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關(guān)于高中生物選修人教版動(dòng)物細(xì)胞工程第1頁,講稿共37頁,2023年5月2日,星期三動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞融合單克隆抗體技術(shù)核移植動(dòng)物細(xì)胞工程常用技術(shù)胚胎移植技術(shù)第2頁,講稿共37頁,2023年5月2日,星期三動(dòng)物組織細(xì)胞間隙中含有一定量的蛋白質(zhì),將細(xì)胞網(wǎng)絡(luò)起來形成具有一定彈性和韌性的組織和器官。傳代培養(yǎng)動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的組織、器官細(xì)胞懸浮液胰蛋白酶(分解彈性纖維)10代細(xì)胞原代培養(yǎng)50代細(xì)胞細(xì)胞株無限傳代細(xì)胞系遺傳物質(zhì)未改變遺傳物質(zhì)改變一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)討論:細(xì)胞株與細(xì)胞系的特點(diǎn)有何不同?第3頁,講稿共37頁,2023年5月2日,星期三1、動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)過程
幼齡動(dòng)物取動(dòng)物器官和組織剪碎組織胰蛋白酶處理細(xì)胞培養(yǎng)單個(gè)細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是其他動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)(1)請(qǐng)據(jù)圖簡(jiǎn)述動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)過程(2)思考:動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)有哪些方面的應(yīng)用?第4頁,講稿共37頁,2023年5月2日,星期三2、有關(guān)概念原代培養(yǎng):從機(jī)體取出后立即培養(yǎng)的細(xì)胞為原代細(xì)胞。培養(yǎng)的第1代細(xì)胞與傳10代以內(nèi)的細(xì)胞稱為原代細(xì)胞培養(yǎng)。傳代培養(yǎng):將原代細(xì)胞從培養(yǎng)瓶中取出,配制成細(xì)胞懸浮液,分裝到兩個(gè)或兩個(gè)以上的培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng),稱為傳代培養(yǎng)。第5頁,講稿共37頁,2023年5月2日,星期三2、有關(guān)概念
細(xì)胞株:原代細(xì)胞一般傳至10代左右細(xì)胞生長(zhǎng)停滯,大部分細(xì)胞衰老死亡,少數(shù)細(xì)胞存活到40~50代,這種傳代細(xì)胞為細(xì)胞株。
細(xì)胞系:細(xì)胞株傳代至50代后又出現(xiàn)細(xì)胞生長(zhǎng)停滯狀態(tài),只有部分細(xì)胞由于遺傳物質(zhì)的改變,使其在培養(yǎng)條件下可以無限制傳代,這種傳代細(xì)胞為細(xì)胞系。
細(xì)胞株和細(xì)胞系的區(qū)別:細(xì)胞系的遺傳物質(zhì)改變,具有癌細(xì)胞的特點(diǎn),失去接觸抑制,容易傳代培養(yǎng)。第6頁,講稿共37頁,2023年5月2日,星期三3、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件(1)無菌無毒的環(huán)境(2)營(yíng)養(yǎng)(3)溫度和pH(4)氣體環(huán)境
比較:植物的組織培養(yǎng)的條件第7頁,講稿共37頁,2023年5月2日,星期三4.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的應(yīng)用(1)大規(guī)模生產(chǎn)有重要價(jià)值的蛋白質(zhì)生物制品。(2)解決為大面積燒傷病人移植皮膚問題。(利用貼壁生長(zhǎng)和接觸抑制原理)(3)檢測(cè)有關(guān)物質(zhì)毒性。(4)培養(yǎng)正?;虿∽兗?xì)胞,用于科研。如病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體第8頁,講稿共37頁,2023年5月2日,星期三植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的比較比較項(xiàng)目植物組織培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)原理細(xì)胞的全能性細(xì)胞增殖培養(yǎng)基性質(zhì)固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基培養(yǎng)基特有成分蔗糖植物激素葡萄糖動(dòng)物血清培養(yǎng)結(jié)果植物體細(xì)胞株、細(xì)胞系培養(yǎng)目的快速繁殖、培育無病毒植株獲得細(xì)胞或細(xì)胞分泌蛋白第9頁,講稿共37頁,2023年5月2日,星期三思考:2、為什么選用動(dòng)物胚胎或幼齡個(gè)體的器官或組織做動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)材料?1、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液的主要成分是什么?