分子生物學技術之DNA重組技術

第五章分子生物學技術DNA重組技術及應用現(xiàn)代分子生物學的快速發(fā)展，得益于上個世紀中葉以來研究方法、特別是基因操作和基因工程技術的進步。基因操作主要包括DNA分子的切割與連接、雜交、電泳、細胞轉(zhuǎn)化、核酸序列分析以及基因人工合成、表達、定點突變和PCR擴增等，是分子生物學研究的核心技術。基因工程是指在體外將核酸分子插入病毒、質(zhì)粒或其它載體分子，構成遺傳物質(zhì)的新組合，使之進入原先沒有這類分子的寄主細胞內(nèi)并進行持續(xù)穩(wěn)定的繁殖和表達。基因工程技術是核酸操作技術的一部分，只不過它強調(diào)了外源核酸分子在另一種不同的寄主細胞中的繁衍與性狀表達。事實上，這種跨越物種屏障、把來自其它生物的基因置于新的寄主生物細胞之中的能力，是基因工程技術區(qū)別于其它技術的根本特征。重宴組撇D經(jīng)N愿A浸技肉術靠發(fā)嶄展嬌史酷上災的接重充大冠事法件三湖大臟成晌就改：一跑、瞎在閥2貸0尤世豆紀短4貫0岔年褲代門確殃定風了牙遺出傳襪信疼息翠的載攜直帶季者捎、夸即扭基熟因置的編分債子惰載紗體圈是蹄D棟N元A在而瓶不牧是棍蛋頂白錦質(zhì)片，粗解班決惠了逗遺溫傳歉的督物場質(zhì)銜基梯礎敲問圖題爐；二刻、馳5沫0輔年螞代叔提賢出參了蹤蝶D籠N耀A涼分李子曬的繭雙忙螺按旋咳結(jié)單構菊模叼型雞和少半乞保曾留菜復超制削機鮮制慢,蘇解捧決非了券基搖因潛的犯自團我祥復私制陳和圾世礙代異交鏡替叉問訪題圍；三岸、追5往0炊年凱代棵末通至飽6倦0酒年柜代釣，戶相沈繼尺提猶出孔了粗“蒜中柳心彩法弓則衡”掏和狗操太縱辣子嘗學潛說構,夏成厭功版地仙破至譯云了更遺毛傳截密謝碼燈，壯闡階明皮了厚遺柜傳護信逐息俱的則流撈動永與登表買達霸機轉(zhuǎn)制美。5莫.蜻1禽基跳因明操濟作順的顫基針本刃工訴具（石一左）限跡制爬性仗核鳳酸筍內(nèi)除切匹酶能彼夠雖識框別麗D令N梢A降上蠅的扶特炸定剝堿海基勉序碼列膠并防從負這毯個折位他點誼切各開航D氧N蹲A疼分蹲子撈。第攤一甩個吸核烤酸匠內(nèi)法切沾酶吩E握c伴o車R篩I幕是源B反o尚y板e兼r士實差驗適室械在硬1帳9央7扇2挺年品發(fā)舅現(xiàn)寸的箭，溜它室能浮特林異派性陵識部別就G翅A唱A禿T包T蔥C辜序壁列門，殿將獲雙填鏈瘡D招N呈A疑分壇子向在努這韻個珠位臨點箭切穩(wěn)開帖并援產(chǎn)遲生樸具飲有弄粘匪性狹末理端萄的傍小澤片筐段否。圖察5裂-刪1找?guī)自路N從主仗要脂D尿N提A氧內(nèi)卡切額酶李所她識戰(zhàn)別胳的澆序貍列爭及沒其量酶肯切費末土端。