無(wú)名高熱的理論及其解決思路

第1頁(yè)，講稿共38頁(yè)，2023年5月2日，星期三近年來(lái)豬越來(lái)越難養(yǎng)、病越來(lái)越多！根本原因何在？豬群的健康狀態(tài)下降兩大免疫抑制性疾病豬繁殖與呼吸綜合征(藍(lán)耳病PRRS)豬圓環(huán)病毒2型感染(PCV-2)第2頁(yè)，講稿共38頁(yè)，2023年5月2日，星期三豬藍(lán)耳病(PRRS)1.PRRS的危害2.目前的流行特點(diǎn)3.關(guān)于病毒的血清型4.如何診斷？5.疫苗使用存在的問(wèn)題？6.PRRSV致病機(jī)制7.利用豬只免疫及攻毒試驗(yàn)測(cè)試PRRS免疫營(yíng)養(yǎng)劑的功效性第3頁(yè)，講稿共38頁(yè)，2023年5月2日，星期三藍(lán)耳病(PRRSVdisease)呼吸與繁殖綜合癥Porcinerespiratorydiseasecomplex(PRDC)母豬流產(chǎn)及死亡癥狀SowAbortionandMortalitySyndrome(SAMs)仔豬多系統(tǒng)綜合衰竭消耗癥PostweaningMultisystemicWastingSyndrome(PMWS)第4頁(yè)，講稿共38頁(yè)，2023年5月2日，星期三藍(lán)耳病毒的感染哺乳期懷孕期保育期育肥期胎兒胎盤(pán)PRRSV母豬癥狀：發(fā)燒、嗜睡、厭食、無(wú)乳、發(fā)情不順鏈球菌、TGE圓環(huán)病毒圓環(huán)病毒、豬瘟沙氏桿菌、巴氏桿菌副嗜血桿菌圓環(huán)病毒、附紅細(xì)胞體放線(xiàn)桿菌AP仔豬泌乳PRRSV保育豬PRRSV肥豬PRRSV死胎、木乃伊胎晚期流產(chǎn)呼吸癥狀、肺炎下痢、臍帶出血免疫下降、死亡化膿性腦炎肺炎、PDWN虛弱、死亡呼吸道癥狀整體免疫下降肺炎第5頁(yè)，講稿共38頁(yè)，2023年5月2日，星期三除此而外，公豬也會(huì)感染PRRSV已感染PRRS的精蟲(chóng)未感染PRRS的精蟲(chóng)黑點(diǎn)第6頁(yè)，講稿共38頁(yè)，2023年5月2日，星期三PRRSV與豬瘟免疫感染PRRSV后對(duì)豬瘟抗體有很大的免疫抑制性感染PRRSV后即使做了豬瘟疫苗免疫仍然會(huì)爆發(fā)豬瘟由于PRRSV的存在，使豬瘟疫苗免疫失效第7頁(yè)，講稿共38頁(yè)，2023年5月2日，星期三PRRS對(duì)于豬瘟疫苗功效性的影響PRRSVHCvaccineCSFvirusdpcill/dead

