常用培養(yǎng)基的制備課件

技能訓(xùn)練3

常用培養(yǎng)基的制備技能訓(xùn)練3

常用培養(yǎng)基的制備1熟悉培養(yǎng)基制備的基本程序會制備常用的培養(yǎng)基

實(shí)訓(xùn)目標(biāo)熟悉培養(yǎng)基制備的基本程序?qū)嵱?xùn)目標(biāo)2高壓蒸氣滅菌器、電熱干燥箱、電爐、天平、量筒、漏斗、試管、培養(yǎng)皿、燒杯、三角燒瓶、營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基（或伊紅美蘭瓊脂培養(yǎng)基、三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基、SS瓊脂培養(yǎng)基、麥康凱瓊脂培養(yǎng)基）等儀器材料高壓蒸氣滅菌器、電熱干燥箱、電爐、天平、量筒、漏斗、試管、培3方法步驟（一）營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基（二）血液瓊脂培養(yǎng)基（三）肉湯培養(yǎng)基（四）半固體培養(yǎng)基方法步驟（一）營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基4（一）營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基計(jì)算稱量溶化倒平板或倒試管滅菌無菌檢驗(yàn)備用（一）營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基計(jì)算51．計(jì)算：根據(jù)營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基的說明書了解營養(yǎng)瓊脂粉與水的比例，一般是1000ml蒸餾水中應(yīng)加營養(yǎng)瓊脂粉31.3g，再根據(jù)培養(yǎng)基的需要量確定營養(yǎng)瓊脂粉的用量。營養(yǎng)瓊脂粉的量=31.3×15×n/1000（g）其中：15代表一個(gè)平板需要營養(yǎng)瓊脂約15ml；n代表要做的培養(yǎng)基平板的數(shù)量1．計(jì)算：根據(jù)營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基的說明書了解營62．稱量：用普通天平準(zhǔn)確稱量出營養(yǎng)瓊脂粉的量，用量筒量出相應(yīng)的蒸餾水的量，要盡量準(zhǔn)確。2．稱量：用普通天平準(zhǔn)確稱量出營養(yǎng)瓊脂粉的量，用量筒量出相應(yīng)73．溶化：將營養(yǎng)瓊脂粉和蒸餾水倒入搪瓷缸中，于電爐上加熱溶化，邊加熱邊攪拌，沸騰時(shí)立即從電爐上拿下，等泡沫消失后再放在電爐上加熱，注意不能讓瓊脂溢出，煮沸2—3次。3．溶化：將營養(yǎng)瓊脂粉和蒸餾水倒入搪瓷缸中，于電爐上加熱溶化84．倒平板或倒試管分裝：若做平板培養(yǎng)基應(yīng)倒于培養(yǎng)皿中，每板約15ml左右，以剛好覆蓋平皿底為易。若做斜面培養(yǎng)基應(yīng)倒入試管中，量為試管的1/34．倒平板或倒試管分裝：若做平板培養(yǎng)基應(yīng)倒于培養(yǎng)皿中，每板約95．滅菌：用高壓滅菌器滅菌將平板培養(yǎng)基整齊地平放入高壓滅菌器的內(nèi)筒中，將試管口蓋上棉塞或橡膠塞，用紙包扎好，直立放入內(nèi)筒中，在121.3℃滅菌20-30min。滅菌完畢后，將平板培養(yǎng)基拿出平放于桌面，凝固前勿動；將試管培養(yǎng)基擺成斜面，凝固前勿動。5．滅菌：用高壓滅菌器滅菌將平板培養(yǎng)基整齊地平放入高壓滅菌器106．無菌檢驗(yàn)：隨機(jī)抽取幾個(gè)平板或試管培養(yǎng)基于溫箱中培養(yǎng)24小時(shí)，若無菌生長則為合格。6．無菌檢驗(yàn)：隨機(jī)抽取幾個(gè)平板或試管培養(yǎng)基于溫箱中培養(yǎng)24小117．備用：將合格的平板培養(yǎng)基和試管培養(yǎng)基放入冰箱，在0-4℃中保存?zhèn)溆谩?．備用：將合格的平板培養(yǎng)基和試管培養(yǎng)基放入冰箱，在0-4℃12（二）血液瓊脂培養(yǎng)基將滅菌的營養(yǎng)瓊脂冷至45～50℃，以無菌操作，加入5%～10%的無菌血液（或脫纖維血），然后傾注平皿或分裝試管制成斜面。（二）血液瓊脂培養(yǎng)基將滅菌的營養(yǎng)瓊脂冷至45～50℃，以無菌13（三）肉湯培養(yǎng)基1．成分牛肉膏3～5g，蛋白胨10g，氯化鈉5g，蒸餾水1000ml。2．制法將牛肉膏、蛋白胨、氯化鈉加蒸餾水后，加熱溶解。矯正pH至7.4～7.6，過濾分裝。置高壓蒸氣滅菌器內(nèi)，121.3℃滅菌20min即成。3．用途可供一般細(xì)菌生長，同時(shí)也是制作一般培養(yǎng)基的基礎(chǔ)原料。供營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌分離培養(yǎng)，亦可供溶血性的觀察和保存菌種。（三）肉湯培養(yǎng)基1．成分牛肉膏3～5g，蛋白胨10g，氯14（四）半固體培養(yǎng)基肉湯培養(yǎng)基中加入0.3%～0.5%瓊脂粉制成，用于菌種的保存或觀察細(xì)菌的運(yùn)動性。（四