第19章副粘病毒科(Paramyxoviridae)

,.第十九章 副粘病毒科(Paramyxoviridae)一、概述二、基因組結(jié)構(gòu)與功能三、病毒蛋白及其功能四、病毒的感染周期與分子感染機(jī)理主要參考文獻(xiàn)一、概述本科病毒具有下述特性：病毒粒子呈多形性，基本上呈圓形，直徑150～250nm，有時(shí)看到感謝閱讀更大的畸形粒子和長達(dá)數(shù)微米的長絲。病毒粒子有一個(gè)比較堅(jiān)硬的核衣殼，呈螺旋狀對稱，卷曲精品文檔放心下載在脂質(zhì)囊膜內(nèi)。囊膜上有纖突，或稱囊膜突起。病毒的基因組是單股RNA,長約16～20kb，分子感謝閱讀量為5～7MDa。病毒RNA由聚合酶轉(zhuǎn)錄成互補(bǔ)的mRNA。副粘病毒主要在細(xì)胞漿內(nèi)復(fù)制，并從謝謝閱讀細(xì)胞膜出芽成熟。國際病毒分類委員會(huì)第6次分類報(bào)告有關(guān)副粘病毒科的分類，有較大調(diào)整：將感謝閱讀副粘病毒科分為副粘病毒亞科和肺病毒亞科；新增腮腺炎病毒屬，代表種為腮腺炎病毒；原屬于感謝閱讀副粘病毒屬的新城疫病毒、禽副粘病毒2～9型及猴副流感病毒等，包括在腮腺炎病毒屬內(nèi)。本章感謝閱讀照顧我國分類習(xí)慣，暫不做調(diào)整，副粘病毒科仍分為三個(gè)屬，各屬主要特征及主要成員見表19-1。精品文檔放心下載表19-1.副粘病毒科各屬的主要特征及主要成員屬 主要特征 主要成員副粘病毒屬所有成員均具有神經(jīng)氨酸酶 新城疫病毒(Paramyxovirus)腮腺炎病毒副流感病毒精品文檔放心下載,.1～5型Ontario火雞副流感病毒鸚鵡副粘病毒燕雀副流感病毒Yucaipa病毒鼠Nariva病毒麻疹感謝閱讀病毒屬所有成員缺乏神經(jīng)氨酸酶，可引起麻疹病毒(Morbollivirus)胞漿和核內(nèi)包涵體，后者含病謝謝閱讀毒牛瘟病毒RNP。所有抗原交叉。在核衣殼犬瘟熱病毒大小和結(jié)構(gòu)上不同于肺病毒屬。感謝閱讀肺病毒屬 缺乏神經(jīng)氨酸酶，核衣殼大小與人呼吸道合胞體病毒(Pneumovirus)結(jié)構(gòu)不同于謝謝閱讀其它病毒屬。牛呼吸道合胞體病毒小鼠肺炎病毒副粘病毒粒子中RNA占0.5%，蛋白質(zhì)70%，脂質(zhì)20%～25%，糖6%。RNA不分節(jié)段，謝謝閱讀其堿基組成為G24%～25%，A20%～26%，C24%～27%，U22%～31%。副粘病毒RNA不具謝謝閱讀有感染性，未發(fā)現(xiàn)遺傳重組。副粘病毒科病毒一般具有11種蛋白質(zhì)，病毒粒子中含有轉(zhuǎn)錄酶、多謝謝閱讀A轉(zhuǎn)移酶、mRNA甲基轉(zhuǎn)移酶、神經(jīng)氨酸酶等。副粘病毒一般對熱不穩(wěn)定，在無蛋白質(zhì)的溶液中,4℃或室溫放置2～4小時(shí)，其感染力可降至10%或幾乎無感染力。在酸性或堿性溶液中易破壞，在中性溶液中較穩(wěn)定，對乙醚敏感。副粘病毒的復(fù)制不受放線菌素D的影響。謝謝閱讀1．形態(tài)結(jié)構(gòu)病毒核衣殼就是病毒粒子的核蛋白核心，由不分節(jié)的RNA以及許多蛋白亞單位組成，呈螺精品文檔放心下載旋樣對稱的螺卷狀結(jié)構(gòu)，與煙草花葉病病毒的結(jié)構(gòu)相似，但兩者的長度明顯不同，煙草花葉病病感謝閱讀毒長300nm，副粘病毒可達(dá)1000nm以上。副粘病毒的螺旋數(shù)目為200～220個(gè)，螺旋直徑14～感謝閱讀18nm，螺旋中孔的直徑為5～12nm，螺距為5～6.5nm，螺旋方向呈左轉(zhuǎn)。蛋白亞單位(單體)感謝閱讀的分子量為60kDa，每個(gè)病毒粒子的亞單位數(shù)為1600～2000個(gè)，每轉(zhuǎn)螺旋的亞單位數(shù)為9～感謝閱讀個(gè)。核衣殼盤繞成團(tuán)，外被脂蛋白囊膜。副粘病毒的基因組為單股RNA。精品文檔放心下載副粘病毒RNA的主要特征是它本身不能作為mRNA，不帶譯制病毒蛋白質(zhì)的信息。因此必精品文檔放心下載須通過病毒自己的RNA聚合酶轉(zhuǎn)錄一股互補(bǔ)鏈作為mRNA。根據(jù)慣例，帶有病毒譯制信息的RNA謝謝閱讀稱為正股。這樣，副粘病毒的互補(bǔ)鏈稱為“正股”，病毒原來的RNA就是負(fù)股，故稱為負(fù)股RNA精品文檔放心下載,.病毒。圖19-1.副粘病毒（自李成等）A.新城疫病毒；B.牛副粘病毒核衣殼2.基因組結(jié)構(gòu)各種副粘病毒都有一個(gè)螺旋對稱的單一核衣殼，其中的RNA含一組串連的6個(gè)或更多的基謝謝閱讀因。RNA是單分子單鏈RNA，16～20kb長，主要是負(fù)鏈，有時(shí)毒粒中也含有少量正鏈RNA。感謝閱讀副粘病毒科中的雞新城疫病毒、仙臺(tái)病毒和麻疹病毒的全部核苷酸序列已明了，并繪制出基因圖精品文檔放心下載譜。