血球計數(shù)板使用及相關計算

血球計數(shù)板使用及相關計算第1頁，課件共18頁，創(chuàng)作于2023年2月第2頁，課件共18頁，創(chuàng)作于2023年2月第3頁，課件共18頁，創(chuàng)作于2023年2月血球計數(shù)板的使用方法步驟1．鏡檢。在加樣前，先對計數(shù)板的計數(shù)室進行鏡檢。若有污物，則需清洗，吹干后才能進行計數(shù)；2．加樣。將清潔干燥的血球計數(shù)板的計數(shù)室上加蓋專用的蓋玻片，用吸管吸取稀釋后的酵母菌懸液，滴于蓋玻片邊緣，讓培養(yǎng)液自行緩緩滲入，一次性充滿計數(shù)室，防止產生氣泡，多余培養(yǎng)液可用濾紙吸去；3．計數(shù)。稍待片刻（約5min），待酵母菌細胞全部沉降到計數(shù)室底部后，將計數(shù)板放在載物臺的中央，先在低倍鏡下找到計數(shù)室所在位置后，再轉換高倍鏡觀察、計數(shù)并記錄。4．清潔。血球計數(shù)板使用后，用自來水沖洗，切勿用硬物洗刷，洗后自行晾干或用吹風機吹干，或用95%的乙醇、無水乙醇、丙酮等有機溶劑脫水使其干燥。通過鏡檢觀察每小格內是否殘留菌體或其他沉淀物。若不干凈，則必須重復清洗直到干凈為止。第4頁，課件共18頁，創(chuàng)作于2023年2月計數(shù)培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的要點：1．每天同一時間，各組取出本組的試管，用血球計數(shù)板計數(shù)酵母菌個數(shù)，并作記錄，連續(xù)觀察7天。2．從試管中吸出培養(yǎng)液進行計數(shù)之前，要將試管輕輕震蕩幾下，這樣使酵母菌分布均勻，求得的培養(yǎng)液中的酵母菌數(shù)量誤差小。3．如果一個小方格內酵母菌過多，難以數(shù)清，應當對培養(yǎng)液進行稀釋。具體方法是：搖勻試管，取1mL酵母菌培養(yǎng)液，加入成倍的無菌水稀釋，稀釋n倍后，再用血球計數(shù)板計數(shù)，所得數(shù)值乘以稀釋倍數(shù)。以每小方格內含有4—5個酵母細胞為宜。第5頁，課件共18頁，創(chuàng)作于2023年2月4．活酵母有出芽生殖現(xiàn)象，若芽體達到母細胞大小的一半時，即可作為兩個菌體計數(shù)，若芽體小于母細胞一半時為1個酵母細胞。5．對于壓在方格界線上的酵母菌應當計數(shù)同側相鄰兩邊上的菌體數(shù)，一般可采取“數(shù)上線不數(shù)下線，數(shù)左線不數(shù)右線”的原則處理，另兩邊不計數(shù)。6．計數(shù)一個樣品要從兩個計數(shù)室中計得的平均數(shù)值來計算，對每個樣品可計數(shù)三次，再取其平均值。第6頁，課件共18頁，創(chuàng)作于2023年2月例1、有關“探究培養(yǎng)液中酵母菌數(shù)量動態(tài)變化”的實驗，正確的敘述是A．改變培養(yǎng)液的pH值不影響K值（環(huán)境容納量）大小B．用樣方法調查玻璃容器中酵母菌數(shù)量的變化C．取適量培養(yǎng)液滴于普通載玻片后對酵母菌準確計數(shù)D．營養(yǎng)條件并非影響酵母菌種群數(shù)量變化的唯一因素（參考答案：D）

第7頁，課件共18頁，創(chuàng)作于2023年2月例2、為探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的動態(tài)變化，某同學進行了如下操作。其中操作正確的有▲(填下列操作的序號)。①將適量干酵母放入裝有一定濃度葡萄糖溶液的錐形瓶中，在適宜條件下培養(yǎng)②靜置一段時間后，用吸管從錐形瓶中吸取培養(yǎng)液③在血球計數(shù)板中央滴一滴培養(yǎng)液，蓋上蓋玻片④用濾紙吸除血球計數(shù)板邊緣多余培養(yǎng)液⑤將計數(shù)板放在載物臺中央，待酵母菌沉降到計數(shù)室底部，在顯微鏡下觀察、計數(shù)參考答案：①④⑤第8頁，課件共18頁，創(chuàng)作于2023年2月例3、（2008江蘇高考31．）（4）在探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的動態(tài)變化整個實驗過程中，直接從靜置的培養(yǎng)瓶中取培養(yǎng)原液計數(shù)的做法是錯誤的，正確的方法是▲和▲。（5）實驗結束后，用試管刷蘸洗滌劑擦洗血球計數(shù)板的做法是錯誤的，正確的方法是▲。（參考答案（4）搖勻培養(yǎng)液后再取樣樣液稀釋后再計數(shù)（5）浸泡和沖洗）第9頁，課件共18頁，創(chuàng)作于2023年2月推導：1mm×1mm方格的計數(shù)

