生物安全微生物

歷史上的實驗室微生物感染著名事件(1)1979年前蘇聯(lián)斯維爾德洛夫斯克炭疽菌泄漏事件醫(yī)生秘密日記：至1979年4月20日,350人發(fā)病，45人死亡，214人瀕臨死亡。高級官員從莫斯科趕來。消毒隊用氯對醫(yī)院進行了徹底消毒，房屋也被清洗。野狗被打死。街道的表層被推土機挖走然后重鋪。1992年之前，政府統(tǒng)一的說法是有少數(shù)人食用了遭炭疽菌污染的肉制品而致病?？烁癫米吡耸瑱z報告.2023/6/271中山大學微生物與生化制藥實驗室張革本文檔共83頁；當前第1頁；編輯于星期二\3點19分死亡數(shù)字依舊沒有解密1992年，葉利欽曾公開承認這件事是“我們的軍事研究出了問題”.

前蘇聯(lián)設在葉卡捷琳堡的國防微生物實驗室的地下試驗場在試驗武器時發(fā)生了事故(可能是武器爆炸)，從而導致了炭疽菌的泄露。1979年到1989年十年間對葉卡捷琳堡的人口統(tǒng)計表明，該地區(qū)的人口呈明顯下降趨勢，男女比例嚴重失調，新生兒中有中樞神經(jīng)問題的達80%。

2023/6/272中山大學微生物與生化制藥實驗室張革本文檔共83頁；當前第2頁；編輯于星期二\3點19分(2)1967年德國馬爾堡病毒實驗室感染事件1967年德國馬爾堡，法蘭克福和南斯拉夫的貝爾格萊德三個實驗室使用來自烏干達的猴子用于脊髓灰質炎疫苗研究。實驗室人員，醫(yī)務人員等37人感染馬爾堡出血熱，1/4的人死亡。原發(fā)性感染發(fā)生在實驗室工作人員中。繼發(fā)性病例涉及2名醫(yī)生、一名護士、一名尸檢助理和一名獸醫(yī)的妻子

.馬爾堡出血熱是一種惡性病毒傳染病，主要通過體液傳染，能引起高燒、惡心、腹瀉和嘔吐等各種緊急病癥，5至7天后會出現(xiàn)嚴重的出血癥狀，如果治療不及時病人會在一周內(nèi)死亡。

2023/6/273中山大學微生物與生化制藥實驗室張革本文檔共83頁；當前第3頁；編輯于星期二\3點19分3個月后德國專家才找到罪魁禍首：馬爾堡病毒，一種由猴類傳染給人類的危險的新病毒。馬爾堡病毒，與埃博拉病毒為同一家族，卻比埃博拉病毒厲害得多埃博拉也是一種十分罕見、極度恐怖的病毒，屬于已知感染人的最烈性病原體.這種病毒因其1976年首先在剛果的埃博拉河地區(qū)被發(fā)現(xiàn)而得名，據(jù)世界衛(wèi)生組織公布的最新數(shù)字顯示，全世界已有1100人感染了這一病毒，其中793人死于該病毒引起的埃博拉出血熱。2023/6/274中山大學微生物與生化制藥實驗室張革本文檔共83頁；當前第4頁；編輯于星期二\3點19分埃博拉-馬爾堡病毒病又叫做非洲出血熱、馬爾堡病毒病、埃博拉病毒出血熱這兩種疾病均無疫苗或有效治療，盡管延續(xù)幾年涉及檢測數(shù)百種動物、昆蟲和植物的強化調查，但是尚未查明該病毒的動物儲主或其它環(huán)境源。猴子易受感染，但未被認為是可生存的有效儲主，因為幾乎所有受感染動物太快死亡以至于不能維持該病毒的生存。

