臨床常用免疫學(xué)檢驗(yàn)課件

臨床常用免疫學(xué)檢驗(yàn)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)（laboratorymedicine）是一門(mén)臨床學(xué)科，它運(yùn)用不斷發(fā)展的自然科學(xué)和醫(yī)學(xué)科學(xué)技術(shù)對(duì)患者血液、尿液和各種體液標(biāo)本進(jìn)行檢驗(yàn)，并以發(fā)展檢驗(yàn)技術(shù)、提高檢驗(yàn)質(zhì)量為重點(diǎn)，達(dá)到對(duì)患者疾病的診斷、病情觀察和預(yù)后判斷等目的。

7/1/202322（一）現(xiàn)代檢驗(yàn)診斷特點(diǎn)

主要有：①自動(dòng)化和智能化。②高質(zhì)量控制。③微量化標(biāo)本、多參數(shù)分析。④流水線檢測(cè)和床邊檢測(cè)并存。⑤基因檢測(cè)前景可喜。

7/1/202333（二）現(xiàn)代檢驗(yàn)診斷面臨挑戰(zhàn)

雖然現(xiàn)代檢驗(yàn)診斷的技術(shù)正在長(zhǎng)足發(fā)展，但也面臨許多挑戰(zhàn)。表現(xiàn)在：

1．如何選擇日益增多的檢驗(yàn)診斷項(xiàng)目？

2．如何選擇有多種方法的檢驗(yàn)診斷項(xiàng)目？

3．如何判斷檢驗(yàn)診斷新項(xiàng)目的應(yīng)用價(jià)值？

4．如何合理選擇檢驗(yàn)診斷項(xiàng)目，降低檢驗(yàn)診斷的費(fèi)用？

7/1/202344二、循證檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)——新世紀(jì)檢驗(yàn)診斷高質(zhì)量發(fā)展的新天地

定義循證醫(yī)學(xué)（evidence-basedmedicine，EBM）指：在對(duì)患者作出新的醫(yī)療決策的過(guò)程中，必須審慎、明確和明智地運(yùn)用當(dāng)前所能獲得的最佳證據(jù)。這里，“最佳證據(jù)”指不僅可以否定迄今已被視為臨床診斷或輔助診斷的“金標(biāo)準(zhǔn)”，并且其本身也可被未來(lái)的更準(zhǔn)確、更有效新證據(jù)所取代。

7/1/202355目的主要是：①不斷弄清疾病的病因和發(fā)病危險(xiǎn)因素的證據(jù)，為臨床診斷和預(yù)防提供最為可靠的依據(jù)。②提高疾病的早期診斷率，繼而提高疾病的治愈率。③改善患者的預(yù)后，提高患者的生存質(zhì)量。④提高臨床醫(yī)療管理和決策水平。⑤精選臨床檢查和治療方案，降低醫(yī)、患雙方的醫(yī)療費(fèi)用，使患者得到最合理的臨床醫(yī)療服務(wù)。⑥促進(jìn)臨床醫(yī)學(xué)教學(xué)水平，培養(yǎng)業(yè)務(wù)精湛、醫(yī)德高尚的臨床醫(yī)學(xué)人才。

7/1/202366現(xiàn)行傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)是以經(jīng)驗(yàn)醫(yī)學(xué)為主，而EBM則要求選用最新的、經(jīng)過(guò)臨床研究機(jī)構(gòu)科學(xué)評(píng)價(jià)過(guò)的、更為準(zhǔn)確的新證據(jù)，而不采用尚未經(jīng)過(guò)嚴(yán)格評(píng)價(jià)的、目前仍處于基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究階段的所謂“新證據(jù)”。

7/1/202377概念：循證檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)（evidence-basedlaboratorymedicine，EBLM）就是按照循證醫(yī)學(xué)“以當(dāng)前最佳證據(jù)為基礎(chǔ)”的原則，用臨床流行病學(xué)的方法學(xué)規(guī)范檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)的研究、設(shè)計(jì)和文獻(xiàn)評(píng)價(jià)，其任務(wù)是向臨床醫(yī)師提供反映患者真實(shí)情況的檢驗(yàn)證據(jù)。7/1/202388

循證醫(yī)學(xué)同樣也給檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)帶來(lái)了發(fā)展機(jī)遇。循證檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)要求檢驗(yàn)醫(yī)師不僅向臨床醫(yī)師解釋檢驗(yàn)項(xiàng)目的意義，而且要幫助他們選擇正確的檢驗(yàn)項(xiàng)目，合理地利用實(shí)驗(yàn)室資源。這是因?yàn)橛袝r(shí)候臨床醫(yī)師并不一定熟悉這些新的診斷指標(biāo)，相反，過(guò)多的檢查會(huì)提供一些不必要的信息和消耗不必要的費(fèi)用，從而干擾診斷、治療和醫(yī)療經(jīng)濟(jì)的合理分配。檢驗(yàn)醫(yī)師還必須使用綜合分析方法對(duì)診斷指標(biāo)進(jìn)行評(píng)價(jià)。

7/1/202399一些專家認(rèn)為，目前應(yīng)用的實(shí)驗(yàn)室檢查項(xiàng)目，在臨床應(yīng)用前并未給予充分的評(píng)價(jià)。Jaeshke等認(rèn)為，判斷一項(xiàng)診斷試驗(yàn)是否有用的最終標(biāo)準(zhǔn)是：試驗(yàn)是否增加了有用的診斷信息。Burke認(rèn)為,如果一項(xiàng)試驗(yàn)主要用于篩檢，其敏感性一定要高，但易出現(xiàn)假陽(yáng)性。任何新的檢驗(yàn)只有在充分評(píng)價(jià)其可靠性、準(zhǔn)確性后才能用于臨床實(shí)踐。而現(xiàn)實(shí)是，由于制造商的熱情提供試劑、臨床醫(yī)師和檢驗(yàn)人員的欣然接受，許多新檢驗(yàn)項(xiàng)目在未被評(píng)價(jià)充分之前，就已被積極的推向了臨床應(yīng)用。

7/1/20231010

第一章免疫功能檢驗(yàn)

(ImmunologicalFunctionTest)

免疫功能檢驗(yàn)分為細(xì)胞免疫功能檢驗(yàn)和體液免疫功能檢驗(yàn)，對(duì)于了解患者的免疫狀態(tài)，以及細(xì)胞的各種功能，為深入研究和認(rèn)識(shí)機(jī)體免疫系統(tǒng)的生理、病理改變，闡明某些疾病的發(fā)病機(jī)制和臨床診斷與治療將提供有利的信息。下面簡(jiǎn)單介紹臨床常用的一些免疫檢驗(yàn)項(xiàng)目。7/1/20231111

一.IgG、IgA、IgM測(cè)定

免疫球蛋白（Immunoglobulin，Ig)是一組具有抗體活性的蛋白。存在于機(jī)體的血液、體液、外分泌液及某些細(xì)胞的膜上，分為IgG、IgA、IgM、IgD、和IgE五類(lèi)。其中IgG、IgA、IgM含量較多，一般應(yīng)用單向免疫擴(kuò)散法、免疫比濁法和速率散射比濁法測(cè)定。

7/1/20231212〖參考值〗依年齡、性別、地區(qū)等因素有差異。

IgG：6.94－16.18g/L

IgA：0.68－3.78g/L

IgM：0.60－2.63g/L

〖臨床意義〗

1.Ig含量減低：一種或多種Ig水平減少，分原發(fā)性和繼發(fā)性。見(jiàn)于各種先天性或獲得性免疫缺陷病。繼發(fā)性常與免疫抑制劑應(yīng)用、射線、蛋白質(zhì)丟失、營(yíng)養(yǎng)不良等有關(guān)。也可見(jiàn)于細(xì)胞毒藥物治療后。

7/1/20231313

2.Ig含量增高：

(1)多克隆性增高，見(jiàn)于各種慢性感染、慢性肝病、某些自身免疫病，如SLE、RA、SS等；也見(jiàn)于寄生蟲(chóng)疾病、結(jié)節(jié)病等。

