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第六章微生物的生長(zhǎng)繁殖與生存因子詳解演示文稿本文檔共44頁(yè);當(dāng)前第1頁(yè);編輯于星期三\13點(diǎn)24分優(yōu)選第六章微生物的生長(zhǎng)繁殖與生存因子本文檔共44頁(yè);當(dāng)前第2頁(yè);編輯于星期三\13點(diǎn)24分外界因素引起的細(xì)菌數(shù)量的增加、停滯、衰減等變化。提問(wèn):如何研究呢?測(cè)菌數(shù)量變化與外因的關(guān)系細(xì)菌群體力量改變環(huán)境通常都是將細(xì)菌群體作為研究對(duì)象,考察細(xì)菌群體的生長(zhǎng)規(guī)律——“生、老、病、死”。提問(wèn):細(xì)菌群的“生、老、病、死”表現(xiàn)為何呢?本文檔共44頁(yè);當(dāng)前第3頁(yè);編輯于星期三\13點(diǎn)24分第一節(jié)微生物的生長(zhǎng)繁殖主要內(nèi)容:
微生物的生長(zhǎng)繁殖概念細(xì)菌的生長(zhǎng)曲線微生物生長(zhǎng)曲線在污(廢)水生物處理中的應(yīng)用
本文檔共44頁(yè);當(dāng)前第4頁(yè);編輯于星期三\13點(diǎn)24分一個(gè)微生物細(xì)胞合適的外界條件,吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),進(jìn)行代謝。如果同化作用的速度超過(guò)了異化作用個(gè)體的生長(zhǎng)原生質(zhì)的總量(重量、體積、大?。┚筒粩嘣黾尤绻骷?xì)胞組分是按恰當(dāng)?shù)谋壤鲩L(zhǎng)時(shí),則達(dá)到一定程度后就會(huì)發(fā)生繁殖,引起個(gè)體數(shù)目的增加。群體內(nèi)各個(gè)個(gè)體的進(jìn)一步生長(zhǎng)群體的生長(zhǎng)本文檔共44頁(yè);當(dāng)前第5頁(yè);編輯于星期三\13點(diǎn)24分微生物細(xì)胞吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),進(jìn)行新陳代謝,當(dāng)同化作用>異化作用時(shí),生命個(gè)體的重量和體積不斷增大的過(guò)程。生長(zhǎng)生命個(gè)體生長(zhǎng)到一定階段,通過(guò)特定方式產(chǎn)生新的生命個(gè)體,即引起生命個(gè)體數(shù)量增加的生物學(xué)過(guò)程。繁殖
群體生長(zhǎng)的實(shí)質(zhì)是包含著個(gè)體細(xì)胞生長(zhǎng)與繁殖交替進(jìn)行的過(guò)程:
群體生長(zhǎng)=個(gè)體生長(zhǎng)+個(gè)體繁殖一、微生物生長(zhǎng)繁殖的概念本文檔共44頁(yè);當(dāng)前第6頁(yè);編輯于星期三\13點(diǎn)24分世代時(shí)間簡(jiǎn)稱代時(shí)(Generationtime,G)
:就是一個(gè)世代所需的時(shí)間,因而也就是群體細(xì)胞數(shù)目擴(kuò)大1倍所需的時(shí)間,有時(shí)也被稱為倍增時(shí)間。單細(xì)胞微生物的世代時(shí)間:兩次細(xì)胞分裂之間的時(shí)間。多細(xì)胞生物的世代時(shí)間:兩次繁殖之間的時(shí)間。
世代時(shí)間的大小反映了一種微生物繁殖速度的快慢。不同種的微生物,其生長(zhǎng)繁殖速度不同。原核微生物的繁殖速度一般比真核微生物快。
