第十三章弧菌與厭氧菌屬

第十三章弧菌與厭氧菌屬第1頁(yè)，課件共73頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

短小，彎曲成弧形，G-菌單鞭毛，氧化酶實(shí)驗(yàn)陽(yáng)性分布廣泛，水中最多與人類感染有關(guān)的主要為霍亂弧菌、副溶血性弧菌第2頁(yè)，課件共73頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月第3頁(yè)，課件共73頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月霍亂弧菌霍亂是由霍亂弧菌所致的烈性腸道傳染病,因其發(fā)病急，傳播快，是亞非大部分地區(qū)腹瀉的重要原因，故列為國(guó)際檢疫傳染病。在我國(guó)為甲類傳染病。典型病例起病急驟，以劇烈腹瀉、嘔吐、脫水、肌肉痙攣、循環(huán)衰竭伴嚴(yán)重電解質(zhì)紊亂與酸堿失衡，甚或急性腎功能衰竭等為臨床特征。一般以輕癥多見，帶菌者亦較多，重癥及典型患者其病死率極高。第4頁(yè)，課件共73頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月霍亂流行第5頁(yè)，課件共73頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月WHO分類：

WHO腹瀉控制中心根據(jù)弧菌的生化性狀、O抗原的特異性和致病性等的不同，將其分為三類：第6頁(yè)，課件共73頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月O1群霍亂弧菌：包括古典生物型和埃爾托生物型,1817-1923年發(fā)生6次世界性霍亂大流行,自1961年出現(xiàn)第七次世界大流行以后，埃爾托生物型成為霍亂的主要致病菌。不典型O1群霍亂弧菌：無致病性，雖可被多價(jià)O1群血清凝集，但不產(chǎn)生腸毒素。非O1群霍亂弧菌：其O抗原與O1群不相同，不能被O1群霍亂弧菌的多價(jià)血清所凝集，故統(tǒng)稱為不凝集弧菌。第7頁(yè)，課件共73頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

1992年在印度和孟加拉等地區(qū)發(fā)生霍亂大流行，證實(shí)為一種新的非O1群霍亂弧菌血清型，后被命名為O139群霍亂弧菌。并可能標(biāo)志著第八次大流行的開始。第8頁(yè)，課件共73頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月（一）生物學(xué)特性

1、形態(tài)與染色

?

革蘭染色陰性

?弧形或逗點(diǎn)狀，有一根單鞭毛?

運(yùn)動(dòng)非?；顫?，呈魚群穿梭樣或流星狀?經(jīng)人工培養(yǎng)后，易失去弧形而呈桿狀第9頁(yè)，課件共73頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月第10頁(yè)，課件共73頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月鞭毛染色魚群狀排列第11頁(yè)，課件共73頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月2、培養(yǎng)特性與生化反應(yīng)

?

兼性厭氧，營(yíng)養(yǎng)要求不高?

耐堿不耐酸，pH8.4~9.2

?堿性平板：圓形、扁平、透明的大菌落?

可在無鹽環(huán)境中生長(zhǎng)（鑒別）第12頁(yè)，課件共73頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月第13頁(yè)，課件共73頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月生化反應(yīng)：分解甘露醇、葡萄糖、蔗糖、麥芽糖，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。遲緩發(fā)酵乳糖，不分解阿拉伯膠糖。觸酶、氧化酶試驗(yàn)均陽(yáng)性能產(chǎn)生靛基質(zhì)，亞硝酸鹽試驗(yàn)陽(yáng)性第14頁(yè)，課件共73頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月3、抗原結(jié)構(gòu)與分型

O-Ag:O1~O155血清群

AgO1、O139→霍亂

H-Ag:無特異性第15頁(yè)，課件共73頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月（二）致病性與免疫性1、致病物質(zhì)（1）霍亂腸毒素（CT）

·染色體上的基因編碼

·

熱不穩(wěn)定性多聚體蛋白

·最強(qiáng)烈致瀉毒素，腸毒素的典型代表第16頁(yè)，課件共73頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月A亞單位（毒性亞單位）

B亞單位（結(jié)合亞單位）cAMP↑，主動(dòng)分泌Na+、K+、HCO3-和水，導(dǎo)致嚴(yán)重的腹瀉和嘔吐與小腸黏膜上皮細(xì)胞神經(jīng)節(jié)苷脂受體結(jié)合，介導(dǎo)A亞單位進(jìn)入細(xì)胞第17頁(yè)，課件共73頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月（2）鞭毛、菌毛

?鞭毛：有助于細(xì)菌穿過腸粘膜表面粘液層而接近腸壁上皮細(xì)胞?