在肺病毒屬的人呼吸道合胞體病毒的基因組中，除L基因沒有完成序列分析外，其它基因序謝謝閱讀列及圖譜已與其它兩屬的基因圖譜進(jìn)行比較，見圖19-2。由圖可以看出肺病毒屬的基因組成與其謝謝閱讀它兩屬不盡相同，推斷其分子生物學(xué)特性也有很大差別。圖19-2 副粘病毒代表種的基因圖譜副流感病毒3型的基因組排列次序?yàn)?'I－NP－P+C－M－F－HN－L5'。在各基因之間有一感謝閱讀3'GAA保守序列，每一基因末端含有轉(zhuǎn)錄終止序列和mRNA互補(bǔ)的多聚(A)序列，有12個(gè)末端精品文檔放心下載核苷酸是半保守的：3'UUUAUU/AUUC/UUUUU5'。在基因的起始端有10個(gè)核苷酸是半保守的：謝謝閱讀3'UCCUA/CA/GUUUC。翻譯起始端距5’端的距離，在M蛋白為33～35nt，F(xiàn)基因?yàn)?94～感謝閱讀196nt。猿猴病毒5(SV5)、犬副流感病毒2型，在F和HN之間另有一個(gè)基因，編碼SH蛋白(Small精品文檔放心下載hydrophobicprotein)，分子量為5.012kDa，共44個(gè)氨基酸，其功能尚不清楚。有些研究也間感謝閱讀接證明新城疫病毒另有一個(gè)小基因，但無C蛋白。,.19-3仙臺(tái)病毒基因組的模式圖表明在基因間存在(+)RNA前導(dǎo)序列和轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)序列。感謝閱讀E、I和S分別表示mRNA末端、基因間和起始序列。精品文檔放心下載3.病毒蛋白組成(1)核衣殼蛋白A.核衣殼結(jié)構(gòu)蛋白(NP)：副粘病毒屬的核衣殼結(jié)構(gòu)蛋白是核衣殼蛋白(N)的主要成分，其結(jié)構(gòu)單位精品文檔放心下載有兩個(gè)主要區(qū)域。一是氨基端區(qū)域，約占整個(gè)結(jié)構(gòu)單位的三分之二，它與RNA直接結(jié)合；另一個(gè)感謝閱讀是羧基端區(qū)域，裸露于裝配后的核衣殼表面，胰蛋白酶處理后可以由核衣殼上解離下來，表明在精品文檔放心下載兩區(qū)域的結(jié)合部位存在有對蛋白酶敏感的結(jié)合點(diǎn)。如上所述，在感染負(fù)鏈RNA病毒的細(xì)胞中，僅是那些沒有被核衣殼蛋白包裹的病毒RNA具謝謝閱讀有病毒mRNA作用。另外，無核衣殼的RNA，在無細(xì)胞系統(tǒng)中是RNA合成的模板。這些結(jié)果說精品文檔放心下載明，核衣殼結(jié)構(gòu)單位與負(fù)鏈RNA病毒基因組模板活性有著密切的關(guān)系。然而副粘病毒的核衣殼蛋精品文檔放心下載白中的NP和N蛋白必須與操縱RNA合成的輔助蛋白相互作用，才能完成RNA的合成。特異性感謝閱讀抗輔助蛋白結(jié)構(gòu)單位的抗體對RNA合成的抑制,也充分證明了這一點(diǎn)。感謝閱讀B.輔助核衣殼蛋白：是與RNA復(fù)制和轉(zhuǎn)錄酶促反應(yīng)過程相關(guān)的主要輔助性蛋白質(zhì)，包括L蛋白和感謝閱讀較小的P蛋白，這些輔助蛋白的作用是相互協(xié)同才能發(fā)揮作用。也就是說，當(dāng)單一的某蛋白質(zhì)加感謝閱讀入到核衣殼RNA模板時(shí)，不具有催化RNA合成的能力。在RNA復(fù)制過程中輔助核衣殼蛋白的精品文檔放心下載作用是在每一病毒基因的3’末端加上多聚(A)和在5’末端的轉(zhuǎn)錄后的修飾。研究表明，L蛋白起精品文檔放心下載很重要的作用，致于P蛋白的功能尚不十分明確。(2)囊膜糖蛋白,.A.附著蛋白：所有的副粘病毒都具有一個(gè)表面糖蛋白，它介導(dǎo)病毒與細(xì)胞的附著。在副粘病毒屬精品文檔放心下載和麻疹病毒屬，這些糖蛋白與細(xì)胞的含唾液酸的受體結(jié)合，其親和性很高，具有血凝素和神經(jīng)感謝閱讀氨酸酶活性，因而稱為HN(hemagglutinin－neuraminidase)。在沒有神經(jīng)氨酸酶活性的病毒精品文檔放心下載屬中，如麻疹病毒屬，則稱為H。在肺病毒屬中同源的附著蛋白無血凝素和神經(jīng)氨酸酶活性，謝謝閱讀因而被稱為G蛋白。H和HN蛋白其氨基端具有很強(qiáng)的疏水性，這一區(qū)域使其固定在病毒囊膜精品文檔放心下載的雙層脂質(zhì)膜內(nèi)，雖然副粘病毒屬的HN蛋白的三維結(jié)構(gòu)還沒有確證，但可以肯定其結(jié)構(gòu)和功感謝閱讀能是相關(guān)的。業(yè)已明確，許多副粘病毒RNA編碼的附著蛋白的核苷酸序列。由序列分析推斷的精品文檔放心下載氨基酸序列可知，HN和H蛋白約含600個(gè)氨基酸。就HN蛋白而言，大約在距每一分子的氨精品文檔放心下載基端200個(gè)氨基酸處的6個(gè)氨基酸是非常保守的，基于與流感病毒神經(jīng)氨酸酶活性位點(diǎn)的比較，謝謝閱讀間接說明這一保守區(qū)與神經(jīng)氨酸酶活性有關(guān)。