BS-400生化操作培訓(xùn)

生化分析儀根底知識(shí)介紹生化分析儀檢驗(yàn)結(jié)果判斷紫外-可見分光光度法入射光強(qiáng)度出射光強(qiáng)度吸光度，也稱光密度OD消光系數(shù)吸光物質(zhì)的濃度光徑，即光線通過的液體厚度Lambert-Beer定律：A=lg〔I0/I〕；A=kcL透射比濁法I=I0e-rbIn〔I0/I〕=rb入射光強(qiáng)度出射光強(qiáng)度吸光物質(zhì)的濁度光徑，即光線通過的液體厚度公式與L-B定律類似，故比色法的操作程序、校準(zhǔn)曲線、計(jì)算公式以及儀器等均是適合于比濁法丁鐸爾現(xiàn)象：在一定條件下，透射光的強(qiáng)度和懸濁液中顆粒的數(shù)量呈比例關(guān)系：標(biāo)準(zhǔn)品濃度×待測(cè)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品ALambert-Beer定律及丁鐸爾現(xiàn)象的意義：同一物質(zhì)在光徑相同的情況下，濃度與吸光度成正比，因此：

待測(cè)物質(zhì)濃度c=示例血清葡萄糖檢測(cè)原理1、葡萄糖+H2OH2O2+葡糖酸葡萄糖氧化酶2、H2O2+4-氨基安替比林〔無色〕+酚

H2O+醌亞胺〔紅色〕過氧化物酶無色紅色37℃加入物（mL）空白管標(biāo)準(zhǔn)管（濃度5.55mmol/L）待測(cè)管標(biāo)準(zhǔn)液——0.020——樣本————0.020試劑3.003.003.00測(cè)定步驟1.測(cè)定參數(shù)：波長：505nm；光徑：10mm；溫度：37℃。2.測(cè)定方法：混勻后于37℃保溫15分鐘,以空白管調(diào)零,測(cè)定各管吸光度值血糖含量=×標(biāo)準(zhǔn)液濃度A樣A標(biāo)計(jì)算方法全自動(dòng)生化分析儀的定標(biāo)定標(biāo)方法：線性定標(biāo)：濃度與吸光度成線性〔正比〕非線性定標(biāo)：濃度與吸光度呈非線性關(guān)系線性校準(zhǔn)兩點(diǎn)線性××非線性校準(zhǔn)SPLINE非線性校準(zhǔn)全自動(dòng)生化儀參數(shù)設(shè)置主要參數(shù)：試劑量、樣本量、測(cè)試方法、波長、反響時(shí)間、反響方向、線性范圍、試劑位置、參考范圍等單試劑終點(diǎn)法參數(shù)例如樣本用量稀釋比稀釋樣本用量試劑用量單試劑終點(diǎn)法固定10至12點(diǎn)平均值為空白值〔13點(diǎn)加R1試劑；9秒鐘1點(diǎn)〕77點(diǎn)至79點(diǎn)平均值為反響終點(diǎn)補(bǔ)償系數(shù)用于工程整體補(bǔ)償計(jì)算R1試劑空白判斷

反響時(shí)間內(nèi)反響沒有發(fā)生底物耗盡時(shí)所能到達(dá)的最小或最大吸光度值動(dòng)力學(xué)法判斷各點(diǎn)吸光度變化率是否超限，用于線性拓展｛自動(dòng)稀釋功能兩個(gè)吸光度之差△A：4797.99-405.72=4392.27△A生化分析儀的測(cè)試方法—單試劑終點(diǎn)法｛｛平均值平均值BS-400固定為第13點(diǎn)加樣本生化分析儀的測(cè)試方法—單試劑終點(diǎn)法雙試劑終點(diǎn)法參數(shù)例如雙試劑終點(diǎn)法固定40至42點(diǎn)平均值為空白值〔43點(diǎn)加R2試劑〕生化分析儀的測(cè)試方法—雙試劑終點(diǎn)法兩個(gè)吸光度之差△A：646.64-232.91=-413.73｛｛｛｛BS-400固定為第43點(diǎn)加第二試劑生化分析儀的測(cè)試方法—雙試劑終點(diǎn)法固定時(shí)間法參數(shù)例如此時(shí)代表第59點(diǎn)與47點(diǎn)吸光度差值生化分析儀的測(cè)試方法—固定時(shí)間法兩個(gè)吸光度之差△A：13460.3711-11728.4736=968.05生化分析儀的測(cè)試方法—固定時(shí)間法速率法參數(shù)例如連續(xù)監(jiān)測(cè)50點(diǎn)至69點(diǎn)的吸光度變化率速率法參數(shù)例如從50點(diǎn)至69點(diǎn)之間吸光度變化率A速率法參數(shù)例如酶活性結(jié)果計(jì)算：吸光度變化率×計(jì)算因子生化分析儀結(jié)果判斷室內(nèi)質(zhì)量控制