2023/6/275中山大學微生物與生化制藥實驗室張革本文檔共83頁；當前第5頁；編輯于星期二\3點19分(3)3起嚴重的實驗室SARS病毒感染事件

1.新加坡的實驗室sars感染事件

2003年9月新加坡國立大學27歲的研究生在環(huán)境衛(wèi)生研究院實驗室中感染SARS病毒。該研究生是被確診前已經(jīng)與多人有過接觸。原因調查：實驗室安全程序不當。該研究生在實驗室做西尼羅河病毒研究工作的，這個實驗室同時也做具有活性的SARS冠狀病毒研究。實驗室內(nèi)西尼羅河病毒與SARS病毒交叉污染是這次的傳染源。2023/6/276中山大學微生物與生化制藥實驗室張革本文檔共83頁；當前第6頁；編輯于星期二\3點19分第一，環(huán)境衛(wèi)生研究院只具有P2的生物安全設備，卻在院內(nèi)設立了用來進行更具危險性病毒研究的實驗室。第二，研究院同一時間處理多種不同的活性病毒研究，增加了生物安全方面的復雜程度，因處理程序不當，冠狀病毒與這名研究生研究的西尼羅病毒交叉感染。第三，其他研究機構的科研人員也可利用研究院的設備，而每一個科研人員的安全意識都不同環(huán)境部長就此事件事件，向新加坡人民致歉事故結論及處理：2023/6/277中山大學微生物與生化制藥實驗室張革本文檔共83頁；當前第7頁；編輯于星期二\3點19分2、中國臺灣地區(qū)的實驗室感染事件

2003年12月一名臺灣的SARS研究人員在實驗室感染SARS病毒。臺灣這名感染的研究人員工作的“國防預防醫(yī)學研究所”屬臺灣軍方研究單位，設立在山洞中，以兩層阻絕設施與外界隔離。這所實驗室擁有全臺最頂尖的實驗設備，實驗室等級列為P4，是臺灣唯一的“第4級生物安全實驗室”，超過“衛(wèi)生署疾病管制局”及“臺大醫(yī)院”等P3等級的實驗室，被譽為臺灣生化資源重鎮(zhèn)。當時在亞洲僅有日本擁有同等級的生物實驗室。2023/6/278中山大學微生物與生化制藥實驗室張革本文檔共83頁；當前第8頁；編輯于星期二\3點19分事故結論及處理：詹中校從實驗室操作到后來發(fā)病的處理過程，包括在實驗室清除廢棄物時出現(xiàn)疏失，沒有主動通報，后來還跑到新加坡去開會，出現(xiàn)發(fā)燒癥狀也沒有第一時間告知、通報，有一連串的錯誤，以致造成民眾心理的沖擊、甚至影響經(jīng)濟此外，根據(jù)世界衛(wèi)生組織的調查，臺灣SARS實驗室的一個主要問題是人手不足，科研人員常常單獨工作，提高了發(fā)生意外和錯誤被忽視的風險。世衛(wèi)組織人員強調科研人員不應單獨在實驗室工作，至少應有兩人在一起。世衛(wèi)組織人員指出，臺灣實驗室人員雖接受安全程序的教導，但他們?nèi)狈ψ銐虻谋O(jiān)督以確保他們真正遵守規(guī)章。給予詹中校停權處分。

2023/6/279中山大學微生物與生化制藥實驗室張革本文檔共83頁；當前第9頁；編輯于星期二\3點19分3、中國大陸的實驗室感染事件

2004年4月安徽、北京先后發(fā)現(xiàn)新的SARS病例，經(jīng)證實傳染源為中國CDC病毒實驗室的兩名研究生。安徽出現(xiàn)兩例SARS病例：安徽醫(yī)科大學的學生宋某和她的母親。北京患者李某則是曾護理宋某的護士。另一患者為中國CDC病毒實驗室工作的博士生楊某。

2023/6/2710中山大學微生物與生化制藥實驗室張革本文檔共83頁；當前第10頁；編輯于星期二\3點19分疫情源于實驗室內(nèi)感染

2004年4月非疫情的專項調查。調查結果如下：1.宋某和楊某兩個原發(fā)病例發(fā)生在同一實驗室。該實驗室有SARS冠狀病毒（SARS-CoV）的科研工作。2.封鎖病毒所后，未再出現(xiàn)任何SARS病人。3.從二代病例魏某（宋某之母）胸水分離到SARS-CoV，其全基因組序列與該室用于實驗的毒株高度同源。4.沒有發(fā)現(xiàn)宋某和楊某與野生動物接觸感染的證據(jù)。5.宋某和楊某發(fā)病潛伏期內(nèi)沒有任何其他SARS病例報告，沒有實驗室外接觸其他SARS病人而被感染的可能。6.楊某與宋某最后一次接觸，到楊某發(fā)病相距15天，僅在走廊碰面，楊某發(fā)病不可能是宋某傳染。2023/6/2711中山大學微生物與生化制藥實驗室張革本文檔共83頁；當前第11頁；編輯于星期二\3點19分事故結論及處理：衛(wèi)生部、科技部聯(lián)合調查組調查認定，這次疫情源于實驗室內(nèi)感染，是一起因實驗室安全管理不善，執(zhí)行規(guī)章制度不嚴，技術人員違規(guī)操作，安全防范措施不力，導致實驗室污染和工作人員感染的重大責任事故。中國CDC病毒所腹瀉病毒室跨專業(yè)從事SARS研究，采用未經(jīng)論證和效果驗證的非典病毒滅活方法，在不符合防護要求的普通實驗室內(nèi)操作非典感染材料，發(fā)現(xiàn)人員健康異常情況未及時上報。中國CDC主任李立明、副主任楊曉光等因對病毒管理不善負有重要領導責任，引咎辭職。