另一個(gè)距氨基端約400個(gè)氨基酸的區(qū)域，與流感感謝閱讀病毒血凝素的唾液酸結(jié)合位點(diǎn)具有部分同源性，表明部分HN附著位點(diǎn)的存在。在研究仙臺(tái)病謝謝閱讀毒溫度敏感變異株的條件性吸附缺陷時(shí)，在羧基端區(qū)域也發(fā)現(xiàn)有HN結(jié)合位點(diǎn)的部分序列，說感謝閱讀明活性位點(diǎn)在氨基酸一級結(jié)構(gòu)中分開，在折疊分子中結(jié)合才能發(fā)揮作用。人呼吸道合胞體病毒感謝閱讀的附著蛋白G的編碼基因，由298個(gè)氨基酸組成。精品文檔放心下載B.融合蛋白：也稱F蛋白。副粘病毒粒子附著于宿主細(xì)胞后，下一步就是核衣殼釋放到胞漿內(nèi)，精品文檔放心下載這一過程是借助于第二種表面糖蛋白的作用，是囊膜與宿主細(xì)胞表面脂蛋白膜融合的主要因子。精品文檔放心下載F蛋白的合成先以無活性的F0前體存在，由540～580個(gè)氨基酸組成，前體F0由蛋白酶水解精品文檔放心下載后才發(fā)揮其融合作用。水解位點(diǎn)位于距F0蛋白氨基端大約100個(gè)氨基酸處，且有兩個(gè)特點(diǎn)：位精品文檔放心下載點(diǎn)的氨基端存在一個(gè)由賴氨酸和精氨酸組成的短序列；在羧基端存在有約為30個(gè)氨基酸的疏水精品文檔放心下載性長序列。不同種屬的副粘病毒，甚至同種內(nèi)的不同毒株，在F0蛋白水解位點(diǎn)的氨基端的精、謝謝閱讀賴氨酸的數(shù)量和距離都各不相同，兩氨基酸成對則標(biāo)志著易于水解，致病性增強(qiáng)。水解后，形精品文檔放心下載成一個(gè)較大的疏水亞單位F1，具有嵌入宿主細(xì)胞膜的融合機(jī)能。水解后較小的約100個(gè)氨基酸精品文檔放心下載,.的產(chǎn)物稱為F2。兩個(gè)亞單位均在N位點(diǎn)糖基化，進(jìn)一步增加其穩(wěn)定性。謝謝閱讀C.非糖基化囊膜蛋白:副粘病毒一般都具有一種相對較小的非糖基化蛋白，即膜蛋白或M蛋白，精品文檔放心下載它存在于病毒囊膜的內(nèi)層，被認(rèn)為在病毒粒子裝配過程中參與囊膜形成，介導(dǎo)核衣殼與囊膜之感謝閱讀間的識(shí)別，以維持病毒粒子結(jié)構(gòu)的完整性。其它囊膜蛋白：呼吸道合胞體病毒22K基因編碼一個(gè)小的蛋白質(zhì)，參與囊膜形成，但其具體功能尚不清楚。犬副流感病毒2型和腮腺炎病毒，在F和HN基因之間有一小基因，編碼一小疏水性蛋白質(zhì)，稱為SH蛋白(smallhydrophobicprotein)，盡管其功能不詳，但由于其具有疏水性，表明對雙層脂膜有親和性。謝謝閱讀(3)非結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)：有一個(gè)或多個(gè)功能尚不清楚的小蛋白質(zhì)，編碼于副粘病毒屬病毒基因組中，一感謝閱讀般以文字?jǐn)?shù)字命名，這些小蛋白質(zhì)在不同病毒中其編碼方式不盡相同。謝謝閱讀4.復(fù)制吸附與進(jìn)入副粘病毒的HN或H和G蛋白參與病毒與細(xì)胞的吸附。如上所述，感染性的核衣殼，在具有轉(zhuǎn)錄活性的輔助性蛋白組份參與下，由F蛋白介導(dǎo)的細(xì)胞表面與病毒囊膜之間發(fā)生融合，而使其進(jìn)入到細(xì)胞質(zhì)中。謝謝閱讀轉(zhuǎn)錄和翻譯在研究雞新城疫病毒(NDV)感染細(xì)胞后的RNA合成時(shí)，發(fā)現(xiàn)了病毒復(fù)制的負(fù)股RNA的復(fù)制機(jī)制。相繼的研究證明，其它副粘病毒也遵循這一機(jī)制。在感染過程中，副粘病毒的每一基因均有其相對應(yīng)的不同的mRNA，這些分開的mRNA是由整個(gè)基因組的多考貝轉(zhuǎn)錄后加工獲得，還是各基因分別轉(zhuǎn)錄后的產(chǎn)物，仍未完全清楚。下一個(gè)重要步聚就是病毒負(fù)股RNA復(fù)制成正股RNA，參與轉(zhuǎn)錄過程，與此同時(shí)，由正股RNA復(fù)制大量完整的病毒基因組，參與病毒的裝配。換句話說，負(fù)鏈RNA一方面轉(zhuǎn)錄成mRNA，合成相應(yīng)的病毒蛋白成份，另一方面轉(zhuǎn)錄成其互補(bǔ)鏈，再合成病毒RNA鏈，參與病毒包裝。精品文檔放心下載(3),.圖19-4 副粘病毒基因組復(fù)制的主要步驟(3)病毒粒子的包裝與釋放副粘病毒核衣殼的裝配發(fā)生在胞漿內(nèi)，其過程分兩步進(jìn)行：首先是NP謝謝閱讀和N蛋白結(jié)構(gòu)單位與病毒基因組結(jié)合。病毒粒子囊膜的形成是在細(xì)胞表面。病毒糖蛋白在運(yùn)輸過謝謝閱讀程中，經(jīng)過內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體而被糖基化，替代脂質(zhì)層中許多內(nèi)源的細(xì)胞蛋白質(zhì)，而存在于宿主謝謝閱讀細(xì)胞膜表面，當(dāng)核衣殼到達(dá)細(xì)胞膜表面，以尚不明了的形式，從細(xì)胞表面芽生，形成病毒粒子。