血脂代謝及檢測項(xiàng)目（臨床生物化學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)課件）

血脂代謝異常與動脈粥樣硬化的發(fā)生、發(fā)展有密切關(guān)系,對心腦血管病的急性事件的發(fā)生起重要作用!情境一、基礎(chǔ)物質(zhì)代謝檢測

體液蛋白質(zhì)檢測項(xiàng)目糖代謝紊亂檢測項(xiàng)目血脂代謝異常檢測項(xiàng)目

鈉鉀氯和酸堿平衡檢測項(xiàng)目鈣、鎂、磷及微量元素檢測項(xiàng)目子情境3血脂代謝異常檢測項(xiàng)目

概述血脂及脂蛋白測定臨床應(yīng)用與評價一、什么是血脂？

血漿中的脂質(zhì)簡稱為血脂，它的主要成分是膽固醇、甘油三酯和類脂（磷脂、糖脂、固醇、類固醇和游離脂肪酸）。子情境3:血脂代謝異常及檢測項(xiàng)目第一節(jié)概述二、血脂的生理功能

主要提供能量，人體的各種活動都是以熱能做動力，脂質(zhì)是產(chǎn)生熱量（幾乎是糖和蛋白質(zhì)的二倍）最高的營養(yǎng)素；構(gòu)成生物膜基本成份。血漿脂質(zhì)總量為4.0~7.0g/L，占血漿成份中比例較少部分，但代謝非常活躍。腸道吸收外源性食物脂類；肝合成的內(nèi)源性脂類；脂肪組織貯存的脂肪動員都要經(jīng)過血液再到其他組織，因此，血脂水平反映全身脂代謝狀態(tài)；血脂代謝異常與動脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展、心腦血管病及糖尿病、腎臟疾病等有密切關(guān)系。三、血脂的存在形式——脂蛋白1）、脂蛋白的基本結(jié)構(gòu)2）、脂蛋白的種類1）、脂蛋白的基本結(jié)構(gòu)

表層親水性使之溶于水,可與酶和脂蛋白受體結(jié)合表層(親水性)內(nèi)核(疏水性)2）、脂蛋白的種類CMVLDLLDLHDL電泳位置原位前密度小大直徑大小TG含量大小CE,PL含量小大蛋白質(zhì)含量小大主要成分：蛋白質(zhì)、甘油三酯、磷脂、游離膽固醇及膽固醇酯等。超速離心及電泳分離效果圖密度顆粒乳糜微粒(CM)極低密度脂蛋白（VLDL）低密度脂蛋白（LDL）高密度脂蛋白（HDL）依據(jù)結(jié)構(gòu)決定功能的思想，你能否猜測出脂蛋白具有怎樣的功能嗎？運(yùn)輸脂類物質(zhì)，與血脂的代謝關(guān)系密切回顧人體內(nèi)脂類物質(zhì)的來源和去路釋放能量糖類來源去路血脂四、血脂的代謝（一）、血液中甘油三脂的來源和去路小腸脂肪組織肝臟血管食物中油脂和脂肪的消化吸收甘油三酯甘油三酯分解轉(zhuǎn)變?yōu)楦视秃椭舅釋⒏视秃椭舅嶂匦潞铣筛视腿ィ惶穷愇镔|(zhì)轉(zhuǎn)化成甘油三酯乳糜微粒極低密度脂蛋白1、血液中甘油三脂的來源經(jīng)淋巴循環(huán)外源性內(nèi)源性（一）、血液中甘油三脂的來源和去路血管壁細(xì)胞肝臟血管甘油三酯水解為甘油和游離脂肪酸甘油三酯將甘油和脂肪酸轉(zhuǎn)化成糖類物質(zhì)2、血液中甘油三脂的去路組織細(xì)胞甘油和脂肪酸氧化分解釋放能量乳糜微粒極低密度脂蛋白（二）、血液中膽固醇的來源和去路