--V2/9~11

-VVnosymptomV-V2/9~11VVV2~3/6---nosymptom第一組給予豬瘟病毒之攻毒而不免疫疫苗第二組注射豬瘟疫苗并于三周后進(jìn)行豬瘟病毒攻毒第三組進(jìn)行PRRS病毒(01NP1,美洲病毒株)攻毒后隔四周再給予豬瘟病毒之攻毒第四組進(jìn)行PRRS病毒攻毒后一周免疫注射豬瘟疫苗，再隔三周進(jìn)行豬瘟病毒之攻毒第五組為本試驗(yàn)之空白組，不免疫疫苗亦不攻毒任何病毒。泰國(guó)病理學(xué)家Kesdangsakonwuti等人(2005)也就是說(shuō),即使您打了豬瘟疫苗,因?yàn)镻RRSV的侵襲,使豬瘟疫苗失去了保護(hù)力,用豬瘟病毒攻毒時(shí),照樣引起感染豬瘟而死亡!第8頁(yè)，講稿共38頁(yè)，2023年5月2日，星期三結(jié)論：PRRSV潛在的危害很大豬群的生產(chǎn)性能下降豬群免疫力下降呼吸道疾病發(fā)病率上升繼發(fā)感染增多母豬發(fā)情障礙、滯后產(chǎn)現(xiàn)象增多第9頁(yè)，講稿共38頁(yè)，2023年5月2日，星期三PRRS病毒的血清型國(guó)際上分美洲型和歐洲型我國(guó)分離的毒株都屬美洲型我國(guó)豬群中還未發(fā)現(xiàn)歐洲型毒株第10頁(yè)，講稿共38頁(yè)，2023年5月2日，星期三如何診斷?明確豬場(chǎng)各階段豬群的藍(lán)耳病病毒感染率（用ELISA試劑盒進(jìn)行抗體監(jiān)測(cè)）監(jiān)測(cè)感染動(dòng)態(tài)情況（每季度1次），是否升高或降低出現(xiàn)繁殖障礙問(wèn)題，應(yīng)同時(shí)檢測(cè)（胎兒體內(nèi)、母豬血清中）病毒和抗體，單純的抗體陽(yáng)性并不能說(shuō)明就是由藍(lán)耳病造成的繁殖障礙第11頁(yè)，講稿共38頁(yè)，2023年5月2日，星期三當(dāng)一個(gè)豬場(chǎng)符合以下3點(diǎn)時(shí)應(yīng)診斷患PRRS1.豬群表現(xiàn)典型的PRRS癥狀及有PRRS患病史2.豬群出現(xiàn)PRRS病變3.患病豬中找到PRRS病毒如果仔豬出現(xiàn)典型的臨床癥狀、病變、血液中有PRRS抗體時(shí)，又知該豬群沒(méi)有注射PRRS疫苗的則可診斷患有PRRS。第12頁(yè)，講稿共38頁(yè)，2023年5月2日，星期三疫苗使用存在的問(wèn)題：1.使用活疫苗造成藍(lán)耳病暴發(fā)已是不爭(zhēng)的事實(shí)（國(guó)內(nèi)外均有實(shí)例）2.活疫苗的返強(qiáng)、變異、重組可產(chǎn)生新病毒3.免疫接種豬造成疫苗毒的持續(xù)性感染和長(zhǎng)期帶毒；引起免疫豬場(chǎng)和豬群處于長(zhǎng)期感染狀態(tài)第13頁(yè)，講稿共38頁(yè)，2023年5月2日，星期三PRRSV致病機(jī)制第14頁(yè)，講稿共38頁(yè)，2023年5月2日，星期三豬的肺泡巨噬細(xì)胞上的Heparinlike接受器與PRRS病毒母體蛋白的接合情況(InvolvementoftheMatrixProteininAttachmentofPorcineReproductiveandRespiratorySyndromeVirustoaHeparinlikeReceptoronPorcineAlveolarMacrophages)

pSn=receptorforPRRSVORF5ORF6C-S-S-CPRRSVSialo-adhesinprotein(涎黏著蛋白)

HeparinlikeReceptor第15頁(yè)，講稿共38頁(yè)，2023年5月2日，星期三Nucleus核ORF5ORF6MhcIIMhcIMhcIMhcIICD8+cellCD4+cellNTdomain結(jié)合部位Hostcells,Antigenpresentcells第16頁(yè)，講稿共38頁(yè)，2023年5月2日，星期三利用豬只免疫及攻毒試驗(yàn)測(cè)試

PRRS免疫營(yíng)養(yǎng)劑的功效性第17頁(yè)，講稿共38頁(yè)，2023年5月2日，星期三(1)豬只免疫及攻毒試驗(yàn)代號(hào)免疫營(yíng)養(yǎng)劑組別頭數(shù)H

