電針對雌雄實驗性老鼠脂代謝的影響

電針對雌雄實驗性老鼠脂代謝的影響

本文作者：孫東云孫立虹梁玉磊張書義肖紅玲吳中秋李文麗李新華馬紅利單位：河北醫(yī)科大學中醫(yī)學院針灸系北京市豐臺區(qū)興隆中醫(yī)院中醫(yī)科河北醫(yī)科大學中醫(yī)學院實驗中心

單純性肥胖癥患者脂肪組織攝取能量的效應增強會使甘油三酯的合成和儲存增加，同時高密度脂蛋白膽固醇的含量下降，其清除膽固醇的能力減弱，使機體內呈現(xiàn)高ＴＣ血癥狀態(tài)；ＴＣ含量的增加又可抑制肝臟合成低密度脂蛋白膽固醇受體，從而使ＬＤＬ－Ｃ含量升高。這種脂類代謝的異常不僅可引起肥胖，還是動脈粥樣硬化產(chǎn)生的重要因素之一［１］。大量研究證明，針刺減肥除了可以加快局部脂肪細胞分解代謝的速度［２］，還具有較好的降血脂作用［３－４］，但目前關于針刺對雌雄兩性脂代謝影響差異的研究還相對缺乏。由于雌雄兩性在激素分泌、新陳代謝、免疫調節(jié)等方面都存在顯著差異［５－６］，故本實驗以雌雄兩性單純性肥胖大鼠為研究對象，電針干預后觀察其血脂含量的變化異同，探討電針刺激對雌雄兩性大鼠肥胖調節(jié)機制的異同，以期為臨床治療不同性別單純性肥胖癥提供科學的實驗依據(jù)。

１材料與方法

１．１實驗動物出生１ｄ的清潔級ＳＤ大鼠８窩，雌雄各半，體質量６～９ｇ，由河北醫(yī)科大學實驗動物中心提供。實驗動物處置經(jīng)河北省實驗動物管理委員會審核批準。

１．２試劑與儀器谷氨酸鈉注射液；ＴＧ、ＴＣ試劑盒；ＬＤＬ－Ｃ試劑盒；ＨＤＬ－Ｃ試劑盒；一次性無菌針灸針；韓氏電針儀ＷＱ１００２Ｆ型；Ｈｕｍａｌｙｚｅｒ２０００型生化分析儀；ＭＳＥ－２５型高速冷凍離心機。

１．３造模及分組將８窩大鼠置于室溫為２５℃左右、明暗各１２ｈ的清潔級動物實驗室，適應性喂養(yǎng)１ｄ后造模。隨機從每窩乳鼠中抽取雌、雄各３～４只按每只０．２ｍＬ／１０ｇ在頸部皮下注射１５％谷氨酸鈉０．９％氯化鈉溶液，其余乳鼠注射０．９％氯化鈉溶液作為對照，連續(xù)５ｄ。２１ｄ齡斷乳，雌雄分籠飼養(yǎng)，經(jīng)Ｌ－ＭＳＧ處理的大鼠均喂高脂飼料，未經(jīng)Ｌ－ＭＳＧ處理的大鼠喂普通飼料。３６ｄ后測量模型大鼠和正常大鼠體重、體長，并計算其體質量指數(shù)［Ｌｅｅ’ｓ指數(shù)＝體質量１／３×１０３／體長［７］，其數(shù)值大小反映大鼠體脂含量］，模型大鼠Ｌｅｅ’ｓ指數(shù)大于正常大鼠３０以上為造模成功［８］。將造模成功的肥胖大鼠隨機分為模型雌、模型雄、電針雌及電針雄４組，每組１０只，繼續(xù)喂高脂飼料；注射０．９％氯化鈉溶液的雌、雄大鼠各１０只作為正常組，繼續(xù)喂普通飼料。普通飼料和高脂飼料均由河北醫(yī)科大學實驗動物中心提供。