2023/6/2712中山大學微生物與生化制藥實驗室張革本文檔共83頁；當前第12頁；編輯于星期二\3點19分微生物基本知識：分類2023/6/2713中山大學微生物與生化制藥實驗室張革本文檔共83頁；當前第13頁；編輯于星期二\3點19分（2）微生物基本知識－病原微生物霍亂弧菌流感病毒2023/6/2714中山大學微生物與生化制藥實驗室張革本文檔共83頁；當前第14頁；編輯于星期二\3點19分放線菌螺旋體支原體2023/6/2715中山大學微生物與生化制藥實驗室張革本文檔共83頁；當前第15頁；編輯于星期二\3點19分黃曲霉白色念珠菌2023/6/2716中山大學微生物與生化制藥實驗室張革本文檔共83頁；當前第16頁；編輯于星期二\3點19分（3）微生物與疾病病毒感染真菌局部感染2023/6/2717中山大學微生物與生化制藥實驗室張革本文檔共83頁；當前第17頁；編輯于星期二\3點19分細菌全身感染2023/6/2718中山大學微生物與生化制藥實驗室張革本文檔共83頁；當前第18頁；編輯于星期二\3點19分中毒腫瘤2023/6/2719中山大學微生物與生化制藥實驗室張革本文檔共83頁；當前第19頁；編輯于星期二\3點19分（4）微生物與傳染病蚊蟲傳播飛沫傳播垂直傳播2023/6/2720中山大學微生物與生化制藥實驗室張革本文檔共83頁；當前第20頁；編輯于星期二\3點19分與傳染病相關的微生物G(+)G(-)細菌2023/6/2721中山大學微生物與生化制藥實驗室張革本文檔共83頁；當前第21頁；編輯于星期二\3點19分超級細菌（1）MRSA耐甲氧西林的金黃色葡萄球菌MRSA對所有?-內(nèi)酰胺類藥物如青霉素類、頭孢菌素類、碳青霉烯類、碳頭孢烯類和含酶抑制劑的復合制劑報告為耐藥，并常表現(xiàn)為對其他類抗生素的多重耐藥。2023/6/2722中山大學微生物與生化制藥實驗室張革本文檔共83頁；當前第22頁；編輯于星期二\3點19分目前國內(nèi)未發(fā)現(xiàn)耐萬古的金黃色葡萄球菌。但是萬古霉素用于體內(nèi)治療MRSA亦有失敗的病例報道。實驗室使用耐萬古的金黃色葡萄球菌，要備案并且在安全實驗室進行2023/6/2723中山大學微生物與生化制藥實驗室張革本文檔共83頁；當前第23頁；編輯于星期二\3點19分（2）超廣譜?-內(nèi)酰胺酶（ESBLs）

產(chǎn)ESBLs的代表菌株為肺炎克雷伯菌及大腸埃希菌，其他革蘭陰性桿菌如奇異變形桿菌、產(chǎn)酸克雷伯菌等也能產(chǎn)生。這種酶能水解新一類?-內(nèi)酰胺類藥物。頭孢噻肟、頭孢他啶、頭孢三嗪等及氨曲南等單環(huán)類抗生素，并介導細菌對這些抗生素耐藥的β-內(nèi)酰胺酶2023/6/2724中山大學微生物與生化制藥實驗室張革本文檔共83頁；當前第24頁；編輯于星期二\3點19分(3)耐青霉素肺炎鏈球菌和奈瑟菌奈瑟式菌肺炎鏈球菌2023/6/2725中山大學微生物與生化制藥實驗室張革本文檔共83頁；當前第25頁；編輯于星期二\3點19分(4)耐糖肽類和多種抗生素耐藥的腸球菌屬2023/6/2726中山大學微生物與生化制藥實驗室張革本文檔共83頁；當前第26頁；編輯于星期二\3點19分病毒：肝炎病毒、EBV、CMV、HSV、HZV、HIV等EBVHSV肝炎病毒HIV2023/6/2727中山大學微生物與生化制藥實驗室張革本文檔共83頁；當前第27頁；編輯于星期二\3點19分真菌隱球菌組織胞漿菌念珠菌

