蘇教教學課件微生物的培養(yǎng)基一課件

第一節(jié)第一課時微生物包括哪五類：病毒細菌放線菌真菌原生動物特點：結構都相當簡單,多數(shù)個體十分微小(<o.1mm)的生物的總稱。通常要用光學顯微鏡或電子顯微鏡才能看到，有的甚至沒有細胞結構.且體內一般不含有葉綠素.不能進行光合作用.

原核

原生生物界真菌界病毒界真核病毒

SARS病毒禽流感病毒朊病毒（蛋白質病毒）真菌如圖是酵母菌電子顯微鏡下的形態(tài)結構酵母菌和霉菌青霉

了解有關培養(yǎng)基的基礎知識，進行無菌技術的操作，進行微生物的培養(yǎng)。

一、課題目標：

掌握培養(yǎng)基的制備、高壓蒸氣滅菌和平板劃線法等基本操作技術，熟練、規(guī)范地進行無菌操作，成功地培養(yǎng)微生物。無菌技術的操作。二、課題重點和難點：三、技能目標：（2）按膠培養(yǎng)障基的父物理蜜形態(tài)遣分：液體姻培養(yǎng)軍基半固麗體培敲養(yǎng)基固體令培養(yǎng)甲基一秋基評礎知堵識:（3）按鄰培養(yǎng)擁基的它功能點分：P12基礎尚培養(yǎng)投基選擇初培養(yǎng)塔基鑒別富培養(yǎng)扶基（1）按萌培養(yǎng)題基的襯化學岡成分趙分：·天然羅培養(yǎng)河基·合成炸培養(yǎng)子基·半合成謎培養(yǎng)匯基閱讀大課本P8第三悠段分寺別說狐出它煎們的滲優(yōu)點鳴、缺付點。各種拘培養(yǎng)淡基的憤具體閘配方趕不同凱，但跪一般蘋都包釋括哪奧些成泥分？答：爹不管全哪種拿培養(yǎng)世基，剛一般碧都含靠有水、碳源、和氮源、無機貝鹽等營疼養(yǎng)物堵質。注：另外撤還需貝要滿自足微騙生物堅生長睬對pH、特做殊營姨養(yǎng)物乎質,例如:生長苦因子(即細兇菌生謠長必肯需，盟而自歇身不況能合穿成的眠化合嫌物,如維能生素痰、某則些氨武基酸師、嘌勾呤、服嘧啶)以及詢氧氣津、二氧運化碳、滲透穴壓等的要食求。二扣無綿菌技義術：無菌冬操作秀泛指蜘在培襖養(yǎng)微罵生物管的操乏作中爺，所更有防娃止雜雜菌污準染的則方法貍。閱讀P8-咸--P9說出顛消毒拒和滅逝菌有紅何不盲同？1、煮沸導消毒榮法:10沉0℃煮沸5-芳6m鞏in2、巴膠氏消詠毒法愛：70啞-7括5皇℃下煮30斗mi點n或80號℃下煮15盤mi怪n3、化喊學藥聾劑消勒毒法:用75匯%酒精厚、新植潔爾速滅等隸進行電皮膚車消毒;氯氣女消毒創(chuàng)水源4、紫耐外線下消毒……(1擊)常用狂消毒沃的方悉法：1、灼缸燒滅嗎菌:2、干竭熱滅寧菌：16追0-懼17泊0地℃下加凝熱1-征2h。3、高妨壓蒸閃氣滅撞菌：10瞇0k斧Pa、12兇1敬℃下維石持15牢-3燙0m錯in芒.(2抗)常用僑滅菌描的方托法：分類定義方法滅菌法殺滅一切微生物物理法：熱力、輻射、微波、等離子體化學法：醛類、烷化劑高效消毒法殺滅一切致病微生物紫外線、含氯劑、臭氧、復配劑等中效消毒法殺滅除芽孢外的致病微生物超聲波、碘類、醇類、酚類低效消毒法殺滅細菌繁殖體、親脂病毒單鏈季胺鹽、雙胍類、中草藥、金屬離子無菌陵技術采：常票識1．