正交設(shè)計(jì)法優(yōu)選翻白草中總黃酮的提取工藝

正交設(shè)計(jì)法優(yōu)選翻白草中總黃酮的提取工藝【摘要】［目的］探討翻白草中總黃酮的最佳提取工藝.［方法］采用正交設(shè)計(jì)法以提取物中總黃酮含量為評(píng)價(jià)指標(biāo)，以乙醇濃度、提取時(shí)間、固液比及提取次數(shù)為考察因素，篩選翻白草的最佳提取工藝.應(yīng)用分光光度儀測(cè)定提取物中總黃酮的含量.［結(jié)果］最佳提取條件為在乙醇濃度為700mL/L,固液比為1∶12，提取時(shí)間為150min，提取2次，其中乙醇用量為主要影響因素.［結(jié)論］所優(yōu)選的提取工藝合理,操作簡(jiǎn)便,可行.

【關(guān)鍵詞】黃酮類提取工藝植物藥用

ABSTRACT:OBJECTIVETostudytheoptimumextractiontechniqueoftotalflavonoidsinthePotentilladiscolororthogonaldesign,totalflavonoidsinextractwasasevaluationindex,andethanolconcentration,extractiontime,ratioofmaterialtosolventandextrationfrequencywereasinspectingfactorstoscreenedtheoptimumextractiontechnique,andtotalflavonoidscontentinextractwasdetectedbyoptimumextractingconditionswerethattheethanolconcentrationwas700mL/L,ratioofmaterialtosolvent1∶12,extractiontime150min,andextractionprocesswastwotimes,inwhichtheethanoldosewasimportantinfluencingprocedureisconvenient,appropriateandfeasible.

Keywords:flavones;extractiontechnology;plants,medicinal

翻白草為薔薇科委陵菜屬干燥全草，全草含鞣質(zhì)，植株各部分均含有黃酮類化合物［1］.它具有抗?jié)?、解痙、消炎及降血脂等功能，廣泛應(yīng)用于制藥及食品加工業(yè)［2］.本實(shí)驗(yàn)對(duì)影響翻白草黃酮提取的主要因素進(jìn)行了正交試驗(yàn)，以黃酮含量為指標(biāo)，采用方差分析法進(jìn)行分析，篩選了翻白草的最佳提取工藝，為進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用翻白草提供了依據(jù).

1材料

原料為翻白草全草，于2005年6月采集于吉林省延邊朝鮮族自治州銅佛寺鎮(zhèn)，經(jīng)延邊大學(xué)藥學(xué)院生藥學(xué)教研室呂惠子副教授鑒定為翻白草正品.蘆丁購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所;電子天平為上海精密科學(xué)儀器有限公司產(chǎn)品，REE52C型水浴鍋為北京市醫(yī)療設(shè)備總廠產(chǎn)品，紫外分光光度儀為上海精密科學(xué)儀器有限公司產(chǎn)品；所用試劑均為AR級(jí).x【摘要】［目的］探討翻白草中總黃酮的最佳提取工藝.［方法］采用正交設(shè)計(jì)法以提取物中總黃酮含量為評(píng)價(jià)指標(biāo)，以乙醇濃度、提取時(shí)間、固液比及提取次數(shù)為考察因素，篩選翻白草的最佳提取工藝.應(yīng)用分光光度儀測(cè)定提取物中總黃酮的含量.［結(jié)果］最佳提取條件為在乙醇濃度為700mL/L,固液比為1∶12，提取時(shí)間為150min，提取2次，其中乙醇用量為主要影響因素.［結(jié)論］所優(yōu)選的提取工藝合理,操作簡(jiǎn)便,可行.

【關(guān)鍵詞】黃酮類提取工藝植物藥用

OptimizationofextractionprocessoftotalflavonoidsfromthePotentilladiscolorBungebyorthogonaldesign

JINQuan,LIANLihua，LUOHuishan*

(YanbianUniversityCollegeofPharmacy,Yanji133000,Jilin,China)

ABSTRACT:OBJECTIVETostudytheoptimumextractiontechniqueoftotalflavonoidsinthePotentilladiscolororthogonaldesign,totalflavonoidsinextractwasasevaluationindex,andethanolconcentration,extractiontime,ratioofmaterialtosolventandextrationfrequencywereasinspectingfactorstoscreenedtheoptimumextractiontechnique,andtotalflavonoidscontentinextractwasdetectedbyoptimumextractingconditionswerethattheethanolconcentrationwas700mL/L,ratioofmaterialtosolvent1∶12,extractiontime150min,andextractionprocesswastwotimes,inwhichtheethanoldosewasimportantinfluencingprocedureisconvenient,appropriateandfeasible.