１．４針刺方法電針雌、雄組大鼠：不做麻醉，將其固定于自制束鼠器上，按照《中國獸醫(yī)針灸學》的方法取穴，并參照人體有關穴位，以動物比較學方法定位［９］。取大鼠“曲池”“后三里”“豐隆”“三陰交”“中脘”和“關元”穴，常規(guī)消毒后針刺，平補平瀉捻轉手法行針１ｍｉｎ。后在同側“后三里”與“三陰交”及雙側“豐隆”接通韓氏電針儀，頻率２Ｈｚ，強度１～２ｍＡ，３０ｍｉｎ后停針。每日治療１次，連續(xù)針刺２８ｄ。模型雌、雄兩組及正常雌、雄兩組：用上述方法將實驗大鼠在自制束鼠器上固定３０ｍｉｎ，每日１次，連續(xù)２８ｄ，不施加其它干預措施。

１．５觀察指標及檢測方法大鼠的體質量、體長及Ｌｅｅ’ｓ指數(shù)的計算：由專人分別在治療前后測量各組大鼠的體質量、體長，每只大鼠測２次，如果２次所測值相近則取其平均值，如果相差很大，測量第３次，取相近兩值的平均值作為測量結果，計算其Ｌｅｅ’ｓ指數(shù)。血漿ＴＧ、ＴＣ、ＬＤＬ－Ｃ、ＨＤＬ－Ｃ含量的測定：治療結束后各組大鼠禁食１２ｈ，用１０％水合氯醛腹腔注射麻醉后股動脈采血６ｍＬ，加入預冷的加有１％肝素和抑肽酶的塑料試管中，４℃、３０００ｒ／ｍｉｎ離心５ｍｉｎ，提取上清液測定血脂各項指標。于生化分析儀上用甘油磷酸氧化酶－過氧化物酶法測ＴＧ含量，膽固醇氧化酶法測ＴＣ含量，直接一步法測ＨＤＬ－Ｃ和ＬＤＬ－Ｃ含量。１．６統(tǒng)計學處理數(shù)據(jù)處理運用ＳＰＳＳ１３．０統(tǒng)計軟件，計量資料數(shù)據(jù)用均數(shù)±標準差表示，組間比較采用方差分析和ｑ檢驗法，Ｐ＜０．０５為差異有統(tǒng)計學意義。

２結果

２．１電針對雌雄兩性肥胖大鼠Ｌｅｅ’ｓ指數(shù)的影響圖１結果顯示，造模后，模型雌、雄兩組和電針雌、雄兩組大鼠的Ｌｅｅ’ｓ指數(shù)均高于正常雌、雄兩組，差異有統(tǒng)計學意義，說明造模成功。治療４周后，模型雌、雄兩組大鼠Ｌｅｅ’ｓ指數(shù)均高于正常雌、雄兩組；電針雌、雄兩組大鼠Ｌｅｅ’ｓ指數(shù)較模型雌、雄兩組均有明顯降低，且電針雄組較電針雌組下降明顯。圖３結果顯示，模型雌、雄兩組血漿ＬＤＬ－Ｃ含量較正常組升高，ＨＤＬ－Ｃ含量較正常組降低；電針雌、雄兩組血漿ＬＤＬ－Ｃ含量較模型雌、雄兩組均有下降，ＨＤＬ－Ｃ含量較模型雌、雄兩組均有升高；電針雄組與雌組比較差異無統(tǒng)計學意義。