幻玉無菌腸技術憂包括星：（1）對屆實驗典操作蹈空間撕、操比作者陷的衣隆著和迫手進褲行清潔亦和消墻毒；（2）將眾培養(yǎng)腸器皿秤、接魂種用惠具和嘩培養(yǎng)毯基等內器具象進行滅菌；（3）為耐避免仆周圍翠微生栗物污狼染，鴉實驗對操作乘應在酒精辯燈火平焰附彈近旁進逗行；（4）避池免已腿滅菌躍處理族的材院料用古具與周圍浸物品相接疏觸。2．蛋消毒快方法蒜：（1）日拴常生序活經象常用杏到的菊是煮沸消毒舍法；（2）對腸一些勝不耐膠高溫煙的液壤體，找則使旺用巴氏消毒禿法（尤作簡民要介團紹）不；（3）對捐接種痕室、協(xié)接種咽箱或園超凈窩工作掉臺首剪先噴新灑石炭智酸或礙煤酚群皂等溶銜液以吸增強筋消毒羊效果伐，然能后使斃用紫外拖線進行大物理陜消毒擴。（4）實警驗操鞋作者貸的雙振手使懲用酒精進行史消毒穩(wěn)；（5）飲堤水水鵝源用氯氣進行系消毒糕。3．滅停菌方祖法：（1）接肌種環(huán)櫻、接瓜種針罷、試乎管口鈴等使公用灼燒滅菌媽法；（2）玻桑璃器僻皿、碰金屬跨用具懸等使棵用泉干熱暴滅柴菌法斯，所釀用器婆械是干熱窩滅菌差箱；（3）培搖養(yǎng)基怕、無門菌水培等使櫻用床高壓抓蒸汽滅菌鞏法，所副用器斜械是高壓局蒸汽疲滅菌露鍋。（4）表繡面滅免菌和鵲空氣鍵滅菌浸等使咬用紫外色線滅菌參法，教所用探器械今是紫外容燈。三、能實驗耽操作1.制備樹牛肉繡膏蛋達白胨去培養(yǎng)侍基（綁用于習培養(yǎng)浸細菌霜）【補充】培養(yǎng)粱基的望配制鞠原則遷：①目的鏟要明廳確：根據弓培養(yǎng)狠的微旁生物將種類閑、培琴養(yǎng)的笑目的把等確晝定培而養(yǎng)基懼的類謹型和遵配制炊量。②營養(yǎng)趴要協(xié)相調：培養(yǎng)趣基中辰各種袖營養(yǎng)沈物質捧的濃溝度和宣比例扣要適漢宜。襯例如仙：碳迅氮比4∶銹1時，耕谷氨牙酸棒聞狀桿櫻菌大增量繁昌殖而旺產生貸谷氨枯酸少辯；碳休氮比請為3∶印1時，末菌體攤繁殖根受抑臣制而謊谷氨籍酸合登成量慨大增看。③pH要適挺宜：細裹菌培碼養(yǎng)基pH中性評或偏桶堿性防，霉拜菌培板養(yǎng)基誦呈酸享性。1．配率制：籮計算、稱量、熔化2．調親節(jié)pH：跡用3%的HC怎I/殼Na隊OH調節(jié)pH次7．0-桶--宇7．23．分生裝：法分裝版過程性中注攪意不移要使軟培養(yǎng)曲基沾在狡管口孤或瓶壟口上祝，以貢免沾渠污棉成塞而引若起污膨染。攝分裝壞三角竿燒瓶撕的量以不淹超過姿三角騙燒瓶螺容積旱的一阻半為納宜。4．包搖扎：操作剖步驟:5．滅具菌:將50塘ml培養(yǎng)殲基用玻陷棒轉淺移至裝三角勇錐瓶需中，例塞上省棉花撤塞，鹿包上仔牛皮稅紙，舍再放箏入高壓途蒸氣滅菌刃鍋，寇在壓毀力為10遲0k煌Pa、溫技度為12湯1℃，滅采菌15～30遺mi強n。將培養(yǎng)誘皿用舊尊報紙墨包裹惕，放鈔入干熱較滅菌箱內漠，在16淚0～17充0鉤℃下滅落菌2h。6．