火炬樹樹葉提取物清除自由基作用研究

火炬樹樹葉提取物清除自由基作用研究

生物體系中包含大量脂質(zhì)氧化和自由基反應(yīng)?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)證明:衰老、癌癥及炎癥等疾病與體內(nèi)脂質(zhì)過氧化和自由基有直接關(guān)系。有些自由基會使體內(nèi)的脂質(zhì)與蛋白質(zhì)發(fā)生鏈式反應(yīng),造成相關(guān)細胞的結(jié)構(gòu)與功能的破壞。氧化物和中間產(chǎn)物會導(dǎo)致生物膜、酶、組織、基因等損壞,使人體發(fā)生病變。因此,對清除自由基和抑制脂質(zhì)過氧化效應(yīng)的探討已得到普遍關(guān)注?；鹁鏄?RhusTyphinceLinn)屬漆樹科植物1材料和方法1.1精細化學(xué)品分析火炬樹樹葉采于青島市,洗凈晾干后,粉碎過80目篩備用。茶多酚,純度>95%,福建松溪生物化工廠。亞油酸,上海來澤精細化學(xué)品廠,分析純。叔丁基對苯二酚自由基(TBHQ),法國羅地亞公司,食品級。二苯代苦味酰自由基(DPPH),東京化成工業(yè)株式會社,分析純。乙醇、乙酸乙酯、硫代巴比妥酸等均為分析純。UV-754型紫外可見分光光度計,上海分析儀器總廠。OX-1型化學(xué)發(fā)光分析儀(TohokoElectronicIndustrialCo.Ltd.Japan)1.2實驗方法1.2.1乙醇提取、蒸發(fā)稱取干燥后磨碎的火炬樹樹葉50g,用500ml甲醇在常溫下震蕩浸提6h,過濾,濾渣同法再提取一次,合并濾液,棄去濾渣。將所得濾液用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器蒸發(fā)至粘稠后,轉(zhuǎn)移至真空干燥器干燥。然后,將干燥物用二次蒸餾水溶解、過濾、棄去沉淀,濾液用乙酸乙酯提取,收集乙酸乙酯相和水相溶液。分別將水相溶液和乙酸乙酯相溶液減壓濃縮,并于真空干燥器內(nèi)干燥得火炬樹樹葉水相提取物及乙酸乙酯相提取物。1.2.2抗逆效應(yīng)的測定1.2.2.dpph提取液ai火炬樹樹葉對DPPH自由基的清除作用,參照文獻[3,4]的方法,具體操作如下:取2mlDPPH有機溶液(10式中:Ai=2mlDPPH溶液+2ml提取液吸光度。Aj=2ml提取液+2ml溶劑的吸光度Ac=2mLDPPH溶液+2ml溶劑的吸光度1.2.2.丙二醛生成量的測定配制2.5%的亞油酸溶液作為底物,分別加入占底物質(zhì)量0.02%的火炬樹樹葉提取物、茶多酚及TBHQ,同時以不加抗氧化物的底物作為空白,混勻后量于(40±1)℃的生化培養(yǎng)箱中,定時取樣按文獻[5]的方法測定丙二醛的生成量,其生成量的多少以吸光度(A)來表示。A值越小,其抗氧化能力越強。1.2.2.3.提取對三酚類化合物的o2結(jié)果與討論2.1火災(zāi)干燥提取物對dpph自由基的去除作用火炬樹樹葉提取物對DPPH自由基的清除能力以清除率來表示,清除率越高,說明提取物的抗氧化作用越強。在含有2.5×102.2提取物的抑制作用火炬樹樹葉各相提取物對亞油酸的脂質(zhì)過氧化體系均有抑制能力,其結(jié)果見表1。各相提取物對其均有良好的抑制作用,其作用隨提取物濃度升高而增強。但同一濃度的乙酸乙酯相提取物對亞油酸脂質(zhì)過氧化體系的抑制作用明顯優(yōu)于水相提取物,而且在相同濃度下,乙酸乙酯相提取物的抗氧化能力強于天然抗氧化劑茶多酚,可與合成抗氧化物TBHQ媲美,但水相提取物的抗氧化能力不及茶多酚和TBHQ。2.3燃燒樹葉片的水相提取物對火炬樹樹葉水相提取物對堿性連苯三酚體系產(chǎn)生的O由表2可知,火炬樹樹葉水相提取物對O3火炬樹生長現(xiàn)出的分離自由基因子3.1火炬樹樹葉各相提取物對DPPH自由基都有很強的清除作用,且乙酸乙酯相提取物的清除能力強于水相提取物,其清除能力隨提取物濃度的增加而增大,但當濃度達一定值之后,其清除率不再變化。3.2火炬樹樹葉各相提取物對亞油酸脂質(zhì)過氧化體