治療藥物監(jiān)測工作中常見血藥濃度測定方法的研究進(jìn)展

治療藥物監(jiān)測工作中常見血藥濃度測定方法的研究進(jìn)展

在過去五年中，通過出版和分發(fā)藥物監(jiān)測（tdm），人們達(dá)到了一個新的水平。隨著技術(shù)的發(fā)展和計算機(jī)的普及，tdm工作中出現(xiàn)了一種新的氛圍，其效果也越來越受到重視。詳情如下。一、sdm主要特點(diǎn)為在TDM中最常見的血藥濃度測定方法有三類,即:光譜學(xué)、色譜學(xué)和免疫學(xué),由于光譜學(xué)的靈敏低、專屬性差,單獨(dú)應(yīng)用已經(jīng)越來越少,常與色譜學(xué)結(jié)合使用。(一)色譜學(xué)中以HPLC在TDM中最為常用,發(fā)展也快,目前還處在方興未艾的時候,一些新技術(shù)的引入,提高了HPLC的靈敏度與分離度,使TDM的工作不斷深入。1.液-固萃取法在體液樣品處理中的應(yīng)用.液-固萃取法(LSE)是應(yīng)用LC原理處理樣品,將萃取劑填入小柱,以溶劑淋洗老化,將樣品通過,藥物保留在小柱上,用適當(dāng)溶劑洗去雜質(zhì),再用適當(dāng)溶劑將藥物洗脫下來。本法操作簡單,樣品處理迅速,容易自動化。2.連接柱的應(yīng)用。將液一固萃取柱作為預(yù)柱與HPLC連接,增加一個泵,先將樣品泵經(jīng)預(yù)柱或富集柱,使起到純化與富集作用,再泵經(jīng)分析柱,能提高分析的靈敏度。此法可舉一反三,裝配成雙泵雙柱,或三泵雙柱、或雙泵三柱等各種形式。甚至有的工廠根據(jù)此原理,設(shè)計制成專用的萃取儀,操作更方便,效率更高,如吉爾森的自動試樣萃取儀。3.HPLC多種藥物分析系統(tǒng).本系統(tǒng)充分發(fā)揮了色譜儀的分離性能,使一臺HPLC同時能測定多種藥物,還可以通過更換流動相和紫外檢出器的波長,使測定的藥物可達(dá)數(shù)十種以上。Bio-Rad公司銷售同一類藥物的專用柱和流動相,如苯二氮(二)免疫學(xué)方法是TDM中常規(guī)測定最常用的方法。由于其靈敏度高,樣品用量少,對TDM工作者有很大的吸引力,近年來這方面發(fā)展也較快。七十年代初,放免法的應(yīng)用曾促進(jìn)了TDM的開展,七十年代后期,酶免法代替了放免法,克服了放免法的同位素污染,而作為常規(guī)測定方法之一.八十年代初期螢光免疫法又提高了免疫學(xué)方法的穩(wěn)定性,八十年代中期,螢光偏振免疫法的出現(xiàn),進(jìn)一步提高了熒光免疫法的靈敏度,尤其自動化程度高、性能穩(wěn)定的TDx血藥濃度測定儀的推廠,使TDM工作真正能成為常規(guī)化的可能,也使TDM工作者從繁重費(fèi)時的分析中解放出來,促使TDM深入發(fā)展。免疫方法還在發(fā)展,如熒光偏振免疫法單一試劑的應(yīng)用二、疾病控制的療效藥效主要由游離藥物產(chǎn)生,游離藥物濃度與血漿蛋白結(jié)合率有關(guān),其個體差異比藥動學(xué)的個體差異小得多,但(一)與血漿蛋白具有高度親和力的藥物,其蛋白結(jié)合呈明顯的濃度依賴,如雙異丙吡胺是血漿蛋白結(jié)合引起非線性動力學(xué)的典型.(二)疾病可改變藥物與血漿蛋白的結(jié)合率.如肝硬化病人奎尼停的游離藥物分?jǐn)?shù)幾乎增加三倍;腎病時,苯妥英、水楊酸、安妥明等的血漿蛋白結(jié)合率明顯下降.(三)有些藥物血漿蛋白結(jié)合率存在著明顯的個體差異,如奎尼停的血漿蛋白結(jié)合率的范圍為50～90%,不同個體間游離藥物濃度差達(dá)10倍.(四)游離藥物濃度簡易測定方法的建立,是促進(jìn)游離藥物測定的重要條件。在治療藥物監(jiān)測的領(lǐng)域里常用的有二種:一是平衡透析法,常應(yīng)用改進(jìn)了的裝置,將一張透析膜夾在二塊有對應(yīng)孔穴的不銹鋼塊中,夾緊,在透析膜二側(cè)分別加樣品與滲透液,在一定溫度下放置一定時間,測定藥物濃度;另一種是超濾法,將樣品通過超濾膜,可以應(yīng)用減壓法、加壓法或者離心法(也是一種加壓法)三、活性代謝的監(jiān)測除前體藥物外,一般情況下,由于活性代謝物濃度低,并不顯得重要,然而,當(dāng)活性代謝物濃度不低時、活性較強(qiáng)時、腎功能有障礙時,對活性代謝物的存在應(yīng)給予足夠的重視(一)活性代謝的檢測1.