高劑量6L

低劑量6BK

空白組6組別1stimmunized2nd3rdchallenge高劑量低劑量空白組21~28days3-wkage5-wk7-wk9-wkHalf-doseHalf-doseFull-dose3-wkage5-wk7-wk9-wkImmunizationandchallengeinpigsmodel第18頁(yè)，講稿共38頁(yè)，2023年5月2日，星期三Group

coatingantigen

IgM-ELISAtitres(S/BK)IFAtitresNTtitres

Hdosegroup

3~1010~3016~3216~32

Ldosegroup310168~32BKgroupNegativeCTL11<8<8

(2)各試驗(yàn)組免疫三次后2周(9周齡)之血清免疫力價(jià)分析第19頁(yè)，講稿共38頁(yè)，2023年5月2日，星期三(3)攻毒后(14-DPC)臨床癥狀及健康情形：攻毒后之DPI-14之臨床癥狀(P8)P10-experimentgroup總頭數(shù)發(fā)燒咳嗽死亡毛粗(H)Highdose61102(L)Lowdose621~202(BK)Placebo(15%ISA206)64~53~403~5疫苗組，于攻毒后一至二天內(nèi)都有一至二頭發(fā)生40.5℃以上發(fā)燒反應(yīng)，但是二周后大都回復(fù)原來(lái)之40.3℃以下，攻毒后(H)及(L)顯然大多較活潑健康、不再咳嗽、皮毛漸漸恢復(fù)亮麗，而(BK)對(duì)照組之豬只咳嗽現(xiàn)象比較頻繁。以下表為攻毒后1~14-DPC觀(guān)察之將康狀態(tài)及患病情形第20頁(yè)，講稿共38頁(yè)，2023年5月2日，星期三觀(guān)察項(xiàng)目點(diǎn)數(shù)觀(guān)察項(xiàng)目點(diǎn)數(shù)1.糞便3.關(guān)節(jié)堅(jiān)固1正常1半固狀2腫脹2下痢3無(wú)法支撐重量3死亡4死亡42.行為4.步行活潑機(jī)警1正常1昏睡2跛行2擠在一堆3不能站立3死亡4死亡4觀(guān)察項(xiàng)目點(diǎn)數(shù)觀(guān)察項(xiàng)目點(diǎn)數(shù)5.食欲8.毛發(fā)正常1平滑1食量減少2粗糙2無(wú)食欲3豎立3死亡4死亡46.身體狀況9.皮膚腹部圓滿(mǎn)1正常1消瘦2疹斑2脊骨突出肋骨明顯3發(fā)疳3死亡4死亡47.神經(jīng)肌肉10.呼吸正常1正常1歪頭斜頭2快速2震顫3呼吸困難，咳嗽3死亡4死亡4健康狀況與臨床癥狀觀(guān)察指標(biāo)表每只動(dòng)物每日需作10項(xiàng)觀(guān)察指標(biāo)，每個(gè)觀(guān)察項(xiàng)目正常為1點(diǎn)，每日總計(jì)正常為10點(diǎn)，最嚴(yán)重的臨床癥狀為30點(diǎn)，死亡40點(diǎn)。第21頁(yè)，講稿共38頁(yè)，2023年5月2日，星期三攻毒后之14-DPC依觀(guān)察項(xiàng)目計(jì)分之臨床癥狀P10

觀(guān)察項(xiàng)目12345678910T*Hdose1.01.01.01.01.01.21.01.31.21.210.9Ldose1.01.21.21.21.21.21.01.51.51.212.2BK1.51.81.71.72.02.21.52.51.52.318.7P10