(2)單克隆性增高，又稱“M”蛋白，主要見(jiàn)于免疫增殖性疾病，如多發(fā)性骨髓瘤、重鏈病、輕鏈病，巨球蛋白血癥等。

7/1/20231414〖注意事項(xiàng)〗

Ig水平與年齡、性別有一定的關(guān)系，Ig含量因檢測(cè)方法不同而有差別，各地區(qū)參考值也不相同，在判斷結(jié)果時(shí)應(yīng)綜合考慮。如有“M蛋白”，可進(jìn)一步作血清或尿液免疫電泳，檢測(cè)輕鏈和重鏈。

7/1/20231515

二.血清總IgE測(cè)定

IgE為血清中含量極少的一種免疫球蛋白，與過(guò)敏性疾病和寄生蟲(chóng)感染有關(guān)。目前檢測(cè)方法有多種，包括ELISA、間接血凝試驗(yàn)（indirecthemoagglutinationassayIHA）、RIA、電化學(xué)發(fā)光法（electrochemiluminescenceimmunoassay，ECLIA，）、IFA等。

〖參考值〗0.1-150IU/ml

7/1/20231616〖臨床意義〗

1.IgE增高：見(jiàn)于IgE型多發(fā)性骨髓瘤、特應(yīng)性哮喘、特應(yīng)性皮炎、過(guò)敏性鼻炎、寄生蟲(chóng)感染、熱帶嗜酸細(xì)胞增多癥、SLE、RA及某些霉菌病等。

2.IgE減低：一般無(wú)意義。可見(jiàn)于原發(fā)性無(wú)丙種球蛋白血癥、惡性腫瘤及細(xì)胞毒藥物治療后。

7/1/20231717〖注意事項(xiàng)〗

年齡、性別均可影響總IgE水平。一般男性高于女性；新生兒水平低，青春期水平最高，30歲以后逐漸下降。不同種族血清總IgE水平也有差別，混血人種比白人高3－4倍，黑人水平更高，黃種人水平也較高?？侷gE水平高不一定是過(guò)敏；過(guò)敏者總IgE也不一定高。因此，在評(píng)價(jià)總IgE結(jié)果時(shí)要考慮到以上因素。

7/1/20231818

三.特異性IgE抗體（sIgE)的檢測(cè)

過(guò)敏患者的血清中存在著具有變應(yīng)原特異性的IgE稱之為特異性IgE,如對(duì)牛奶過(guò)敏者則有針對(duì)牛奶變應(yīng)原的IgE；對(duì)蒿草花粉過(guò)敏者，則有針對(duì)該花粉的IgE，該抗體只能與該變應(yīng)原特異性結(jié)合。

7/1/20231919sIgE的測(cè)定在變態(tài)反應(yīng)體外診斷中占有重要地位。在呼吸疾病中，過(guò)敏性哮喘，過(guò)敏性鼻炎，職業(yè)性哮喘等患者血清中均能檢出sIgE。sIgE檢測(cè)方法有許多種，目前臨床上常用的有ELISA，F(xiàn)EIA，免疫印跡等。隨著sIgE測(cè)定技術(shù)的完善，此項(xiàng)測(cè)定已日趨商品化，開(kāi)發(fā)了各種檢測(cè)系統(tǒng)，如CAP過(guò)敏原檢測(cè)系統(tǒng)，Master過(guò)敏原檢測(cè)系統(tǒng)，Px過(guò)敏原檢測(cè)系統(tǒng)等，這些測(cè)定系統(tǒng)包括了儀器、試劑、計(jì)算機(jī)軟件處理系統(tǒng)。國(guó)內(nèi)目前應(yīng)用最多的是CAP檢測(cè)系統(tǒng)。

7/1/202320201.CAP檢測(cè)系統(tǒng)

〖原理〗CAP，一個(gè)很小的塑料帽狀物，其內(nèi)置有多孔性、彈性和親水性的纖維素粒，此粒多孔，吸咐了更多的變應(yīng)原，加入血清，血清中的sIgE就會(huì)和變應(yīng)原結(jié)合，再加入酶標(biāo)抗人IgE，再加入熒光顯色系統(tǒng)，在熒光分光光度計(jì)上測(cè)定熒光強(qiáng)度，計(jì)算機(jī)提供相應(yīng)軟件，自動(dòng)計(jì)算出結(jié)果。報(bào)告sIgE含量。

7/1/20232121〖適應(yīng)征〗

（1）臨床懷疑過(guò)敏性疾病，支氣管哮喘等；

（2）不適宜作皮內(nèi)試驗(yàn)的患者；

（3）脫敏治療的病人觀察療效。

（4）抗組胺等對(duì)癥治療藥物影響皮膚反應(yīng)者；

（5）皮試可能發(fā)生危險(xiǎn)者；

7/1/20232222（6）不能用于皮試的變應(yīng)原，如毒素，非水溶性或高度致敏性物質(zhì)；

（7）食物過(guò)敏，皮試結(jié)果不可靠者。

（8）皮試結(jié)果可疑者。

〖方法〗RASTFEIA

〖參考值〗CAP系統(tǒng)結(jié)果報(bào)告。一般報(bào)告sIgE含量。單位ku/L。正常人<0.35ku/L，為陽(yáng)性。sIgE的分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)見(jiàn)表。7/1/20232323

表1.特異性IgE的分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)

_______________________________________________________________

RAST分級(jí)sIgE含量(ku/L)sIgE水平臨床意義

O<0.35無(wú)或不能檢出不過(guò)敏

I0.35-低可疑或輕度

II0.70-中輕度過(guò)敏

III3.5-高中度過(guò)敏

IV17.5-特高（I）中度到重度

V50-特高（II）重度過(guò)敏

VI>100特高（III）特別嚴(yán)重之過(guò)敏___________________________________________________________________例如：報(bào)告格式：sIgE（d1）81.3ku/L（Ⅴ級(jí)）

其中d1代表屋塵螨。每一過(guò)敏原均有代號(hào)，可查閱相關(guān)資料7/1/20232424

〖臨床意義〗

sIgE測(cè)定是體外檢測(cè)變應(yīng)原的重要手段。其試驗(yàn)的靈敏度及特異性都很高、特別是對(duì)花粉、螨類(lèi)、寵物皮屑、牛奶、雞蛋、堅(jiān)果等變應(yīng)原的sIgE測(cè)定，靈敏度和特異性都在90％以上，有的甚至接近100％。根據(jù)sIgE含量可確定患者變應(yīng)原種類(lèi)，可評(píng)價(jià)患者過(guò)敏狀態(tài)，脫敏治療的療效，對(duì)哮喘的診斷和鑒別診斷有重要幫助。CAP吸咐變應(yīng)原有單價(jià)，有多價(jià)，如多價(jià)霉菌，多價(jià)食物（Fx5E，含6種食物過(guò)敏原），多價(jià)羽毛等，多價(jià)變應(yīng)原陽(yáng)性后，再進(jìn)一步確定單個(gè)變應(yīng)原成分。

7/1/20232525〖注意事項(xiàng)〗

（1）有明顯的地域性，該法所使用的均系進(jìn)口產(chǎn)品生產(chǎn)國(guó)的與我國(guó)的不一定完全符合。我國(guó)常見(jiàn)的變應(yīng)原，國(guó)外不一定有。因此，評(píng)價(jià)結(jié)果應(yīng)注意區(qū)別。

7/1/20232626（2）某些小分子的變應(yīng)原，sIgE測(cè)定的靈敏度不高，如青霉素降解物，對(duì)這些變應(yīng)原，如測(cè)不出sIgE并不除外過(guò)敏的可能性。

7/1/20232727（3）要結(jié)合臨床癥狀，體格檢查，常規(guī)化驗(yàn)，當(dāng)?shù)氐膶?shí)際條件，體內(nèi)試驗(yàn)以及體外試驗(yàn)的結(jié)果綜合考慮，才能得出比較正確的結(jié)論。

