杭州免疫學(xué)會(huì)議發(fā)言

杭州免疫學(xué)會(huì)議發(fā)言杭州免疫學(xué)會(huì)議發(fā)言第1頁(yè)2引言—研究目標(biāo)靜脈免疫球蛋白(IVIG)被廣泛應(yīng)用于感染性和免疫相關(guān)性疾病治療。IVIG在新生兒尤其早產(chǎn)兒感染預(yù)防與重癥感染治療中療效確切，但其安全性也日益受到關(guān)注。多年研究發(fā)覺足月新生兒應(yīng)用大劑量IVIG后，T、B淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)下降。而相關(guān)早產(chǎn)兒應(yīng)用IVIG對(duì)其免疫功效影響研究資料較少。本研究目標(biāo)：采取體外試驗(yàn)，選擇不一樣劑量IVIG作用于早產(chǎn)兒臍血單個(gè)核細(xì)胞，觀察其對(duì)Th細(xì)胞和調(diào)整性T細(xì)胞功效影響，從免疫學(xué)角度探討IVIG早產(chǎn)兒用藥安全性。杭州免疫學(xué)會(huì)議發(fā)言第2頁(yè)3材料與方法—研究對(duì)象

選擇年6月～年12月在青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院從屬醫(yī)院母孕32～34周娩出早產(chǎn)兒15例為研究對(duì)象，出生體重1300g～2450g，平均(1923±349)g。其母親分娩前4周內(nèi)無顯著感染史，未使用免疫增強(qiáng)或抑制劑等藥品。全部受試早產(chǎn)兒母親均知情同意。杭州免疫學(xué)會(huì)議發(fā)言第3頁(yè)4材料與方法—研究方法標(biāo)本采集CBMC制備CBMC培養(yǎng)(設(shè)置A組、B組、C組）CD4+CD25+Foxp3+Treg細(xì)胞IFN-r、IL-4、IL-10、TGF-β1杭州免疫學(xué)會(huì)議發(fā)言第4頁(yè)5材料與方法—分

組IVIG濃度選擇

37℃、飽和濕度、5%CO2條件培養(yǎng)72hA組（近生理狀態(tài)組）B組（低劑量組）C組（高劑量組）6mg/ml9mg/ml12mg/ml杭州免疫學(xué)會(huì)議發(fā)言第5頁(yè)6材料與方法—統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采取SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。試驗(yàn)數(shù)據(jù)呈正態(tài)分布且方差齊，以

x±s表示。采取單原因方差分析，LSD檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＜0.01為差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。杭州免疫學(xué)會(huì)議發(fā)言第6頁(yè)7結(jié)果組別例數(shù)IFN-γIL-4A組15175.68±86.8229.04±8.27▲B組15124.51±56.0618.01±5.72C組1532.59±26.82＊14.44±5.18注：＊與B組和A組比較,P<0.01；▲與B組和C組比較，P<0.01表1不一樣濃度IVIG對(duì)早產(chǎn)兒臍血CBMC分泌IFN-γ及IL-4水平影響1、不一樣濃度IVIG對(duì)早產(chǎn)兒臍血CBMC分泌IFN-γ及IL-4水平影響杭州免疫學(xué)會(huì)議發(fā)言第7頁(yè)8結(jié)果組別例數(shù)IFN-γ/IL-4A組155.61±2.38B組158.22±4.21☆

C組152.41±1.72△

表2不一樣濃度IVIG對(duì)CBMC上清液IFN-γ/IL-4比值改變影響注：△與B組和A組比較，P<0.01；☆與A組比較，P<0.05.2、不一樣濃度IVIG對(duì)CBMC上清液IFN-γ/IL-4比值改變影響杭州免疫學(xué)會(huì)議發(fā)言第8頁(yè)9結(jié)果020406080100120140160180200IFN-γIL-4A組B組C組圖1不一樣濃度IVIG對(duì)CBMC分泌細(xì)胞因子影響0123456789A組B組C組A組B組C組圖2不一樣濃度IVIG對(duì)CBMC上清液IFN-γ/IL-4比值改變影響杭州免疫學(xué)會(huì)議發(fā)言第9頁(yè)10結(jié)