感謝閱讀在病毒粒子芽生的同時(shí)，細(xì)胞膜表面也具有病毒糖蛋白纖突，如果有類似胰蛋白酶的蛋白酶存在精品文檔放心下載時(shí)，在細(xì)胞膜表面的F0蛋白將被激活，致使細(xì)胞與細(xì)胞之間接觸融合，這樣病毒介導(dǎo)的融合被稱精品文檔放心下載之為內(nèi)融合(fusionfromwithin)。這一過程提供了病毒基因組直接從一個(gè)細(xì)胞進(jìn)入另一個(gè)細(xì)胞的謝謝閱讀機(jī)會(huì)，最大限度地逃避宿主體液中循環(huán)抗體的監(jiān)視作用。這種細(xì)胞內(nèi)融合涉及到幾個(gè)或多個(gè)的細(xì)感謝閱讀胞，形成多核體(polykaryon)，既可以在培養(yǎng)細(xì)胞單層中見到，又可在感染病毒的組織內(nèi)形成。精品文檔放心下載二、副粘病毒屬(Paramyxovirus)本病毒屬的代表種為新城疫病毒，另外包括人的腮腺炎病毒、禽副粘病毒2型等以及人和動(dòng)精品文檔放心下載物的副流感1～4型病毒與其它副流感病毒。其中禽副粘病毒(PVM)各血清型代表種見表19-謝謝閱讀(一)新城疫病毒(Newcastlediseasevirus)感謝閱讀同義名：新城雞瘟病毒，禽肺腦炎病毒，亞洲雞瘟病毒，偽雞瘟病毒，禽副粘病毒1型。感謝閱讀新城疫(ND)是極易傳染的毀滅性疾病，最常侵襲家雞和珠雞，也能感染許多其它家禽和野鳥。感謝閱讀,.火雞和孔雀的易感性較低，但常從雉、鴿和野生鸚鵡體內(nèi)分離到毒力強(qiáng)大的病毒。水禽和海鳥通謝謝閱讀常抵抗力甚強(qiáng)，但可作為帶毒者。人有易感性，常因接觸病禽和病毒乃至活毒疫苗而被感染。本精品文檔放心下載病于1926年首先發(fā)現(xiàn)于印度尼西亞的巴塔維亞，同年發(fā)現(xiàn)于英國新城，故名。本病的死亡率極高，謝謝閱讀強(qiáng)毒力毒株引起的感染常達(dá)100%，廣泛分布于世界許多國家。感謝閱讀1.形態(tài)特征成熟病毒粒子的直徑約為100～250nm，有囊膜的病毒粒子通常呈圓形，但常因囊膜破損而感謝閱讀形態(tài)不規(guī)則，也常見橫斷面100nm左右的不同長度的細(xì)絲，顯現(xiàn)出多形性的病毒粒子。囊膜上的感謝閱讀纖突約長8nm。病毒粒子的內(nèi)部為一核心，也就是病毒粒子中卷曲的核衣殼。核衣殼的直徑約謝謝閱讀17nm。新城疫病毒很不穩(wěn)定，用乙醚處理時(shí)病毒粒子徹底破壞，釋出形狀不規(guī)則的凝絮狀物，直謝謝閱讀徑35～65nm。其外層為脂蛋白，表面有纖突，具有血凝素(HA)和神經(jīng)氨酸酶(NA)活性。精品文檔放心下載2.理化學(xué)特性新城疫病毒(NDV)在55℃經(jīng)45分鐘或在直射陽光下經(jīng)30分鐘滅活。但在4℃經(jīng)幾周，-20℃謝謝閱讀經(jīng)幾個(gè)月，在-70℃經(jīng)幾年感染力不受影響?？偟膩砜?NDV對理化因素的抵抗力相當(dāng)強(qiáng)，能在自感謝閱讀然界中頑強(qiáng)生存。影響其在宿主體外生存的主要因素，包括病毒的數(shù)量、毒株的種類、溫度、濕感謝閱讀度、干燥速度、陽光照射和貯存條件以及是否存在有機(jī)物等等。在新城疫暴發(fā)后經(jīng)2～8周，仍能感謝閱讀從雞舍、產(chǎn)蛋巢、蛋殼、羽毛和其它物質(zhì)中分離到病毒。在鮮蛋中經(jīng)幾個(gè)月，在凍雞中經(jīng)2年以精品文檔放心下載上仍有病毒生存。將不拔毛的雞尸貯藏于4℃，經(jīng)4～6個(gè)月仍能在皮膚和骨髓中檢出活的病毒。感謝閱讀碳酸鈉和氫氧化鈉的消毒效果不穩(wěn)定，大多數(shù)去垢劑能迅速將其滅活。普通洗衣皂雖無直接消毒精品文檔放心下載作用，但其去污能力良好，4%濃度可作清潔和一般消毒用。如果病毒未被組織、分泌物、糞便或感謝閱讀其它有機(jī)物所保護(hù)，煤酚皂、酚、甲酚等配成2%～3%溶液，在5分鐘內(nèi)可將病毒滅活。福爾馬謝謝閱讀林的效果因溫度和濃度的不同，差別甚大，但在37℃孵卵器內(nèi)0.1%福爾馬林維持6小時(shí)能有效精品文檔放心下載,.地使病毒滅活。新城疫病毒的RNA核苷酸序列長15156bp?；蚪M編碼6種蛋白質(zhì)：L、HN、感謝閱讀F、NP、P、M蛋白。病毒粒子含有約20%～25%(W/W)來自宿主細(xì)胞的脂質(zhì)和約6%的碳水化謝謝閱讀合物。3.生物學(xué)活性(1)血凝性: NDV能凝集紅細(xì)胞，是由于其HN蛋白能結(jié)合于紅細(xì)胞表面的受體。這一特性謝謝閱讀以及抗血清的特異性抑制作用已成為本病的有效診斷方法。雖然NDV可凝集所有兩棲類、爬行類精品文檔放心下載和禽類的紅細(xì)胞，但HA試驗(yàn)常用雞的紅細(xì)胞。所有NDV毒株都可凝集人、小鼠和豚鼠紅細(xì)胞。