7/1/202328282.吸入物變應(yīng)原過(guò)篩試驗(yàn)（phadiotop）。

〖原理〗呼吸道變態(tài)反應(yīng)病在臨床上很常見(jiàn)，有些病很難從臨床上區(qū)別是否過(guò)敏，如過(guò)敏性鼻炎和血管運(yùn)動(dòng)性鼻炎的臨床表現(xiàn)相似，外源性哮喘和內(nèi)源性哮喘也有共同之處；在臨床工作中首先要區(qū)別是否屬于過(guò)敏范疇。血清總IgE測(cè)定作為過(guò)敏性疾病的過(guò)篩試驗(yàn)曾得到廣泛應(yīng)用，但其特異性、敏感性均不高，總IgE高并不一定是過(guò)敏，過(guò)敏者的總IgE水平也不一定高。過(guò)敏與否取決于sIgE的存在。7/1/20232929phadiotop是根據(jù)變應(yīng)原吸附原理，將空氣中90％以上的最為常見(jiàn)的變應(yīng)原吸咐到CAP上。患者血清中只要有針對(duì)其中之一種變應(yīng)原的sIgE，即可呈陽(yáng)性反應(yīng)。據(jù)此可測(cè)知患者是否為吸入物變應(yīng)原過(guò)敏者。

7/1/20233030與sIgE測(cè)定不同的是所用CAP為特制的，內(nèi)含多種吸入物變應(yīng)原。結(jié)果報(bào)告不是含量，而是比值，即待測(cè)血清吸光度與參考血清吸光度之比。

〖參考值〗正常人為陰性，當(dāng)待測(cè)血清吸光度大于參考血清吸光度時(shí)報(bào)告為陽(yáng)性。根據(jù)比值，可將phadiotop陽(yáng)性者分為四個(gè)等級(jí)。弱陽(yáng)性1－；陽(yáng)性2－；強(qiáng)陽(yáng)性20－；特強(qiáng)陽(yáng)性40－。

7/1/20233131〖臨床意義〗

陽(yáng)性結(jié)果可視為多種sIgE的總和，比值越大，表明體內(nèi)sIgE越多，這可能是某一種變應(yīng)原的sIgE很高，也可能是多種變應(yīng)原sIgE累加的結(jié)果。

7/1/20233232〖注意事項(xiàng)〗

phadiotop中未包括律草花粉及蠶絲，這兩種在我國(guó)都是很重要的變應(yīng)原，如患者只對(duì)律草花粉或蠶絲過(guò)敏，phadiotop則為陰性。但如果同時(shí)還合并有其它變應(yīng)原過(guò)敏，phadiotop仍為陽(yáng)性。phadiotop陽(yáng)性只說(shuō)明患者對(duì)常見(jiàn)的空氣中的變應(yīng)原過(guò)敏，但對(duì)何種變應(yīng)原過(guò)敏，仍需進(jìn)一步檢查。phadiotop作為過(guò)篩實(shí)驗(yàn)，可篩出非過(guò)敏的患者，以免進(jìn)行不必要的特異性變應(yīng)原檢查。由于phadiotop中包被的是國(guó)外的抗原，有時(shí)臨床診斷與phadiotop結(jié)果有不符的個(gè)別現(xiàn)象發(fā)生。

7/1/20233333四.血清補(bǔ)體測(cè)定

補(bǔ)體（Complement)是血清中的一組具有酶活性的蛋白。它由20多種蛋白組成。當(dāng)機(jī)體受到病原微生物侵襲時(shí)，在抗體的存在下，補(bǔ)體參與滅活virus或殺死bacteria的免疫反應(yīng)。在自身免疫病中，complement也能參與破壞自身組織或細(xì)胞而造成免疫病理?yè)p傷。測(cè)定血清中補(bǔ)體活性或其單一補(bǔ)體成分含量，對(duì)于許多疾病的診斷和鑒別診斷、療效觀察以及發(fā)病機(jī)理的研究都有一定的臨床意義。

7/1/20233434(一)總補(bǔ)體活性測(cè)定（50%hemolyticunitofcomplement，CH50)

Complement可使溶血素(抗體)致敏的SRBC裂解而發(fā)生溶血，補(bǔ)體活性與溶血程度呈正相關(guān)。根據(jù)產(chǎn)生50%溶血所需要的最小補(bǔ)體量，可計(jì)算出血清總補(bǔ)體的活性。

7/1/20233535〖參考值〗75－160U/ml

〖臨床意義〗

.增高：常見(jiàn)于各種急性炎癥、組織損傷、心肌梗死和某些惡性腫瘤等。

.降低：見(jiàn)于各種免疫復(fù)合物性疾病，如SLE、急、慢性腎小球腎炎、自身免疫性溶血性貧血。也可見(jiàn)于病毒性肝炎、DIC、蛋白丟失性腸病、嚴(yán)重灼傷、急性粒細(xì)胞性白血病等。

7/1/20233636〖注意事項(xiàng)〗

待測(cè)血清需新鮮、無(wú)溶血。測(cè)定方法有試管法、微量板法，近來(lái)又有生化儀器法等。不同方法具有不同的參考值。

7/1/20233737(二)補(bǔ)體C3測(cè)定（Complement3，C3)

C3為補(bǔ)體系統(tǒng)各組分中含量最高的組分，是激活補(bǔ)體傳統(tǒng)途徑與旁路途徑的關(guān)鍵成分。檢測(cè)方法主要有RID、免疫比濁、速率散射比濁等。

〖參考值〗0.8-1.55g/L

7/1/20233838〖臨床意義〗

1.C3增高：見(jiàn)于某些急性炎癥或傳染病早期以及某些惡性腫瘤等。

2.C3降低：見(jiàn)于SLE、RA、急性腎小球腎炎、肝臟疾病、冷球蛋白血癥等。狼瘡腎炎時(shí)血清中C3含量降低，當(dāng)病情好轉(zhuǎn)時(shí)，含量恢復(fù)正常。

7/1/20233939(三),補(bǔ)體C4測(cè)定（Complement4，C4)

C4是一種多功能的β1-球蛋白，也是補(bǔ)體系統(tǒng)中的主要成分。在補(bǔ)體傳統(tǒng)活化途徑中發(fā)揮重要作用。裂解后的產(chǎn)物在補(bǔ)體的活化、促進(jìn)吞噬、防止免疫復(fù)合物沉著和中和毒素等方面發(fā)揮很大作用。檢測(cè)方法同C3測(cè)定。

7/1/20234040〖參考值〗0.16～0.47g/L

〖臨床意義〗

1.升高：見(jiàn)于風(fēng)濕熱的急性期、結(jié)節(jié)性動(dòng)脈周?chē)住⑵ぜ⊙?、心肌梗死、Reiter綜合征和各種類(lèi)型的關(guān)節(jié)炎。

2.降低：見(jiàn)于自身免疫病，例如：SLE、RA、慢性活動(dòng)性肝炎、多發(fā)性硬化癥、IgA型腎病等。在SLE，C4含量下降明顯，并較C3下降為早。

7/1/20234141五.循環(huán)免疫復(fù)合物（Circulatingimmunocomplex，CIC,)

CIC是體內(nèi)游離抗原與抗體相結(jié)合的產(chǎn)物。復(fù)合物可分大、中、小三類(lèi)。大的復(fù)合物(>19s)可被吞噬細(xì)胞吞噬去除；中等復(fù)合物(約等于19s)存在于局部病變部位，如腎基膜、皮膚基底膜、血管內(nèi)膜和關(guān)節(jié)滑膜等；只有小的復(fù)合物(<19s)游離于血液、體液中，為一種可溶的CIC。CIC測(cè)定對(duì)免疫復(fù)合物病、自身免疫病以及肝病的診斷、療效觀察、預(yù)后判斷均有重要意義。7/1/20234242檢測(cè)方法有多種，如聚乙二醇沉淀法、C1q結(jié)合法等。PEG可引起蛋白沉淀，蛋白分子愈大沉淀所需PEG濃度愈小。CIC分子量較大，且抗原-抗體結(jié)合后發(fā)生構(gòu)型改變，而被低濃度PEG從液相中析出，PEG還抑制CIC解離，促使CIC聚合成更大的凝聚物而被沉淀，用分光光度計(jì)在波長(zhǎng)450nm處測(cè)定吸光度。計(jì)算出濁度值，可知CIC的存在和含量。

