獸醫(yī)微生物學(xué)課件-革蘭氏陽性無芽孢桿菌

革蘭氏陽性無芽孢桿菌丹毒絲菌屬本屬只有一種，即豬丹毒絲菌，是豬丹毒病的病原體，通稱豬丹毒桿菌。DNA的G十Cmol/%為36～40。形態(tài)與染色本菌為直或稍彎曲的細(xì)桿菌，兩端鈍圓，大小0.2～0.4um×0.8～2.5um，單在或呈V形、堆狀或短鏈排列，易形成長絲狀。

G+，在老齡培養(yǎng)物中菌體著色能力較差，常呈陰性。無鞭毛、無莢膜、不產(chǎn)生芽孢。培養(yǎng)與生化特性本菌為微需氧菌。pH在6.7～9.2范圍內(nèi)均可生長，最適pH為7.2～7.6，生長溫度為5~42℃，最適溫度為30～37℃。在普通瓊脂培養(yǎng)基和普通肉湯中生長不良，如加入0.2%～0.5%葡萄糖或5%～10%血液、血清則生長茂盛；在血瓊脂平皿上經(jīng)37℃24h培養(yǎng)可形成濕潤、光滑、透明、灰白色、露珠樣的圓形小菌落，并形成α溶血環(huán)。在麥康凱培養(yǎng)基不生長。在肉湯中呈輕度渾濁，有少量白色黏稠沉淀。不形成菌膜和菌環(huán)。在加有5%馬血清和1%蛋白胨水的糖培養(yǎng)基中可發(fā)酵葡萄糖、果糖和乳糖，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣;不發(fā)酵甘露醇、山梨醇、肌醇、水楊素、鼠李糖、蔗糖、漁藻糖、棉實糖、菊糖。產(chǎn)生H2S，不產(chǎn)生靛基質(zhì)和接觸酶，不分解尿素。甲基紅及VP試驗陰性。明膠穿刺生長特殊，沿穿刺線橫向四周生長，如試管刷狀，但明膠不液化。抵抗力本菌對腐敗和干燥環(huán)境有較強(qiáng)的抵抗力。

在飲水中可存活5d，在污水中可存活15d，在深埋的尸體中可存活9個月。在病死豬熏制的火腿中3個月后仍可在深部分離出活菌。對熱和直射光較敏感，70℃經(jīng)5～15min可完全殺死。對常

用消毒劑抵抗力不強(qiáng)，0.5%甲醛數(shù)十分鐘可殺

死。用10%生石灰乳或0.1%過氧乙酸涂刷墻壁和噴灑豬圈是目前較好的消毒方法。本菌可耐0.2%的苯酚，對青霉素很敏感?？乖Y(jié)構(gòu)與血清型本菌最初被分為A、B、N型。現(xiàn)通用阿拉伯?dāng)?shù)字為型號，用英文小寫字母表示亞型，目前共有25個血清型和1a、1b及2a、2b亞型。分型是依據(jù)菌體可溶性的耐熱肽聚糖的抗原性。大多數(shù)菌株為1型和2型(相當(dāng)于以前的A型和B型)，從急性敗血癥分離的菌株多為la型，從亞急性及慢性病病例分離的則多為2型。致病機(jī)理與致病性本菌通過消化道感染，進(jìn)入血流，而后定殖在局部或引致全身感染。已知無致病力菌株對消化道上皮細(xì)胞黏附力差，且易被吞噬細(xì)胞消化。但致病菌株的黏附素及抗吞噬物質(zhì)尚不清楚。末發(fā)現(xiàn)外毒素，細(xì)菌產(chǎn)生的神經(jīng)氨酸酶是

可能的毒力因子，菌株的毒力與該酶的量有相關(guān)性，酶的存在有助于菌體侵襲宿主細(xì)胞。在細(xì)菌神經(jīng)氨酸酶的作用下，宿主組織黏蛋白、血纖維蛋白原等被除去N-乙酚神經(jīng)氨酸，從而減弱了黏蛋白籌對機(jī)體的保護(hù)作用。感染動物能產(chǎn)生神經(jīng)氨酸酶抗體，已證實實驗動物通過對該酶的主動或被動免疫可獲得保護(hù)。豬