小腸小腸細(xì)胞肝臟血管食物中膽固醇的吸收300~500mg膽固醇自身合成膽固醇1、血液中膽固醇的來源自身合成膽固醇外源性內(nèi)源性（二）、血液中膽固醇的來源和去路組織細(xì)胞肝臟血管利用膽固醇合成生物膜、部分激素、維生素D3等膽固醇2、血液中膽固醇的去路膽固醇被加工成膽汁酸排出體外低密度脂蛋白高密度脂蛋白脂蛋白代謝小結(jié)：1.CM:是外源性甘油三酯的運(yùn)輸形式直接分解出脂肪酸供組織利用殘粒和脂肪酸由肝攝取合成VLDL2.VLDL:是內(nèi)源性甘油三酯運(yùn)輸形式直接分解出脂肪酸供組織利用殘粒由肝臟攝取轉(zhuǎn)化為LDL被組織利用或肝臟攝取3.LDL:將膽固醇自肝臟運(yùn)至外周組織的脂蛋白由細(xì)胞溶酶體水解FC供膜結(jié)構(gòu)及激素合成利用4.HDL:將膽固醇自外周組織運(yùn)至肝臟的脂蛋白入肝臟合成膽汁酸經(jīng)膽汁及腸道代謝內(nèi)分泌系統(tǒng)[想一想]人體中血脂代謝主要受到哪些系統(tǒng)的調(diào)節(jié)？神經(jīng)系統(tǒng)五、血脂代謝的調(diào)節(jié)

當(dāng)血液中甘油三酯含量上升時，身體內(nèi)哪些激素的分泌量會上升？哪些激素的分泌量會相對下降？上升：胰高血糖素、腎上腺素下降：胰島素1、血脂的激素調(diào)節(jié)脂肪組織肝臟血管血糖甘油三酯分解為甘油和脂肪酸，代謝中間產(chǎn)物轉(zhuǎn)化成葡萄糖將甘油和脂肪酸轉(zhuǎn)化為葡萄糖或肝糖元血脂的激素調(diào)節(jié)血糖甘油三酯胰高血糖素胰島素2、血脂失衡想一想：哪些因素會引發(fā)血脂含量失衡？遺傳因素、膳食因素、疾病、體重、體力活動、藥物、年齡和性別、飲酒、精神壓力高脂血癥3、血脂代謝異常會引發(fā)的疾病概念：空腹血脂濃度持續(xù)高于正常種類：單純性高膽固醇血癥、單純性高甘油三酯血癥、兩者兼具的血脂代謝紊亂疾病什么是高脂血癥？高脂血癥有哪些種類？高脂血癥的主要危害是什么？如何預(yù)防高脂血癥？（一）高脂蛋白血癥分類

1.表現(xiàn)類型分類(未考慮病因)高脂蛋白血癥WHO分型法━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━表型血漿4℃過夜外觀TCTGCMVLDLLDL備注━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━I奶油上層,下層清↑→↑↑↑↑↑↑↓→易發(fā)胰腺炎IIa透明

↑↑→→→↑↑易發(fā)冠心病IIb透明

↑↑↑↑→↑↑易發(fā)冠心病III奶油上層,下層混濁↑↑↑↑↑R↑R↓易發(fā)冠心病IV混濁

↑→↑↑→↑↑→易發(fā)冠心病V奶油上層,下層混濁↑↑↑↑↑↑↓→易發(fā)胰腺炎━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━注:↑示濃度升高;→示濃度正常;↓示濃度降低R：殘粒

2.按所繼發(fā)疾病分類(1)糖尿病:常表現(xiàn)為IV型胰島素缺乏肝生成VLDL↑+LPL活性↓VLDL清除減少TG,VLDL↑(2)甲減:常表現(xiàn)為II型甲狀腺激素↓影響脂代謝各個環(huán)節(jié)如LPL活性↓+LDL受體功能↓清除LDL↓TC↑±TG↑(3)腎病:常表現(xiàn)為IV型±載脂蛋白紊亂脂蛋白VLDL顆粒相對↑,HDL↓TG↑(4)藥物:利尿劑,糖皮質(zhì)激素TC↑,TG↑