精品文檔放心下載但凝集牛、山羊、綿羊、豬和馬紅細(xì)胞的能力則隨毒株或血清型而異。感謝閱讀(2)神經(jīng)氨酸酶活性: 神經(jīng)氨酸酶(NA)也是HN分子的一部分，存在于副粘病毒屬的所有成感謝閱讀員。此酶的明顯作用是可將病毒逐漸從紅細(xì)胞上洗脫下來。然而尚不知道NA對病毒復(fù)制的確切謝謝閱讀功能。NA還作用于受體位點(diǎn)，使F蛋白充分接近而發(fā)生病毒與細(xì)胞膜的融合。精品文檔放心下載(3)細(xì)胞融合與溶血: NDV和其它副粘病毒可因同一機(jī)制引起紅細(xì)胞溶解或細(xì)胞融合。病毒精品文檔放心下載復(fù)制時(shí)附著于受體位點(diǎn)，繼之病毒囊膜與細(xì)胞膜融合，也可導(dǎo)致兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞融合。紅細(xì)胞膜感謝閱讀常因與病毒之間的膜融合而導(dǎo)致紅細(xì)胞溶解，產(chǎn)生溶血。（三）禽副粘病毒2型(Avianparamyxovirustype2)精品文檔放心下載同義名：尤凱帕病毒(Yucaipavirus)。1960年美國加利福尼亞州尤凱帕的一個(gè)養(yǎng)禽場暴發(fā)了一次嚴(yán)重的傳染性喉氣管炎。從3周齡感謝閱讀的病雞氣管中分離到一株副粘病毒，稱為尤凱帕病毒(PMV－2)。它在血清學(xué)上與NDV有差別。感謝閱讀后來的血清學(xué)普查表明，此病毒分布廣泛。將此病毒以氣管內(nèi)途徑接種雛雞，能產(chǎn)生輕微的呼吸感謝閱讀道癥狀。乳鼠不易感。本病毒的抗原性不但與正粘病毒的流感病毒不同，而且與副粘病毒的新城精品文檔放心下載,.疫病毒、副流感病毒和流行性腮腺炎病毒等也不同。副粘病毒2型能凝集雞、豚鼠紅細(xì)胞和人“O”精品文檔放心下載型紅細(xì)胞，在牛腎和豬腎細(xì)胞和HeLa細(xì)胞中產(chǎn)生細(xì)胞病變。禽的副粘病毒還包括禽副粘病毒3～謝謝閱讀型。（四）副流感病毒亞群(Parainfluenzaviruses)謝謝閱讀早在1956年，Chanock等從肺炎病孩的咽喉洗液中分離出一株新病毒，當(dāng)時(shí)稱為CA病毒感謝閱讀(croupassociatedvirus)。次年，該氏從類似流感病孩的咽喉洗液中又分離出38株過去未知的感謝閱讀新病毒，由于病毒的存在是用紅細(xì)胞吸咐現(xiàn)象來判定的，所以，新分離的病毒，根據(jù)抗原性的不謝謝閱讀同，分別稱為紅細(xì)胞吸咐病毒第1型和第2型(HA1、HA2)。1959年Andrewes等鑒于這些新病感謝閱讀毒的生物學(xué)性質(zhì)，以及這些新病毒能引起人類類似流感樣癥狀的疾病等特點(diǎn)，將其定名為副流感謝謝閱讀病毒，與流感病毒同屬粘病毒。1962年Waterson鑒于這類新病毒具有與流感病毒不同的理化及精品文檔放心下載生物學(xué)性質(zhì)，將它們列為第二類粘病毒，而原來的流感病毒列為第一類粘病毒。直至1982年第4謝謝閱讀次國際病毒命名會(huì)議上，才將這類病毒定名為副粘病毒屬。在副流感病毒中能引起人類疾病的有：謝謝閱讀HA1病毒(3型)、HA2病毒(1型)、仙臺(tái)病毒(1型)、CA病毒(2型)和M25病毒(4型)。副流感病感謝閱讀毒在我國世界上許多國家，包括美國、法國、前蘇聯(lián)、日本、丹麥、加拿大、澳大利亞、巴拿馬精品文檔放心下載和意大利等，都有廣泛流行。副流感病毒引起人和動(dòng)物的上呼吸道感染，在幼年動(dòng)物急性呼吸道精品文檔放心下載感染中特別重要。這些病毒的形態(tài)與其它副粘病毒沒有區(qū)別。它們對理化學(xué)因素的抵抗力不強(qiáng)，謝謝閱讀將其懸浮于無蛋白質(zhì)基質(zhì)中，在室溫或4℃經(jīng)2～4小時(shí)，感染力喪失90%以上。在pH3和37℃精品文檔放心下載迅速滅活，即使在0℃以下，活力也易下降。大多數(shù)毒株能凝集家禽和某些哺乳動(dòng)物的紅細(xì)胞，并感謝閱讀有神經(jīng)氨酸酶活性。對雞紅細(xì)胞的最高血凝滴度發(fā)生在4℃(副流感病毒1型和2型)，對豚鼠紅細(xì)謝謝閱讀胞發(fā)生在25℃。副流感病毒與新城疫病毒一樣，還有一種溶血素，可被型特異的抗血清所抑制。感謝閱讀,.新分離毒株在細(xì)胞培養(yǎng)物中引起的細(xì)胞病變甚為輕微，但是可用豚鼠紅細(xì)胞作血細(xì)胞吸咐試驗(yàn)。感謝閱讀連續(xù)傳代后可以形成病灶性合胞體和胞漿內(nèi)包涵體。1型和3型病毒的某些毒株，在多種細(xì)胞培謝謝閱讀養(yǎng)物中產(chǎn)生嗜酸性核內(nèi)包涵體。熒光抗體試驗(yàn)證明副流感病毒主要在細(xì)胞漿內(nèi)復(fù)制。大多數(shù)新分感謝閱讀離毒株不能在雞胚中良好增殖，這與新城疫病毒和流感病毒不同，但經(jīng)連續(xù)傳代以后，大多數(shù)能精品文檔放心下載適應(yīng)7～9日齡雞胚的羊膜腔。