（樹二等）騙基去因以克避隆脫的旬載雕體我貴們長知議道桌僅感僅否能櫻在蘋體翅外鐮利辰用漢限婚制毯性爐核繁酸店內(nèi)投切芽酶愧和籠D主N擔A消連利接聚酶深進輩行寒D句N危A園的席切慕割財和頁重督組素，尸還撒遠倆遠饒不闖能草滿何足叼基氏因浩工精程胳的拌要磚求眠，桃因賢為欣大售多枯數(shù)碼D橫N矩A價片看段竿不循具鐮備戰(zhàn)自褲我綁復免制絲式的就能巡壽力應，奇只纖有榨將碎他府們雜連碎接樂到鼓具拒備揭自累主閱復六制艷能歇力性的襯D把N示A柏分松子藝上控，脆才役能筍在約寄樂主被細饒胞貸中估進頂行時繁回殖樹。載械體甘（拆v羽e尤c肅t葉o國r蔽)寺是罷指叢具未備肝自謎主礙復抱制頸的捷D拾N雷A視分分子周，叫象抵病纏毒克、為噬甜菌名體置和藍質(zhì)慶粒盼等拼相洲對萌分盞子疾量扔較乒小姨的墳復頃制烤子那均妥可紀以廳作備為鬼基嚼因購導碗入況的元載裹體絲式。載喚體毀三脖要辦素林：自林我艷復圖制貌能胞力竹；攜桑帶腳外礙源山基顏因襲片嘴段升大裝小初（滾具站有是較害小密的夢分營子慢量表和縫較嘉高杜的限拷艇貝悄數(shù)已）全；插櫻入洽位蠅點受多辦少弓（酬具付有尊若規(guī)干悔限周制載酶逝單茶一瘋識夫別晝位盞點嫩）右；易巧于略鑒埋定隔識煎別廊（蘭具況有產(chǎn)抗哭菌炎素災抗螺性侄基繁因艦）大嗽腸露桿允菌仰質(zhì)信粒麗載脖體未:1述、潮p之S雜C睜1筋0配1寇質(zhì)徑粒父載晴體低饒拷閱貝蒸數(shù)鉛嚴陪緊真型偵復核制互控公制燥的暑大該腸畢桿紋菌愧質(zhì)唇粒驗載巡壽體早，批平央均歡每生個斤寄膨主那細潔胞父僅娘有綠1役~乞2喉個舊拷記貝度。長扁9眨.歉0緣瑞9唇k劈燕b迅，耕帶故有土四粉環(huán)襪素?？沽阈躁兓┮蚨龋ㄏ切e胃tr）希及煙E諸c糊o想R溫I真、淹H的i欄n居d妄I就I域I幕、墻B被a歸m隔H媽I盲、前S以a粉l股I嘆、佩X言h聯(lián)o漂I陡、徹P嗓v倚u食I秒I左以互及蛛S興m旁a距I笑等秋7僵種疊限板制浴性謀核逃酸雹內(nèi)須切封酶豪的偷單著酶礎切叉位真點葬，威在勁H毅i型n嫁d優(yōu)I改I拒I冰、和B寒a(chǎn)席m狀H宵I勇和黃S璃a蠶l排I思等悼3您個音位猶點本插乏入然外趣源煎基堪因濫，方會巷導云致領t述e粘tr失拜活源。大韻腸拜桿壯菌慶p森S以C倒1哥0幸1玻質(zhì)固粒淘載買體軋示使意悄圖逢。是防第復一小個向真耍核慮基洞因趴克鞏隆主載啦體德。栽缺霜點螞：丹它封是您一報種派嚴觀緊摸型冒復軌制惜控誘制參的全低北拷騎貝揮質(zhì)兇粒遵，蛇從倘帶束有賓該初質(zhì)妙粒果的遼寄必主另細分胞添中乘提拆取譜p半S且C愚1紀0魚1壓D絮N態(tài)A天，碗產(chǎn)寶量榜很傘低垂。2繼、服C父o水l驢E美1綠質(zhì)靜粒遠載紗體松帥弛棟型面復咳制魯控句制點的蛋多湖拷匹貝牧質(zhì)濁粒絨。一另般裂情為況麗下節(jié)，張當姓培采養(yǎng)走基著中梳氨阻基匯酸著被兆耗雙盡乓，緣瑞或搭是脫在輪細運胞漫培太養(yǎng)運物始中捏加代入怕氯焦霉銹素屈以煙抑雅制悶蛋粒白食質(zhì)管的推合愛成頃，鏟寄鑼主般染傭色班體鍬D丟N蒼A賢的考復鍋制載便相被躲抑照制騙，區(qū)細歷胞資的豬生畫長潮也店隨罩之迎停涂止紋。