有利于深入指導(dǎo)臨床合理用藥.2.有助于解釋血藥濃度與藥效間的矛盾,如濃度與效應(yīng)間的不平行現(xiàn)象.3.也有助于解釋和預(yù)防治療期間出現(xiàn)的某些不良反應(yīng),即某些藥物代謝物的治療活性不一定很高,然而,腎功能障礙時.代謝物的濃度積蓄到一定程度時,出現(xiàn)不良反應(yīng).由于色譜方法的發(fā)展,分離度與靈敏度都有很大的提高,代謝物的測定方法正在逐步解決.當(dāng)前問題比較突出的是活性代謝物標(biāo)準(zhǔn)品的來源不易,尤其在國內(nèi)解決更困難.乙胺碘酜酮及N-去乙基碘酜酮;利多卡因及GX、MEGX;奎尼停及3-羥基尼奎停;撲(四)代謝是否有積累1.代謝物藥理活性與原型藥物的關(guān)系,它們的作用是相加、協(xié)同或拮抗,作用強(qiáng)度比是多少?2.代謝物與原型藥物的處置動力學(xué)有無異同?3.肝、腎功能有障礙時,代謝物是否有積累,積累程度為多少?四、屏幕監(jiān)控(一)不同的康復(fù)劑具有不同的效果（見表1）(二)不同給藥途徑對映射體的影響1.藥物對映體的總體清除率的不同見表2.2.給消旋體后,血漿中對映體的比值有較大的個體差異,如單劑量口服40mg心得安消旋體后,對映體比值在15例病人上的3.在不同給藥途徑時,對映體的比值也是不同的。如給戊脈安后,首過效應(yīng)優(yōu)先選擇性轉(zhuǎn)化R(一)對映體。因此,戊脈安(一)/(+)比值,iv時為0.56±0.10,po時為0.23±0.05,欲得到相同的PR間期延長值時,po給藥比iv給藥需要更高的血藥總濃度。(三)物體的測量1.化合物衍生物化標(biāo)準(zhǔn)(1)應(yīng)用化學(xué)結(jié)合手性固定相、流動相中加入手性復(fù)合物、用手性化合物衍生物化等方法,分離消旋體中的對映體。(2)手性固定相柱已廣泛用于分離酸性和堿性藥物,如阿托品、達(dá)舒平、布洛芬、酮基布洛芬、美多心胺、鎮(zhèn)痛新、心得安、托卡因、戊脈羥、間羥舒喘寧等.(3)衍生物化后再用色譜法分離,如心得安可應(yīng)用(一)N-trifuoroacetyl-1-prolylchloride(TPC)試劑衍生物化.對映體選擇放免測定法的試劑包括化學(xué)立體選擇性的抗血清,和高度光學(xué)純的放射性配體的結(jié)合.現(xiàn)已有氚標(biāo)的戊巴比妥、華法令及已巴比妥的藥合。五、體化給藥與生物資本七十年代Sheiner和Beal等基于非線性混合效應(yīng)模型的理論,編制了NONMEM程序,到八十年代逐漸發(fā)展為一步法估算群體藥動學(xué)參數(shù),并開始應(yīng)用于治療藥物監(jiān)測的回顧性分析,以及新藥上市前群體藥動學(xué)特征的分析。群體藥動學(xué)參數(shù)在個體化給藥中,有著極其重要的地位.給藥個體化可以概括為三個階段:經(jīng)驗法、個體化藥動學(xué)參數(shù)法、和群體藥動學(xué)參數(shù)結(jié)合個體血藥濃度反饋法(即NONMEM程序結(jié)合Bayesian反饋法),第三階段國外已經(jīng)開始,并正在發(fā)展中,國內(nèi)處在萌芽狀態(tài).NONMEM程序不僅可以應(yīng)用在來源于均勻群體數(shù)據(jù)的擬合與參數(shù)的估算,其更突出的優(yōu)點(diǎn)是應(yīng)用在來源于非均勻群體數(shù)據(jù)的擬合與參數(shù)的估算。所謂非均勻群體數(shù)據(jù)是指每一個病人所取的樣本,在時間和次數(shù)上都是不相同的,可以把多個病人,每個病人的少數(shù)數(shù)據(jù)積累起來使用,因此,它可以與日常的TDM工作結(jié)合起來,易為病人所接受,結(jié)果也更具有代表性。一步法估算群體藥動學(xué)參數(shù),結(jié)合Bayesian反饋方法估算個體化藥動學(xué)參數(shù),設(shè)計個體化給藥方案,將使合理用藥提高到一個新水平.六、血藥濃度與藥物濃度的關(guān)系治療藥物效果的評值,最直接的方法是監(jiān)測藥理效應(yīng)或臨床效果,但在很多情況下,定量評價效果或效應(yīng)是很困難的,因此,常常通過測定血