標(biāo)本溶血對(duì)生化檢驗(yàn)結(jié)果的影響

標(biāo)本溶血對(duì)生化檢驗(yàn)結(jié)果的影響第1頁(yè)，課件共22頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月（一）什么是溶血

溶血是紅細(xì)胞破壞,紅細(xì)胞的一些組分釋放進(jìn)入血清或血漿，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)樣品出現(xiàn)特有的紅色增加。很多因素都可以使紅細(xì)胞破壞，發(fā)生溶血，從而干擾監(jiān)測(cè)，使檢驗(yàn)結(jié)果失去真實(shí)性和準(zhǔn)確性，影響疾病的診斷和治療。

第2頁(yè)，課件共22頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月2014年生化室拒收標(biāo)本統(tǒng)計(jì)分析

類型

季度

溶血標(biāo)本量少其他第一季度1931第二季度2048第三季度2514第四季度5410第3頁(yè)，課件共22頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月從表格中可以看出，2014年度共有104個(gè)拒收標(biāo)本，而溶血標(biāo)本占拒收標(biāo)本的66.3％，因此溶血是臨床生化檢驗(yàn)中最常見(jiàn)的一種干擾和影響因素。

溶血后顯著增高的有AST、ALT、LDH、K+、TBIL、TP、ALB等；溶血后顯著降低的項(xiàng)目有GLU、CR等。第4頁(yè)，課件共22頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

一溶血對(duì)肝功能測(cè)定的影響

1.谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）

溶血造成AST升高可能是由以下兩個(gè)方面的原因引起(1)人類紅細(xì)胞中AST活性約為血清中的40倍，當(dāng)標(biāo)本溶血時(shí)紅細(xì)胞破裂后釋放AST，勢(shì)必引起血清AST活性的升高從而使溶血標(biāo)本的結(jié)果明顯高于未溶血標(biāo)本。

(2)溶血后血清顏色加深，致使測(cè)得的吸光度值增高。第5頁(yè)，課件共22頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月3、

乳酸脫氫酶（LDH）

紅細(xì)胞和血小板中含有豐富的LDH，紅細(xì)胞中LDH的含量是血清的160～200倍，故受溶血影響最大。在測(cè)定環(huán)節(jié)上都有可能發(fā)生不同程度的血小板破壞，而影響LDH測(cè)定，使其測(cè)定結(jié)果偏高。第6頁(yè)，課件共22頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月4、GGT（谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶）由于紅細(xì)胞內(nèi)GGT含量很低，輕微溶血對(duì)其測(cè)定結(jié)果影響不大，但重度溶血?jiǎng)t有影響第7頁(yè)，課件共22頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月5

、

總蛋白（TP）

總蛋白的測(cè)定通常選用雙縮脲法，主波長(zhǎng)540nm,而血紅蛋白在555nm有吸收峰，試驗(yàn)表明如果溶血標(biāo)本中［Hb］≤0.5g／L時(shí)無(wú)干擾；而高［Hb］時(shí)，會(huì)使結(jié)果偏高，可以做樣品空白來(lái)消除影響。第8頁(yè)，課件共22頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月6.總膽紅素（TBIL）

重氮法測(cè)定總膽紅素，最后生成紅紫色的偶氮膽紅素，主要在波長(zhǎng)為540nm～560nm處有光吸收。而血紅蛋白在波長(zhǎng)540nm～550nm處有光吸收，恰與偶氮膽紅素的比色波長(zhǎng)相近。因此溶血后細(xì)胞破裂時(shí)大量血紅蛋白進(jìn)入血清，勢(shì)必造成總膽紅素測(cè)定值的升高，是總膽紅素測(cè)定的正向干擾因素。此外，由于血紅蛋白重氮試劑反應(yīng)形成的產(chǎn)物可破壞偶氮膽紅素，溶血對(duì)重氮法測(cè)定膽紅素同時(shí)存在負(fù)向干擾，使測(cè)定結(jié)果偏低，但該作用較輕微，因此溶血后由于血紅蛋白對(duì)測(cè)定結(jié)果的干擾，膽紅素的測(cè)定結(jié)果往往偏高。

第9頁(yè)，課件共22頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月2、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）紅細(xì)胞中ALT活性約是血清中7～15倍。嚴(yán)重溶血（Hb約6.5g/L）時(shí)，可使血清ALT由20u/L增高到26.5u/L（增加約27%）。因此溶血后ALT含量測(cè)定的增高主要來(lái)源于細(xì)胞內(nèi)ALT的大量釋放?？梢?jiàn)與AST相比，ALT受溶血影響輕些.第10頁(yè)，課件共22頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月二溶血對(duì)血脂測(cè)定的影響

1、

總膽固醇（TC）

試驗(yàn)表明如果溶血標(biāo)本中［Hb］≤1.5g／L無(wú)干擾；而高濃度時(shí)因Hb的固有顏色干擾，會(huì)使結(jié)果偏高。第11頁(yè)，課件共22頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月2、甘油三酯（TG）除去上述如總膽固醇影響因素外，目前所用甘油磷酸氧化酶—過(guò)氧化物酶法和乙酰丙醇顯色法都以測(cè)量甘油為基礎(chǔ)，而紅細(xì)胞膜磷脂可被磷脂酶作用，產(chǎn)生游離甘油，所以溶血后測(cè)定結(jié)果偏高第12頁(yè)，課件共22頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月3、