7/1/20234343〖參考值〗PEG沉淀法：<10U/ml

〖臨床意義〗

1.CIC陽(yáng)性常見(jiàn)于自身免疫病如SLE、RA等，也可見(jiàn)于血清病、慢性活動(dòng)性肝炎、細(xì)菌感染、傳染病、惡性腫瘤等。

2.動(dòng)態(tài)檢測(cè)CIC的變化，可監(jiān)測(cè)疾病的發(fā)展、判斷療效及預(yù)后。

7/1/20234444〖注意事項(xiàng)〗

參考值依方法不同而有差別，此法快速簡(jiǎn)便，但特異性較差，只適于篩查。低密度脂蛋白可引起濁度增加，故應(yīng)空腹取血。高γ球蛋白血癥及標(biāo)本反復(fù)凍融易造成假陽(yáng)性。

7/1/20234545六.T淋巴細(xì)胞亞群（Tcellsubpopulation)測(cè)定

Tcell因功能不同可將其分為若干亞群，如T輔助/誘導(dǎo)細(xì)胞；T抑制/細(xì)胞毒性細(xì)胞等。也可根據(jù)T細(xì)胞表面分化抗原(CD)不同劃分為相應(yīng)的亞群，如CD3；CD4；CD8等。同一CD表型的細(xì)胞功能可能不同。如CD8細(xì)胞中既有T抑制細(xì)胞，也有細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞。T細(xì)胞各亞群的相互協(xié)調(diào)，穩(wěn)定地調(diào)節(jié)著機(jī)體的免疫應(yīng)答反應(yīng)。7/1/20234646應(yīng)用抗CD抗原的單克隆抗體，如抗CD3、抗CD4、抗CD8等，對(duì)外周血單個(gè)核細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè)，依據(jù)各單抗的陽(yáng)性率，判定各Tcell亞群，并算出CD4/CD8的比值。測(cè)定方法有IFA、IEA、APAAP法、流式細(xì)胞儀法等。

7/1/20234747〖參考值〗（IFA法）總T細(xì)胞（CD3+）53-88%；CD4+細(xì)胞32-60%；CD8+細(xì)胞20-40%。CD4+/CD8+1.5-2.0。

（流式細(xì)胞儀法）

總T細(xì)胞（CD3+）955-2860/μl；CD4+細(xì)胞27-51%，550-1440μl；CD8+細(xì)胞15-44%，320-1250μl。CD4+/CD8+0.64-2.85。

7/1/20234848〖臨床意義〗

Tcell亞群在許多臨床疾病中可發(fā)生異常改變，特別是免疫功能受損病人。測(cè)定Tcell亞群變化對(duì)了解疾病的發(fā)病機(jī)制、指導(dǎo)臨床治療、控制疾病的發(fā)生發(fā)展均有重要意義。

7/1/202349491.在自身免疫病中，如SLE、RA、自身免疫性溶血性貧血，以及乙型肝炎病人常表現(xiàn)為CD8＋細(xì)胞的數(shù)量及功能低下，有時(shí)也有CD4＋細(xì)胞增高，CD4+/CD8+比值升高。

50

2.免疫缺陷病患者CD4+/CD8+比值減少，如AIDS病人，CD4+顯著減少，常出現(xiàn)CD4+/CD8+比值倒置。常作為HIV感染者的監(jiān)測(cè)指標(biāo)。

7/1/202351513.感染性疾病患者免疫抑制功能增強(qiáng)，表現(xiàn)為CD8+細(xì)胞的數(shù)量及功能都異常增高。病毒感染時(shí)，CD3+、CD4+細(xì)胞減少，CD8+細(xì)胞增多，CD4+/CD8+比值降低。

52

4.腫瘤病人CD3+，CD4+細(xì)胞明顯減少，CD8+明顯增加，CD4+/CD8+比值明顯下降。據(jù)此，可了解機(jī)體的免疫狀態(tài)，指導(dǎo)免疫調(diào)節(jié)劑及治療藥物的應(yīng)用。

7/1/202353535.支氣管哮喘病人，在過(guò)敏原激發(fā)后，外周血CD4+T細(xì)胞迅速降低，支氣管肺泡灌洗液中CD3+、CD4+、CD8+T細(xì)胞則增高。過(guò)敏性鼻炎患者CD3+、CD4+、CD8+T細(xì)胞均比正常人低。

546.血液系統(tǒng)疾病Tcell亞群也有相應(yīng)變化，如再生障礙性貧血、粒細(xì)胞減少癥時(shí)CD4+細(xì)胞減少，CD8+細(xì)胞增多，CD3+/CD8+比值下降。

55〖注意事項(xiàng)〗

Tcell亞群檢測(cè)方法很多，參考值也不盡相同，在判斷結(jié)果時(shí)要全面考慮，結(jié)合臨床及其他檢查。此外，利用上法也可測(cè)定B細(xì)胞、NK細(xì)胞等。流式細(xì)胞儀法，B細(xì)胞絕對(duì)值為90-560/μl，百分?jǐn)?shù)為5-18%，NK細(xì)胞絕對(duì)數(shù)為150-1100/μl，百分?jǐn)?shù)為7-40%。華人較其他種族有較高的NK細(xì)胞值。

7/1/20235656七.細(xì)胞因子（Cytokine，CK)及其受體（receptor)測(cè)定

CK是由多種細(xì)胞產(chǎn)生的免疫功能調(diào)節(jié)因子，其中主要包括：淋巴因子（Lymphokine，LK)，單核因子（Monokine，MK)以及其他由非淋巴細(xì)胞及非單核細(xì)胞產(chǎn)生的CK。白細(xì)胞介素（Interleukin，IL)是體內(nèi)一大類(lèi)細(xì)胞因子。7/1/20235757CK在調(diào)節(jié)機(jī)體的免疫功能方面發(fā)揮著重大作用。新的CK不斷被發(fā)現(xiàn)。各種CK需與各自的receptor特異結(jié)合才能起作用。CK受體存在于被作用的細(xì)胞膜上或細(xì)胞質(zhì)內(nèi)，目前所知不是太多。迄今所發(fā)現(xiàn)的CK近百種，其中多數(shù)仍處于研究和探索階段。

58

檢測(cè)CK及其receptor的產(chǎn)生和免疫細(xì)胞對(duì)其反應(yīng)能力，可以了解淋巴細(xì)胞及其他細(xì)胞的免疫功能。目前臨床上用于測(cè)定CK及其受體的方法有生物活性測(cè)定法、RIA法和ELISA等，并且已有試劑盒供應(yīng)。如IL－2、IL－4、IL－6、IL－8、TNF－α、干擾素、粒細(xì)胞集落刺激因子(GCSF)、促紅細(xì)胞生成素(EPO)等等。7/1/20235959近來(lái)，DNA分析法已經(jīng)用于CK的研究，應(yīng)用分子雜交法檢測(cè)CK的基因；應(yīng)用PCR技術(shù)測(cè)定CK的mRNA表達(dá)等。目前，利用PCR技術(shù)已建立了定量測(cè)定TGF、IL－2、IL－1、TNF等CK的方法。

60（四）寄生蟲(chóng)病的檢測(cè)

1、豬囊蟲(chóng)抗體測(cè)定

Cysticercosis（囊蟲(chóng)?。┯址QCysticercosisCelluosae（豬囊尾蚴?。?是人和豬共患的一種寄生蟲(chóng)病。又分為肌肉型、中樞神經(jīng)型等。主要檢測(cè)方法有ELISA、IHA（間接血凝試驗(yàn)）等。用以檢測(cè)病人體內(nèi)特異性IgG抗體。對(duì)臨床診斷及血清流行病學(xué)調(diào)查均有實(shí)用價(jià)值。