1mm×1mm表示計數(shù)室的邊長，即一個大方格的邊長。由于計數(shù)室厚度為0.1mm，所以計數(shù)室的總體積為0.1mm3。

1．16×25型的計數(shù)公式：

酵母細胞個數(shù)／1mL=100個小方格細胞總數(shù)/100×400×10000×稀釋倍數(shù)

2．25×16型的計數(shù)公式：

酵母細胞個數(shù)／1mL＝80個小方格細胞總數(shù)/80×400×10000×稀釋倍數(shù)

假設：計數(shù)室內酵母菌為a個，稀釋倍數(shù)為b，則10mL培養(yǎng)液中酵母菌總數(shù)為：a×105×b

第10頁，課件共18頁，創(chuàng)作于2023年2月例4、通常用血球計數(shù)板對培養(yǎng)液中酵母菌進行計數(shù)，若計數(shù)室為1mm×1mm×0.1mm方格，由400個小方格組成，如果一個小方格內酵母菌過多，難以計數(shù)，應先▲后再計數(shù)。若多次重復計數(shù)后，算得每個小方格中平均有5個酵母菌，則10mL該培養(yǎng)液中酵母菌總數(shù)有▲個。（參考答案：稀釋；2×108）5×400×10000×10＝2×108。第11頁，課件共18頁，創(chuàng)作于2023年2月例5、檢測員將1mL水樣稀釋10倍后，用抽樣檢測的方法檢測每毫升藍藻的數(shù)量；將蓋玻片放在計數(shù)室上，用吸管吸取少許培養(yǎng)液使其自行滲入計數(shù)室，并用濾紙吸去多余液體。已知每個計數(shù)室由25×16＝400個小格組成，容納液體的總體積為0．1mm3。現(xiàn)觀察到圖中該計數(shù)室所示a、b、c、d、e5個中格80個小格內共有藍藻n個，則上述水樣中約有藍藻▲個／mL。（參考答案：5n×105）第12頁，課件共18頁，創(chuàng)作于2023年2月例6、在用血球計數(shù)板（2mm×2mm方格）對某一稀釋50倍樣品進行計數(shù)時，發(fā)現(xiàn)在一個計數(shù)室內（蓋玻片下的培養(yǎng)液厚度為0.1mm）酵母菌平均數(shù)為16個，據(jù)此估算10mL培養(yǎng)液中有酵母菌

▲個。（參考答案：2×107）

第13頁，課件共18頁，創(chuàng)作于2023年2月總結：2mm×2mm方格的計數(shù)

2mm×2mm表示計數(shù)室的邊長，即一個大方格的邊長。由于計數(shù)室厚度為0.1mm，所以計數(shù)區(qū)的總體積為0.4mm3。

計數(shù)室通常也有兩種規(guī)格：一種是16×25型，另一種是25×16型。

假設：計數(shù)室內酵母菌為a個，稀釋倍數(shù)為b，則10mL培養(yǎng)液中酵母菌總數(shù)為：a/4×105×b1．16×25型的計數(shù)公式為：

酵母細胞個數(shù)／1mL=100個小方格細胞總數(shù)/100×100×10000×稀釋倍數(shù)

2．25×16型的計數(shù)公式為：

酵母細胞個數(shù)／1mL

＝80個小方格細胞總數(shù)/80×100×10000×稀釋倍數(shù)

第14頁，課件共18頁，創(chuàng)作于2023年2月例7、跳蟲、甲螨和線蟲是土壤中的主要動物類群，對動植物的分解起重要作用。請回答：（1）由于跳蟲和甲螨活動能力

，身體

，不適合用手直接捕捉，常采用吸蟲器等進行采集。(2)現(xiàn)要采集大量的跳蟲用于實驗室培養(yǎng)，最好選擇下圖中的吸蟲器

，理由是

。若要采集大量的甲螨作為標本保存，最好選擇吸蟲器

，理由是

。（3）現(xiàn)在一培養(yǎng)罐內同時培養(yǎng)跳蟲、甲螨和線蟲三個種群，若他們均僅以罐內已有的酵母菌為食，則跳蟲與甲螨之間的關系是

，線蟲與酵母菌之間的關系是

。若跳蟲種群所含能量增長nKJ，則跳蟲消耗的酵母菌所儲存的能量至少為

KJ。第15頁，課件共18頁，創(chuàng)作于2023年2月參考答案：（1）較強微小（2）B該吸蟲器中的濕棉花模擬了土壤濕潤環(huán)境，利于跳蟲存活D該吸蟲器中的酒精可將收集的甲螨及時固定，防止腐爛（3）競爭捕食5n第16頁，課件共18頁，創(chuàng)作于2023年2月解析：從例5來