倒訊平板:待培撈養(yǎng)基冷卻效到50燈℃左右密時，李在酒樸精燈瓶附近壟倒平棋板。2d后觀跪察平舊板，蹲無雜糧菌污偏染才鄙可用絮來接虧種.7．無烏菌檢浙查：將滅揀菌的銹培養(yǎng)才基放蠅入37坡℃的溫樓室中香培養(yǎng)24業(yè)—4嶺8小時停，以棵檢查紛滅菌母是否統(tǒng)徹底底。倒平徐板:菌種婆的保魄存1、臨外時保叔藏：阻接種癢到固年體斜很面培茅養(yǎng)基戶，菌宰落長摸成后材置于4℃冰箱姐保存濫。2、長幫期保蠢存：百甘油植冷凍衣管藏攤法1.培養(yǎng)創(chuàng)基滅選菌后砌，需匯要冷比卻到50等℃左右繩時，睜才能對用來微倒平制板。劇你用索什么料辦法綠來估應計培跡養(yǎng)基撈的溫據度？問題隨討論答：可以享用手禮觸摸額盛有沾培養(yǎng)勇基的折錐形奮瓶，暮感覺殺錐形類瓶的俗溫度死下降咸到剛難剛不燦燙手指時，費就可久以進初行倒盼平板續(xù)了。2.為什鏈么需賠要使曬錐形券瓶的氧瓶口繪通過扶火焰媽？答：疏通過蓄灼燒廁滅菌凡，防朝止瓶頂口的叔微生存物污插染培敲養(yǎng)基兄。注意:3.平板延冷凝宰后，派為什賢么要居將平宣板倒嗎置？4.在倒期平板違的過面程中慰，如藍果不逗小心預將培祝養(yǎng)基撒濺在薄皿蓋重與皿吃底之向間的辛部位騰，這白個平老板還兄能用友來培厭養(yǎng)微匆生物塵嗎？童為什皮么？答：驚平板豪冷凝擴后，拒皿蓋吹上會屬凝結碧水珠束，凝傍固后踢的培質養(yǎng)基叨表面蝴的濕鑒度也榨比較罰高，司將平霸板倒木置，孔既可塑以使桃培養(yǎng)?；韮擅娴尼斔謨愿棉r地揮棟發(fā)，潑又可營以防植止皿灑蓋上炒的水求珠落勝入培呀養(yǎng)基洽，造脈成污榆染。答：料空氣陡中的嶄微生極物可慨能在喇皿蓋底與皿就底之垂間的率培養(yǎng)?；暇ψ躺?，因戲此最冤好不折要用文這個摟平板宵培養(yǎng)寧微生脆物。選擇們培養(yǎng)戀基加入青霉倘素的培運養(yǎng)基:分離竟酵母敞菌、旬霉菌沿等真更菌加入館高濃情度食鹽的培牽養(yǎng)基:分離餃金黃塊色葡齊萄球同菌不加施氮源近的無氮培養(yǎng)濟基:分離悠固氮岡菌不加享含碳認有機允物的無碳培養(yǎng)驕基:分離疼自養(yǎng)兆型微猜生物加入青霉嬌素等球抗生沉素的培旅養(yǎng)基:分離解導入映了目縫的基濾因的鎮(zhèn)受體蜂細胞加入氨基徑喋呤棒、次產黃嘌千呤和冰胸腺傷嘧啶頃核苷的培斃養(yǎng)基:分離錯雜交絞瘤細倦胞2、純稱化大敵腸桿趴菌:接種衫方法飾有：平板侮劃線顆法和龜稀釋禾涂布玻平板捆法平板臂劃線澤法:通過述接種加環(huán)在蓋瓊脂厚固體胡培養(yǎng)魄基表媽面連顏續(xù)畫尿線的扒操作,將聚溜集的唱菌鐘畏逐步儉稀釋亮分散忽到培城養(yǎng)基也的表提面.在數(shù)俗次畫收線后,可以各分離存到由建一個替細胞箏繁殖牛而來礦的肉墾眼可脊見的棗子細籮胞群性體,這就石是菌龜落.微生燙物的治接種版技術劃線盈后茫培床養(yǎng)一迎段時丈間后微生兩物的僻恒溫否培養(yǎng)微生忘物的瞎恒溫債培養(yǎng)問題乳討論1.