7/1/20236161〖參考值〗一般陰性

ELISA：P/N〈2.1

〖臨床意義〗

囊蟲(chóng)IgG抗體陽(yáng)性，多見(jiàn)于腦囊蟲(chóng)病?？勺餮搴湍X脊液囊蟲(chóng)抗體檢查。應(yīng)結(jié)合臨床表現(xiàn)和CT、核磁檢查結(jié)合作出判斷。

7/1/202362622、血吸蟲(chóng)抗體測(cè)定

日本血吸蟲(chóng)病早期宿主對(duì)血吸蟲(chóng)可發(fā)生特異性免疫反應(yīng)。血清中產(chǎn)生IgM,IgG,IgE抗體。IgM,IgE抗體陽(yáng)性可作為日本血吸蟲(chóng)病的早期診斷指標(biāo)。IgG抗體陽(yáng)性表明病人處在恢復(fù)期?？贵w檢測(cè)有助于臨床診斷和流行病學(xué)研究，主要方法有ELISA、乳膠凝集試驗(yàn)、環(huán)卵沉淀試驗(yàn)等。

〖參考值〗陰性

ELISA：P/N〈2.1

〖臨床意義〗

（1）血清中IgM抗體陽(yáng)性提示疾病處于早期。

（2）血清中IgG抗體陽(yáng)性表示疾病處于恢復(fù)期，P/N值的大小表示抗體效價(jià)的高低，部分患者感染后IgG抗體可持續(xù)數(shù)年。

7/1/20236363〖注意事項(xiàng)〗

血吸蟲(chóng)抗體的將測(cè)可以達(dá)到診斷病人的目的，但不能區(qū)分血吸蟲(chóng)現(xiàn)癥病人和過(guò)去感染者，早期慢性和晚期血吸蟲(chóng)病患者，未治愈的血吸蟲(chóng)病人及新感染和既往感染的混合病人。此外用于考核療效尚不夠理想。目前，不少學(xué)者應(yīng)用單克隆抗體ELISA檢測(cè)循環(huán)抗原用于診斷和考核療效。但仍存在不少問(wèn)題，仍需改進(jìn)。

7/1/202364643、肝吸蟲(chóng)抗體測(cè)定

肝吸蟲(chóng)病又稱華支睪吸蟲(chóng)病，是由華支睪吸蟲(chóng)寄生于人體肝膽管內(nèi)所引起的寄生蟲(chóng)病。主要依靠臨床流行病學(xué)、病原學(xué)檢查、免疫學(xué)檢查結(jié)合臨床表現(xiàn)作出診斷。因病原學(xué)檢查受到排卵量和排卵規(guī)律的影響，以及受所用方法敏感性的限制，很難查到蟲(chóng)卵。因此應(yīng)用免疫學(xué)診斷具有重要意義。宿主感染華支睪吸蟲(chóng)后，在抗原刺激下，誘發(fā)產(chǎn)生特異性抗體，主要是IgM,IgA,IgE和IgG。一般抗體檢出時(shí)間均明顯早于糞便中蟲(chóng)卵出現(xiàn)的時(shí)間。檢測(cè)肝吸蟲(chóng)抗體方法主要有皮內(nèi)試驗(yàn)、ELISA、IFA等。

7/1/20236565〖參考值〗陰性

ELISA：P/N〈2.1

〖臨床意義〗

目前所查多為IgG抗體，P/N>2.1為陽(yáng)性。數(shù)值越大，表明患者體內(nèi)抗體效價(jià)越高，表明患者為華支睪吸蟲(chóng)感染。如能測(cè)到IgM抗體，對(duì)于早期診斷有很大幫助。如有可能，可檢測(cè)循環(huán)抗原以考核療效和早期診斷。

7/1/202366664、肺吸蟲(chóng)抗體測(cè)定

肺吸蟲(chóng)病又稱并殖吸蟲(chóng)病，是由并殖吸蟲(chóng)引起的自身免疫源性疾病。臨床表現(xiàn)多種多樣，可分肺型和肺外型。診斷主要結(jié)合流行病學(xué)。臨床癥狀及實(shí)驗(yàn)室檢查。其中免疫學(xué)檢查對(duì)臨床診斷有很重要意義。人感染肺吸蟲(chóng)后，可出現(xiàn)抗肺吸蟲(chóng)抗體，以IgG型為主。血清中IgE水平也可升高。IgM、IgE型抗體檢方法主要有ELISA、IFA、皮內(nèi)試驗(yàn)等。

〖參考值〗陰性

ELISA：P/N〈2.1

7/1/20236767

〖臨床意義〗

抗體陽(yáng)性表明患者為肺吸蟲(chóng)感染者，結(jié)合其他檢查和臨床表現(xiàn)可作出診斷。在判斷結(jié)果時(shí)應(yīng)該注意。其它寄生蟲(chóng)病，如血吸蟲(chóng)病、囊蟲(chóng)病與此有輕度的交叉反應(yīng)。此外還可應(yīng)用雙抗體夾心ELISA法檢測(cè)循環(huán)抗原用于診斷和流行病學(xué)調(diào)查。目前應(yīng)用尚不廣泛。

7/1/20236868第三章

自身免疫病和風(fēng)濕病的免疫學(xué)檢驗(yàn)

7/1/20236969

自身免疫病（AID)是指由于過(guò)度而持久的自身免疫反應(yīng)導(dǎo)致組織器官損傷并引起相應(yīng)器官病變或臨床癥狀的一類(lèi)疾病。風(fēng)濕病是一類(lèi)涉及到關(guān)節(jié)、軟骨、肌肉等結(jié)締組織的慢性疾病。7/1/20237070實(shí)驗(yàn)室檢查特別是免疫學(xué)檢查對(duì)AID和風(fēng)濕病的診斷是及其重要的。有些檢查可作為診斷指標(biāo)之一；有些檢查可作為病情進(jìn)展和預(yù)后判斷的監(jiān)測(cè)指標(biāo)；有些檢查可作為藥物療效的考核指標(biāo)之一。71隨著免疫學(xué)技術(shù)的發(fā)展以及分子生物學(xué)的應(yīng)用，各種自身抗體的檢查越來(lái)越多地應(yīng)用于臨床。作為臨床醫(yī)生，應(yīng)該熟悉這些檢驗(yàn)的意義，并能結(jié)合臨床及其他檢查，客觀地運(yùn)用這些指標(biāo)，協(xié)助診斷，了解病情，指導(dǎo)治療。這里僅介紹臨床常用的一些自身抗體的檢測(cè)。

7/1/202372721.抗核抗體測(cè)定

（Antinuclearantibody,ANA)ANA是抗細(xì)胞核多種成分的自身抗體，無(wú)種屬及器官特異性。ANA可分為抗DNA抗體、抗組蛋白抗體、抗非組蛋白抗體、抗核仁抗體及其他細(xì)胞成分抗體。這些抗體共同組成ANA譜。7/1/20237373抗核抗體（ANA）的檢查最常用于篩查全身性風(fēng)濕病和自身免疫病。ANA的檢查可觀察到能與細(xì)胞核內(nèi)的核酸和蛋白抗原起反應(yīng)的自身抗體。細(xì)胞內(nèi)可能存在對(duì)多種抗原起反應(yīng)的抗體。只有某種抗體的效價(jià)很高時(shí)，IFA才能加以鑒別。

7/1/20237474homogenous（均質(zhì)型）

又稱彌散型，相應(yīng)的抗原是雙鏈DNA和組蛋白復(fù)合物。常見(jiàn)于SLE，特別是腎臟受累病人。也可見(jiàn)于其它結(jié)締組織病，如：風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，MCTD，干燥綜合征，硬皮病，慢性活動(dòng)性肝炎及原發(fā)性膽汁性肝硬變。

Peripheral(周邊型)

相應(yīng)的抗原為雙鏈DNA，多見(jiàn)于活動(dòng)性SLE病人。

7/1/20237575Speckle(斑點(diǎn)型)

