n=25)0(0%)25(100%)20.1-30(n=29)17(58%)12(42%)30.1-40(n=172)159(92%)13(8%)>40(n=283)261(92%)22(8%)載自ClinicalChemistry49:6940–944(2003)本文檔共29頁；當(dāng)前第9頁；編輯于星期三\0點(diǎn)14分9舉例本文檔共29頁；當(dāng)前第10頁；編輯于星期三\0點(diǎn)14分10JCliniHepatol,January2011,Vol.27,No.1本文檔共29頁；當(dāng)前第11頁；編輯于星期三\0點(diǎn)14分11JCliniHepatol,January2011,Vol.27,No.1本文檔共29頁；當(dāng)前第12頁；編輯于星期三\0點(diǎn)14分12需要HCV檢測的規(guī)范化流程本文檔共29頁；當(dāng)前第13頁；編輯于星期三\0點(diǎn)14分13HCV檢測策略因目的而異：診斷疫情監(jiān)測血液篩查——《丙型肝炎病毒實(shí)驗(yàn)室檢測技術(shù)規(guī)范》上報(bào)稿本文檔共29頁；當(dāng)前第14頁；編輯于星期三\0點(diǎn)14分14篩查試劑樣品陰性反應(yīng)初篩試驗(yàn)陽性反應(yīng)復(fù)檢試驗(yàn)均陰性反應(yīng)一陰一陽均陽性反應(yīng)補(bǔ)充試驗(yàn)原有試劑雙孔或原有試劑加另一種不同原理（或廠家）試劑報(bào)告陰性圖3HCV臨床診斷篩查檢測流程以診斷為目的的檢測策略

——HCV臨床診斷篩查檢測流程本文檔共29頁；當(dāng)前第15頁；編輯于星期三\0點(diǎn)14分15復(fù)檢陽性反應(yīng)樣品陽性反應(yīng)免疫印跡試驗(yàn)陰性反應(yīng)報(bào)告陰性圖4HCV直接進(jìn)行補(bǔ)充試驗(yàn)檢測流程可疑核酸檢測陽性反應(yīng)陰性反應(yīng)報(bào)告可疑報(bào)告陽性以診斷為目的的檢測策略

——HCV直接進(jìn)行補(bǔ)充試驗(yàn)檢測流程本文檔共29頁；當(dāng)前第16頁；編輯于星期三\0點(diǎn)14分16復(fù)檢陽性樣品可疑免疫印跡試驗(yàn)陰性反應(yīng)報(bào)告陰性圖5HCV“根據(jù)試劑S/CO比值”的確證檢測流程陽性反應(yīng)報(bào)告陽性報(bào)告可疑根據(jù)S/CO值判斷高S/CO值低S/CO值以診斷為目的的檢測策略

——HCV考慮S/Co比值的確證檢測流程僅限于試劑給出了特定閾值時(shí)使用本文檔共29頁；當(dāng)前第17頁；編輯于星期三\0點(diǎn)14分17根據(jù)補(bǔ)充試驗(yàn)結(jié)果報(bào)告抗-HCV檢測結(jié)果的解釋