受體阻滯劑TC↑+HDL↓(5)其他:肝膽疾病,胰腺炎等3.高脂血癥基因分型法基因缺陷常用名臨床特征表型分類1.LDL受體家族性高膽固TC↑↑LDL↑↑缺陷醇血癥±TG↑II黃色瘤,CHD,高脂血2.ApoB100缺陷

家族性ApoB100缺陷同上II3?IIb.家族性混合高脂血癥(TC,TG,LDL,VLDL)↑

CHD,高脂血4.ApoE異常家族性異常脂蛋白血癥(TC,TG,CM)↑黃色瘤III5.?家族性高甘油三酯血癥(TG,VLDL)↑↑±TC↑IV

(二)低脂蛋白血癥1.家族性低-脂蛋白血癥:常染色體顯性遺傳.LDL↓TC↓臨床表現(xiàn):脂類吸收不良,棘形紅細(xì)胞,視網(wǎng)膜色素沉著,神經(jīng)肌肉退變2.-脂蛋白缺乏癥:常染色體隱性遺傳.apoB合成缺陷(CM,VLDL,LDL)↓TC↓↓臨床表現(xiàn):自幼生長發(fā)育不良,之后同1.3.家族性低-脂蛋白血癥:常染色體顯性遺傳.HDL↓臨床表現(xiàn):早發(fā)動脈硬化4.Tangier病:常染色體隱性遺傳.apoA1缺乏.HDL檢測不到,(TC,LDL)↓臨床表現(xiàn):扁桃體,肝脾腫大(膽固醇脂在網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)堆積),角膜渾濁及周圍神經(jīng)炎高脂血癥危害：防治原則：控制飲食、適當(dāng)運(yùn)動、服用降脂藥降低LDL、VLDL，提高HDL1．血液中乳糜微粒的結(jié)構(gòu)組成是（）A．核心成分是甘油三酯，周圍包繞一層磷脂、膽固醇、蛋白質(zhì)分子B．核心成分是甘油三酯，周圍包繞兩層磷脂、膽固醇、蛋白質(zhì)分子C．核心成分是膽固醇，周圍包繞一層磷脂、甘油三酯、蛋白質(zhì)分子D．核心成分是膽固醇，周圍包繞兩層磷脂、甘油三酯、蛋白質(zhì)分子課堂練習(xí)：A項(xiàng)目名稱檢查結(jié)果檢查結(jié)果參考范圍單位總膽固醇5.707.803.60~5.2mmol/L甘油三酯2.6314.650.45~1.7mmol/L高密度脂蛋白1.160.850.90~1.68mmol/L低密度脂蛋白5.014.022.84~3.12mmol/L甲和乙空腹時的血脂檢驗(yàn)報告單TC、TG、HDL、LDL、ApoA、ApoB、Lp（a）標(biāo)本采集：取血前2周，平衡膳食，適量運(yùn)動標(biāo)本儲存：4℃穩(wěn)定3天，-20℃穩(wěn)定數(shù)周，-70℃長期儲存第二節(jié).血脂、脂蛋白、載脂蛋白測定一、血漿（清）靜置試驗(yàn)標(biāo)本于4℃過夜，觀察分層及清澈度（正常應(yīng)清澈）1.上層奶油樣，下層清澈CM↑I型2.上層奶油樣，下層渾濁（CM，VLDL）↑V型

注：血清清澈可以正常也可以是IIa（LDL↑）

二.血清（血漿）總膽固醇測定化學(xué)法：常需抽提，具腐蝕性,限手工操作酶法：特異、靈敏適合自動分析酶測定法1.原理：膽固醇酯+H2OCEH膽固醇+游離脂肪酸膽固醇+O2

COD△4-膽甾烯酮+H2O22H2O2+4-氨基安替比林+酚POD醌亞胺

紅色（500nm）2.評價：A.受酶的質(zhì)量限制B.表面活性劑可干擾酶作用C.因?qū)傺趸€原反應(yīng)故受體內(nèi)還原物質(zhì)的干擾，紅色終產(chǎn)物故受膽紅素、溶血干擾3.參考值：≦5.2mmol/L4.臨床意義：