為什諷么在筆操作稻的第展一步鹽以及宜每次點劃線榆之前弦都要圖灼燒紙接種植環(huán)？堵在劃正線操慮作結擁束時摟，仍巷然需排要灼飾燒接拔種環(huán)冬嗎？失為什錫么？答：夸操作規(guī)的第欠一步每灼燒非接種節(jié)環(huán)是舉為了乓避免做接種構環(huán)上版可能墊存在笨的微布生物灰污染鎖培養(yǎng)酒物；扣每次限劃線戒前灼樹燒接婆種環(huán)匠是為拼了殺量死上槽次劃知線結穿束后篩，接些種環(huán)群上殘菜留的通菌種心，使汗下一感次劃助線時衣，接怕種環(huán)背上的竿菌種躲直接碰來源目于上盈次劃碗線的補末端言，從面而通溝過劃跨線次囑數(shù)的燦增加圾，使荒每次脹劃線問時菌喚種的威數(shù)目廢逐漸堂減少躁，以賣便得物到菌細落。堵劃線超結束害后灼舅燒接岔種環(huán)班，能顯及時啦殺死蝴接種圈環(huán)上趕殘留置的菌戶種，像避免籮細菌涌污染白環(huán)境葉和感總染操星作者撐。2.在灼挑燒接炕種環(huán)卵之后夕，為隸什么頁要等槽其冷撞卻后禁再進殺行劃愧線？答：虹以免究接種績環(huán)溫卵度太膽高，緒殺死躁菌種單。3.在作幟第二裹次以您及其泛后的廊劃線椒操作猜時，乳為什得么總亦是從職上一葬次劃盟線的鬧末端衛(wèi)開始攀劃線？答：械劃線捐后，榨線條床末端巷細菌悼的數(shù)席目比他線條撫起始樸處要唱少，聰每次擁從上訂一次喝劃線醉的末黨端開允始，挽能使雜細菌愛的數(shù)盤目隨卻著劃行線次閉數(shù)的隆增加豎而逐螞步減湯少，悔最終株能得惑到由恭單個移細菌餐繁殖喂而來傲的菌溜落。四、倘課題占成果退評價（一古）培垂養(yǎng)基錢的制刊作是關否合晶格如果纏未接澡種的架培養(yǎng)腹基在煎恒溫確箱中喊保溫1～2是d后無勾菌落朵生長汽，說川明培衫養(yǎng)基首的制吩備是想成功爆的，挽否則糖需要碼重新凝制備掩。（二虧）接爪種操知作是永否符尿合無半菌要醬求如果兄培養(yǎng)飯基上景生長急的菌螞落的秩顏色夫、形麻狀、杰大小瘦基本桌一致錫，并哀符合茶大腸挑桿菌親菌落明的特總點，嚴則說謊明接競種操孫作是悔符合贊要求存的；淺如果教培養(yǎng)犁基上堵出現(xiàn)驚了其盼他菌爸落，用則說明明接悶種過濕程中皇，無配菌操宗作還材未達拌到要味求，璃需要斧分析適原因臨，再慶次練村習。（三?。┦怯浄襁M贏行了售及時謎細致啊的觀述察與構記錄培養(yǎng)12壞h與24香h后的柳大腸渣桿菌創(chuàng)菌落快的大似小會掀有明墻顯不槍同，初及時綱觀察提記錄羞的同邀學會權發(fā)現(xiàn)毫這一準點，另并能彈觀察鎖到其廳他一厲些細治微的艙變化窮。這壁一步脈的要蠢求主功要是療培養(yǎng)礙學生歲良好漢的科常學態(tài)潤度與惕習慣回。本課棍題知驅識小隸結:【典例晉解析】例1．關撐微生百物營任養(yǎng)物釣質的示敘述羨中，灰正確涂的是:A.是碳泄源的蝦物質漆不可藥能同鋒時是茅氮源B.凡碳苗源都掌提供克能量C.除水直以外忙的無距機物扯只提伶供無愁機鹽D.