果3、IVIG對(duì)早產(chǎn)兒CBMC體外培養(yǎng)后CD4+CD25+Foxp3+Treg細(xì)胞表示影響:

試驗(yàn)顯示：早產(chǎn)兒CBMC在不一樣濃度IVIG干預(yù)下，各組CD4+CD25+Foxp3+Treg細(xì)胞表示率比較均無顯著性差異(P均>0.05)。杭州免疫學(xué)會(huì)議發(fā)言第10頁(yè)11結(jié)

果4、IVIG對(duì)早產(chǎn)兒CBMC體外產(chǎn)生IL-10和TGF-β1水平影響：

C組CBMC分泌IL-10水平顯著低于B組(P<0.05)，顯著低于A組(P<0.01)；B組CBMC分泌IL-10水平也顯著低于A組(P<0.05)。

C組CBMC分泌TGF-β1水平顯著低于A組(P<0.01)，但與B組比較無顯著性差異(P>0.05)；B組CBMC分泌TGF-β1水平顯著低于A組(P<0.05)。

杭州免疫學(xué)會(huì)議發(fā)言第11頁(yè)12圖3

IVIG對(duì)早產(chǎn)兒CBMC體外培養(yǎng)后CD4+CD25+Foxp3+Treg

細(xì)胞表示影響結(jié)果圖4IVIG對(duì)早產(chǎn)兒CBMC體外培養(yǎng)后IL-10和TGF-β1水平影響杭州免疫學(xué)會(huì)議發(fā)言第12頁(yè)13討論IVIG除免疫替換外可經(jīng)過各種機(jī)制發(fā)揮免疫調(diào)整作用、用于治療各種免疫相關(guān)性疾病

中和去除致病抗原，尤其是超抗原

改變免疫復(fù)合物特征，降低免疫復(fù)合物沉積

免疫封閉巨噬細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞，抑制巨噬細(xì)胞吞噬功效和B淋巴細(xì)胞活化

恢復(fù)獨(dú)特型-抗獨(dú)特型網(wǎng)絡(luò)，抑制本身抗體產(chǎn)生

抑制T淋巴細(xì)胞活化，降低各種細(xì)胞因子產(chǎn)生等杭州免疫學(xué)會(huì)議發(fā)言第13頁(yè)14新生兒（包含早產(chǎn)兒）Thl/Th2功效狀態(tài)特點(diǎn)

足月兒T淋巴細(xì)胞功效呈生理性低下狀態(tài)，且其Th細(xì)胞亞群功效發(fā)育不平衡，Th2類細(xì)胞功效相對(duì)占優(yōu)勢(shì)

早產(chǎn)兒IFN-γ、IL-4水平顯著低于足月兒，以IFN-γ更為突出，即依然Th2亞群功效相對(duì)占優(yōu)勢(shì)

杭州免疫學(xué)會(huì)議發(fā)言第14頁(yè)15IVIG對(duì)新生兒T細(xì)胞功效影響：

體外試驗(yàn)顯示：IVIG10mg/ml能夠顯著抑制PHA-P誘導(dǎo)足月新生兒CBMC分泌IFN-γ，也能夠抑制CBMC中IL-4mRNA表示；同時(shí)抑制PHA誘導(dǎo)足月新生兒CBMC分泌IL-10與TGF-β1。

IVIG能抑制脂多糖誘導(dǎo)新生兒?jiǎn)魏司奘杉?xì)胞活化，從而抑制其分泌IL-6，而IL-6能促進(jìn)T細(xì)胞活化及向Thl、Th2分化，間接證實(shí)了IVIG對(duì)T細(xì)胞尤其是Thl、Th2細(xì)胞因子抑制作用杭州免疫學(xué)會(huì)議發(fā)言第15頁(yè)16