主要是針對(duì)ENA的抗體，包括Sm，RNP，SSA，SSB，Scl-70。一般認(rèn)為低效價(jià)的斑點(diǎn)型ANA不是結(jié)締組織病特有的，實(shí)際上不代表臨床異常。高效價(jià)的抗Sm抗體多與SLE有關(guān)。高效價(jià)的抗RNP自身抗體見(jiàn)于MCTD，但也見(jiàn)于SLE。抗SSA和抗SSB抗體，見(jiàn)于S.S，也可見(jiàn)于SLE。當(dāng)病人有抗SSA抗體時(shí)，通常以皮膚表現(xiàn)和光過(guò)敏為主。，也存在于ANA陰性狼瘡和新生兒狼瘡。Scl-70抗體與硬皮病有關(guān)。

7/1/20237676Nucleoli(核仁型)

其靶抗原是與RNA分子相關(guān)的核蛋白。多見(jiàn)于硬皮病。

Centromere(著絲點(diǎn)型)

抗著絲點(diǎn)抗體（ACA），多見(jiàn)于全身性硬皮病的CREST綜合征。

7/1/20237777常用檢測(cè)方法為IFA、ELISA、免疫印跡法、RIA、免疫斑點(diǎn)法、膠體金標(biāo)斑點(diǎn)免疫滲濾法等。其中IFA是應(yīng)用較廣的一種方法。一般采用鼠肝切片或Hep-2細(xì)胞為底物抗原片，當(dāng)加入病人血清時(shí)，病人血清中的ANA可與細(xì)胞中相應(yīng)抗原成分結(jié)合。再加入熒光標(biāo)記抗人IgG，在熒光顯微鏡下可見(jiàn)細(xì)胞核內(nèi)亮綠色熒光。

78〖參考值〗<1:10或陰性

〖臨床意義〗

NA陽(yáng)性見(jiàn)于多種疾病，常用于風(fēng)濕病及自身免疫病的診斷。SLE患者陽(yáng)性率在95％以上，且效價(jià)常在1：80以上。在其他風(fēng)濕病如RA、系統(tǒng)性硬化癥、皮肌炎、干燥綜合征(SS)、混合結(jié)締組織病(MCTD)等也可陽(yáng)性。其他如肝病，病毒感染等也可呈低效價(jià)陽(yáng)性。

7/1/20237979〖注意事項(xiàng)〗

在大約1%的正常人的體內(nèi)可測(cè)到低效價(jià)的非特異性抗核抗體，80歲以上老人的檢出率可高達(dá)50%。高效價(jià)的ANA一般與活動(dòng)期SLE密切相關(guān)。采用Hep-2細(xì)胞檢測(cè)ANA，可見(jiàn)到不同的染色模型。

此外，口服避孕藥的婦女也可檢測(cè)到ANA。807/1/202381817/1/202382827/1/202383837/1/20238484二.可提取性核抗原（ExtractablenuclearantigenENA)抗體

ENA是細(xì)胞內(nèi)許多小分子的RNA和多肽組成的非組蛋白的酸性核蛋白顆粒。分布在細(xì)胞質(zhì)中的稱為小細(xì)胞漿核糖核蛋白(scRNPs)；分布在細(xì)胞核內(nèi)的稱為小細(xì)胞核核糖核蛋白(snRNPs)。目前已發(fā)現(xiàn)的有20余種，其中常用的抗ENA抗體有如下幾種。

7/1/20238585（一）抗Sm抗體

Sm是病人Smith的縮寫(xiě)。Sm抗原屬于SnRNP，由5個(gè)RNA和多肽組成，抗原表位在29KD、28KD和13.5KD多肽上，抗Sm抗體是酸性糖蛋白，是SLE的標(biāo)記抗體。

7/1/20238686(二)抗nRNP(u1RNP)抗體

u1RNP是u1RNA和蛋白質(zhì)組成的，抗原表位在73KD、32KD和17.5KD多肽上，是MLTD的重要血清標(biāo)志。

7/1/20238787（三）抗SSA抗體

SS為干燥綜合征的縮寫(xiě)。此抗體又稱抗RO抗體。SSA抗原是RNA和蛋白質(zhì)復(fù)合物，抗原表位在52KD多肽上，主要見(jiàn)于原發(fā)性干燥綜合征患者及SLE。

7/1/20238888（四）抗SSB抗體

SSB抗體常伴隨SSA抗體同時(shí)出現(xiàn)，又稱抗La抗體，SSB抗原屬于SnRNP，是含有RNA和50KD蛋白質(zhì)的復(fù)合物。抗原表位在45KD、47KD和48KD多肽上。與SSA抗體并存對(duì)診斷SS有特異性。

7/1/20238989（五）抗Scl-70抗體

Scl-70抗原表位在86KD、70KD的片段上，是DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶I的降解產(chǎn)物，抗Scl-70抗體幾乎僅見(jiàn)于硬皮病，陽(yáng)性率30%左右。

7/1/20239090（六）抗Jo-1抗體

Jo-1抗體是組氨酰tRNA合成酶，抗原表位在55KD多肽，抗Jo-1抗體是多發(fā)性肌炎和皮肌炎的標(biāo)記抗體，陽(yáng)性率25-40%。

7/1/20239191（七）抗核糖體抗體

核糖體在核仁合成，然后轉(zhuǎn)入胞漿，抗原表位在大亞基上的38KD、16KD和15KD多肽上?？购颂求w抗體陽(yáng)性主要見(jiàn)于SLE，陽(yáng)性率20-30%。

7/1/20239292

檢測(cè)以上抗體的方法主要有：對(duì)流免疫電泳法(CIE)、雙相免疫擴(kuò)散法，免疫印跡試驗(yàn)(IBT)，免疫斑點(diǎn)技術(shù)和ELISA法等。一般采用兔胸腺或牛胸腺提取物或細(xì)胞提取物作為抗原。近年來(lái)，應(yīng)用分子重組抗原制備的試劑盒已投入市場(chǎng)。

7/1/20239393〖參考值〗陰性

〖臨床意義〗

1.抗nRNP抗體：見(jiàn)于35－40％的SLE病人，在MCTD病人中陽(yáng)性率可達(dá)95－100％，也可見(jiàn)于其他風(fēng)濕性疾病。

2.抗Sm抗體：主要見(jiàn)于SLE及重疊綜合征，急性期病人75％為陽(yáng)性。一般SLE患者30－40％陽(yáng)性率。但Sm抗體陽(yáng)性者90％以上為SLE，故稱之為SLE的標(biāo)記抗體。

7/1/20239494

3.抗SSA和抗SSB抗體：見(jiàn)于40－45％的SS病人。抗SSA抗體也可見(jiàn)于25％的SLE病人及其他風(fēng)濕性疾??；抗SSA抗體與新生兒狼瘡和先天性傳導(dǎo)阻滯有關(guān)?？筍SA抗體也可見(jiàn)于病毒感染等非風(fēng)濕性疾病?？筍SB抗體對(duì)原發(fā)性干燥綜合征較特異，但陽(yáng)性率僅27％左右。

7/1/202395954.抗Scl-70抗體：一般僅見(jiàn)于系統(tǒng)性硬化癥病人，陽(yáng)性率20－60％。

5.抗Jol-1抗體見(jiàn)于30％的多發(fā)性肌炎病人及10％的皮肌炎病人。抗Jol-1抗體與多發(fā)性肌炎病人間質(zhì)性肺炎的發(fā)生率增加有關(guān)。

6.抗rRNP抗體：主要見(jiàn)于SLE患者，陽(yáng)性率20%左右，與中樞神經(jīng)系統(tǒng)病變有關(guān)，多在疾病活動(dòng)期出現(xiàn)。

7/1/20239696〖注意事項(xiàng)〗

判斷試驗(yàn)結(jié)果時(shí)要結(jié)合臨床表現(xiàn)作出評(píng)價(jià)，也應(yīng)根據(jù)試驗(yàn)方法來(lái)作出解釋。對(duì)流免疫電泳法和雙相擴(kuò)散法敏感性低，但特異性較高；免疫印跡法、斑點(diǎn)免疫法及ELISA方法敏感性提高，但特異性相對(duì)減少。

7/1/20239797三.抗雙鏈DNA抗體（Antidouble-strandedDNA，A-dsDNA，)