本文檔共44頁(yè);當(dāng)前第7頁(yè);編輯于星期三\13點(diǎn)24分“生、老、病、死”(根據(jù)投食方式)分分批培養(yǎng)、連續(xù)式培養(yǎng)兩種情況1.分批培養(yǎng)只有開(kāi)始時(shí)的一次性投料和接種細(xì)菌(其余時(shí)間細(xì)菌根據(jù)環(huán)境變化自行生滅)(“坐吃山空型”)應(yīng)用:生理特性研究、生物發(fā)酵和生物治污二、研究微生物生長(zhǎng)的方法本文檔共44頁(yè);當(dāng)前第8頁(yè);編輯于星期三\13點(diǎn)24分生長(zhǎng)曲線的制作:接種 適溫培養(yǎng)定時(shí)取樣測(cè)定生長(zhǎng)量將少量細(xì)菌的純培養(yǎng),接種到一恒定容積的新鮮液體培養(yǎng)基中,在適宜條件下培養(yǎng),每隔一定時(shí)間取樣,測(cè)菌細(xì)胞數(shù)目。以培養(yǎng)時(shí)間為橫坐標(biāo),以細(xì)菌增長(zhǎng)數(shù)目的對(duì)數(shù)為縱坐標(biāo),繪制所得的一條反映細(xì)菌在整個(gè)培養(yǎng)期間菌數(shù)變化規(guī)律的曲線。
本文檔共44頁(yè);當(dāng)前第9頁(yè);編輯于星期三\13點(diǎn)24分細(xì)菌純培養(yǎng)生長(zhǎng)曲線圖
生
長(zhǎng)
速
率
靜止期
衰亡期
細(xì)菌數(shù)目的對(duì)數(shù)值
0時(shí)間t總菌數(shù)活菌數(shù)
停
滯
期對(duì)數(shù)期0+_時(shí)期的劃分:按照生長(zhǎng)速率常數(shù)(growthraceconstant)不同本文檔共44頁(yè);當(dāng)前第10頁(yè);編輯于星期三\13點(diǎn)24分本文檔共44頁(yè);當(dāng)前第11頁(yè);編輯于星期三\13點(diǎn)24分(1)停滯期特點(diǎn):代謝活躍,個(gè)體體積、重量增高。不立即進(jìn)行細(xì)胞分裂、增殖,數(shù)量不變甚至減少
細(xì)
菌
停
數(shù)滯
目期
的
對(duì)
數(shù)
值
0時(shí)間t提問(wèn):為什么會(huì)出現(xiàn)停滯期呢?適應(yīng)環(huán)境(合成相應(yīng)的酶),營(yíng)養(yǎng)儲(chǔ)備(用于復(fù)制合成)?崗前培訓(xùn)-“萬(wàn)事開(kāi)頭難”本文檔共44頁(yè);當(dāng)前第12頁(yè);編輯于星期三\13點(diǎn)24分◆菌種:繁殖速度較快的菌種的停滯期一般較短;◆接種物菌齡:用對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的菌種接種時(shí),其停滯期較短,甚至檢查不到停滯期;◆接種量:一般來(lái)說(shuō),接種量增大可縮短甚至消除停滯期;◆培養(yǎng)基成分:
在營(yíng)養(yǎng)成分豐富的天然培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的停滯期比在合成培養(yǎng)基上生長(zhǎng)時(shí)短;