Keywords:flavones;extractiontechnology;plants,medicinal

翻白草為薔薇科委陵菜屬干燥全草，全草含鞣質(zhì)，植株各部分均含有黃酮類化合物［1］.它具有抗?jié)儭⒔獐d、消炎及降血脂等功能，廣泛應(yīng)用于制藥及食品加工業(yè)［2］.本實(shí)驗(yàn)對(duì)影響翻白草黃酮提取的主要因素進(jìn)行了正交試驗(yàn)，以黃酮含量為指標(biāo)，采用方差分析法進(jìn)行分析，篩選了翻白草的最佳提取工藝，為進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用翻白草提供了依據(jù).

1材料

原料為翻白草全草，于2005年6月采集于吉林省延邊朝鮮族自治州銅佛寺鎮(zhèn)，經(jīng)延邊大學(xué)藥學(xué)院生藥學(xué)教研室呂惠子副教授鑒定為翻白草正品.蘆丁購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所;電子天平為上海精密科學(xué)儀器有限公司產(chǎn)品，REE52C型水浴鍋為北京市醫(yī)療設(shè)備總廠產(chǎn)品，紫外分光光度儀為上海精密科學(xué)儀器有限公司產(chǎn)品；所用試劑均為AR級(jí).

2方法與結(jié)果

對(duì)照品溶液的制備及標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制精密稱取105℃條件下干燥至恒質(zhì)量的蘆丁對(duì)照品，用700mL/L乙醇溶解定容于100mL容量瓶中，即得質(zhì)量濃度為/L的蘆丁對(duì)照品溶液.精確吸取蘆丁對(duì)照品溶液0，1，2，3，4，5mL,分別置于25mL容量瓶中，各加入50g/L亞硝酸鈉溶液，搖勻，放置6min，加入100g/L硝酸鋁溶液，搖勻，放置6min，再加入40g/L氫氧化鈉溶液10mL，加入700mL/L乙醇至刻度，搖勻，放置15min，于510nm處測(cè)定吸光度［3,4］.得回歸方程y=+，蘆丁質(zhì)量濃度在20～50mg/L范圍內(nèi)，與峰面積呈良好的線性關(guān)系.

圖1蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線

翻白草中總黃酮提取量的測(cè)定精確稱取翻白草100g置于錐形瓶中，按比例加入一定量的提取溶劑回流提取總黃酮，在80℃條件下回流提取一定時(shí)間，流水冷卻后過(guò)濾，合并過(guò)濾液，定容至100mL，即得總黃酮提取液［5,6］.精確吸取總黃酮提取液置于100mL容量瓶中，按標(biāo)準(zhǔn)曲線的要求測(cè)定吸光度，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線得總黃酮含量.

翻百草中總黃酮提取工藝的正交試驗(yàn)主要對(duì)乙醇濃度、提取時(shí)間、固液比及提取次數(shù)等4個(gè)因素進(jìn)行四因素三水平L9(34)正交試驗(yàn)，考察因素和水平見(jiàn)表1，結(jié)果見(jiàn)表2及表3.由表2中k1，k2，k3，R分析見(jiàn)，乙醇濃度、提取時(shí)間、固液比和提取次數(shù)4個(gè)因素對(duì)總黃酮提取率影響的主次順序依次為乙醇濃度、提取時(shí)間、固液比、提取次數(shù)，最佳提取條件為在乙醇濃度為700mL/L.表1因素水平表表2正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果表3方差分析結(jié)果

最佳條件重復(fù)性驗(yàn)證試驗(yàn)為證實(shí)上述篩選法提取工藝的穩(wěn)定性，以優(yōu)選工藝，重復(fù)進(jìn)行3次實(shí)驗(yàn)，測(cè)定翻白草總黃酮平均提取量為/kg,RSD為%，提示該工藝穩(wěn)定，重復(fù)性好.

3討論

正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,在乙醇熱浸提取翻白草中總黃酮時(shí)，各因素對(duì)提取量的影響大小依次為乙醇濃度、提取時(shí)間、固液比及提取次數(shù),其中乙醇濃度的影響最大.在選定的水平范圍內(nèi)，隨著回流溫度和固液比的增大,提取量亦提高，但由于本試驗(yàn)中使用的固液比值較大，提取充分，故對(duì)翻白草總黃酮提取量的影響較小．從極差分析中可直觀見(jiàn)，乙醇提取翻白草總黃酮的最佳工藝條件是A2B3C3D2，即乙醇濃度為700mL/L,固液比為1∶12,提取時(shí)間為150min,提取2次，以最佳提取工藝測(cè)得翻白草中總黃酮含量為/kg.

【參考文獻(xiàn)】

［1］鐘海軍.翻白草的化學(xué)成分［J］.中草藥，2000，31：488.

［2］鄒俊利.翻白草的研究進(jìn)展［J］.黑龍江醫(yī)藥科學(xué),2006，29:104.

［3］許松姬，韓春姬，許妍姬.輪葉黨參降血脂保健