A-dsDNA對(duì)SLE有高度特異性，是針對(duì)細(xì)胞核脫氧核糖核酸的自身抗體。臨床上常用的檢測(cè)方法有：①Farr‘s法：125I－DNA與待檢標(biāo)本中的A-dsDNA形成免疫復(fù)合物，加飽和硫酸銨使復(fù)合物沉淀，以γ計(jì)數(shù)器分別測(cè)定上清中游離及沉淀物中已結(jié)合的125I－DNA含量，可計(jì)算出血清中A－dsDNA的結(jié)合活性。7/1/20239898②ELISA法：將小牛胸腺DNA包被在微孔板中，加入病人血清，如有A-dsDNA則結(jié)合到微孔板上，加入酶標(biāo)抗人IgG，加入底物顯色后經(jīng)酶標(biāo)儀比色可知血清中A-dsDNA抗體的量。99

③免疫熒光法：采用馬疫錐蟲(chóng)或短膜蟲(chóng)作為基質(zhì)，加入病人血清。血清中的A-dsDNA與膜上的天然DNA結(jié)合，加入熒光標(biāo)記抗人IgG。馬疫錐蟲(chóng)和短膜蟲(chóng)的動(dòng)基體會(huì)發(fā)出綠色熒光。

④金標(biāo)斑點(diǎn)法：雙鏈DNA包被于硝酸纖維膜上，加入病人血清，加入金標(biāo)記抗人IgG，如有A-dsDNA存在，會(huì)顯示紅色斑點(diǎn)。

7/1/2023100100〖參考值〗依方法不同參考值也有不同。

Farr‘s法：≤0.20

免疫熒光法：<1:10

ELISA法：依試劑盒而定，一般<70u

金標(biāo)法：陰性

7/1/2023101101〖臨床意義〗

A-dsDNA陽(yáng)性對(duì)SLE有較高的特異性。大約60％的活動(dòng)性SLE病人會(huì)出現(xiàn)A-dsDNA。其他風(fēng)濕性疾病也會(huì)出現(xiàn)，但陽(yáng)性率非常低，如RA、S.S。

〖注意事項(xiàng)〗

假陽(yáng)性結(jié)果非常少見(jiàn)，但陰性亦不能排除SLE的診斷。

7/1/2023102102四.抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體（Antineutrophilcytoplasmicantibody,ANCA)測(cè)定

ANCA是針對(duì)中性粒細(xì)胞胞漿多種成分的自身抗體，主要有髓過(guò)氧化物酶(MPO)和蛋白酶3（Proteinase3，PR3)的抗體。主要用于診斷Wegener肉芽腫和系統(tǒng)性血管炎，特別是伴有腎病、呼吸疾病或其他類(lèi)型血管炎引起多器官損害的患者。檢測(cè)方法有IFA、ELISA、IBT等。

7/1/2023103103〖參考值〗陰性。

〖臨床意義〗

免疫熒光法檢查ANCA陽(yáng)性一般分為兩種熒光類(lèi)型，一種是胞漿型，稱為cANCA，一種是核周型，稱為pANCA。cANCA產(chǎn)生彌漫性細(xì)胞漿染色，是針對(duì)PR3的抗體，一般見(jiàn)于wegener肉芽腫病(WG)，特別是腎和肺受累的病人。pANCA產(chǎn)生核周染色，是針對(duì)MPO的抗體，主要見(jiàn)于系統(tǒng)性血管炎病人。7/1/2023104104在WG病人中，cANCA陽(yáng)性率在活動(dòng)期可達(dá)80％，且有較高的抗體效價(jià)。在緩解期抗體陽(yáng)性率低，且效價(jià)下降，或完全消失。

105〖注意事項(xiàng)〗

ANCA陽(yáng)性也可見(jiàn)于Good-Pastare‘s綜合征和SLE病人。WG的診斷不能單純依賴ANCA的結(jié)果，還要結(jié)合其他臨床表現(xiàn)，試驗(yàn)室檢查和組織病理學(xué)檢查才能確定。ANCA效價(jià)不能完全反應(yīng)疾病的活動(dòng)以及對(duì)治療的反應(yīng)。7/1/2023106106pANCA陽(yáng)性不是特異性的抗MPO抗體，也可以是抗粒細(xì)胞胞漿中其他酶的抗體，如彈性蛋白酶，組織蛋白酶G等。ANCA檢測(cè)應(yīng)注意排除其他自身抗體的交叉反應(yīng)，如ANA。因其可產(chǎn)生假陽(yáng)性應(yīng)注意鑒別，并進(jìn)行ANA檢測(cè)。

107五.抗線粒體抗體（Antimitochondrialantibody,AMA)

AMA是以細(xì)胞漿中的線粒體為抗原的一種自身抗體，無(wú)器官和種屬特異性。一般采用大鼠腎及胃作為抗原基質(zhì)，采用IFA檢測(cè)，陽(yáng)性可見(jiàn)大鼠腎和胃的細(xì)胞漿呈現(xiàn)細(xì)顆粒狀熒光。7/1/2023108108采用免疫印跡法可將與線粒體抗原的反應(yīng)分為從M1到M9九種類(lèi)型，高效價(jià)的M2和M9型自身抗原與原發(fā)性膽汁性肝硬變相關(guān)。目前已有檢測(cè)M2的ELISA試劑盒供應(yīng)。

109〖參考值〗陰性

>1：10為陽(yáng)性

〖臨床意義〗

AMA是原發(fā)性膽汁性肝硬化的標(biāo)記抗體，陽(yáng)性率達(dá)90%，并且50%患者抗體效價(jià)達(dá)1：1280或更高。此外，也可見(jiàn)于慢性活動(dòng)性肝炎、隱匿性肝硬化。肝外阻塞性黃疸患者AMA常陰性，因此可作為鑒別診斷的一個(gè)指標(biāo)。正常人中陽(yáng)性率<10%，且效價(jià)較低。

7/1/2023110110六.抗平滑肌抗體（Antismoothmuscleantibody，ASMA)

ASMA是抗肝細(xì)胞膜上一種肌動(dòng)球蛋白的自身抗體。這種肌動(dòng)球蛋白與平滑肌有交叉抗原性，因此與平滑肌有反應(yīng)。一般采用IFA法，以大鼠胃作為抗原基質(zhì)，陽(yáng)性可見(jiàn)胃壁平滑肌呈現(xiàn)亮綠色熒光。

7/1/2023111111〖參考值〗陰性，>1：10為陽(yáng)性

〖臨床意義〗

主要見(jiàn)于明顯活動(dòng)期的自身免疫性肝炎患者，陽(yáng)性率在80%以上，效價(jià)在1：80以上。急性病毒性肝炎早期ASMA也可陽(yáng)性，且早于HBsAg出現(xiàn)。其他疾病如傳染性單核細(xì)胞增多癥、SS、RA、支原體肺炎、腫瘤和病毒感染者也有不同程度的陽(yáng)性率。正常人中僅有2%陽(yáng)性。

7/1/2023112112七.抗甲狀腺球蛋白抗體（ATGA)和抗甲狀腺微粒體抗體(ATMA)

ATGA是由甲狀腺炎引起的自身抗體，抗原是一種糖蛋白。ATGA有器官特異性而無(wú)種屬特異性。ATMA的抗原是甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞胞漿內(nèi)的脂蛋白。常用檢測(cè)方法有：IFA、IHA、RIA、ELISA等。

7/1/20231131137/1/2023114114〖參考值〗

IHA：血清效價(jià)≤1：32，>1：32為陽(yáng)性，ATGA和ATMA

ELISA：正常為陰性，P/N<2.1，>2.1為陽(yáng)性,ATGA和ATMA

RIA：ATGA<30%；ATMA<15%

7/1/2023115115〖臨床意義〗

主要見(jiàn)于橋本甲狀腺炎、甲亢、甲低患者，也可見(jiàn)于甲狀腺瘤、惡性貧血、重癥肌無(wú)力、Edison病和肝臟疾病等。SLE及其他自身免疫病也有一定的陽(yáng)性率。

