復(fù)方丹參片檢驗(yàn)方法驗(yàn)證方案

復(fù)方丹參片檢驗(yàn)方法確認(rèn)方案文件編號(hào)：起草人批準(zhǔn)人

部門(mén) 簽名 日期xxxxxxx概述：復(fù)方丹參片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)為已驗(yàn)證的法定標(biāo)準(zhǔn)，含量測(cè)定方法為HPLC法，其它項(xiàng)目為試驗(yàn)室日常測(cè)試步驟。依據(jù)2023年版《藥品質(zhì)量治理標(biāo)準(zhǔn)》的要求，需要對(duì)含量測(cè)定檢驗(yàn)方法進(jìn)展確認(rèn)，包括專(zhuān)屬性、周密度、準(zhǔn)確度三個(gè)方面。目的：確認(rèn)復(fù)方丹參片含量測(cè)定檢驗(yàn)方法在我公司質(zhì)量把握試驗(yàn)室的適用性。適用范圍：復(fù)方丹參片含量測(cè)定檢驗(yàn)方法條件：檢驗(yàn)操作規(guī)程齊全設(shè)備相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程齊全檢驗(yàn)、檢測(cè)儀器均已校驗(yàn)含量測(cè)定含丹參以丹參酮IIA計(jì)檢測(cè)方法確認(rèn)確認(rèn)要求及標(biāo)準(zhǔn)〔〕硅膠為填充劑；以甲醇-水-〔73∶27〕為流淌相；檢測(cè)波長(zhǎng)為270nm。理論板數(shù)以丹IIA20231.5。專(zhuān)屬性空白樣品溶液在與丹參酮IIA積小于比照品峰面積的3%。周密度RSD應(yīng)不得超過(guò)2.0%準(zhǔn)確度丹參酮IIA的加樣回收率98.0%～102%，回收率的RSD小于2.0%。材料和分析方法試劑：IIA來(lái)源：復(fù)方丹參片復(fù)方丹參片來(lái)源：試劑名稱(chēng)：甲醇來(lái)源：儀器：高效液相色譜儀型號(hào)：型號(hào)：6.2.3．溶液配置：

6.2.3.1.比照品溶液配置取丹參酮IIA比照品適量，周密稱(chēng)定，置棕色量瓶中，加甲醇制成每1ml含40微克的溶液即得。6.2.3.2供試品溶液 取復(fù)方丹參片20片，除去糖衣片，周密稱(chēng)定，研細(xì)，取約1g，周密稱(chēng)定后置具塞棕色瓶中，周密參與甲醇25ml，密塞稱(chēng)定重量，超聲處理15空白物溶液取空白物20片，除去糖衣片，周密稱(chēng)定，研細(xì)，取約1g，周密25ml15分鐘，放冷，貯存液A周密稱(chēng)取丹參酮IIA醇制成每1ml含120微克的溶液即得。6.2.4分析方法：用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-水-〔7327〕為流淌相；檢測(cè)波長(zhǎng)為270nm10ul。檢驗(yàn)方法確實(shí)認(rèn)專(zhuān)屬性-水-〔73∶27〕為流淌相；檢測(cè)波長(zhǎng)為270nm。理論丹參酮IIA峰計(jì)算應(yīng)不低于2023，分別1.5。測(cè)定分別周密吸取比照品溶液與空白樣品溶液各1，注入液相色譜儀，測(cè)定，記錄色譜圖IIA3%。周密度重復(fù)性6針〔10ul〕，記錄色譜圖。確認(rèn)合格標(biāo)準(zhǔn)6針比照品溶液、供試品溶液峰面積的RSD應(yīng)不得超過(guò)2.0%。中間周密度在不同的日期和不同的儀器，不同檢驗(yàn)員〔3人〕按6.2.3.2的方法重制備樣液，分別計(jì)算含量。RSD2.0%，3RSD應(yīng)不得超過(guò)2.0%。溶液編號(hào)容量瓶〔溶液編號(hào)容量瓶〔參與貯存液〔ml〕A參與空白比照物〔g〕ml〕進(jìn)樣濃度〔／ml〕ug16.012528.827.012533.636.00.8203648.012538.457.00.8204269.012543.2710.012548811.012552.899.00.82054溶液1～9:將表2中規(guī)定量的貯存液A25ml15分鐘，放冷，再稱(chēng)定重量并補(bǔ)足，搖勻?yàn)V過(guò)取續(xù)濾液置棕色瓶中即得。周密吸取9份樣液各10ul，注入液相色譜儀，測(cè)定，計(jì)算回收率計(jì)算公式：計(jì)算公式：測(cè)得值100%回收率〔%〕6.3.3.3．確認(rèn)合格標(biāo)準(zhǔn)RSD2.0%。=參與的比照品量丹參酮IIA的加樣回收率收率98.0%～102%，回收率含量測(cè)定含丹參以丹酚酸B計(jì)檢測(cè)方法確認(rèn)確認(rèn)要求及標(biāo)準(zhǔn)〔〕硅膠為填充劑；以乙腈－甲醇－甲酸－水〔10：30：1：59〕為流淌相；檢測(cè)波長(zhǎng)為286nmB4000。B3%。周密度RSD應(yīng)不得超過(guò)2.0%IIA98.0%～102%RSD小于2.0%。材料和分析方法試劑：IIA復(fù)方丹參片來(lái)源：來(lái)源：來(lái)源：

空白比照物：按復(fù)方丹參片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)制法自制〔缺丹參〕儀器：高效液相色譜儀型號(hào)： 編號(hào)： 色譜柱編號(hào)：溶液配置：B比照品