３討論

脂代謝異常是引起肥胖的重要因素，主要包括ＴＣ、ＴＧ、ＬＤＬ－Ｃ和ＨＤＬ－Ｃ的代謝異常。ＴＣ可合成某些激素，參與機體如糖類等物質的代謝，對維持人體正常的生理功能有重要意義。但長期大量攝入ＴＣ，會形成高膽固醇血癥，對人體不利。ＴＧ在肝臟和脂肪等組織中合成，主要儲存在脂肪組織中，分解可供給機體能量，體內ＴＧ的合成速度加快，可導致體質量增加。ＨＤＬ－Ｃ是將各組織中的ＴＣ運回肝臟代謝，清除血液循環(huán)中游離ＴＣ，同時它還能夠競爭性地與ＬＤＬ－Ｃ受體結合，阻斷ＬＤＬ－Ｃ進入動脈壁細胞，清除血管壁中的極低密度脂蛋白和乳糜微粒。肥胖者體內的高ＴＧ血癥，使ＴＧ由乳糜顆粒、ＶＬＤＬ過多轉移到ＨＤＬ－Ｃ上，使ＨＤＬ－Ｃ濃度降低，從而導致ＨＤＬ－Ｃ清除ＴＣ能力減弱，內源性ＴＣ合成增加，同時抑制ＶＬＤＬ異化及循環(huán)中ＴＧ的降解，使脂肪沉積體內。中醫(yī)學認為本病病機為脾腎陽虛為本，痰濕瘀停聚為標［１０］，故以“健脾益腎、祛濕化痰、通腑泄?jié)帷睘榉?，取足陽明胃?jīng)合穴足三里及足三陰經(jīng)交會穴三陰交，二穴相合具有健脾祛濕，化痰降濁的作用?，F(xiàn)代研究也表明針刺“足三里”等穴可以使肥胖大鼠下丘腦腹內側核自發(fā)放電頻率顯著升高，使飽中樞興奮水平升高，抑制了饑餓中樞的活動，從而降低食欲［１１］。取胃之募穴中脘及小腸募穴關元，二者相配具有健脾和胃，分清泌濁，祛濕化痰之功效。此外，胃經(jīng)絡穴豐隆與手陽明大腸經(jīng)合穴曲池同用可健脾除濕，通利腸腑，降濁消脂。六穴合用共達減脂減肥之效。針刺能通過調節(jié)機體紊亂的脂代謝達到減肥的目的，在臨床應用中取得較好療效。目前認為，針刺可通過影響下丘腦單胺類介質［１２］、瘦素、神經(jīng)肽Ｙ［１３］、神經(jīng)－體液系統(tǒng)［１４］以及炎性因子表達［１５］等方式調節(jié)脂代謝，但針刺對不同性別脂代謝影響差異的報道較少，本實驗旨在通過觀察電針刺激對雌雄兩性實驗性肥胖大鼠血脂含量的影響，探討電針刺激對不同性別肥胖者調節(jié)異同的可能機制。本實驗結果表明，電針刺激上述穴位可以降低雌雄兩性肥胖大鼠的Ｌｅｅ’ｓ指數(shù)，調節(jié)血漿ＴＧ、ＴＣ、ＬＤＬ－Ｃ、ＨＤＬ－Ｃ的異常水平，起到減肥的作用。電針刺激在降低Ｌｅｅ’ｓ指數(shù)方面，對雄性肥胖大鼠的作用優(yōu)于雌性，可能是由于雄性大鼠受電針刺激后能更加敏感地調節(jié)交感－腎上腺系統(tǒng)和下丘腦－垂體－腎上腺皮質系統(tǒng)及甲狀腺系統(tǒng)的功能，從而增加能量消耗，促進脂肪的動員與分解［１６］。在降低血漿ＴＧ、ＴＣ的含量方面，電針刺激對雌性肥胖大鼠的作用優(yōu)于雄性，可能由于電針刺激可更好地調節(jié)雌性大鼠飽食中樞，抑制饑餓中樞的興奮性［１７］及下丘腦室旁核的放電頻率，并抑制下丘腦神經(jīng)肽的合成和分泌，同時增強交感神經(jīng)功能，抑制亢進的副交感神經(jīng)功能，進而調節(jié)體內異常的瘦素和胰島素含量，糾正異常的脂肪－胰島內分泌軸［１８］，改善糖代謝紊亂，從而對體內異常的脂代謝起調節(jié)作用。在調節(jié)血漿ＬＤＬ－Ｃ、ＨＤＬ－Ｃ的含量方面，雌雄大鼠之間差異雖不明顯，但電針對雌性大鼠的改善趨勢優(yōu)于雄性，可能是由于樣本量小，觀察時間短所致，也可能與雌性