無機富氮源僑也能閣提供嫁能量解析銀：不同勇的微劃生物削，所輝需營捆養(yǎng)物什質有壟較大林差別著，要虜針對命微生調物的蘭具體零情況藍分析帶。對闖于A、B選項盯，它軟的表筍達是勻不完驢整的艙。有窗的碳均源只逃能是籃碳源宵，如衫二氧斧化碳賊；有峽的碳堤源可駕同時零是氮白源，驅如NH4HC旗O3；有壺的碳齒源同按時是識能源查，如雷葡萄稿糖；酸有的徐碳源認同時澆是氮藍源，捎也是虹能源催，如桿蛋白宅胨。書對于C選項諷，除乏水以健外的站無機謎物種甜類繁匪多，綱功能奸也多勾樣。比如二暗氧化挨碳，員可作飽為自碼養(yǎng)型淺微生繁物的株碳源軋；Na該HC找O3，可易作為樓自養(yǎng)在型微斃生物笨的碳決源和逐無機旱鹽；禍而Na熔Cl則只畢能提樸供無股機鹽殺。對閣于D選項窩，無臭機氮園源提掙供能設量的傘情況辨還是尋存在蓄的，圓如NH3可為亮硝化鋸細菌察提供器能量果和氮摘源。答案唱：D例2．下狠面對聾發(fā)酵孤工程廚中滅難菌的過理解不正歡確的是:A.防止慣雜菌錢污染B.消滅綠雜菌C.培養(yǎng)購基和臘發(fā)酵球設備譯都必干須滅斗菌D.滅菌俱必須肺在接遮種前答案饒：B解析毒：滅菌恩是微盆生物刮發(fā)酵停過程奸的一蓬個重邀要環(huán)戲節(jié)。A說的狀是滅城菌的扎目的恥，因時為發(fā)乖酵所繡用的丟菌種斗大多肅是單滾一的次純種事，整販個發(fā)叉酵過病程不狀能混湖入其餓他微筒生物汪（雜眨菌）膨，所猴以是名正確仇的；B是錯日誤的想，因犧為滅夜菌的鏈目的局是防敬止雜咱菌污歪染，筋但實朱際操驚作中脈不可腐能只統(tǒng)消滅漏雜菌扒，而瓜是消亮滅全貫部微翼生物擁。C是正椅確的嶄，因鋒為與容發(fā)酵發(fā)有關毅的所灰有設露備和法物質嘩都要嬸滅菌懇；發(fā)皮酵所籃用的倚微生跡物是急滅菌盛后專傅門接證種的閥，滅給菌必戴須在痕接種否前，鋪如果筑接種芹后再恰滅菌架就會嫂把所添接菌遇種也善殺死婆。編號成分含量①粉狀硫10g②（NH4）2SO40.4g③K2HPO44.0g④MgSO49.25g⑤FeSO40.5g⑥CaCl20.5g⑦H2O100ml例3．右叛表是跟某微伙生物臥培養(yǎng)翠基成竹分，充請據帶此回慶答：（1）右泡表培須養(yǎng)基易可培藝養(yǎng)的華微生固物類溜型是（2）若莫不慎坡將過堪量Na點Cl加入鋤培養(yǎng)怪基中禁。如不命想浪謙費此徹培養(yǎng)田基，道可再臭加入.用于播培養(yǎng)稠金黃斤色葡峰萄球壯菌.自養(yǎng)弟型微抬生物含碳胞有機鄙物（3）若驅除去者成分曾②，桑加入顫（CH2O），退該培距養(yǎng)基訓可用略于培置養(yǎng)。（4）表陶中營哄養(yǎng)成釣分共榴有類。（5）不嚇論何鞠種培影養(yǎng)基粗，在貢各種艙成分疤都溶陣化后榮分裝伍前，齡要進浸行的貍是。（6）右個表中瘡各成弓分重醫(yī)量確倚定的弱原則紀是。（7）若監(jiān)右表抄培養(yǎng)貞基用貌于菌叨種鑒罩定，蒜應該兼增加丑的成器分是。固氮徑微生研