TC除了作為高膽固醇血癥的診斷指標(biāo)之外，不能作為其它任何疾病的診斷指標(biāo)，對于動脈粥樣硬化和冠心病而言，TC是一個明確的危險因子，與冠心病的發(fā)病率呈正相關(guān)。影響TC水平的因素:①年齡與性別；②長期的高膽固醇、高飽和脂肪酸和高熱量飲食可使TC增高；③遺傳因素；④其它：如缺少運(yùn)動、腦力勞動、精神緊張等可能使TC升高。高TC血癥：原發(fā)和繼發(fā)低TC血癥：原發(fā)和繼發(fā)

三.血清（血漿）甘油三酯測定化學(xué)法：操作步驟多，腐蝕性強(qiáng),限手工操作酶法：特異、靈敏適合自動分析1.磷酸甘油氧化酶法（穩(wěn)定、靈敏，受膽紅素、溶血及VitC干擾）TG+H2OLPL甘油+脂肪酸甘油+ATPGK+Mg2+3-磷酸甘油+ADP3-磷酸甘油+O2

GPO磷酸二羥丙酮+H2O2

H2O2+4-氨基安替比林+4-氯酚POD苯醌亞胺非那腙+H2O

（Trinder反應(yīng)）500nm酶法測定2.甘油氧化酶法A.消除游離甘油干擾游離甘油+O2

甘油氧化酶甘油醛+H2O2H2O2+EMAEPOD無色物質(zhì)B.顯色TG+3H2OLPL甘油+3RCOOH甘油+O2甘油氧化酶甘油醛+H2O2H2O2+4-AAP+EMAEPOD有色化合物（棕紅）EMAE：還原劑,作用與酚同N-乙基,N-3-甲基,N-乙酰乙二胺參考值：≦1.7mmol/L臨床意義：升高:原發(fā):見于原發(fā)性高甘油三酯血癥和高脂蛋白血癥繼發(fā):見于糖尿病,糖原積累病,甲減,腎病綜合癥,妊娠,口服避孕藥降低:甲抗,腎上腺皮質(zhì)功能減退,肝功能衰竭四.血清(血漿)脂蛋白測定各類脂蛋白分離方法:1.超速離心法:按密度分離2.血清脂蛋白電泳法:按電荷分離3.化學(xué)法沉淀分離

掩蔽(一)血清脂蛋白電泳原理:根據(jù)各脂蛋白所含蛋白質(zhì)與脂類的比例不同,在一定pH條件下帶電荷量不同而分離,以親脂染料染色后掃描分析各組分含量結(jié)果:由快至慢依次分離為-脂蛋白(0.3-0.4),前-脂蛋白(0.13-0.25),-脂蛋白(0.5-0.6),乳糜微粒(-).

(二)高密度脂蛋白測定1.超速離心分離+化學(xué)法顯色(參考方法)酶法測定2.沉淀分離(磷鎢酸-鎂)+酶法測定3.直接測定聚已二醇/抗體包裹法酶修飾法+酶法測定

掩蔽法(表面活性劑)參考值:HDL-C≧1.04mmol/L為冠心病的負(fù)危險因素下降見于心腦血管病,糖尿病,肝病.(三)低密度脂蛋白測定1.超速離心分離+化學(xué)法顯色(參考方法)酶法測定2.Friedwald公式法:(TG≦4.25mmol/L)LDL-C(mmol/L)=TC－HDL-C－TG/2.23.直接測定選擇性抑制法:試劑選擇性抑制非LDLD-C與酶作用

消除法:采用表面活性劑I改變非LDL-C結(jié)構(gòu),加速其與酶的反應(yīng)而被消除,之后以表面活性劑II促進(jìn)LDL-C與酶反應(yīng),最終以Trinder反應(yīng)顯色.采用的酶為膽固醇酯酶(CEH)和膽固醇氧化酶(COE)參考值:≦3.12mmol/L,(測定包括IDL和LP(a)的chol在內(nèi))臨床意義:升高時為動脈硬化危險因素載脂蛋白apolipoprotein,