樣本狀態(tài)判斷

報(bào)告單結(jié)果審核

室內(nèi)質(zhì)控的目的檢測(cè)、控制本室測(cè)定工作的精密度；檢測(cè)其準(zhǔn)確度的改變；提高日間常規(guī)測(cè)定工作的批間、批內(nèi)標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果的一致性。目標(biāo)：保證每個(gè)患者樣本的測(cè)定結(jié)果的可靠性。正確使用質(zhì)控品嚴(yán)格按說明書操作；凍干品復(fù)溶時(shí)要確保溶劑的質(zhì)量；凍干品復(fù)溶時(shí)所加溶劑的量要準(zhǔn)確，并盡量保持每次參加量的一致性；凍干品復(fù)溶時(shí)應(yīng)輕輕搖勻，使內(nèi)容物完全溶解，切忌劇烈振搖。應(yīng)嚴(yán)格按照說明書規(guī)定的方法保存，不使用過期的質(zhì)控物。質(zhì)控品要與患者標(biāo)本測(cè)試條件相同。使用質(zhì)控品進(jìn)行質(zhì)控的局限性質(zhì)控品本錢價(jià)格昂貴。質(zhì)控品存在不穩(wěn)定性。質(zhì)控品的基質(zhì)效應(yīng)。只能監(jiān)測(cè)分析階段，無法檢測(cè)分析前。質(zhì)控品的靶值僅為參考值，各實(shí)驗(yàn)室需建立自己的靶值

質(zhì)控圖的理論依據(jù)

正態(tài)分布連續(xù)測(cè)定同一批號(hào)質(zhì)控品20天以上。同時(shí)測(cè)試高、低兩個(gè)水平值計(jì)算均值及標(biāo)準(zhǔn)差，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品及樣本結(jié)果調(diào)整質(zhì)控品的靶值。確定質(zhì)控上限及下限。以時(shí)間為X軸，以質(zhì)控品的測(cè)定值為Y軸。根據(jù)質(zhì)控規(guī)那么判斷是否在控校準(zhǔn)品〔Calibrationmaterials〕含有量的欲測(cè)物，用以校準(zhǔn)該測(cè)定方法的數(shù)值，它與該方法及試劑、儀器是相關(guān)聯(lián)的。校準(zhǔn)品的作用是為了消除儀器、試劑等造成的系統(tǒng)誤差。因此最好為人血清基質(zhì)，以減少基質(zhì)效應(yīng)造成的誤差。質(zhì)控品〔Controlmaterials〕只用于和待測(cè)標(biāo)本同時(shí)測(cè)定的，為了控制標(biāo)本的測(cè)定誤差，因此要求是保存時(shí)間長，結(jié)果穩(wěn)定。校準(zhǔn)品與質(zhì)控品的區(qū)別決不能用定值質(zhì)控血清代替校準(zhǔn)品作校準(zhǔn)用

假設(shè)單一水平質(zhì)控失控，一般為質(zhì)控品變質(zhì)假設(shè)兩個(gè)水平質(zhì)控均失控，重配質(zhì)控品并復(fù)查確認(rèn)更換試劑，重新測(cè)定，并查驗(yàn)反響曲線是否平穩(wěn)使用校準(zhǔn)品重新定標(biāo)〔必要時(shí)使用新配校準(zhǔn)品〕分析儀器本身因素，如參數(shù)、光源、比色杯、水質(zhì)等失控時(shí)原因分析樣本狀態(tài)分析輕度溶血：ALT↑、AST↑、LDH↑、K+↑、HBDH↑、P↑嚴(yán)重溶血：除上述各工程外，多個(gè)工程如TP、ALB、UR、Cr、TC等均會(huì)有不同程度增高，TB、DB等結(jié)果偏低，應(yīng)重新采血脂濁和黃疸主要影響本底顏色而干擾結(jié)果，