微生物的鑒定-病原性真菌鑒定（微生物檢驗技術課件）

《微生物檢驗技術》----白假絲酵母菌鑒定1假絲酵母菌屬假絲酵母菌，俗稱念珠菌。白假絲酵母菌為最常見的致病菌?？梢鹋约俳z酵母菌性陰道炎、外陰炎、念珠菌龜頭炎、包皮炎鵝口瘡等。2致病性引起皮炎引起粘膜白斑3生物學特性白假絲酵母菌呈圓形或卵圓形，直徑3~6μm。革蘭陽性，著色不均勻。出芽方式繁殖，在組織內(nèi)可見芽生孢子、假菌絲。在玉米粉培養(yǎng)基中可產(chǎn)生假菌絲和厚膜孢子。4白假絲酵母菌微生物檢驗標本直接檢查分離培養(yǎng)鑒定藥物敏感試驗5分離培養(yǎng)及鑒定菌落特征:標本沙氏培養(yǎng)基上25℃或37℃培養(yǎng)1~4d后，培養(yǎng)基表面可出現(xiàn)奶油色類酵母型菌落，鏡檢可見假菌絲和芽生孢子。鑒定試驗：芽管形成試驗厚膜孢子形成試驗糖同化或發(fā)酵試驗產(chǎn)色培養(yǎng)基鑒定5分離培養(yǎng)及鑒定白色念珠菌，膿汁涂片5分離培養(yǎng)及鑒定白色念珠菌，鵝口瘡5分離培養(yǎng)及鑒定白色念珠菌，血培養(yǎng)涂片，亞甲藍染色5分離培養(yǎng)及鑒定沙氏斜面血平板5分離培養(yǎng)及鑒定白色念珠菌革蘭染色結(jié)果5分離培養(yǎng)及鑒定熱帶念珠菌5分離培養(yǎng)及鑒定白色念珠菌在玉米吐溫80培養(yǎng)基上形成的厚膜孢子（400×）5分離培養(yǎng)及鑒定9

芽管形成試驗5分離培養(yǎng)及鑒定假菌絲和厚膜孢子5分離培養(yǎng)及鑒定半乳糖發(fā)酵試驗+葡萄糖發(fā)酵試驗5分離培養(yǎng)及鑒定產(chǎn)色培養(yǎng)基5分離培養(yǎng)及鑒定《微生物檢驗技術》----淺部感染真菌鑒定1淺部感染真菌概述淺部真菌主要侵犯機體皮膚、毛發(fā)和指（趾）甲，寄生和腐生于表皮、毛發(fā)和甲板的角質(zhì)組織中，引起淺部真菌病。淺部感染真菌包括表面感染真菌、皮膚癬真菌和皮下組織感染真菌三類。臨床上最多見的淺部真菌為皮膚癬真菌，包括毛癬菌屬、表皮癬菌屬和小孢子菌屬。真菌種類感染部位傳染源皮膚毛發(fā)甲板人動物表皮癬菌屬+-+絮狀表皮癬菌無小孢子菌屬++-奧杜安小孢子菌犬小孢子菌石膏樣小孢子菌毛癬菌屬+++石膏樣毛癬菌紅色毛癬菌石膏樣毛癬菌2真菌的檢測程序KOH透明法標本（膿、痰、尿、糞）皮屑等血、腦脊液沙保弱培養(yǎng)基、BA增菌培養(yǎng)鑒定：形態(tài)染色生長現(xiàn)象生化反應形態(tài)結(jié)構(gòu)結(jié)果初報結(jié)果報告3真菌標本直接檢查10%KOH加熱或不加熱放置10分鐘鏡檢4分離培養(yǎng)真菌培養(yǎng)是目前鑒定真菌的唯一方法。培養(yǎng)成功與否與采集的標本是否適當、是否新鮮、培養(yǎng)基的選擇、培養(yǎng)溫度與時間等有關。大多數(shù)真菌培養(yǎng)的溫度為28℃，但深部真菌為37℃。5毛癬菌6表皮癬菌屬7小孢子菌屬《微生物檢驗技術》----新型隱球菌的鑒定1隱球菌屬廣泛分布于自然界，也存在于人體表、口腔和腸道中。在組織中呈圓形或卵圓形，直徑一般在4~6μm。外周有寬厚莢膜，莢膜較菌體大1~3倍。一般染色法不易著色，常采用墨汁負染色法，在黑色背景下可鏡檢到透亮菌體和寬厚莢膜，非致病性隱球菌無莢膜。2新生隱球菌（革蘭染色）3新生隱球菌（墨汁負染色）4微生物檢驗直接鏡檢：用病人腦脊液作墨汁負染色檢查是診斷隱球菌腦膜炎最簡便、快速之方法。分離培養(yǎng)：將標本接種在沙氏培養(yǎng)基上，病原性隱球菌在25℃和37℃孵育的可生長，而非病原性隱球菌在37℃時不生長。培養(yǎng)2~5d后觀察菌落形態(tài)特點，并取菌落作印度墨汁負染色鏡檢。5生物學特性及鑒定涂片墨汁染色墨汁染色，培養(yǎng)物涂片×10005生物學特性及鑒定墨汁染色，腦脊液涂片×10005生物學特性及鑒定墨汁染色，痰液涂片×20005生物學特性及鑒定痰液涂片，革蘭染色×20005生物學特性及鑒定痰液涂片，抗酸染色5生物學特性及鑒定腦脊液涂片，莢膜染色×20005生物學特性及鑒定6新生隱球菌菌落7鑒定程序鏡檢：寬厚莢膜標本（腦脊液、痰）涂片墨汁染色初步報告結(jié)果分離培養(yǎng)脲酶：+酚氧化酶：+37℃生長+糖同化試驗乳糖：－半乳糖：+新型隱球菌《微生物檢驗技術》----真菌的生物學特性1真菌概述真菌是一類真核細胞型微生物，有典型的細胞核和完善的細胞器。真菌廣泛分布于自然界，種類繁多，有10余萬種。大多數(shù)對人無害，只有少數(shù)可引起人類疾病，稱病原性真菌。對人致病的真菌分為四類：病原性真菌、條件致病性真菌、產(chǎn)毒真菌及致癌真菌。目前大多數(shù)真菌的鑒定，形態(tài)學（包括真菌形態(tài)、菌落形態(tài)）檢查仍有重要意義。2真菌的生長特性營養(yǎng)要求不高，常用沙保氏培養(yǎng)基基本成分：葡萄糖、蛋白胨、瓊脂生長條件：pH4.0~6.0溫度22~28℃（深部真菌37℃）較高的濕度O23菌落類型酵母型/類酵母型（單細胞真菌菌落形式）濕潤、柔軟而致密，形態(tài)似一般細菌菌落鏡下：酵母型----卵圓孢子、芽生孢子類酵母型----芽生孢子、假菌絲絲狀菌落（多細胞真菌菌落形式）棉絮狀、絨毛狀、粉末狀菌落正背面呈不同顏色（可為鑒定依據(jù)）玻片小培養(yǎng)----鏡下棉蘭染色----孢子、菌絲及完整菌絲體4培養(yǎng)特性

絲狀菌落白假絲酵母菌菌落(類酵母型)酵母型菌落5

絲狀菌落6

變異性

多次傳代或孵育過久，容易變異（形態(tài)、結(jié)構(gòu)、菌落性狀、色素以及生理性狀(毒力)）。