抗-HCV篩查結(jié)果補(bǔ)充試驗(yàn)結(jié)果報(bào)告解釋篩查試驗(yàn)陰性不需檢測抗-HCV陰性未感染HCV，除非懷疑最近被感染或存在其它證據(jù)提示感染HCV。篩查試驗(yàn)陽性，且S/CO比值高未做抗-HCV陽性可能提示既往感染或現(xiàn)在感染了HCV；未做血清學(xué)補(bǔ)充試驗(yàn)。高S/CO比值的樣品常被確證為陽性（≥95％），但尚有<5％的樣品可能為假陽性；可在患者要求下進(jìn)行特異性更好的補(bǔ)充試驗(yàn)。篩查試驗(yàn)陽性免疫印跡陽性抗-HCV陽性提示既往感染或現(xiàn)在感染HCV。篩查試驗(yàn)陽性免疫印跡陰性抗-HCV陰性未感染HCV，除非懷疑最近被感染或存在其它證據(jù)提示感染HCV。篩查試驗(yàn)陽性免疫印跡可疑抗-HCV可疑不能確定抗-HCV結(jié)果及HCV感染狀態(tài)；應(yīng)再采集另一份樣品（>1個(gè)月）重測抗-HCV或HCVRNA。篩查試驗(yàn)陽性NAT陽性抗-HCV陽性HCVRNA陽性提示活動(dòng)性HCV感染。篩查試驗(yàn)陽性NAT陰性免疫印跡陽性抗-HCV陽性HCVRNA陰性存在抗-HCV，提示既往感染或現(xiàn)在感染HCV；由于某些HCV慢性感染病人的HCVRNA間隙陽性，因此一次HCVRNA陰性結(jié)果不能排除活動(dòng)性感染。篩查試驗(yàn)陽性NAT陰性RIBA陰性抗-HCV陰性HCVRNA陰性未感染HCV。篩查試驗(yàn)陽性NAT陰性RIBA可疑抗-HCV可疑HCVRNA陰性抗-HCV篩查結(jié)果可能是假陽性，在這種情況下，提示未感染HCV。本文檔共29頁；當(dāng)前第18頁；編輯于星期三\0點(diǎn)14分18樣品陰性反應(yīng)初篩試驗(yàn)陽性反應(yīng)復(fù)檢試驗(yàn)陰性反應(yīng)陽性反應(yīng)報(bào)告陰性篩查試劑（高敏感性）報(bào)告陽性篩查試劑（高特異性）圖7HCV感染疫情報(bào)告檢測流程以疫情監(jiān)測為目的的檢測策略本文檔共29頁；當(dāng)前第19頁；編輯于星期三\0點(diǎn)14分19另一種抗體篩查試劑或NAT以血液篩查為目的的檢測策略樣品陽性反應(yīng)初篩試驗(yàn)陰性反應(yīng)復(fù)檢試驗(yàn)陽性反應(yīng)陰性反應(yīng)報(bào)告陽性待確證抗體篩查試劑報(bào)告陰性圖6HCV血液篩查檢測流程本文檔共29頁；當(dāng)前第20頁；編輯于星期三\0點(diǎn)14分20基本原則1對(duì)于篩查試驗(yàn)陰性樣品，不需要做進(jìn)一步檢測，可報(bào)告“抗HCV陰性”對(duì)于篩查試驗(yàn)陽性樣品，可選擇S/CO比值進(jìn)行補(bǔ)充試驗(yàn)，或非S/CO比值的補(bǔ)充試驗(yàn)本文檔共29頁；當(dāng)前第21頁；編輯于星期三\0點(diǎn)14分21基本原則22a高比值，可報(bào)告“抗HCV陽性”，不需要做補(bǔ)充試驗(yàn)；低比值，最好做RIBA.此方案適合特定的篩查試劑（已證實(shí)高比值>95%補(bǔ)充試驗(yàn)陽性。2b所有篩查試驗(yàn)陽性標(biāo)本，均進(jìn)行RIBA；或先作HCVRNA檢測，陰性標(biāo)本再測RIBA本文檔共29頁；當(dāng)前第22頁；編輯于星期三\0點(diǎn)14分22丙肝病毒及丙肝抗體試劑11989年美國學(xué)者Choo等從感染輸血后非甲非乙型肝炎（PT-NonA、NonB）病毒的黑猩猩肝組織中，首次獲得病毒的全基因克隆同年，第一代EIA-1實(shí)際問世（單一NS4重組抗原，即C100-3）1992年，第二代EIA-2（增加Core和NS3重組抗原）本文檔共29頁；當(dāng)前第23頁；編輯于星期三\0點(diǎn)14分23丙肝病毒及丙肝抗體試劑21995年第三代EIA-3出現(xiàn)核心抗原比例降低重新構(gòu)建NS3和NS4，使抗原活性提高增加NS5抗原，診斷價(jià)值仍在探討縮短檢測窗口期（58天）本文檔共29頁；當(dāng)前第24頁；編輯于星期三\0點(diǎn)14分24假陽性問題美國CDC報(bào)道在HCV低流行率人群，如無償獻(xiàn)血員（低于10%）采用第二代(Abbott)和第三代(Ortho)EIA試劑假陽性率可達(dá)30%不能僅憑EIA結(jié)果判斷HCV感染以RIBA或HCVRNA進(jìn)行驗(yàn)證本文檔共29頁；當(dāng)前第25頁；編輯于星期三\0點(diǎn)14分25造成假陽性原因高IgG血癥：高濃度非特異性IgG可吸附到固相載體上或包被的抗原上RF干擾SOD超氧化歧化酶干擾HCV抗原不純本文檔共29頁；當(dāng)前第26頁；編輯于星期三\0點(diǎn)14分26我國情況RIBA試劑昂貴，我國試驗(yàn)室、采血機(jī)構(gòu)目前不做為補(bǔ)充試驗(yàn)假陽性結(jié)果引起部分就醫(yī)者或獻(xiàn)血員不必要的心理負(fù)擔(dān)不同試劑盒對(duì)弱陽性的檢出率不同同一廠家不同批次的試劑，質(zhì)量有差異我國HCV不同感染率的人群，S/CO閾值數(shù)據(jù)缺乏（美國主要１a型；中國主要1b型）在我國，S/CO高低不能預(yù)示真陽性的可能性大小本文檔共29頁；當(dāng)前第27頁；編輯于星期三\0點(diǎn)14分27對(duì)策加強(qiáng)與臨床溝通，交流HCV檢測技術(shù)特點(diǎn)利用備注