而孟松吉弛益型搬質(zhì)旺粒墳D亭N慎A根卻灑繼灣續(xù)輝復榆制盞數(shù)茫小進時閱，徹使得每艷個獎寄宅主雪細釣胞圈中毅C咱o海l財E栗1定質(zhì)羞粒毀的姿拷壤貝棗數(shù)續(xù)達孫到燈1搖0稍0抖0潤~遍3訂0今0懸0走個這，描占目細遇胞室總曠D謠N辰A詢的閑5嚇0腫%族左楚右消。3盟、壓p革B炸R濾3途2形2松質(zhì)罩粒濫載練體由磨三免個材不幫同穩(wěn)來控源釋的痛部駛分閥組播成聲的褲：第涉一壇部掌分芳來撲源濤于輕p盾S殃F忌2勞1膜2瞧4愛質(zhì)榮粒黑易亦位粘子統(tǒng)T皺n刑3堪的吃氨旦芐網(wǎng)青筑霉泊素蠻抗裝性碼基桂因揚（洪A登m訴pR）歐；第佛二初部泥分蕉來茅源凝于組p銅S秋C咽1聞0送1隸質(zhì)儉粒茅的樓四笛環(huán)恰素倉抗赴性渾基斑因烈（替t華e似tr）捧；第怎三蜜部蘆分臺則謹來剩源競于謎C出o殺l椅E止1可的廉派控生個質(zhì)吸粒御p顫M驗B癥1劣的療D戚N利A藏復訓制壩起咱點同（不o卸r濕i備）聞。A新m費pR優(yōu)多點旋是媽具王有陸較芝小貨的點分拿子述量患，漂其泡長私度唱為呈4蜘3丟6豬3淋b羨p景。樓不渡僅添易夫于蒼純違化武，丸而礙且輛即懶使門攜她帶襖上申一吵段靈6長-泉8始k蜻b砍的懶外衣源適D塊N獄A停片牙段鞏，榆操眨作灣起貨來愚仍敗較畝為忘便滿利合。具纏有壓兩撈種泳抗置生碼素經(jīng)抗溉性虜基止因脂以螞用讀作判轉(zhuǎn)添化招子婦的戒選伯擇役記園號槐。有福較識高來的挪拷哲貝紛數(shù)乏，詳若痰經(jīng)尖過旦氯班霉盈素溪擴俘增模，懶每勾個分細僻胞政中京可列累恥積微1撒0江0漸0妄~祥3天0訴0筆0炒個牙拷勇貝路，婦為填重縱組卵體矮D升N弊A孩的賭制繩備休提倡供秩了扎極陽大磚的奸方見便饒。4展、檔p社U撐C活質(zhì)廚粒國載祝體循（當包薯括孩四偶個璃部祖分怖）估：(街i魄)厭來慣自外p歷B爭R惑3捕2租2染質(zhì)欣粒盯的碗復些制彩起驗點劉（點o憤r躬i濾）顫；(鳳i什i繳)副氨釀芐腐青水霉餅素場抗溉性崇基樓因貍（社a胳m察pr）污；(役i晌i遺i巡壽)朗大蒜腸并桿供菌史β婦-枕半探乳搬糖咳酶田基給因糟（義l糟a匹c綠Z秒）糾的床啟浩動揚子患及堆其野編繼碼盯α廉-賞肽騰鏈越的括D界N跡A守序椅列另，段此季結(jié)己構侮特盡稱始為呀l穴a單c束Z男’副基陜因閣；(排i釀v詠)蝴位德于男l(wèi)姜a較c停Z掩’壓基勝因交中起的呼靠挎近伍5兇’船-延端楊的旗一圣段螺多掉克捐隆瞇位傻點糾（奮M都C技S鑒）幅區(qū)醉段扇，嘗外乞源斥基短因欺插雷入銹后椅破宇壞禿了呆l裳a鞏c篩Z復’或基開因瘦的秤功淘能鑄。優(yōu)睡點貓：更粉小助的醒分桶子流量活和銳更厚高蝦的臥拷標貝逃數(shù)緩。另在肺p嫩B辱R肢3迷2鋸2病基獨礎條上批構粱建幅p渾U需C教質(zhì)數(shù)粒顧載鏡體穩(wěn)時厭，要僅紋保言留磁下儲其仁中什的曉氨冶芐炮青船霉專素專抗料性青基盯因焦及薦復態(tài)制洽起債點成，潮其緒分賞子魂小躁了舅許散多獲，漁p螞U蓮C偶8艙為東2誰7諒5班0鑰b謠p仁，桿p淋U缸C錯1朝8微為鈴2擠6旦8同6狼b飼p彎。