較植物組培培養(yǎng)基有何獨(dú)特之處?3、為什么培養(yǎng)前要將組織細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞?4、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)能否像綠色植物組織培養(yǎng)那樣最終培養(yǎng)成新個(gè)體?主要成分:葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素和動(dòng)物血清等。獨(dú)特之處有:1、液體培養(yǎng)基2、成分中有動(dòng)物血清等因?yàn)檫@些組織或器官上的細(xì)胞生命力旺盛,分裂能力強(qiáng)成塊組織不利培養(yǎng),分散了做成細(xì)胞懸浮液利于培養(yǎng)不能,動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)只能使細(xì)胞數(shù)目增多,不能發(fā)育成新的動(dòng)物個(gè)體第10頁,講稿共37頁,2023年5月2日,星期三多莉羊的培育過程1、誰是“多莉”的母親?2、“多莉羊”是雄還是雌?3、是否符合孟德爾遺傳?問題卵細(xì)胞C母綿羊子宮A母綿羊B母綿羊乳腺細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)細(xì)胞核細(xì)胞核移植胚胎移植早期胚胎多莉羊分娩卵裂融合后的卵細(xì)胞細(xì)胞拆合技術(shù)妊娠第11頁,講稿共37頁,2023年5月2日,星期三第12頁,講稿共37頁,2023年5月2日,星期三第13頁,講稿共37頁,2023年5月2日,星期三動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體第14頁,講稿共37頁,2023年5月2日,星期三細(xì)胞A細(xì)胞B雜種細(xì)胞滅活的病毒物理法化學(xué)法仙臺(tái)病毒皰疹病毒新城雞瘟病毒
一、動(dòng)物細(xì)胞融合
2、過程:1、概念:“2個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞”→“1”、“雜交單核細(xì)胞”第15頁,講稿共37頁,2023年5月2日,星期三用滅活的病毒誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合過程細(xì)胞核病毒顆粒細(xì)胞核思考討論:為什么細(xì)胞融合過程中使用的病毒需要滅活?第16頁,講稿共37頁,2023年5月2日,星期三二、單克隆抗體1、什么是抗體?其本質(zhì)是什么?
2、傳統(tǒng)的抗體生產(chǎn)方法及缺陷是什么?抗體是從何來的?B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗體。3、B淋巴細(xì)胞有什么特點(diǎn)?抗體是機(jī)體受抗原刺激后產(chǎn)生的、并能與該抗原發(fā)生特異性結(jié)合的具有免疫功能的球蛋白。第17頁,講稿共37頁,2023年5月2日,星期三B淋巴細(xì)胞與抗體1.B淋巴細(xì)胞受抗原刺激后,可以產(chǎn)生抗體。2.動(dòng)物體內(nèi)的B淋巴細(xì)胞可以產(chǎn)生百萬種以上的抗體,每種抗體對(duì)特定的抗原具有特異性免疫作用。3.每一個(gè)淋巴細(xì)胞只能產(chǎn)生一種抗體。第18頁,講稿共37頁,2023年5月2日,星期三單克隆抗體
由單個(gè)B淋巴細(xì)胞經(jīng)過無性繁殖(克?。?,形成基因型相同的細(xì)胞群,這一細(xì)胞群所產(chǎn)生的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體稱為單克隆抗體。
特點(diǎn):
特異性強(qiáng)、靈敏度高
第19頁,講稿共37頁,2023年5月2日,星期三如何大量生產(chǎn)單克隆抗體?利用淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗體的功能利用腫瘤細(xì)胞無限增殖的特性利用細(xì)胞融合的技術(shù)將兩種細(xì)胞融合獲得具有淋巴細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞特性的雜交瘤細(xì)胞利用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)大量培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞第20頁,講稿共37頁,2023年5月2日,星期三
單克隆抗體制備過程
