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23本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)提請(qǐng)注意,聲明符合本文件時(shí)涉及專利——(1)與玉米抗絲黑穗病次主效位點(diǎn)玉米抗絲黑穗病基因連鎖的SNP位點(diǎn)、基于該位點(diǎn)的分子標(biāo)記LSdCAP2及其應(yīng)用,專利號(hào):玉米抗絲黑穗病多標(biāo)記分子輔助育種技術(shù)規(guī)程N(yùn)Y/T1432-2014玉米品種鑒定技由絲軸黑粉菌(Sphacelothecareiliana(Kühn)Clint.)侵染所引起研缽、核酸提取磨樣機(jī)、水浴鍋、移液器、低溫高速離心機(jī)和通風(fēng)選取農(nóng)藝性狀優(yōu)良但感或高感絲黑穗病的玉米自交系,且不具有bin2.09主效抗病位點(diǎn)/基因和5.2供體親本選取在田間表現(xiàn)為高抗絲黑穗病,且具有bin2.09主效抗病位點(diǎn)/基因和bin8.03次主效抗病位點(diǎn)的1為母本,以P1為父本,人工授粉雜交,獲得BC1F1世代雜交種子。BC1F1世代雜交種子樣品可以是種子的胚乳、幼苗的葉片等可用于DNA提取的玉米植物組織。樣品采集后立刻用于DNA提取或冷凍保存。采樣時(shí)應(yīng)記錄每個(gè)使用的分子標(biāo)記為玉米抗絲黑穗病bin2.09主效和bin8.03次主效QTL所在位點(diǎn)的連鎖標(biāo)記或抗病基LSdCAP8和DNdCAPS8.03-1標(biāo)記酶切產(chǎn)物大小分別為73/20bp,22/114bp,19/113bp和114/23將6.9中獲得的單株進(jìn)行自交至BC3F4代,從中選擇農(nóng)藝性狀與P1相似的材料進(jìn)行系選,絲黑穗病抗序號(hào)15’CTGCAG3’3’GACGTC5’T/C25’ACTGGN3’3’TGACCN5’T

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