垃由礦于餃缺樸失糊r仍o年p艇基盛因森，足p挑U阿C無質(zhì)旱粒埋不剛經(jīng)鍵氯搞霉著素挨擴殿增芹時島，摧平厲均議每序個莖細盾胞晃即強可忙達巡壽5際0湊0偉~穿7監(jiān)0挖0營個扮拷炮貝?？陕么探M姻織被化鋸學宵方揉法甲檢風測抄重融組足體園。慚p攜U炎C預8貞質(zhì)妙粒運結(jié)槽構襪中枕具故有源來怕自怕大撥腸屢桿丟菌軟l觀a爬c扭操寸縱浙子鋒的呼l耗a終c尊Z尊‘辯基休因胖，偵所寇編昏碼存的假α場-院肽稠鏈跪可呢參飯與下α半-塔互盼補聽作薦用求。糧因賴此揪，碎可天用深X巡壽-轎g坦a熱l睛顯質(zhì)色考法掏實闖現(xiàn)凳對總重寬組五體導轉(zhuǎn)場化匹子暑的攏鑒泉定蒸。具猜有概多瓦克腫隆誼位籮點矮M易C績S新區(qū)謊段光，披可凝以種把濱具丟兩數(shù)種哭不列同育粘寺性師末往端起（潮如再E揪c內(nèi)o清R競I塞和啄B宏a較m剖H探I哨）低的天外林源前D電N叢A典片很段賺直各接暖克漿隆領到道p癢U殲C幅8造質(zhì)鴿粒浴載筒體雪上景。5歸、p糕G割E筆M鄉(xiāng)豐-內(nèi)3勇Z怖質(zhì)呈粒長勵度治為扛2賞7摸4伴3斃b豎p執(zhí)，寇編鬼碼陷有碼一慢個仰氨蠻芐害青膜霉蹦素辮抗萍性森基腳因色和雕一挨個脹l蔽a鵝c掀Z腹'答基棒因植。含副有負兩弊個劍噬括菌援體刪啟聚動今子子（吳T將7第和點S膚P肢6災）淋，院為沸R福N詢A夾聚邊合竄酶孟的笛附篩著漢作團用企提連供廊了姑特煙異芹性貴的撐識里別旬位冠點巖。尊加讀入視T弊7嚇或拋S胞P色6譽R辮N葛A支聚窗合序酶午，銳所請克叉隆尺的柏外程源源基隔因下便蔥會究轉(zhuǎn)堡錄延出縫相態(tài)應侵的爸m感R祖N哥A哄。6壞、在穿徑梭際質(zhì)手粒疊載曾體熟（紙s樹h訪u坑t糖t邀l品e瘡p隸l揭a碼s掘m親i暫d蛇v裕e蘋c肺t胞o注r懸）指尤由紐奉人筍工莫構蜓建貸的誦具壟有毒兩再種艙不顏同撒復筆制造起主點錦和甩選枕擇子記朱號絨，膛可恢在努兩婦種示不獅同病的義寄贏主拔細君胞武中歲存惠活臣和碑復看制陪的謙質(zhì)撫粒沉載火體寶。刮由貝于賭這程類毒質(zhì)仙粒綁載擊體瀉可司以豎保轟證目外飯源恩D貫N升A啄序承列貞在納不談同皺物鴉種臘的劈燕細也胞罷之案間肌得蜜到狂擴境增地，熄能行在但原副核歡和蠅真織核告細傻胞馳之理間趙往烏返殊穿簡梭呈，鋤具追有樓廣摧泛訓的副用卷途枕。7惡、呀p杠B悠l罰u摩e倘s燃c棄r慣i餓p薄t攪噬錫菌簽粒姜載恐體p系B估l輩u止e端s凳c江r脹i解p顆t武是遞指角由激S帝t姓r待a爹t貫a鳳g螞e啞n術e蠅公未司組發(fā)鋒展搏的否一剝類緒從煩p漢U猜C笨載左體頑派乏生掩而緣瑞來哪的候噬晃菌爹粒渠載匪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