曲菌2023/6/2728中山大學微生物與生化制藥實驗室張革本文檔共83頁；當前第28頁；編輯于星期二\3點19分其他原核微生物支原體衣原體立克次體螺旋體2023/6/2729中山大學微生物與生化制藥實驗室張革本文檔共83頁；當前第29頁；編輯于星期二\3點19分（5）中華人民共和國傳染病防治法

(1989年2月21日中華人民共和國第七屆全國人民代表大會常務委員會第六次會議通過1989年2月21日中華人民共和國主席令第15號公布自1989年9月1日起施行)2023/6/2730中山大學微生物與生化制藥實驗室張革本文檔共83頁；當前第30頁；編輯于星期二\3點19分第一章總則第一條為了預防、控制和消除傳染病的發(fā)生與流行，保障人體健康，制定本法。

第二條國家對傳染病實行預防為主的方針，防治結合，分類管理。

第三條本法規(guī)定管理的傳染病分為甲類、乙類和丙類。2023/6/2731中山大學微生物與生化制藥實驗室張革本文檔共83頁；當前第31頁；編輯于星期二\3點19分甲類傳染病是指：鼠疫、霍亂。

乙類傳染病是指：病毒性肝炎、細菌性和阿米巴性痢疾、傷寒和副傷寒、艾滋病、淋病、梅毒、脊髓灰質炎、麻疹、百日咳、白喉、流行性腦脊髓膜炎、猩紅熱、流行性出血熱、狂犬病、鉤端螺旋體病、布魯氏菌病、炭疽、流行性和地方性斑疹傷寒、流行性乙型腦炎、黑熱病、瘧疾、登革熱。

2023/6/2732中山大學微生物與生化制藥實驗室張革本文檔共83頁；當前第32頁；編輯于星期二\3點19分丙類傳染病是指：肺結核、血吸蟲病、絲蟲病、包蟲病、麻風病、流行性感冒、流行性腮腺炎、風疹、新生兒破傷風、急性出血性結膜炎、除霍亂、痢疾、傷寒和副傷寒以外的感染性腹瀉病。國務院可以根據(jù)情況，增加或者減少甲類傳染病病種，并予公布；國務院衛(wèi)生行政部門可以根據(jù)情況，增加或者減少乙類、丙類傳染病病種，并予公布。2023/6/2733中山大學微生物與生化制藥實驗室張革本文檔共83頁；當前第33頁；編輯于星期二\3點19分第二章預防第十五條醫(yī)療保健機構、衛(wèi)生防疫機構和從事致病性微生物實驗的單位，必須嚴格執(zhí)行國務院衛(wèi)生行政部門規(guī)定的管理制度、操作規(guī)程，防止傳染病的醫(yī)源性感染、醫(yī)院內(nèi)感染、實驗室感染和致病性微生物的擴散。第十六條傳染病菌種、毒種的保藏、攜帶、運輸，必須按照國務院衛(wèi)生行政部門的規(guī)定嚴格管理。

2023/6/2734中山大學微生物與生化制藥實驗室張革本文檔共83頁；當前第34頁；編輯于星期二\3點19分第十七條被甲類傳染病病原體污染的污水、污物、糞便，有關單位和個人必須在衛(wèi)生防疫機構的指導監(jiān)督下進行嚴密消毒后處理；拒絕消毒處理的，當?shù)卣梢圆扇娭拼胧?/p>