接種后培養(yǎng)基成分有較大變化時(shí),會(huì)使停滯期加長(zhǎng)?!镉绊懲陂L(zhǎng)短的因素:本文檔共44頁(yè);當(dāng)前第13頁(yè);編輯于星期三\13點(diǎn)24分提問(wèn):根據(jù)上述原因選擇接種何種狀態(tài)的細(xì)菌停滯期會(huì)較長(zhǎng)?對(duì)數(shù)期的細(xì)菌、靜止期或衰亡期、受損細(xì)胞、富集培養(yǎng)基的細(xì)菌后三種靜止期細(xì)胞基本耗盡了各種輔酶或其他細(xì)胞成分受損細(xì)胞養(yǎng)傷修復(fù)富集培養(yǎng)基細(xì)菌需要合成“自力更生”酶本文檔共44頁(yè);當(dāng)前第14頁(yè);編輯于星期三\13點(diǎn)24分在實(shí)際工作中如接種菌種以啟動(dòng)新的水處理設(shè)施,投加新鮮污泥時(shí),接種的細(xì)菌不習(xí)慣于新環(huán)境,會(huì)出現(xiàn)或長(zhǎng)或短的停滯期,采用處于高效菌群對(duì)數(shù)期的菌種、增大接種量、盡量保持接種前后所處的培養(yǎng)介質(zhì)和條件一致等方法來(lái)縮短或消除停滯期。提問(wèn):我們可以通過(guò)哪些手段縮短停滯期呢?停滯期的出現(xiàn)會(huì)增加操作時(shí)間,降低工作效率!本文檔共44頁(yè);當(dāng)前第15頁(yè);編輯于星期三\13點(diǎn)24分(2)對(duì)數(shù)期
細(xì)
菌
數(shù)
目
的
對(duì)
對(duì)
數(shù)
數(shù)
期
值
0時(shí)間t如大腸桿菌在20℃時(shí)其代時(shí)是35℃條件下的2倍;傷寒桿菌在含0.125%的蛋白胨培養(yǎng)基中的代時(shí)為800min,而在含1.0%時(shí)僅為40min。特點(diǎn):繁殖速度最快,代謝最旺盛,代時(shí)最短應(yīng)用:接種用的好種子;代謝、生理研究的好材料提問(wèn):細(xì)菌的代時(shí)與哪些因素有關(guān)?
種類遺傳、個(gè)體健康情況(營(yíng)養(yǎng)、環(huán)境條件)?(青年)本文檔共44頁(yè);當(dāng)前第16頁(yè);編輯于星期三\13點(diǎn)24分G=(t2-t1)/n=(t2-t1)/3.322(lgX2-lgX1)R=1/G=3.322(lgX2-lgX1)/(t2-t1)
X2=X1·2n兩邊取對(duì)數(shù):lgX2=lgX1+nlg2(lg2=0.301)n=3.322(lgX2-lgX1)x2x1t1t2Lg細(xì)胞數(shù)/ml培養(yǎng)時(shí)間對(duì)數(shù)期三個(gè)重要參數(shù)(1)繁殖代數(shù)(n)(3)生長(zhǎng)速率常數(shù)(R)(2)代時(shí)(G)本文檔共44頁(yè);當(dāng)前第17頁(yè);編輯于星期三\13點(diǎn)24分
(3)靜止期(中年)特點(diǎn):*出生率=死亡率*微生物的生長(zhǎng)速率處于動(dòng)態(tài)平衡,培養(yǎng)物中的細(xì)胞數(shù)目達(dá)到最高值*細(xì)胞分裂速度下降,開(kāi)始積累內(nèi)含物,產(chǎn)芽孢的細(xì)菌開(kāi)始產(chǎn)芽孢
細(xì)
菌
停
數(shù)
滯
目
期
的
對(duì)
靜止期
對(duì)
數(shù)衰亡期
數(shù)
期
值
0t時(shí)間產(chǎn)生原因:★營(yíng)養(yǎng)物尤其是生長(zhǎng)限制因子的耗盡;★營(yíng)養(yǎng)物的比例失調(diào),如碳氮比不合適;★有害代謝廢物的積累(酸、醇、毒素等)★物化條件(pH、氧化還原勢(shì)等)不合適;本文檔共44頁(yè);當(dāng)前第18頁(yè);編輯于星期三\13點(diǎn)24分(4)衰亡期(老年)特點(diǎn):*生長(zhǎng)速率負(fù)增長(zhǎng),群體中的活菌數(shù)目急劇下降,死亡率>出生率;*細(xì)胞形態(tài)多樣,出現(xiàn)畸形,形成衰退型;*蛋白水解酶活躍,出現(xiàn)菌體死亡、自溶等,發(fā)生自溶的菌生長(zhǎng)曲線表現(xiàn)為向下跌落的趨勢(shì);*芽孢細(xì)菌芽孢大量釋放。