丹

毒豬

丹

毒慢性：最普遍特征是關(guān)節(jié)炎。有的出現(xiàn)心功能不全。本菌在自然界分布十分廣泛，可寄生于哺乳動物、禽和魚類。其中豬分離率最高，可引致3～12月齡豬豬丹毒;3～4周歲的羔羊可致慢性多發(fā)性關(guān)節(jié)炎;雞與火雞感染后呈現(xiàn)衰弱和下痢;鴨可出現(xiàn)敗血癥，并侵害輸卵管。小鼠和鴿子最易感，實驗感染時皮下注射2～5d內(nèi)呈敗血死亡;家兔和豚鼠抵抗力較強(qiáng)。人可經(jīng)外傷感染，發(fā)生皮膚病變，稱"類丹毒"，病狀與人的丹毒病相似，但后者由化膿鏈球菌所致。從健康豬的扁桃體、禽類及水生動物體表均可分離出不同血清型的菌株，這些菌株對小鼠和仔豬有較強(qiáng)的致病力。已從70多種動物中分離到本菌，帶菌率和發(fā)病率與飼養(yǎng)條件、氣候變化及豬齡大小有密切關(guān)系，是一種“自源性傳染病”。微生物學(xué)診斷1、顯微鏡檢查

可采取高熱期病豬耳靜脈血作涂片，染色、鏡檢。死后可采取心血及新鮮肝、脾、腎、淋巴結(jié)等制成涂片，革蘭氏染色鏡檢。

如發(fā)現(xiàn)少量典型桿菌，可初步確診。如為慢性心

內(nèi)膜炎病例，可用心臟瓣膜增生物涂片，鏡檢。

羔羊患關(guān)節(jié)炎病時，可檢查關(guān)節(jié)滑膜囊液。2、分離培養(yǎng)

分離培養(yǎng)時可用含有0.2%(W/V)的葡萄糖或5%～10%無菌馬血清(W/V)的半固體瓊脂培養(yǎng)基。為提高分離率可采用含有1/100萬結(jié)晶紫、l/5萬疊氮鈉的10%馬血清肉湯及瓊脂平板。也可在馬丁肉湯中加入新霉素(400ug/ml)或萬古霉素(70ug/ml)，抑制

某些雜菌生長。3、細(xì)菌鑒定

主要考慮與李氏桿菌鑒別診斷，區(qū)別要點見本章李氏桿菌有關(guān)內(nèi)容?？捎螟澴蛹∪庾⑸渑囵B(yǎng)物，死后取心血和脾臟涂片，染色、鏡檢，并同時分離細(xì)菌。血清型鑒定時，將待鑒定菌株的純培養(yǎng)物加入1%甲醛滅活，經(jīng)

洗滌、高壓、離心處理后制成沉淀原，與模式

菌株的高免血清作瓊脂擴(kuò)散試驗。4、血清學(xué)診斷可采用生長凝集試驗診斷，是根據(jù)豬丹毒

桿菌在生長繁殖中能與該菌抗血清發(fā)生特異性凝集設(shè)計的。即在含有抗豬丹毒血清的培養(yǎng)基中接種被檢組織液或純培養(yǎng)物，置37℃培養(yǎng)18～24h，觀察有無細(xì)菌凝集。檢測豬血清時，不

發(fā)病豬凝集價在1:20以下，發(fā)病或有免疫力的

豬凝集價在1:320以上。如檢測患豬組織或分

離的待檢菌，有凝集者即判為陽性。免疫與治療本菌具有良好的免疫原性，目前我國應(yīng)用豬丹毒GC42或C4T(l0)弱毒菌株制成的凍干苗，用

20%鋁膠生理鹽水稀釋后，在仔豬斷奶后接種5～7億活菌，有良好的免疫力。若用以無加倍口服也有效。應(yīng)用滅活苗也有較好的保護(hù)效果。世界衛(wèi)生組織提出的豬丹毒滅活苗的標(biāo)準(zhǔn)為：以干燥菌苗0.8mg接種小鼠，免疫2～3周后，攻擊強(qiáng)毒菌50%以上獲得保護(hù)，為1個單位，