被乙類、丙類傳染病病原體污染的污水、污物、糞便，有關單位和個人必須按照衛(wèi)生防疫機構提出的衛(wèi)生要求進行處理。

2023/6/2735中山大學微生物與生化制藥實驗室張革本文檔共83頁；當前第35頁；編輯于星期二\3點19分第二十條對從事傳染病預防、醫(yī)療、科研、教學的人員，現(xiàn)場處理疫情的人員，以及在生產(chǎn)、工作中接觸傳染病病原體的其他人員，有關單位應當根據(jù)國家規(guī)定，采取有效的防護措施和醫(yī)療保健措施。2023/6/2736中山大學微生物與生化制藥實驗室張革本文檔共83頁；當前第36頁；編輯于星期二\3點19分有關菌種保藏的規(guī)定由國和院行政部門指定的單位負責；一、二類菌（毒）種的供應由國務院衛(wèi)生行政部門指定的保藏管理單位供應。三類菌（毒）種由設有專業(yè)實驗室的單位或者國務院衛(wèi)生行政部門指定的保藏管理單位供應；2023/6/2737中山大學微生物與生化制藥實驗室張革本文檔共83頁；當前第37頁；編輯于星期二\3點19分有關菌種使用的規(guī)定使用一類菌（毒）種的單位，必須經(jīng)國務院衛(wèi)生行政部門批準；使用二類菌（毒）種的單位必須經(jīng)省級政府衛(wèi)生行政部門批準；使用三類菌（毒）種的單位，應當經(jīng)縣級政府衛(wèi)生行政部門批準；2023/6/2738中山大學微生物與生化制藥實驗室張革本文檔共83頁；當前第38頁；編輯于星期二\3點19分有關菌種運輸?shù)囊?guī)定一、二類菌（毒）種，應派專人向供誚單位領取，不得郵寄；三類菌（毒）種的郵寄單位的證明，并按照菌（毒）種出寄與裝的有關規(guī)定辦理。

2023/6/2739中山大學微生物與生化制藥實驗室張革本文檔共83頁；當前第39頁；編輯于星期二\3點19分第六章法律責任

第三十七條有本法第三十五條所列行為之一，引起甲類傳染病傳播或者有傳播嚴重危險的，比照刑法第一百七十八條的規(guī)定追究刑事責任。

第三十八條從事實驗、保藏、攜帶、運輸傳染病菌種、毒種的人員，違反國務院衛(wèi)生行政部門的有關規(guī)定，造成傳染病菌種、毒種擴散，后果嚴重的，依照刑法第一百一十五條的規(guī)定追究刑事責任；情節(jié)輕微的，給予行政處分。2023/6/2740中山大學微生物與生化制藥實驗室張革本文檔共83頁；當前第40頁；編輯于星期二\3點19分新刑法－傳染病菌種擴散罪

第三百三十一條：從事實驗、保藏、攜帶、運輸傳染病菌種、毒種的人員，違反國務院衛(wèi)生行政部門的有關規(guī)定，造成傳染病菌種、毒種擴散，后果嚴重的，處三年以下有期徒刑或者拘役；后果特別嚴重的，處三年以上七年以下有期徒刑。

2023/6/2741中山大學微生物與生化制藥實驗室張革本文檔共83頁；當前第41頁；編輯于星期二\3點19分（6）消毒與滅菌滅菌：殺滅物體上所有微生物的方法，包括殺滅細菌芽孢在內(nèi)的全部病原微生物和非病原微生物消毒：殺死物體上病原微生物的方法，并不一定能殺死含芽孢的細菌或非病原微生物防腐：防止或抑制體外細菌生長繁殖的方法無菌：不存在活菌的意思2023/6/2742中山大學微生物與生化制藥實驗室張革本文檔共83頁；當前第42頁；編輯于星期二\3點19分(6-1)干熱滅菌法

A焚燒：

B燒灼：

C干烤：160°～180℃，2hD紅外線滅菌：利用干烤箱，加熱160～180℃2小時，可殺死一切微生物，包括芽胞菌。2023/6/2743中山大學微生物與生化制藥實驗室張革本文檔共83頁；當前第43頁；編輯于星期二\3點19分高壓蒸汽滅菌法：121℃加熱20～30分鐘，殺滅所有微生物及芽孢。(6-2)濕熱滅菌法2023/6/2744中山大學微生物與生化制藥實驗室張革本文檔共83頁；當前第44頁；編輯于星期二\3點19分(6-3)紫外線消毒空氣與物體表面(6-4)化學消毒劑1酚類：濃度：石炭酸為3%-5%、來蘇兒為2%用途：地面、器具表面和皮膚的消毒2醇類：濃度：乙醇70%-75%用途：用于皮膚的消毒和體溫計等的浸泡3重金屬鹽類：（1）2%紅汞：皮膚、粘膜和小創(chuàng)傷（2）0.05-0.01%升汞：非金屬器皿2023/6/2745中山大學微生物與生化制藥實驗室張革本文檔共83頁；當前第45頁；編輯于星期二\3點19分4氧化劑：（1）0.1%高錳酸鉀：皮膚、尿道、水果（2）3%過氧化氫：創(chuàng)傷、皮膚粘膜（3）2%-2.5%碘酒：皮膚消毒（4）氯：飲水和游泳池（5）10%-20%漂白粉：地面、廁所等