細(xì)
菌
延
數(shù)
緩
目
期
的
對(duì)
穩(wěn)定期
對(duì)
數(shù)
衰亡期
數(shù)
期
值
0t時(shí)間產(chǎn)生原因:生長(zhǎng)條件的進(jìn)一步惡化,使細(xì)胞內(nèi)的分解代謝大大超過(guò)合成代謝,繼而導(dǎo)致菌體的死亡。?提問(wèn):如何給細(xì)菌延年益壽呢?補(bǔ)營(yíng)養(yǎng)、環(huán)保(去除環(huán)境毒物)本文檔共44頁(yè);當(dāng)前第19頁(yè);編輯于星期三\13點(diǎn)24分如果把地球看作是封閉的間歇式培養(yǎng)基,人類看作是細(xì)菌,人口若不加控制,必將經(jīng)歷由于資源枯竭,污染物遍地而引發(fā)的大滅絕。自救——節(jié)約、節(jié)育防止“營(yíng)養(yǎng)物消耗過(guò)快”,環(huán)保防止“有害代謝物毒性抑制”。人類群體有類似規(guī)律嗎?本文檔共44頁(yè);當(dāng)前第20頁(yè);編輯于星期三\13點(diǎn)24分2.連續(xù)培養(yǎng)連續(xù)培養(yǎng)類型恒濁連續(xù)培養(yǎng)恒化連續(xù)培養(yǎng)一方面連續(xù)進(jìn)料,另一方面又連續(xù)出料。原理:進(jìn)料=補(bǔ)足營(yíng)養(yǎng)(“污染物”)
出料=稀釋菌濃度、毒物濃度本文檔共44頁(yè);當(dāng)前第21頁(yè);編輯于星期三\13點(diǎn)24分(1)恒濁連續(xù)培養(yǎng)
恒濁——培養(yǎng)基濁度恒定(實(shí)質(zhì)是細(xì)菌數(shù)量恒定)新鮮培養(yǎng)基光電池光源流速控制閥出水很少應(yīng)用反饋控制本文檔共44頁(yè);當(dāng)前第22頁(yè);編輯于星期三\13點(diǎn)24分化——?新鮮培養(yǎng)基流速控制閥出水應(yīng)用:環(huán)境工程、生物工程、實(shí)驗(yàn)室研究(細(xì)菌生理特性研究、細(xì)菌的快速篩選等)。流速恒定進(jìn)料營(yíng)養(yǎng)物總量(2)恒化連續(xù)培養(yǎng)本文檔共44頁(yè);當(dāng)前第23頁(yè);編輯于星期三\13點(diǎn)24分目前,污水連續(xù)生物處理法均類似于恒化連續(xù)培養(yǎng);(流速不完全恒定)本文檔共44頁(yè);當(dāng)前第24頁(yè);編輯于星期三\13點(diǎn)24分第二節(jié)微生物的生存因子
適宜環(huán)境:微生物能正常地進(jìn)行生命活動(dòng)不適宜環(huán)境:微生物的正常生命活動(dòng)受到抑制或被迫暫時(shí)改變?cè)械囊恍┨卣?。惡劣環(huán)境:微生物死亡或發(fā)生遺傳變異。本文檔共44頁(yè);當(dāng)前第25頁(yè);編輯于星期三\13點(diǎn)24分一、溫度