注射抗原B淋巴細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞細(xì)胞融合、篩選雜交瘤細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)篩選,繼續(xù)培養(yǎng)足夠數(shù)量的、能產(chǎn)生特定抗體的細(xì)胞群體外培養(yǎng)注射到小鼠腹腔單克隆抗體第21頁,講稿共37頁,2023年5月2日,星期三思考:1、本過程利用了哪些原理?免疫原理,細(xì)胞融合原理和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)原理2、為什么選用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與B細(xì)胞融合?這樣融合成的雜交瘤細(xì)胞,繼承了雙親細(xì)胞的遺傳物質(zhì),不僅具有B細(xì)胞分泌抗體的能力,而且還有無限增殖的本領(lǐng),因而可以獲得大量單克隆抗體第22頁,講稿共37頁,2023年5月2日,星期三(1)為什么選用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合?(小鼠骨髓瘤細(xì)胞可以在體外培養(yǎng)條件下大量增殖,B淋巴細(xì)胞能夠產(chǎn)生抗體,細(xì)胞的同源性越近,融合形成的雜種細(xì)胞越易成活。)(2)骨髓瘤細(xì)胞是癌細(xì)胞嗎?(有無限增殖能力(失去凋亡機(jī)制,失去接觸抑制等)的細(xì)胞是腫瘤細(xì)胞,而具有轉(zhuǎn)移能力的腫瘤細(xì)胞,稱為癌細(xì)胞,所以說,瘤細(xì)胞不能等于癌細(xì)胞。)第23頁,講稿共37頁,2023年5月2日,星期三(3)整個(gè)制備過程為何要經(jīng)過兩次篩選?(第一次篩選得到雜交瘤細(xì)胞(多種),第二次需先在多孔培養(yǎng)板上,在每孔只有一個(gè)雜交瘤細(xì)胞的情況下開始培養(yǎng),然后再篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群。由于該細(xì)胞群是單個(gè)雜交瘤細(xì)胞克隆得來的,所以產(chǎn)生的抗體必然是化學(xué)性質(zhì)單一的,特異性強(qiáng)的單克隆抗體。這里的單克隆確有單個(gè)細(xì)胞克隆的含義,只不過克隆的不是B淋巴細(xì)胞,而是雜交瘤細(xì)胞。)第24頁,講稿共37頁,2023年5月2日,星期三單克隆抗體的應(yīng)用與常規(guī)抗體相比,單克隆抗體產(chǎn)量高,特異性強(qiáng),靈敏度高,優(yōu)越性十分明顯。應(yīng)用主要有:1、臨床診斷2、作為載體,運(yùn)載抗癌藥物,形成“生物導(dǎo)彈”治療腫瘤資料:目前世界各國(guó)已經(jīng)研制出數(shù)以百計(jì)的單克隆抗體。許多缺乏良好診斷手段的傳染病、免疫性疾病、血液病、內(nèi)分泌疾病和遺傳病,用單克隆抗體作為診斷手段,是一個(gè)必然趨勢(shì)。另外,用單克隆抗體做體內(nèi)診斷,借以鑒別和定位體內(nèi)“病灶”也引起人們的注意,目前,主要用于腫瘤追蹤及心肌梗塞的診斷。生物導(dǎo)彈:?jiǎn)慰寺】贵w作為載體分子,同抗癌藥物相結(jié)合,將他們運(yùn)載到腫瘤部位,殺死癌細(xì)胞,這種抗體——藥物結(jié)合物稱之為生物導(dǎo)彈。它能定向殺滅癌細(xì)胞,避免或減少對(duì)正常細(xì)胞的傷害,大大減輕了抗癌藥物的副作用。第25頁,講稿共37頁,2023年5月2日,星期三第26頁,講稿共37頁,2023年5月2日,星期三第27頁,講稿共37頁,2023年5月2日,星期三第28頁,講稿共37頁,2023年5月2日,星期三第29頁,講稿共37頁,2023年5月2日,星期三1.動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)是:()
A.動(dòng)物細(xì)胞融合
B.胚胎移植
C.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)
D.核移植教學(xué)目標(biāo)鞏固C第30頁,講稿共37頁,2023年5月2日,星期三2.在動(dòng)物細(xì)胞融合和植物體細(xì)胞雜交的比較中,正確的是()A.結(jié)果是相同的
B.雜種細(xì)胞的形成過程基本相同C.操作過程中酶的作用相同D.誘導(dǎo)融合的手段相同教學(xué)目標(biāo)鞏固B第31頁,講稿共37頁,2023年5月2日,星期三3.單克隆抗體制備過程中,骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)融合后,要用特定培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞,在這種培養(yǎng)基上不能存活增殖的細(xì)胞是()①淋巴細(xì)胞②小鼠骨髓瘤細(xì)胞③B淋巴細(xì)胞自身融合細(xì)胞④小鼠骨髓瘤細(xì)胞自身融合細(xì)胞⑤雜交瘤細(xì)胞A.②④B.①③⑤C.①②③④D.②③C教學(xué)目標(biāo)鞏固第32頁,講稿共37頁,2023年5月2日,星期三第33頁,講
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