5表面活性劑：

0.05%-0.1%新潔爾滅：皮膚粘膜、手術器械

6烷化劑：

10%甲醛：物品表面、空氣2023/6/2746中山大學微生物與生化制藥實驗室張革本文檔共83頁；當前第46頁；編輯于星期二\3點19分(6-5)消毒劑在實驗室的應用1皮膚：2.5%碘酒、70%酒精、2%紅汞2粘膜：1%硝酸銀、3%過氧化氫、0.1%高錳酸鉀等3被污染的空氣：甲醛熏蒸4手：2%來蘇兒、2%碘酊、70%酒精

2023/6/2747中山大學微生物與生化制藥實驗室張革本文檔共83頁；當前第47頁；編輯于星期二\3點19分實驗室分類按部門分醫(yī)學實驗室：1、疾控機構專業(yè)實驗室（病原微生物、理化、毒理、消殺、生化和動物實驗室等）2、醫(yī)學臨床實驗室：門診化驗室、生化實驗室3、教學實驗室：大專院校4、研究型實驗室：研究院、各種重點實驗室5、其他特殊實驗室：醫(yī)藥企業(yè)的GMP廠房等2023/6/2748中山大學微生物與生化制藥實驗室張革本文檔共83頁；當前第48頁；編輯于星期二\3點19分（7）病原微生物與實驗室分級

國家對病原微生物按照其對人類和動物以及環(huán)境的危害程度實行分類管理，對實驗室根據(jù)其對病原微生物的防護水平實行分級管理。

2023/6/2749中山大學微生物與生化制藥實驗室張革本文檔共83頁；當前第49頁；編輯于星期二\3點19分病原微生物的分類和管理第四類病原微生物，是指在通常情況下不會引起人或者動物疾病的微生物。第三類病原微生物，是指能夠引起人或者動物疾病，發(fā)生實驗室暴露可能引起感染，但不會引起嚴重危害，且能夠有效實施預防和治療的微生物

國家將病原微生物分為四類，衛(wèi)生部負責制定并調整四類病原微生物的種類。2023/6/2750中山大學微生物與生化制藥實驗室張革本文檔共83頁；當前第50頁；編輯于星期二\3點19分第二類病原微生物，是指能夠引起人或者動物的嚴重疾病，但不易在人或者動物間傳播，且能夠有效實施預防和治療的微生物。第一類病原微生物，是指能夠引起人或者動物的嚴重疾病，容易在人或者動物間傳播，或者沒有有效的預防和治療措施的微生物。

第一類、第二類病原微生物統(tǒng)稱為高致病性病原微生物。2023/6/2751中山大學微生物與生化制藥實驗室張革本文檔共83頁；當前第51頁；編輯于星期二\3點19分

國家實行統(tǒng)一的實驗室生物安全標準（中華人民共和國國家標準

GB19489-2004實驗室生物安全通用要求）。國家根據(jù)實驗室防護水平，將實驗室分為一級、二級、三級、四級。

2023/6/2752中山大學微生物與生化制藥實驗室張革本文檔共83頁；當前第52頁；編輯于星期二\3點19分

實驗室生物安全防護分級一級生物安全防護實驗室，簡稱BSL1或P1二級生物安全防護實驗室，簡稱BSL2或P2三級生物安全防護實驗室，簡稱BSL3或P3四級生物安全防護實驗室，簡稱BSL4或P42023/6/2753中山大學微生物與生化制藥實驗室張革本文檔共83頁；當前第53頁；編輯于星期二\3點19分一級生物安全防護實驗室

實驗室結構和設施、安全操作規(guī)程、安全設備適用于對健康成年人已知無致病作用的微生物，如工程細菌、工程真菌等。大腸桿菌啤酒酵母2023/6/2754中山大學微生物與生化制藥實驗室張革本文檔共83頁；當前第54頁；編輯于星期二\3點19分基礎實驗室從事基礎教學與研究，接觸1級生物危害微生物，即接觸不引起人或動物疾病的細菌、真菌、病毒等生物因子，如枯草桿菌、犬肝炎病毒等。只需開放式長形工作臺和好的微生物操作技術。