載脂蛋白是構(gòu)成脂蛋白的蛋白成分，主要有載脂蛋白A、B、C、E等。功能1.使脂質(zhì)溶于水并運(yùn)載脂質(zhì)進(jìn)行代謝2.與脂蛋白生物信息聯(lián)系A(chǔ).與脂蛋白受體結(jié)合B.激活與脂蛋白代謝有關(guān)酶五.血清載脂蛋白測定載脂蛋白A1

(apoA1)主要分布于HDL及CM中是HDL的主要結(jié)構(gòu)蛋白，主要由肝臟合成,少部分由小腸合成具有抗動脈硬化作用。功能將組織內(nèi)的TC運(yùn)回肝臟激活卵磷脂膽固醇?；D(zhuǎn)移酶,促進(jìn)膽固醇酯化載脂蛋白B

(apoB)主要分布于LDL,VLDLAPOB是LDL、VLDL的主要結(jié)構(gòu)蛋白，能導(dǎo)致動脈硬化。主要作用：參與脂質(zhì)的運(yùn)輸消化與吸收介導(dǎo)LDL與相應(yīng)受體結(jié)合促進(jìn)TC于動脈管壁TC沉積載脂蛋白(a)是脂蛋白(a)的結(jié)構(gòu)蛋白是一種糖基化的載脂蛋白是致動脈硬化的危險因素脂蛋白受體是位于組織細(xì)胞膜上的糖蛋白.以親和方式與脂蛋白上相應(yīng)的配體結(jié)合而介導(dǎo)細(xì)胞對脂蛋白的攝取與代謝.主要包括LDL受體:識別apoB100,apoE清除體內(nèi)LDL殘粒受體:識別apoE,清除CM和VLDL殘粒清道夫受體:存在于巨噬細(xì)胞表面,介導(dǎo)修飾LDL的清除.不存在負(fù)反饋抑制,過多則形成泡沫細(xì)胞沉積于動脈壁.五.血清載脂蛋白測定1.測定方法:目前采用免疫化學(xué)法2.參考值:ApoAI:1.00~1.5g/L;ApoB:0.8~1.00g/L3.臨床意義:冠心病,腎病綜合癥和糖尿病等均有ApoAI下降和ApoB升高.臨床將ApoAI和ApoB比值作為冠心病危險因素脂蛋白(a)測定1.脂蛋白(a)結(jié)構(gòu)特點(diǎn):含有ApoB+Apo(a)且具有與纖溶酶原同源的抗原決定簇,分子量有較大變異2.測定:免疫化學(xué)法3.參考范圍:<200mg/L4.臨床意義:動脈硬化危險因素樣本采集1病人準(zhǔn)備：取血前應(yīng)保持安靜，避免劇烈運(yùn)動。2標(biāo)本采集：使用肝素鋰抗凝（綠帽）或不抗凝（黃帽），靜脈采血。除非是臥床的病人,一般采血時取坐位,從肘靜脈取血,使用止血帶的時間不超過1min,穿刺成功后立即松開止血帶。3注意事項(xiàng)：受檢者必須空腹12小時，不飲酒24小時后采樣。抽血前兩周時間保持平時的飲食習(xí)慣，近期內(nèi)體重穩(wěn)定，無急性病、外傷、手術(shù)等意外情況。采血時應(yīng)避免溶血。藥物對檢驗(yàn)結(jié)果的影響非常復(fù)雜，故在采樣檢查以前，應(yīng)暫停使用各種藥物，如某種藥物不可停用，則應(yīng)了解可能對檢驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生的影響。血脂檢測影響因素