普通菌毛：是細(xì)菌定居于小腸所必須的黏附因子。第18頁(yè)，課件共73頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月2、所致疾病霍亂:烈性腸道傳染病，為我國(guó)的

甲類法定傳染病傳染源:病人、無癥狀感染者易感性：人是唯一易感者第19頁(yè)，課件共73頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月水源傳播途徑：主要是通過污染的水源或食物經(jīng)口攝入上吐下瀉第20頁(yè)，課件共73頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月霍亂弧菌（污染的水或食物）↓粘附小腸上皮細(xì)胞、繁殖↓腸毒素↓與細(xì)胞受體（GM1神經(jīng)節(jié)苷脂）結(jié)合↓腺苷環(huán)化酶活化↓主動(dòng)分泌Na+,K+,HCO3-和水入腸腔↓嚴(yán)重吐瀉→霍亂致霍亂機(jī)制第21頁(yè)，課件共73頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月臨床表現(xiàn):上吐下瀉

劇烈腹瀉和嘔吐（米泔水樣腹瀉物），大量水分和電解質(zhì)喪失，低容量性休克及心力不齊和腎衰竭（死亡率高達(dá)60%）

第22頁(yè)，課件共73頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月第23頁(yè)，課件共73頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月3、免疫性

O1群霍亂弧菌——

感染后機(jī)體可獲得牢固免力，再感染少見；保護(hù)性抗腸毒素抗體及抗菌抗體；腸道局部粘膜免疫是保護(hù)性免疫的基礎(chǔ)。第24頁(yè)，課件共73頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月（三）微生物學(xué)檢查

原則：霍亂是烈性傳染病，對(duì)首例病人的病原學(xué)診斷應(yīng)快速、準(zhǔn)確，并及時(shí)作出疫情報(bào)告。

第25頁(yè)，課件共73頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月病人糞便、肛拭，水樣（流行病學(xué)調(diào)查）標(biāo)本快速檢驗(yàn)堿性蛋白胨水增菌TCBS，玻片凝集分離培養(yǎng)G-弧菌，魚群狀排列懸滴法呈穿梭樣運(yùn)動(dòng)制動(dòng)實(shí)驗(yàn)第26頁(yè)，課件共73頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月（四）防治原則

控制傳染源：隔離病人，治療無癥狀攜帶者。切斷傳播途徑：改善社區(qū)環(huán)境，加強(qiáng)水源管理。提高易感者免疫力：疫苗預(yù)防接種。第27頁(yè)，課件共73頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月預(yù)防：疫苗

O1群死疫苗（im）：保護(hù)率低，血清抗體持續(xù)時(shí)間短Ｂ亞單位—O1群全菌滅活疫苗（口）基因工程-O1群減毒活疫苗（口）

O1與O139群二價(jià)疫苗（在研）效果評(píng)估第28頁(yè)，課件共73頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月治療：（一）隔離（二）補(bǔ)液（三）抗菌治療（四）對(duì)癥治療

1.糾正酸中毒

2.糾正低血鉀

3.糾正休克和心力衰竭

4.抗腸毒素治療第29頁(yè)，課件共73頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

☆復(fù)習(xí)思考題：1、試述霍亂腸毒素的致病機(jī)制。2、試述霍亂的特點(diǎn)和防治原則。第30頁(yè)，課件共73頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月第四節(jié)厭氧性細(xì)菌

第31頁(yè)，課件共73頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月【概述】

嚴(yán)格厭氧菌，G+菌芽胞比菌體粗，菌體膨大呈梭狀抵抗力強(qiáng)周鞭毛，無莢膜（除產(chǎn)氣莢膜梭菌外）致病菌產(chǎn)生外毒素致病，病情嚴(yán)重防治：類毒素與抗毒素（預(yù)防＞治療）第32頁(yè)，課件共73頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月常見的厭氧芽胞梭菌：破傷風(fēng)梭菌產(chǎn)氣莢膜梭菌(無鞭毛、有莢膜)