載脂蛋白A(APOA)載脂蛋白B（APOB）免疫透射比濁法使用最廣泛，以抗原抗體為基礎(chǔ)，血紅蛋白可使測(cè)定結(jié)果升高，故標(biāo)本溶血后測(cè)定結(jié)果偏高。第13頁(yè)，課件共22頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月三、溶血對(duì)腎功能測(cè)定的影響1、尿素（UREA)

無(wú)論是二乙?！胤ㄟ€是脲酶法，溶血均可導(dǎo)致光譜藍(lán)色部分吸光度值升高對(duì)結(jié)果都有干擾，導(dǎo)致結(jié)果偏高第14頁(yè)，課件共22頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月2、

尿酸(UA)

試驗(yàn)表明如果溶血標(biāo)本中［Hb］>1g／L會(huì)干擾；是因?yàn)闇y(cè)定波長(zhǎng)546mm時(shí)因Hb固有顏色潛在影響使測(cè)定結(jié)果偏高(比色法)。

第15頁(yè)，課件共22頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

3、

肌酐（Cre）

苦味酸法測(cè)定Cre的特異性較差，易受其它還原性物質(zhì)影響，主要是維生素C、酮體、丙酮酸等假肌酐干擾。假肌酐物質(zhì)亦可與苦味酸形成顏色反應(yīng)，導(dǎo)致測(cè)定值發(fā)生偏差。這種假肌酐物質(zhì)紅細(xì)胞中最多，血清中較少，故溶血后紅細(xì)胞中假肌酐物質(zhì)的釋放是造成測(cè)定值發(fā)生偏差的主要原因。溶血釋放出的物質(zhì)導(dǎo)致Jaffe反應(yīng)而致測(cè)定結(jié)果的升高。Jaffe反應(yīng)指血漿中的肌酐與堿性苦味酸鹽反應(yīng)，生成黃紅色的苦味酸肌酐復(fù)合物的反應(yīng)。

第16頁(yè)，課件共22頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月四、溶血對(duì)電解質(zhì)測(cè)定的影響1、鉀（K+

）是細(xì)胞內(nèi)液的主要陽(yáng)離子，約98％的鉀存于細(xì)胞內(nèi)，紅細(xì)胞內(nèi)鉀濃度約為105mmol/L，而血清中僅有3.5

mmol/L～5.4

mmol/L，紅細(xì)胞中鉀的含量比血清中高23

倍。因此溶血造成血清鉀明顯升高，增高主要來(lái)源于紅細(xì)胞內(nèi)鉀的大量釋放，有報(bào)道表明血清游離血紅蛋白在

2.5～2.8g

/

L時(shí)血清鉀增高14%～16%，血清游離血紅蛋白達(dá)6.6g

/

L時(shí)血清鉀增高可達(dá)41%，所以應(yīng)在樣品采集后1h內(nèi)應(yīng)將紅細(xì)胞與血清分離。并且在分析血清鉀的結(jié)果時(shí)應(yīng)引起高度注意。

第17頁(yè)，課件共22頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月2、氯（CL-）血漿中氯約為103mmol/L，紅細(xì)胞中氯約為49~54mmol/L。溶血會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)的氯離子轉(zhuǎn)移到血清中，從而引起了血清氯離子測(cè)定值的升高第18頁(yè)，課件共22頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月3

、磷（P

）試驗(yàn)表明如果溶血標(biāo)本中［Hb］≤1g/L影響很小，而在［Hb］2.8g／L時(shí)影響較大，所以應(yīng)在采血后30min內(nèi)分離血球，否則會(huì)因磷酸酯從RBC中釋放而會(huì)使結(jié)果偏高。第19頁(yè)，課件共22頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月五、溶血對(duì)葡萄糖測(cè)定的影響葡萄糖(GLU)

葡萄糖氧化酶法測(cè)定GLU的特異性較強(qiáng)，干擾物較少，但過(guò)氧化氫酶易受到其它物質(zhì)的影響，如維生素C、谷胱苷肽均因能競(jìng)爭(zhēng)H2O2而導(dǎo)致負(fù)偏差，樣品中某些強(qiáng)的酶會(huì)促使葡萄糖降解而導(dǎo)致測(cè)定值明顯下降的。如果在血清或血漿加入NaF、KF作為酵解抑制劑樣品收集后立即去蛋白時(shí)，溶血樣品也可以用。第20頁(yè)，課件共22頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月六、溶血對(duì)心肌酶譜測(cè)定的影響由于LDH、HBDH在紅細(xì)胞內(nèi)的含量皆明顯高于胞外，故溶血后結(jié)果都升高，雖然紅細(xì)胞中不含CK，但含有大量的腺苷酸激酶(AK)，可干擾測(cè)定CK的偶聯(lián)法的反應(yīng)體系，人為地引起CK結(jié)果的升高。第21頁(yè)，課件共22頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月（二）標(biāo)本溶血的原因①環(huán)境溫