影響血脂準(zhǔn)確測定的因素很多，如標(biāo)本的來源、測定方法、儀器和試劑等，其中分析前即臨床實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行測定之前的因素對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響往往被忽視，應(yīng)特別引起關(guān)注。1．分析前影響因素在進(jìn)行血脂檢測前，臨床醫(yī)生應(yīng)了解有許多因素會檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。1.1生物學(xué)因素如個體間、性別、年齡和種族等。研究發(fā)現(xiàn)平均生物學(xué)變異分別為TC6.1%~11%，TG23%~40%，HDL-C7%~12%，LDL-C9.5%，apoAI7%~8%，apoB6.5%~10%和Lp(a)8.6%。1.2行為因素如飲食、肥胖、吸煙、緊張、飲酒、飲咖啡和鍛煉等。1.3臨床因素如疾病（內(nèi)分泌或代謝性疾病、腎臟疾病、肝膽疾病及其他）和用藥（抗高血壓藥、免疫抑制劑及雌激素等）等情況。1.4標(biāo)本收集與處理如禁食狀態(tài)、血液濃縮、抗凝劑與防腐劑、毛細(xì)血管與靜脈血、標(biāo)本貯存等。2．采取措施建議采取以下措施減少血脂和脂蛋白測定分析前因素對結(jié)果的影響：2.1血脂分析前受試者應(yīng)處于穩(wěn)定代謝狀態(tài)，至少2周內(nèi)保持一般飲食習(xí)慣和體重穩(wěn)定。2.2測定前24小時內(nèi)不應(yīng)進(jìn)行劇烈體育運(yùn)動。2.3如血脂檢測異常，在進(jìn)一步處理前，應(yīng)在兩月內(nèi)進(jìn)行再次或多次測定，但至少要相隔一周。2.4雖然有人認(rèn)為TC測定可不用禁食，但應(yīng)注意飽餐后TC會有所下降；對于TG和其他脂蛋白檢測則需至少禁食12小時采血。具體做法：如在采血前一天晚8點(diǎn)鐘開始禁食（包括零食），可少量飲水。于次日早上8至10點(diǎn)采取靜脈血，也就是應(yīng)空腹12h~14h晨間取血。2.5除臥床不起者外，采血時一般取坐位，抽血前受試者至少應(yīng)坐位休息5min。2.6靜脈穿刺過程中止血帶使用不應(yīng)超過1min。2.7血清或血漿標(biāo)本均適用于血脂、脂蛋白測定，但應(yīng)盡量用血清。若用血漿，可將結(jié)果乘以1.03，近似折換為血清濃度。2.8血清標(biāo)本應(yīng)及時測定，盡量避免血清貯存。若必需貯存，短期（<3天）可存于4℃，長期需存于-70℃以下。此外，若使用影響血脂的藥物（如血脂調(diào)節(jié)藥、避孕藥、某些降壓藥、激素等），應(yīng)記錄用藥情況。妊娠后期各項(xiàng)血脂都會增高，應(yīng)在產(chǎn)后或終止哺乳后3個月查血才能反映其基本血脂水平。急性冠狀事件發(fā)生后，應(yīng)在24小時內(nèi)抽血檢查，否則因脂蛋白的結(jié)構(gòu)或濃度改變而影響結(jié)果的準(zhǔn)確性。第三節(jié)臨床應(yīng)用與評價檢查血脂至關(guān)重要

有下述情況時,如高血脂家族史,肥胖、高血壓、皮膚黃色瘤已有冠心病、腦中風(fēng),糖尿病、腎臟疾病、中老年、絕經(jīng)后婦女、長期高糖飲食,請您及早檢查血脂.普通人:每2年檢查一次血脂;40歲以上的人:每一年檢查1次血脂;高危人群和高血脂患者:聽從醫(yī)生指導(dǎo)定期復(fù)查血脂.

臨床上檢測血脂的項(xiàng)目較多，血脂的基本檢測項(xiàng)目為總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、HDL-C、LDL-C。中國成人血脂異常防治指南中制定出血脂水平的分層標(biāo)準(zhǔn)（表4）?？偰懝檀迹═C，Ch）： 有動脈硬化者小于4.6mmol/L 無動脈硬化者小于5.2mmol/L總甘油三酯（TG） 小于1.7mmol/L高密度脂蛋白-膽固醇（HDL-C） 大于1.2mmol/L低密度脂蛋白-膽固醇（LDL-C） 有動脈硬化者小于2.6mmol/L 無動脈硬化