肉毒梭菌艱難梭菌

不同細(xì)菌的芽胞形態(tài)及其在菌體中位置互不相同，對(duì)菌種的鑒別有意義。第33頁(yè)，課件共73頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月一、破傷風(fēng)梭菌（一）生物學(xué)性狀1、形態(tài)與染色

G+菌，菌體細(xì)長(zhǎng)呈桿狀（芽胞菌→G-）周鞭毛，無莢膜芽胞正圓，位于菌體頂端，較菌體粗，使細(xì)菌呈鼓槌狀第34頁(yè)，課件共73頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月破傷風(fēng)梭菌芽胞第35頁(yè)，課件共73頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月2、培養(yǎng)特性與生化反應(yīng)

普通瓊脂平板：中心緊密、周邊稀疏、不整齊、鋸齒狀菌落血瓊脂平板/GAM——

爬行生長(zhǎng)，呈薄膜狀菌落皰肉培養(yǎng)基（厭氧培養(yǎng)基）——

液體混濁，腐敗臭味第36頁(yè)，課件共73頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

厭氧袋厭氧罐第37頁(yè)，課件共73頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月厭氧箱第38頁(yè)，課件共73頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月（二）致病性與免疫性1、致病條件：

傷口厭氧微環(huán)境深而狹窄的傷口組織缺血壞死、需氧菌混合感染第39頁(yè)，課件共73頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月2、致病物質(zhì)

破傷風(fēng)痙攣毒素神經(jīng)毒素（外毒素）毒性強(qiáng)：致死量＜1ug

化學(xué)成分為蛋白質(zhì)：不耐熱(65℃30min)第40頁(yè)，課件共73頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月3、致病機(jī)制痙攣毒素→

中樞神經(jīng)系統(tǒng)→阻止抑制性神經(jīng)介質(zhì)的釋放→使肌肉活動(dòng)的興奮和抑制失調(diào)→骨骼肌出現(xiàn)持續(xù)性緊張強(qiáng)直（屈肌、伸肌同時(shí)收縮）→強(qiáng)直性痙攣第41頁(yè)，課件共73頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月4、臨床表現(xiàn)1）潛伏期：平均7~14d

距離CNS越近，潛伏期越短，死亡率高2）發(fā)病早期：

前驅(qū)癥狀—發(fā)熱、頭疼、肌肉酸痛、流涎、出汗、激動(dòng)第42頁(yè)，課件共73頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月3）典型癥狀：

張口困難、牙關(guān)緊閉、苦笑面容全身肌肉強(qiáng)直性痙攣、角弓反張

CNS功能紊亂—心率不齊、血壓波動(dòng)呼吸困難、窒息死亡第43頁(yè)，課件共73頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月新生兒角弓反張苦笑面容第44頁(yè)，課件共73頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月5、免疫性

?

體液免疫——抗毒素發(fā)揮中和作用?

病后免疫力不牢固?

病愈患者仍需注射類毒素第45頁(yè)，課件共73頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月（三）微生物學(xué)檢查

直接鏡檢、分離培養(yǎng)→陽(yáng)性率低

臨床診斷：典型癥狀+病史第46頁(yè)，課件共73頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月（四）防治原則1、正確及時(shí)處理傷口，清創(chuàng)擴(kuò)創(chuàng)2、特異性預(yù)防以注射類毒素主動(dòng)免疫為主

6個(gè)月~6歲兒童：百白破三聯(lián)疫苗3、緊急預(yù)防：注射破傷風(fēng)抗毒素（TAT）4、治療：抗毒素+抗生素

TAT應(yīng)用要早期、足量且需皮試

人抗破傷風(fēng)免疫球蛋白——效優(yōu)不引起超敏反應(yīng)第47頁(yè)，課件共73頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月二、產(chǎn)氣莢膜梭菌

廣泛分布于自然界，人與動(dòng)物消化道可形成芽胞，存在于土壤中

A型產(chǎn)氣莢膜梭菌——?dú)庑詨木覊乃佬阅c炎食物中毒第48頁(yè)，課件共73頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月（一）生物學(xué)特性1、形態(tài)與染色

?

革蘭染色陽(yáng)性，G+桿菌

?