觀(guān)察項(xiàng)目12345678910T*Hdose1.01.01.01.01.01.21.01.31.21.210.9Ldose1.01.01.01.21.21.21.01.31.51.211.6BK1.51.81.71.72.02.21.52.31.52.318.5*：觀(guān)察10項(xiàng)之臨床癥狀，每一組6頭豬分別給分后取其平均值后分別填入表格，T為10項(xiàng)臨床癥狀之總分。攻毒后之21-DPC依觀(guān)察項(xiàng)目計(jì)分之臨床癥狀第22頁(yè)，講稿共38頁(yè)，2023年5月2日，星期三(4)試驗(yàn)豬只在免疫及攻毒后重量變化情形攻毒第23頁(yè)，講稿共38頁(yè)，2023年5月2日，星期三*:ThebloodsamplesoftestedpigscanbedetectedPRRSVinfectedbyRT-PCRrunning(5)豬只攻毒試驗(yàn)后病毒血癥檢出情況組別疫苗名稱(chēng)頭數(shù)2-DPC7-DPC*14-DPC21-DPCH

60210L

60220BKPlacebo

61363第24頁(yè)，講稿共38頁(yè)，2023年5月2日，星期三(6)各試驗(yàn)組攻毒后21DPC解剖后肺臟之病變嚴(yán)重性分析豬只攻毒后，第21天起進(jìn)行試驗(yàn)豬只之屠體解剖，觀(guān)察肺部之肉眼病變結(jié)果可知，空白組之6頭豬都有明顯的間質(zhì)性肺炎，壞死病變癥狀之病變指數(shù)Lesionscore約在15-40，高劑量組有一肺臟病變嚴(yán)重，可能有二次感染發(fā)生，其指數(shù)約在25左右，其他5頭的指數(shù)都在15以下。LesionscoreHighdose251510885Lowdose2018151055BK403530262515

各組的6頭豬只其肺臟病變指數(shù)第25頁(yè)，講稿共38頁(yè)，2023年5月2日，星期三(7)各試驗(yàn)組攻毒后21DPC解剖后分析肺臟組織切片病理分析間質(zhì)性肺炎之嚴(yán)重性

耳號(hào)

scoreHighdosevaccine100111002110031100411005010061Lowdosevaccine101111012110131101411015210161BK102161022510236102461025510266C103101032110330空白組的感染指數(shù)最高第26頁(yè)，講稿共38頁(yè)，2023年5月2日，星期三結(jié)論：由豬只免疫及攻毒試驗(yàn)?zāi)Ｊ娇芍焊邉┝考暗蛣┝康腜RRS免疫營(yíng)養(yǎng)劑經(jīng)前二次半劑量及第三次全量免疫仔豬后，該免疫的豬只對(duì)于PRRSV（5T-type1;TCID50=104)攻毒皆具有相當(dāng)強(qiáng)的保護(hù)力！第27頁(yè)，講稿共38頁(yè)，2023年5月2日，星期三PRRSV感染途徑與免疫營(yíng)養(yǎng)增強(qiáng)劑的開(kāi)發(fā)策略多重感染路徑：Step1.上呼吸道及下呼吸道上皮細(xì)胞感染路徑Step2.呼吸道周邊組織的monocyte（單核球）,macrophage（巨噬細(xì)胞）感染路徑Step3.Antibodydependentenhancement(ADE)ofphagocytosis第28頁(yè)，講稿共38頁(yè)，2023年5月2日，星期三可以誘發(fā)產(chǎn)生較高的中和力價(jià)。減低PRRSvaccine抗原過(guò)敏性問(wèn)題?？梢杂行дT發(fā)T細(xì)胞免疫機(jī)制。

（1）誘發(fā)中和力價(jià)之液體或粘膜免疫反應(yīng)機(jī)制

（2）誘發(fā)細(xì)胞免疫機(jī)制清除被感染的細(xì)胞

PRRSV感染途徑與免疫營(yíng)養(yǎng)增強(qiáng)劑的開(kāi)發(fā)策略第29頁(yè)，講稿共38頁(yè)，2023年5月2日，星期三千呼萬(wàn)喚始出來(lái)免疫營(yíng)養(yǎng)增強(qiáng)劑制作原理第30頁(yè)，講稿共38頁(yè)，2023年5月2日，星期三ProcedureofV.S.P:PRRSVirusEffectiveDNAORF5ORF6C-S-S-CCopyincarrierMixwith