編號(hào)：適量，周密稱(chēng)定，加水制成每1ml含60微克的溶液即得。7.2.3.2供試品溶液取復(fù)方丹參片200.15g，周密稱(chēng)定后置50ml具塞量瓶中，加水適量，超聲處理30分鐘，放冷，加水至刻度，搖勻離心取上清夜即得。7.2.3.3.空白物溶液取空白比照物20片，除去糖衣片，周密稱(chēng)定，研細(xì)，取約0.15g，周密稱(chēng)定后置50ml具塞量瓶中，加水適量，超聲處理30分鐘，放冷，加水至刻度，搖勻離心取上清夜即得。7.2.4分析方法：用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈－甲醇－甲酸－水〔10：30：1：59〕為流淌相；檢測(cè)波長(zhǎng)為286nm；進(jìn)樣量為10ul。檢驗(yàn)方法確實(shí)認(rèn)專(zhuān)屬性醇－甲酸－水〔10：30：1：59〕為流淌相；檢測(cè)波長(zhǎng)為286nm。理論板數(shù)以丹酚酸B4000。測(cè)定分別周密吸取比照品溶液與空白樣品溶液各1，注入液相色譜儀，測(cè)定，記錄色譜圖。B3%。周密度重復(fù)性6針〔10ul〕，記錄色譜圖確認(rèn)合格標(biāo)準(zhǔn)6針比照品溶液、供試品溶液峰面積的RSD應(yīng)不得超過(guò)2.0%。中間周密度在不同的日期和不同的儀器，不同檢驗(yàn)員〔2人〕按7.2.3.2的方法重制備樣液，分別計(jì)算含量。RSD2.0%，3RSD應(yīng)不得超過(guò)2.0%。準(zhǔn)確度取丹酚酸B比照品適量，周密稱(chēng)定，置棕色量瓶中，加水制成每1ml含60微克的溶液。取上述〔7.2.3.2〕研細(xì)的復(fù)方丹參片樣品0.09g，周密稱(chēng)定10份，分別置于50ml具塞量瓶中，并分別參與比照品溶液0、10、10、10、20、20、20、30、30、30ml，參與適量水超聲處理30分鐘，放冷后用水補(bǔ)足至刻度，搖勻離心取上清夜即得。周密吸取10份樣液各10ul，注入液相色譜儀，測(cè)定，計(jì)算回收率。計(jì)算公式：

回收率〔%〕

參與的比照品量

100%7.3.3.3B98.0%～102%RSD小于2.0%。含量測(cè)定含三七以人參皂苷Rg1、人參皂苷Rb1、人參皂苷R1、人參皂苷Re計(jì)檢測(cè)方法確認(rèn)確認(rèn)要求及標(biāo)準(zhǔn)〔〕AB1波長(zhǎng)為203nm。理論板數(shù)以人參皂苷Rg1峰計(jì)算應(yīng)不低于6000，人參皂苷Rg1與人參Re1.8.2時(shí)間〔分鐘〕流淌相A〔％〕流淌相B〔％〕0～3535～551919～298181～7155～70297170～10029～4071～603%。周密度RSD應(yīng)不得超過(guò)2.0%Rg1Rb1R1Re率大于收率98.0%～102%，回收率的RSD小于2.0%。材料和分析方法試劑：

編號(hào)：號(hào)：比照品：丹參酮IIA樣品： 試劑名稱(chēng)：乙腈

編號(hào)：

試劑名稱(chēng)：甲醇 批號(hào)：空白比照物：按復(fù)方丹參片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)制法自制〔缺三七〕溶液配置：

來(lái)源：Rg1Rb1參皂苷R1Re比照品適量，加70%甲醇制成每1ml含參皂苷Rg1及人參皂苷Rb1各0.2mg、人參皂苷R1及人參皂苷Re各0.05mg的混合溶液即得。8.2.3.2供試品溶液取復(fù)方丹參片10片，除去糖衣片，周密稱(chēng)定，研細(xì)，1g50ml70%50ml3070%8.2.3.3.101g，周密50ml70%50ml30分鐘，放70%8.2.4分析方法：AB120ul。檢驗(yàn)方法確實(shí)認(rèn)專(zhuān)屬性AB2203nm。理論板數(shù)以人參皂苷Rg1峰計(jì)算應(yīng)不低于6000，人參皂苷Rg1與人參皂苷Re的分別度應(yīng)大于1.8.測(cè)定分別周密吸取比照品溶液與空白樣品溶液各2，注入液相色譜儀，測(cè)定，記錄色譜圖。3%。周密度重復(fù)性6圖。確認(rèn)合格標(biāo)準(zhǔn)6針比照品溶液、供試品溶液峰面積的RSD應(yīng)不得超過(guò)2.0%。中間周密度在不同的日期和不同的儀器，不同檢驗(yàn)員〔3人〕按8.2.3.2的方法重制備樣液，分別計(jì)算含量。RSD2.0%，3RSD應(yīng)不得超過(guò)2.0%。準(zhǔn)確度周密稱(chēng)取人參皂苷Rg1比照品、人參皂苷Rb1比照品、人參皂苷R1對(duì)照品、人參皂苷Re比照品適量，加70%甲醇制成每1ml含參皂苷Rg1及人參皂苷Rb1各0.2mg、人參皂苷R1及人參皂苷Re各0.05mg的比照品溶液。取上述〔8.2.3.2〕細(xì)的復(fù)方丹參片樣品0.6g，周密稱(chēng)定10份，分別置于具塞量瓶中，并分別參與比照品溶液0、10、10、10、20、20、20、30、30、30ml，超聲處理30分