菌體粗大，兩端鈍圓，常呈鏈狀排列?

芽胞呈橢圓形，位于菌體中央或次極端直徑＜菌體橫徑?

有莢膜，無鞭毛第49頁(yè)，課件共73頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月第50頁(yè)，課件共73頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月2、培養(yǎng)特性與生化反應(yīng)?

專性厭氧?

血瓊脂平板：中等大小、光滑菌落

內(nèi)環(huán)—θ毒素→完全溶血雙層溶血

外環(huán)—α毒素→不完全溶血第51頁(yè)，課件共73頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月雙層溶血環(huán)第52頁(yè)，課件共73頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

?

皰肉培養(yǎng)基：生長(zhǎng)迅速肉渣粉紅色、肉湯混濁、大量氣體?

卵黃瓊脂平板：乳白色混濁圈

Naglar反應(yīng)—加入抗α毒素抗血清，則無混濁第53頁(yè)，課件共73頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月卵黃瓊脂平板上，菌落周圍出現(xiàn)乳白色渾濁圈第54頁(yè)，課件共73頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月生化反應(yīng)：代謝活躍，分解多種糖類，產(chǎn)酸產(chǎn)氣。牛乳培養(yǎng)基——“洶涌發(fā)酵”

分解乳糖→酪蛋白凝固，大量氣體液化明膠，硫化氫（+），卵磷脂酶（+）第55頁(yè)，課件共73頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月第56頁(yè)，課件共73頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月（二）致病性與免疫性1、致病物質(zhì)——外毒素

卵磷脂酶、膠原酶、透明質(zhì)酸酶、DNA酶

β毒素、腸毒素

第57頁(yè)，課件共73頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月2、所致疾病

1）氣性壞疽（多見于戰(zhàn)傷）

致病條件：傷口厭氧微環(huán)境伴有混合感染致病物質(zhì)：毒性酶、毒素第58頁(yè)，課件共73頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月氣性壞疽第59頁(yè)，課件共73頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

臨床特征：

遠(yuǎn)端肢體壞死，有惡臭神經(jīng)末梢因刺激而劇烈疼痛嚴(yán)重病例——組織腫脹、水氣夾雜觸摸有捻發(fā)感毒素入血致毒血癥潛伏期短——8~48h第60頁(yè)，課件共73頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月2）食物中毒致病物質(zhì)：A型菌——腸毒素臨床癥狀：細(xì)菌性食物中毒癥腹痛、惡心、吐瀉病程：1~2d自愈第61頁(yè)，課件共73頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月3）壞死性腸炎：致病物質(zhì)：C型菌——β腸毒素臨床癥狀：腹痛、腹瀉、血便并發(fā)腹膜炎，循環(huán)衰竭▲注意與菌痢、出血性腸炎鑒別！第62頁(yè)，課件共73頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月（三）微生物學(xué)檢查1、直接涂片鏡檢：

極有價(jià)值的快速診斷法

——G+菌，粗大桿菌，WBC少第63頁(yè)，課件共73頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月2、分離培養(yǎng)壞死組織↓

懸液↓血瓊脂/皰肉培養(yǎng)基↓鏡檢+生化鑒定第64頁(yè)，課件共73頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月（四）防治原則

預(yù)防：

及時(shí)清創(chuàng)擴(kuò)創(chuàng)，H2O2

沖洗、濕敷嚴(yán)格隔離病人，防止芽胞形成器械、敷料、物品徹底滅菌

治療：

手術(shù)切除壞死組織+大量青霉素早期可用多價(jià)抗毒素血清高壓氧艙法

第65頁(yè)，課件共73頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月三、肉毒梭菌

厭氧性腐物寄生菌廣泛分布于土壤、海洋、動(dòng)物糞便產(chǎn)生肉毒毒素——神經(jīng)中毒

死亡率極高第66頁(yè)，課件共73頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月（一）生物學(xué)特性1、形態(tài)與染色

?

革蘭染色陽(yáng)性，G+桿菌?

菌體粗大，兩端鈍圓，單個(gè)或成雙排列?

芽胞呈橢圓形，位于菌體次極端直徑＞菌體橫徑（網(wǎng)球拍狀）?無莢膜，周身鞭毛第67頁(yè)，課件共73頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月肉毒梭菌第