微生物的生長(zhǎng)要求有一定的溫度范圍:最低生長(zhǎng)溫度、最適生長(zhǎng)溫度、最高生長(zhǎng)溫度。根據(jù)細(xì)菌最適生長(zhǎng)溫度的不同,可把細(xì)菌分為:嗜冷菌、嗜中溫菌、嗜熱菌和嗜超熱菌。大多數(shù)菌為嗜中溫菌。本文檔共44頁(yè);當(dāng)前第26頁(yè);編輯于星期三\13點(diǎn)24分本文檔共44頁(yè);當(dāng)前第27頁(yè);編輯于星期三\13點(diǎn)24分溫度對(duì)微生物生長(zhǎng)速率的影響本文檔共44頁(yè);當(dāng)前第28頁(yè);編輯于星期三\13點(diǎn)24分廢水中的細(xì)菌一般都是嗜中溫菌,最適溫度多在30℃左右,嗜冷菌和嗜熱菌占少數(shù)。低溫、中溫和高溫細(xì)菌的生長(zhǎng)溫度范圍細(xì)菌最低溫度℃最適溫度℃最高溫度℃嗜冷菌—5~0
5~1020~30嗜中溫菌
5~1025~4045~50嗜熱菌
3050~6070~80嗜超熱菌55以上70~105110~113本文檔共44頁(yè);當(dāng)前第29頁(yè);編輯于星期三\13點(diǎn)24分低溫型微生物(嗜冷微生物):最適生長(zhǎng)溫度在5-15℃,主要分布在地球的兩極、冷泉、深海、冷凍場(chǎng)所及冷藏食品中。例:假單孢菌中的某些嗜冷菌在低溫下生長(zhǎng),常引起冷藏食品的腐敗。在低溫下生長(zhǎng)的機(jī)理:—具備低溫活性酶
—細(xì)胞質(zhì)膜含有大量的不飽和脂肪酸,在低溫下能保持半流動(dòng)性,使之能有效地集中必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。本文檔共44頁(yè);當(dāng)前第30頁(yè);編輯于星期三\13點(diǎn)24分方法主要措施適宜菌種保藏期評(píng)價(jià)冰箱保藏法(斜面)低溫各大類約1-6月簡(jiǎn)便冰箱保藏法(半固體)低溫、避氧細(xì)菌、酵母菌約6-12月簡(jiǎn)便石蠟油封保藏法低溫、阻氧各大類約1-2年簡(jiǎn)便甘油懸浮液保藏法低溫、保護(hù)劑、干燥、無(wú)營(yíng)養(yǎng)細(xì)菌、酵母菌約10年較簡(jiǎn)便砂土保藏法干燥、無(wú)營(yíng)養(yǎng)產(chǎn)孢子的微生物約1-10年簡(jiǎn)便有效冷凍干燥保藏法干燥、低溫、無(wú)氧、有保護(hù)劑各大類>5-15年繁而高效液氮保藏法超低溫、有保護(hù)劑各大類>15年繁而高效現(xiàn)有的微生物保藏法本文檔共44頁(yè);當(dāng)前第31頁(yè);編輯于星期三\13點(diǎn)24分高溫型微生物:最適生長(zhǎng)溫度為45℃-55℃,主要分布在溫泉、堆肥和土壤中。在高溫下能生長(zhǎng)的原因:①酶蛋以及核糖體有較強(qiáng)的抗熱性②核酸具有較高的熱穩(wěn)定性(核酸中G+C含量高(tRNA),可提供形成氫鍵,增加熱穩(wěn)定性)。③細(xì)胞膜中飽和脂肪酸含量高,較高溫度下能維持正常的液晶狀態(tài)。④細(xì)胞生長(zhǎng)速率快,能迅速合成生物大分子,以彌補(bǔ)由于高溫造成的破壞。本文檔共44頁(yè);當(dāng)前第32頁(yè);編輯于星期三\13點(diǎn)24分二、pH常見(jiàn)的四大類微生物中,對(duì)pH的最適(范圍)細(xì)菌:(4-10);放線菌:7-8(5-10);霉菌:3-6(1.5-10);酵母菌:5-6(1.5-10)。
微生物對(duì)pH的要求存在最高、最低和最適三個(gè)點(diǎn)。