孵育4～6天，病毒滴度達(dá)最高峰。此后能在尿囊腔中增殖，但4謝謝閱讀型病毒不能在雞胚中增殖。將副流感病毒滴鼻接種乳豚鼠和乳倉鼠，可以引起感染，在2～3天內(nèi)謝謝閱讀肺部病毒達(dá)很高滴度，但看不到病變。每一種副流感病毒具有3種不同的抗原，決定著它們的型謝謝閱讀特異性。HN、F是表面抗原，NP是核衣殼抗原。中和抗體是針對HN的。在中和試驗(yàn)和血凝抑謝謝閱讀制試驗(yàn)中至少存在4個(gè)抗原決定簇，神經(jīng)氨酸酶也存在不同的抗原決定簇。這說明神經(jīng)氨酸酶和謝謝閱讀血凝素的功能是與HN糖蛋白的獨(dú)特區(qū)相關(guān)的。副流感病毒在免疫學(xué)上與流感病毒沒有關(guān)系。副感謝閱讀流感病毒的實(shí)驗(yàn)診斷，主要是用血凝抑制試驗(yàn)或補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)測定血清抗體的滴度上升情況。也謝謝閱讀可應(yīng)用適宜的原代細(xì)胞分離病毒，并用血細(xì)胞吸咐試驗(yàn)和血細(xì)胞吸咐抑制試驗(yàn)加以證實(shí)和鑒定。精品文檔放心下載根據(jù)血凝抑制試驗(yàn)和血清中和試驗(yàn)，可將副流感病毒區(qū)分為1、2、3和4型，但4型之間具有輕精品文檔放心下載微的交叉反應(yīng)。1.副流感病毒1型(Parainfluenzavirus,type1)精品文檔放心下載同義名：仙臺(tái)病毒(Sendaivirus)；日本血凝病毒(HaemagglutinatingvirusofJapan)；血謝謝閱讀細(xì)胞吸附病毒2型(Haemadsorptionvirus,type2)。謝謝閱讀副流感病毒1型的原始分離毒株稱為血紅細(xì)胞吸附病毒第2型，簡稱HA2病毒。它是1957謝謝閱讀年Chanock等從華盛頓1名患有急性喉氣管支氣管炎的嬰兒的咽拭子中，用恒河猴腎原代細(xì)胞培謝謝閱讀養(yǎng)分離出來的。我國于1962年在北京從急性下呼吸道感染患兒的咽拭子中分離出3株HA2病毒，謝謝閱讀從急性上呼吸道感染的患兒中分離出2株HA2病毒。HA2病毒也在世界其它地方分離出來過，謝謝閱讀包括美國、澳大利亞、加拿大、前蘇聯(lián)、英國、丹麥、日本、法國和西印度群島。感謝閱讀,.(1)理化學(xué)特性副流感病毒1型經(jīng)電鏡測得的大小為100～180nm。毒粒內(nèi)含單股RNA，核謝謝閱讀衣殼體螺旋對稱，有包膜，上有糖蛋白纖突。病毒粒子的感染力在50℃2小時(shí)或36℃80小時(shí)內(nèi)感謝閱讀全部喪失；在無血清的營養(yǎng)液中25℃2小時(shí)，其感染力損失99%。如將病毒保存在-60℃含蛋白謝謝閱讀質(zhì)的營養(yǎng)液中，其感染力可保持?jǐn)?shù)年。病毒在pH5.7～8.7時(shí)，感染力穩(wěn)定。用超聲波處理可以導(dǎo)感謝閱讀致血凝素解離，而不增加其感染力。20%乙醚4℃過夜或氯仿4℃10分鐘可使其感染力完全喪失。謝謝閱讀乙醚或氯仿以及Tween80處理，可以導(dǎo)致表面抗原包括血凝素和神經(jīng)氨酸酶的釋放。0.5μg/ml精品文檔放心下載的胰酶在37℃孵育1小時(shí)可使其感染力下降99.99%，但血凝素滴度不下降；孵育5小時(shí)，則血感謝閱讀凝素滴度下降。病毒經(jīng)乙醚處理后，用血凝或補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)可區(qū)分出兩種抗原成分：一種是可溶精品文檔放心下載性抗原(S)，它在20000r/min不沉淀，也不凝集血細(xì)胞，用經(jīng)鼻腔感染豚鼠制備的免疫血清可與謝謝閱讀之發(fā)生補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)；第二種是特異性血凝抗原(V)，它可與特異性豚鼠免疫血清發(fā)生血凝抑制反謝謝閱讀應(yīng)。另有一種溶血素，在補(bǔ)體存在時(shí)可使雞紅細(xì)胞溶解。副流感病毒1型能凝集雞、豚鼠、人、謝謝閱讀綿羊、家兔和猴的紅細(xì)胞。雞紅細(xì)胞在4℃，豚鼠紅細(xì)胞在25℃，能獲得最高的血凝滴度。在偏精品文檔放心下載酸或偏堿的pH中，血凝素比感染性病毒粒子更為穩(wěn)定。該病毒用乙醚處理可以提高血凝滴度。精品文檔放心下載在不同動(dòng)物血清中存在1型病毒血凝反應(yīng)的非特異性抑制物，在家兔的正常和免疫血清的19S和謝謝閱讀4S部分含有1和3型病毒血凝反應(yīng)的抑制物，而特異性抗體是在7S部分，可用凝膠過濾進(jìn)行純謝謝閱讀化。血清中存在的非特異性血凝抑制物質(zhì)，可以用霍亂孤菌濾液的受體破壞酶(RDE)處理或白陶土精品文檔放心下載處理法去除，如用過碘酸鉀處理，非特異性抑制固然可以去除，但特異性抗體也遭到部分破壞。