2023/6/2755中山大學微生物與生化制藥實驗室張革本文檔共83頁；當前第55頁；編輯于星期二\3點19分

本學院分子生物、基因工程、藥理、毒理等實驗室(布局在學院二樓)按一級生物安全防護標準執(zhí)行。其中生物材料的使用：菌株：大腸桿菌工程菌株、枯草桿菌工程菌株、啤酒酵母工程菌株以及其他工程菌株。載體：克隆及表達質粒（不包括哺乳病毒載體）細胞：不含安全性不明的致病性病毒的原代及傳代細胞核酸：DNA、RNA、PCR擴增產(chǎn)物等2023/6/2756中山大學微生物與生化制藥實驗室張革本文檔共83頁；當前第56頁；編輯于星期二\3點19分二級生物安全防護實驗室

實驗室結構和設施、安全操作規(guī)程、安全設備適用于對人或環(huán)境具有中等潛在危害的微生物。如：病原微生物分離培養(yǎng)、藥物實驗及病毒的血清學實驗2023/6/2757中山大學微生物與生化制藥實驗室張革本文檔共83頁；當前第57頁；編輯于星期二\3點19分基礎實驗室從事實驗健康服務、診斷、研究、接觸2級生物危害微生物，即引起人動物發(fā)病但不會引起嚴重危害的病原體。實驗室感染后不導致嚴重疾病，具有有效的治療和預防方法，傳播風險有限，如乙型肝炎病毒、沙門菌、弓形體等。除了開放式長形工作臺還應配置生物安全柜。實驗室應有生物危害標記。操作人員應身著防護服，有好的微生物操作技術，

2023/6/2758中山大學微生物與生化制藥實驗室張革本文檔共83頁；當前第58頁；編輯于星期二\3點19分

本學院涉及以下實驗的實驗室按二級生物安全防護標準執(zhí)行（布局在學院二樓的P2實驗室）。其中生物材料的使用：菌株：病原微生物的分類和管理法中對應的第三類微生物。如：TB,

MRSA，淋球菌等載體：哺乳病毒載體，尤其是生物安全性不明的逆轉錄病毒、慢病毒載體。細胞：含致病性哺乳動物病毒或生物安全性不明的原代及傳代細胞。如EB病毒。2023/6/2759中山大學微生物與生化制藥實驗室張革本文檔共83頁；當前第59頁；編輯于星期二\3點19分2023/6/2760中山大學微生物與生化制藥實驗室張革本文檔共83頁；當前第60頁；編輯于星期二\3點19分(一）腺病毒載體有些腺病毒在動物體內(nèi)可致瘤，在體外能轉化細胞。在美國軍隊中出現(xiàn)腺病毒引起的呼吸道疾病之后，腺病毒疫苗已經(jīng)徹底地檢查了其安全性,這促進了針對人免疫缺陷病毒和狂犬病病毒的重組腺病毒疫苗的研制發(fā)展?；蚬こ滩《据d體2023/6/2761中山大學微生物與生化制藥實驗室張革本文檔共83頁；當前第61頁；編輯于星期二\3點19分（二）腺相關病毒(AAV)載體是一種人細小病毒

本身無致病性，宿主范圍廣，轉移外源基因時，不伴隨任何病毒基因，以位點特異方式整合入人19號染色體

缺點：包裝容量有限，<5kb

2023/6/2762中山大學微生物與生化制藥實驗室張革本文檔共83頁；當前第62頁；編輯于星期二\3點19分（三）逆病毒轉錄載體、慢病毒載體易與宿主細胞基因穩(wěn)定整合，長期表達，隨機整合入宿主基因組，有致突變危險，不穩(wěn)定

2023/6/2763中山大學微生物與生化制藥實驗室張革本文檔共83頁；當前第63頁；編輯于星期二\3點19分2023/6/2764中山大學微生物與生化制藥實驗室張革本文檔共83頁；當前第64頁；編輯于星期二\3點19分攜帶病毒的細胞B958細胞株EB病毒含腺病毒的細胞株含逆轉錄病毒、慢病毒的細胞2023/6/2765中山大學微生物與生化制藥實驗室張革本文檔共83頁；當前第65頁；編輯于星期二\3點19分三級生物安全防護實驗室

實驗室結構和設施、安全操作規(guī)程、安全設備適用于主要通過呼吸途徑使人傳染上嚴重的甚至是致死疾病的致病微生物及其毒素，通常已有預防傳染的疫苗。如：艾滋病毒的研究應在三級生物安全防護實驗室中進行。HIV遏制實驗室