在廢水生物處理中,pH一般在(6-9)。生物處理的主體是細(xì)菌,它要求pH略為偏堿。過(guò)高的pH會(huì)使原生動(dòng)物呆滯,菌膠團(tuán)解體,影響去除效果,而過(guò)低的pH,會(huì)使霉菌大量繁殖,造成污泥膨脹。本文檔共44頁(yè);當(dāng)前第33頁(yè);編輯于星期三\13點(diǎn)24分主要影響一些極性營(yíng)養(yǎng)物如脂肪酸、氨基酸以乙酸的吸收為例,細(xì)菌表面帶有電荷,如“—”1.影響細(xì)胞膜蛋白及胞外水解酶的活性從而影響營(yíng)養(yǎng)物的正常吸收與轉(zhuǎn)運(yùn)2.影響營(yíng)養(yǎng)物的解離與吸收外界pH對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響本文檔共44頁(yè);當(dāng)前第34頁(yè);編輯于星期三\13點(diǎn)24分三、氧化還原電位(簡(jiǎn)稱ORP或Eh)——某物質(zhì)與氫電極構(gòu)成原電池時(shí)的電壓高低,反映該物質(zhì)氧化性強(qiáng)弱。本文檔共44頁(yè);當(dāng)前第35頁(yè);編輯于星期三\13點(diǎn)24分提問(wèn):影響水樣氧化還原電位的因素有哪些?氧化性物質(zhì)(主要是氧氣濃度)與還原性物質(zhì)(有機(jī)物、H2S等)的含量
不同細(xì)菌適宜的氧化還原電位(mv)好氧細(xì)菌兼性厭氧細(xì)菌厭氧細(xì)菌+300~+400+100好氧呼吸-100無(wú)氧呼吸—200~—250本文檔共44頁(yè);當(dāng)前第36頁(yè);編輯于星期三\13點(diǎn)24分3、Eh的改變方法降低Eh
除氧及向培養(yǎng)基中添加還原性物質(zhì):H2S、抗壞血酸、含巰基化合物(半胱氨酸、谷胱甘肽、二硫蘇糖醇等)升高Eh
通空氣或氧及向培養(yǎng)基中添加氧化性物質(zhì):Fe(OH)3等本文檔共44頁(yè);當(dāng)前第37頁(yè);編輯于星期三\13點(diǎn)24分四、溶解氧
微生物可分為:好氧微生物、兼性厭氧微生物和厭氧微生物。1.好氧微生物(專性好氧和微量好氧)
O2的作用有兩個(gè),一是作為最終電子受體,二是參與甾醇類和不飽和脂肪酸的合成。微生物只能利用溶解于水中的O2,即溶解氧(DO)。DO與水溫、大氣壓等因素有關(guān),溫度越高,氧的溶解度越小。在好氧生物處理中,DO是個(gè)十分重要的因子,要求提供充足的氧,一般曝氣池中的DO要求控制在3-4mg/L。本文檔共44頁(yè);當(dāng)前第38頁(yè);編輯于星期三\13點(diǎn)24分2.兼性微生物即能在有氧條件下生存,又能在無(wú)氧條件下生存。但兩者所表現(xiàn)的生理狀態(tài)是很不同的。如酵母菌。3.厭氧微生物(專性厭氧和耐氧)
只有在無(wú)氧條件下才能生存。對(duì)于專性厭氧微生物,要求絕對(duì)無(wú)氧的條件,氧的存在會(huì)使微生物死亡,如產(chǎn)甲烷菌;另一些厭氧微生物(也叫耐氧微生物),氧的存在與否對(duì)它沒(méi)有影響,既不利用氧,也不中毒。如乳酸菌。本文檔共44頁(yè);當(dāng)前第39頁(yè);編輯于星期三\13點(diǎn)24分專性好氧菌好氧菌
微好氧菌兼性厭氧菌耐氧厭氧菌
厭氧菌(專性)厭氧菌本文檔共44頁(yè);當(dāng)前第40頁(yè);編輯于星期三\13點(diǎn)24分氧毒害厭氧菌的機(jī)制:超氧陰離子是活性氧的形式之一,帶奇數(shù)電子,負(fù)電荷。它即有分子性質(zhì),也有離子性質(zhì),反應(yīng)力極強(qiáng),性質(zhì)極不穩(wěn)定。在體內(nèi)可破壞各種重要生物高分子和膜,也可形成其他活性氧化物。在體內(nèi),超氧陰離子自由基可以自由酶促(如黃嘌呤氧化酶)或非酶促方式形成。O2+
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