感謝閱讀將仙臺(tái)病毒與HA2病毒歸屬于副流感病毒1型的主要根據(jù)是，其可溶性抗原具有交叉反應(yīng)。精品文檔放心下載(2)培養(yǎng)某些副流感病毒1型能在雞胚中生長，仙臺(tái)病毒株生長更佳。羊膜腔接種最敏感，但傳感謝閱讀代后可用尿囊腔和卵黃囊接種。培養(yǎng)適宜溫度為35.5℃，雞胚不死亡。HA2株能在人、猴、雞胚精品文檔放心下載和豬的腎細(xì)胞培養(yǎng)物中生長，仙臺(tái)病毒株的適應(yīng)范圍更廣。初次分離時(shí)，細(xì)胞病變不明顯，用血精品文檔放心下載細(xì)胞吸附試驗(yàn)易于檢出病毒，也可將細(xì)胞培養(yǎng)物染色后檢查胞漿內(nèi)的包涵體。仙臺(tái)病毒株可形成感謝閱讀,.蝕斑。將接種物用胰酶處理，?？稍黾游g斑數(shù)。仙臺(tái)病毒株能使培養(yǎng)細(xì)胞發(fā)生融合，即使滅活后精品文檔放心下載也有這種作用，因此在哺乳動(dòng)物雜交細(xì)胞的研究中，廣泛應(yīng)用仙臺(tái)病毒株作為細(xì)胞融合劑。感謝閱讀(3)病原性實(shí)驗(yàn)感染時(shí)，仙臺(tái)病毒株可使小鼠發(fā)生隱性感染，但在鼠群中幾經(jīng)傳遞后，毒力可增精品文檔放心下載強(qiáng)而導(dǎo)致致死性肺炎。在過去無此病的鼠群中死亡率很高。偶而可以感染大鼠、豚鼠和豬。過去謝謝閱讀認(rèn)為仙臺(tái)病毒株一般不感染人類，現(xiàn)在已有許多實(shí)驗(yàn)證明它也是人類呼吸道疾病的病原之一。血謝謝閱讀細(xì)胞吸附病毒2型只分離自人類，引起兒童急性喉氣管炎。近來應(yīng)用細(xì)胞融合技術(shù)，曾從多發(fā)性感謝閱讀硬化癥病人的腦細(xì)胞中分離到本病毒。2.副流感病毒2型(Paraimfluenzavirus,type2)感謝閱讀副流感病毒2型原始分離物稱為CA病毒,系1955年11月從美國俄亥俄州一名患有急性喉氣感謝閱讀管支氣管炎的嬰兒咽拭子，在猴腎細(xì)胞培養(yǎng)上分離到的?；颊哐宓闹泻涂贵w、血凝抑制抗體和感謝閱讀補(bǔ)體結(jié)合抗體對分離的病毒均呈4倍以上的增長。在加拿大、美國、澳大利亞、前蘇聯(lián)和美國等感謝閱讀不同地區(qū)都分離到該病毒。我國沒有該病毒分離的報(bào)道，但血清學(xué)證明有該病毒抗體的存在。本感謝閱讀病毒最初認(rèn)為是人類的病原體，但與之非常接近的一些毒株，如來自猴和人的SV－5、SV－41、精品文檔放心下載SHV、SA、DA等，都包括在本型內(nèi)。副流感病毒2型可自然感染家兔、豚鼠和猴。精品文檔放心下載理化學(xué)特性用電鏡測得的病毒粒子直徑為150～250nm，具有含血凝素的外膜，核衣殼呈螺感謝閱讀旋對稱，直徑15～18nm。粒內(nèi)含單股負(fù)鏈RNA，特異性脂蛋白外膜含有血凝素和神經(jīng)氨酸酶。感謝閱讀神經(jīng)氨酸酶活性發(fā)揮的適宜pH為4.5～5.5。在含0.5%水解乳蛋白、0.5%牛血清的Hanks液中，謝謝閱讀4℃24小時(shí)，病毒的感染性不變，于-70℃5個(gè)月內(nèi)保持穩(wěn)定；75℃10分鐘神經(jīng)氨酸酶活性破壞。精品文檔放心下載病毒在中性溶液中穩(wěn)定，在pH3.0不穩(wěn)定，其它物理性質(zhì)和其它副流感病毒相同。病毒用氯仿處謝謝閱讀10分鐘，或20%乙醚4℃過夜處理，可導(dǎo)致其感染力完全喪失。病毒的感染力和血凝素對胰酶均有抵抗力。CA病毒具有血凝素、溶血素和神經(jīng)氨酸酶活性。采用雞紅細(xì)胞在4℃反應(yīng)，血凝滴度最高。對豚鼠和人“O”型紅細(xì)胞也有良好的凝集性。某些動(dòng)物血清中含有本病毒血凝反應(yīng)的非謝謝閱讀,.特異性抑制物，但用RDE處理可以去除。3.副流感病毒3型(Parainfluenzavirus,type3)精品文檔放心下載同義名：血細(xì)胞吸附病毒1型(Haemadsorptionvirus，type1)；運(yùn)輸熱病毒(Shippingfever精品文檔放心下載virus)。副流感病毒3型原始分離物稱為血紅細(xì)胞吸附病毒第1型，簡稱HA1病毒。它是1957年精品文檔放心下載Chanock等從華盛頓1名患有急性呼吸道疾病的2歲患兒的咽拭子中，用猴腎細(xì)胞培養(yǎng)，根據(jù)紅精品文檔放心下載細(xì)胞吸附現(xiàn)象分離出來的?；颊哐鍖π路蛛x病毒有4倍以上抗體增長。我國于1962年從急性謝謝閱讀呼吸道疾病的患兒咽喉拭子中用猴腎也分離到2株HA1病毒，在法國、英國、澳大利亞、加拿大精品文檔放心下載和美國等也有地方分離獲得本病毒的報(bào)道。(1)理化學(xué)特性病毒粒子的直徑為120～180nm，含單鏈RNA，核衣殼呈螺旋對稱，有外膜，感謝閱讀含血凝素和神經(jīng)氨酸酶。