2023/6/2766中山大學微生物與生化制藥實驗室張革本文檔共83頁；當前第66頁；編輯于星期二\3點19分遏制實驗室從事特殊診斷與服務，接觸3級生物危害微生物，即引起人或動物嚴重疾病但通常不因偶然在個體間傳播，有治療方法的病原體，如TB、致病性真菌、圣路易斯腦炎病毒等。需要生物安全柜和其他操作所需的基本裝置，實驗室應有生物危害標記。操作人員身著特殊防護服，有好的微生物操作技術。人員進入受限，實驗室內(nèi)有定向氣流。

2023/6/2767中山大學微生物與生化制藥實驗室張革本文檔共83頁；當前第67頁；編輯于星期二\3點19分HIV實驗室生物安全級別艾滋病血清學檢測艾滋病血清學檢測（包括篩查和確認實驗室）、免疫學和核酸檢測應在符合Ⅱ級生物安全實驗室（BSL-2）要求的艾滋病檢測實驗室中進行。HIV分離、研究

HIV分離、細胞培養(yǎng)及研究工作應在Ⅲ級生物安全實驗室（BSL-3）中進行。2023/6/2768中山大學微生物與生化制藥實驗室張革本文檔共83頁；當前第68頁；編輯于星期二\3點19分四級生物安全防護實驗室

實驗室結構和設施、安全操作規(guī)程、安全設備適用于對人體具有高度的危險性，通過氣溶膠途徑傳播或傳播途徑不明，目前尚無有效的疫苗或治療方法的致病微生物及其毒素。SARS如：愛博拉-馬堡病毒

（嚴格遏制實驗室）2023/6/2769中山大學微生物與生化制藥實驗室張革本文檔共83頁；當前第69頁；編輯于星期二\3點19分嚴格遏制實驗室從事危險病原體操作。接觸4級生物危害微生物，即引起人類或動物非常嚴重的疾病，能在人與人、人與動物之間造成傳播，尚無有效治療和預防方法的病原體。應有配套的生物安全柜，人員身著帶正壓的連衣褲，實驗室空氣經(jīng)過濾，配備帶雙門的高壓滅菌器。除了三級防護措施外，人員進入實驗室時，應經(jīng)過密封的過渡艙，離開時應經(jīng)風淋，生物廢棄物應經(jīng)特殊處理。

2023/6/2770中山大學微生物與生化制藥實驗室張革本文檔共83頁；當前第70頁；編輯于星期二\3點19分目前世界上最先進的高危病毒實驗室———法國讓.梅里厄

P4實驗室。這個實驗室1999年3月開始運作，目標除了研究最毒、最新的病毒，也對歷史上舊的、變種的病毒作深入的研究、建檔，并找出治療的方法。面積僅為600平方米的實驗室造價達4000萬法郎，其中的儀器設備價值1000萬法郎，每年的運行維持和實驗費用是190萬歐元。里昂的

P4實驗室全部用由玻璃和鋼材建成，被一致公認為“新一代

P4的首創(chuàng)”。

2023/6/2771中山大學微生物與生化制藥實驗室張革本文檔共83頁；當前第71頁；編輯于星期二\3點19分主樓分三層：上層是空氣處理區(qū)，保證實驗室人員和動物呼吸用氣及實驗室空氣的消毒；下層是廢物處理區(qū)，對實驗室器材和實驗垃圾進行消毒；中層為真正的P4區(qū)。方形主樓的旁邊，還有一個兩層的、半圓柱形的、金屬附屬樓，負責進行實驗準備，控制實驗室的安全，全部由計算機實行中央控制。P4區(qū)主要有兩個面積為60至70平方米、相互獨立的實驗室和一個動物試驗室2023/6/2772中山大學微生物與生化制藥實驗室張革本文檔共83頁；當前第72頁；編輯于星期二\3點19分研究人員進出入實驗工作臺，必須經(jīng)過這樣的程序：用通行卡和個人密碼打開實驗區(qū)的第一道門，進入房間脫衣、進行清潔淋浴、穿上類似潛水員的密封服；進入另一室檢查服裝的密封性；再開一道門，即可進入動物實驗室；此后，還有兩道門將存放病菌的恒溫箱和實驗廳分開。在進入動物實驗室之前的每一個房間都是逐步減壓的，房間的門上都安裝充氣密封墊，以防止病菌往外擴散。與外界完全隔離的P4級無泄漏病毒實驗室

2023/6/2773中山大學微生物與生化制藥