商陸醋炙前后對動物黏膜刺激性的變化

商陸醋炙前后對動物黏膜刺激性的變化

商陸系商陸科植物。材料表面光光度計和酸度計SPECTRAMAX190酶標(biāo)儀(美國AD公司);SP-754PC型紫外-可見分光光度計(上海光譜儀器有限公司);80-2B離心機(jī)(上海安亨科學(xué)儀器廠);S10手提高速勻漿機(jī)(廠商:SCIENTZ,由上海京工實業(yè)有限公司提供),PHS-3C型酸度計(上海理達(dá)儀器廠);BP211D電子天平(德國Sartorius公司)。營藥房集團(tuán)有限公司凱基Braford蛋白含量檢測試劑盒(南京凱基生物科技發(fā)展有限公司,批號20100611);生理鹽水(南京小營藥業(yè)集團(tuán)有限公司,批號2010031702);甲醛(分析純,上海久億化學(xué)試劑有限公司,批號20100301),氫氧化鉀(分析純,南京化學(xué)試劑有限公司,批號10041320246),甲醇(色譜純,國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司,批號T20080716),鹽酸(分析純,上海中試化工總公司,批號20100208)。植物商陸的制備生商陸購自安徽省亳州市永剛飲片有限公司(山西產(chǎn),批號20100122),經(jīng)本院中藥鑒定教研室王春根教授鑒定為商陸科植物商陸分別取生商陸、醋商陸飲片100g,加水800mL煎煮30min,過濾。濾渣再加水600mL煎煮30min,過濾。合并濾液,濃縮至100mL,得1g·mL美國scxk滬ICR雄性小鼠,體重(20±2)g;SD雄性大鼠,體重(200±20)g,均為SPF級,由上海斯萊克實驗動物有限責(zé)任公司提供,許可證號SCXK(滬)2007-0005。大耳白種家兔,雌雄不限,體重(1.5±0.2)kg,健康,雙眼清亮無紅腫,由南京市青龍山動物繁殖場提供,許可證號SCXK(蘇)2007-0008。方法分組和分組ICR小鼠實驗前禁食12h(自由飲水),按體重隨機(jī)分為9組,每組6只。分別為生理鹽水組,生商陸水煎液1.17,11.7,23.4,35.1g·kg分組及分組ICR小鼠實驗前禁食12h(自由飲水),按體重隨機(jī)分為7組,每組6只。分別為生理鹽水組,生商陸水煎液1.2,11.7,23.4g·kgPGEM為PGE經(jīng)過多次給藥后，生商陸和醋商陸大鼠胃的比較SD大鼠按體重隨機(jī)分為3組,每組6只。分別為生理鹽水組、生商陸水煎液16g·kg測定胃腸道體積和胃酸程度按常規(guī)方法準(zhǔn)確量取各組胃液離心上清液體積,并記錄。胃液中的酸度以pH表示,pH酸度計測定。半睡眠癥取各組胃液離心上清液各0.5mL,加入2mL氫氧化鉀甲醇溶液(0.5mol·L酶活性測定：白鼠尾胃蛋白酶活性的測定按Mett法進(jìn)行生商陸和醋商島對兔子眼膜刺激性的比較不同濃度的兔實驗取生商陸飲片適量,粉碎后過200目篩,用生理鹽水分別配成7.5%,10%,12.5%,15%的混懸液,并調(diào)節(jié)pH至中性,備用。取家兔隨機(jī)分組,分為生理鹽水組和各濃度生品組。將兔固定于兔籠內(nèi),實驗時撩起上下眼瞼,使成杯狀,將藥液分別滴加到兔眼中,每只眼給藥50μL,其中生理鹽水組給生理鹽水。給藥后,輕輕使上下眼瞼被動閉合10s,使藥液和眼充分接觸,10min后立即用20mL左右生理鹽水沖洗眼睛至眼中無任何異物,隨后觀察3h內(nèi)兔眼情況,拍照記錄家兔眼的刺激反應(yīng)情況并打分評定眼刺激性強(qiáng)度,家兔眼結(jié)膜刺激性試驗評分標(biāo)準(zhǔn)見表1,2。配制混懸液的眼刺激性對比研究取生商陸和醋商陸飲片適量,粉碎后過200目篩,用生理鹽水分別配成15%濃度的混懸液,并調(diào)節(jié)pH至中性,備用。取家兔隨機(jī)分組,分為生理鹽水組和生商陸、醋商陸組,按結(jié)果給藥后，生商陸和醋商陸劑量的比較研究病理切片結(jié)果見圖1,單次大劑量給藥后商陸會造成的病變主要位于胃。生商陸35.1g·kg生商陸和醋商陸的單次高劑量給藥后，大鼠胃組織的質(zhì)量和pge單次給藥后,與生理鹽水組比較,生商陸高劑量組小鼠胃體質(zhì)量顯著減輕(商陸高劑量組胃體質(zhì)量顯著增加(經(jīng)過多次給藥后，生商陸和醋商陸的小鼠胃的比較多次給藥后,與生理鹽水組比較,生商陸組大鼠胃液量顯著增加(生商陸和醋商島對兔子眼膜刺激性的比較不同濃度兔眼刺激性試驗在一定濃度范圍內(nèi),生商陸混懸液的濃度和家兔的眼刺激性強(qiáng)度呈現(xiàn)確切的量-效關(guān)系,即濃度越高,對兔眼的刺激性越強(qiáng)。濃度達(dá)到15%時,對兔眼結(jié)膜具有重度刺激性,見表5。相同濃度的生商陸和醋商陸的混合懸浮液對土家的眼刺激性進(jìn)行了比較與15%生商陸混懸液組比較,15%醋商陸混懸液組對兔眼的刺激性強(qiáng)度顯著減弱(商陸小劑量多次給藥的安全性商陸臨床中毒癥狀主要表現(xiàn)為胃腸道反應(yīng),如惡心嘔吐、腹痛腹瀉,嚴(yán)重者可出現(xiàn)胃腸道糜爛、潰瘍及出血等。本文通過小鼠單次大劑量給藥后消化系統(tǒng)臟器病理切片檢查可知,這種急性刺激性作用主要作用于胃。本文亦對小鼠臨床等效劑量多次給藥后的消化系統(tǒng)臟器進(jìn)行了病理切片檢查,各部位均未發(fā)現(xiàn)明顯病變?？紤]商陸小劑量多次給藥后毒性并不明顯,文中后續(xù)所有實驗均采用單次(或多次)大劑量給藥后的作用。胃黏膜細(xì)胞分泌的PGE除了傳統(tǒng)的口服中毒外,商陸粉末與眼、鼻和口腔黏膜接觸會出現(xiàn)紅腫疼痛等局部刺激性反應(yīng)。這種刺激性可能是商陸中草酸鈣針晶的物理刺激和某些成分的化學(xué)刺激所引起的炎癥反應(yīng),關(guān)于其刺激性作用的機(jī)制正在深入研究中。本文通過家兔眼結(jié)膜刺激性試驗考察了商陸醋制前后的這種刺激性作用變化。結(jié)果表明,商陸經(jīng)醋制后,對家兔眼結(jié)膜的刺激性顯著減弱。本研究結(jié)果顯示,商