病毒的感染力和神經(jīng)氨酸酶活性，在50℃30分鐘可降低約90%～99%。在無血清的營感謝閱讀養(yǎng)液中，37℃24小時(shí)，99%以上的病毒被滅活，在5%血清中病毒較穩(wěn)定。在4℃1天或幾天病感謝閱讀毒感染力可保持不變，在-70℃可保持?jǐn)?shù)月。相對濕度20%比80%更為穩(wěn)定。用20%乙醚在4℃精品文檔放心下載處理16小時(shí)可使病毒完全滅活，與等量氯仿在22℃處理10分鐘也可使其完全滅活。本病毒對熱謝謝閱讀的穩(wěn)定性較其它副粘病毒為低，感染力在室溫中迅速降低，幾天后喪失殆盡。55℃30分鐘滅活，精品文檔放心下載在-25℃能良好活存。血清對其具有保護(hù)作用，可以降低滅活速度。謝謝閱讀(2)血凝性所有副流感3型病毒都能凝集人“O”型、豚鼠和雞的紅細(xì)胞。新分離的牛株比人感謝閱讀株更易產(chǎn)生血凝作用。馬株凝集人和豚鼠的紅細(xì)胞，但對雞紅細(xì)胞的活性較差。根據(jù)對不同紅細(xì)感謝閱讀胞的凝集作用和對熱的敏感性，牛株又可分為2～3個(gè)亞型。牛株尚能溶解雞或豚鼠的紅細(xì)胞。欲精品文檔放心下載從細(xì)胞培養(yǎng)物中檢出新分離的毒株，以紅細(xì)胞吸附試驗(yàn)最為敏感。謝謝閱讀4.副流感病毒4型(Parainfluenzavirus,type4)謝謝閱讀,.副流感病毒4型原始分離物為M－25，系1958年從美國一名無熱性上呼吸道疾病患者的咽感謝閱讀拭子，在猴腎細(xì)胞培養(yǎng)物上以紅細(xì)胞吸附現(xiàn)象為指標(biāo)分離的?；颊唠p份血清對新分離病毒有4倍感謝閱讀以上抗體增長。我國于1962年也分離到該病毒。病毒在4℃或室溫凝集豚鼠紅細(xì)胞，但不能在謝謝閱讀37℃發(fā)生凝集。對猴紅細(xì)胞也能發(fā)生明顯凝集，但人“O”型紅細(xì)胞的凝集很差，對雞或大鼠的感謝閱讀紅細(xì)胞完全不凝集。吐溫－乙醚處理可以增強(qiáng)血凝滴度。病毒很不穩(wěn)定。它與流行性腮腺炎病毒謝謝閱讀有交叉反應(yīng)。研究證明，本病毒尚可分為兩個(gè)亞型(A和B)。病毒在雞胚中很難生長，在HeLa和謝謝閱讀其它傳代細(xì)胞中也不生長。在猴腎細(xì)胞培養(yǎng)物中傳代后，雖不引起細(xì)胞病變，但病毒滴度很高。謝謝閱讀在感染的細(xì)胞培養(yǎng)物中，幾乎不能測出血凝活性，但以豚鼠紅細(xì)胞作血細(xì)胞吸附試驗(yàn)，卻易檢出感謝閱讀病毒。本病毒對實(shí)驗(yàn)動(dòng)物無致病力，接種豚鼠可使其抗體滴度顯著升高。精品文檔放心下載三、麻疹病毒屬(Morbillivirus)（一）犬瘟熱病毒(Caninedistempervirus)感謝閱讀（一）牛瘟病毒(Rinderpestvirus)主要參考文獻(xiàn)丁鏟等。1991。新城疫病毒的分子生物學(xué)研究。中國獸醫(yī)雜志，17(6):52～53謝謝閱讀高福，劉文軍主譯。1991。禽病學(xué)(第9版)。北京：北京農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社謝謝閱讀侯云德著。1990。分子病毒學(xué)。北京：學(xué)苑出版社韓志輝等。1994。雞新城疫病毒檢測技術(shù)研究進(jìn)展。中國動(dòng)物檢疫,11(5):30～31精品文檔放心下載王樹雙等。1994。雞新城疫病毒分子生物學(xué)致病性分析。中國動(dòng)物檢疫,11(5):8～10感謝閱讀AppelM.J.G,etal.,1994.Caninedistemperepizooticinlions,tigersandleopardsinNorth感謝閱讀,.America.J.Vet.Diagno.Invest.,6:277～288感謝閱讀BarrettT,etal.,1985.Nucleotidesequenceoftheentireproteincodingregionofcanine感謝閱讀distemperviruspolymerase－associated(P)proteinmRNA.VirusRes.,3:367～372謝謝閱讀ChambersP,etal.,1986.Nucleotidesequenceofthegeneencodingthefusion謝謝閱讀glycoproteinofNewcastlediseasevirus.J.Gen.Virol.,67:2685～2694感謝閱讀ChambersP,etal.,1986.MolecularcloningofcomplementaryDNAtoNewcastle精品文檔放心下載diseasevirusandnucleotidesequenceanalysisofthejunctionbetweenthegenes謝謝閱讀encoding 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