7/1/2023116116正常人也可檢出這兩種抗體，并且隨著年齡的增長(zhǎng)，陽(yáng)性率增加，特別是40歲以上婦女，可達(dá)18%左右。

應(yīng)該注意到，有的患者ATGA陰性，但ATMA陽(yáng)性，因此兩種抗體同時(shí)檢測(cè)可提高抗甲狀腺自身抗體的檢出水平。117八.HLA－B27測(cè)定

HLA－B27抗原為人類(lèi)MHCI類(lèi)抗原B位點(diǎn)的表達(dá)產(chǎn)物，可分為幾種亞型。HLA－B27的檢測(cè)方法有多種，補(bǔ)體依賴性微量細(xì)胞毒法(CDMA)；流式細(xì)胞儀法；玫瑰花法；ELISA法；等電聚焦法等。近來(lái)應(yīng)用PCR法檢測(cè)HLA－B27，敏感而特異，并且可進(jìn)行B27亞型的分析。

7/1/2023118118〖參考值〗

非洲－美洲人：3－4%；高家索人：6－8%；亞洲人：1%。

119〖臨床意義〗

強(qiáng)直性脊柱炎(AS)患者HLA－B27陽(yáng)性率為90－95%。大約42%的青年類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(JRA)存在HLA－B27，Reiter‘s綜合征患者陽(yáng)性率大約79%。此外，腸病性關(guān)節(jié)炎、銀屑病性關(guān)節(jié)炎也有一定的陽(yáng)性率。RA病人陽(yáng)性率不高。

7/1/2023120120〖注意事項(xiàng)〗

在評(píng)價(jià)HLA－B27陽(yáng)性結(jié)果時(shí)應(yīng)結(jié)合臨床表現(xiàn)綜合考慮，不能單純依靠此結(jié)果作出診斷。

121其他自身抗體及檢測(cè)7/1/2023122122C反應(yīng)蛋白（C-ReactiveProtein，CRP）

CRP是一種急性時(shí)相蛋白，由肝細(xì)胞合成，可與肺炎球菌細(xì)胞壁C多糖發(fā)生沉淀反應(yīng)，故稱CRP。在各種炎癥的急性期或組織創(chuàng)傷時(shí)，血清CRP濃度急劇升高。CRP不僅可結(jié)合多種細(xì)菌（bacteria）,真菌(fungi)及原蟲(chóng)（protozoal)體內(nèi)的多糖物質(zhì)，而且在鈣離子存在下，還可以結(jié)合磷脂酰膽堿和核酸。結(jié)合后的復(fù)合體具有激活補(bǔ)體(complement)的作用。123常用檢測(cè)方法為單相免疫擴(kuò)散（singleimmunodiffusiontest）、乳膠凝集實(shí)驗(yàn)（latexagglutinationtest)、火箭電泳法（rocketimmunoelectrophoresis)、酶聯(lián)免疫吸附法（enzyme-linkedimmunosorbentassay，ELISA)、速率散射比濁法（ratenephelometry）等。

124〖參考值〗<8mg/L

〖臨床意義〗

血清CRP升高多見(jiàn)于：急性、慢性細(xì)菌感染；組織損傷壞死；急性心肌梗死；各種炎癥；外科手術(shù)；腫瘤浸潤(rùn)；急性風(fēng)濕熱和活動(dòng)性類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎，以及其它關(guān)節(jié)炎性疾病。但病毒性感染一般CRP不升高，因此可作為病毒性感染和細(xì)菌性感染的鑒別指標(biāo)。

7/1/2023125125〖注意事項(xiàng)〗

CRP測(cè)定方法不同，在判定結(jié)果時(shí)應(yīng)予考慮。此外，雌激素、口服避孕藥可使CRP增高，皮質(zhì)激素和抗炎藥可使CRP下降。

126附：超敏C反應(yīng)蛋白

（HighSensitivityCReactiveProtein，HS-CRP）

CRP是一種急性期血漿蛋白，在組織損傷、炎癥和感染時(shí)可快速增加。CRP是由肝細(xì)胞分泌的，它的合成受細(xì)胞因子（Cytokine）調(diào)節(jié)，特別是IL-6。7/1/2023127127近年研究證實(shí)CRP濃度與血管內(nèi)皮功能障礙相關(guān)聯(lián)。動(dòng)脈內(nèi)的炎癥引發(fā)刺激、損傷、愈合，周而復(fù)始，形成斑塊，其結(jié)果是動(dòng)脈狹窄或粥樣硬化。許多研究認(rèn)為CRP可預(yù)測(cè)動(dòng)脈粥樣硬化病人的危險(xiǎn)性，其中一些人日后發(fā)生冠狀動(dòng)脈病、腦血管病或周?chē)鷦?dòng)脈病變。CRP是炎癥并發(fā)動(dòng)脈粥樣硬化的良好指標(biāo)，血漿中CRP濃度高說(shuō)明更易導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣硬化。測(cè)定方法為速率散射比濁法。

128〖參考值〗＜3mg/l

〖臨床意義〗

HS-CRP測(cè)試（檢測(cè)低限約為0.2mg/L），再加上血脂如膽固醇監(jiān)測(cè)，有助于預(yù)測(cè)冠心病的危險(xiǎn)性。一般將CRP＞3mg/L以上，總膽固醇＞6.06mmol/L認(rèn)為患心肌梗塞的危險(xiǎn)性會(huì)增加。未發(fā)生心血管或周?chē)芤馔獾娜丝墒褂眠@指標(biāo)來(lái)評(píng)估6-10年出現(xiàn)發(fā)作的危險(xiǎn)性。

7/1/2023129129

類(lèi)風(fēng)濕因子（RheumatoidFactor，RF）

RF是一種自身抗體，可與變性的IgG發(fā)生反應(yīng)，與IgG的Fc段結(jié)合。RF可分為IgG、IgM、IgA、IgD和IgE五型。凝集試驗(yàn)檢測(cè)的主要為IgM型RF。RF主要見(jiàn)于類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（rheumatoidarthritisRA)，也可見(jiàn)于其他結(jié)締組織病及其他疾病。檢測(cè)方法有乳膠凝集試驗(yàn)、致敏羊紅細(xì)胞凝集法、速率散射比濁法、ELISA法等。

7/1/2023130130〖參考值〗

乳膠法：陰性或<1：20

速率散射比濁法：<30IU/ml

〖臨床意義〗

RF見(jiàn)于90%以上的RA病人，效價(jià)常在1：160以上，含量多>80IU/ml。，一般方法所檢測(cè)的大部分是IgM-RF。7/1/2023131131關(guān)于RF分型，臨床應(yīng)用尚不廣泛。多數(shù)作者認(rèn)為：IgM－RF效價(jià)高低可在一定程度上反映RA的活動(dòng)性，但無(wú)明確的密切關(guān)系；IgG-RF與RA患者的滑膜炎、血管炎和關(guān)節(jié)外癥狀密切相關(guān)；IgA-RF見(jiàn)于RA、硬皮病、Felty綜合征和系統(tǒng)性紅斑狼瘡（systemiclupuserythematosus，SLE)，也是RA臨床活動(dòng)性的一個(gè)指標(biāo)；IgE-RF除RA患者外，也見(jiàn)于Felty綜合征和青年型RA。高水平IgM-RF陽(yáng)性病人預(yù)后較差。7/1/2023132132

從早期RA患者的X線片分析，IgM-RF持續(xù)陽(yáng)性的病人更易發(fā)生骨侵蝕。IgA-RF在SS病人中陽(yáng)性率較高；IgE-RF在惡性關(guān)節(jié)炎病人中陽(yáng)性率較高。在RA病人，高效價(jià)RF存在并伴有嚴(yán)重的關(guān)節(jié)功能受限時(shí)，常提示預(yù)后不良。

7/1/2023133133〖注意事項(xiàng)〗

正常人也可有4％左右的陽(yáng)性率。隨年齡增加，RF的檢出率會(huì)增加。RA病人RF也可陰性，不能單純依靠RF陽(yáng)性來(lái)診斷RA。RF還可見(jiàn)于其它多種疾病，其中最常見(jiàn)的是干燥