IVIG對(duì)新生兒肺炎似無顯著療效，大劑量使用IVIG可能因其最少短期內(nèi)含有抑制T、B淋巴細(xì)胞功效作用而加重新生兒期暫時(shí)免疫缺點(diǎn)。

對(duì)極低出生體重兒過大劑量或短期內(nèi)重復(fù)使用IVIG預(yù)防感染無顯著療效，而且可能加重暫時(shí)免疫低應(yīng)答反應(yīng)，影響細(xì)胞免疫自然發(fā)育過程。杭州免疫學(xué)會(huì)議發(fā)言第16頁(yè)17本試驗(yàn)研究結(jié)果：

與近似生理狀態(tài)組比較，低劑量IVIG組CBMC分泌IL-4顯著降低，而IFN-γ改變輕微；較大劑量IVIG組IFN-γ和IL-4水平皆顯著降低，但以IFN-γ降低更為顯著

結(jié)果提醒：IVIG可抑制早產(chǎn)兒臍血Thl、Th2細(xì)胞功效，而且與其劑量相關(guān)。低劑量時(shí)主要抑制Th2細(xì)胞功效，較大劑量時(shí)Th1、Th2細(xì)胞均受抑，但以Th1細(xì)胞更為顯著杭州免疫學(xué)會(huì)議發(fā)言第17頁(yè)18本試驗(yàn)研究結(jié)果顯示：

早產(chǎn)兒CBMC經(jīng)不一樣劑量IVIG干預(yù)后，其CD4+CD25+Foxp3+Treg細(xì)胞表示率無顯著差異。

較大劑量IVIG組CBMC分泌IL-10水平顯著低于低劑量組和近生理狀態(tài)組，低劑量組也顯著低于近生理狀態(tài)組；較大和低劑量組CBMC分泌TGF-β1水平均顯著低于近生理狀態(tài)組，但較大劑量組與低劑量組比較無顯著性差異。

結(jié)果提醒：IVIG對(duì)早產(chǎn)兒CBMC中天然Treg細(xì)胞數(shù)量并無影響。但I(xiàn)VIG能抑制早產(chǎn)兒CBMCIL-10和TGF-β1分泌。IVIG濃度越高，IL-10分泌越少；而TGF-β1當(dāng)IVIG到達(dá)一定濃度后其抑制分泌程度無深入加重。杭州免疫學(xué)會(huì)議發(fā)言第18頁(yè)19正常過敏體質(zhì)伴炎癥反應(yīng)過敏體質(zhì)未伴炎癥反應(yīng)123TH1/TH17/TH2/Treg細(xì)胞杭州免疫學(xué)會(huì)議發(fā)言第19頁(yè)20綜合我國(guó)外文件和本研究結(jié)果：

早產(chǎn)兒應(yīng)用較大劑量IVIG對(duì)其T細(xì)胞功效有顯著影響，可深入加重Th1/Th2失衡，抑制Treg細(xì)胞功效，加重暫時(shí)免疫低應(yīng)答反應(yīng)，影響細(xì)胞免疫自然發(fā)育過程，可能增加日后變態(tài)反應(yīng)性疾病發(fā)生。提醒早產(chǎn)兒應(yīng)用IVIG需選擇適宜劑量。杭州免疫學(xué)會(huì)議發(fā)言第20頁(yè)21結(jié)論IVIG可抑制早產(chǎn)兒臍血Thl、Th2細(xì)胞功效，而且與其劑量相關(guān)。低劑量時(shí)主要抑制Th2細(xì)胞功效，較大劑量時(shí)Th1、Th2細(xì)胞均受抑，但以Th1細(xì)胞更為顯著。IVIG不能直接影響早產(chǎn)兒臍血天然Treg細(xì)胞數(shù)量，但能夠經(jīng)過調(diào)整細(xì)胞因子IL-10和TGF-β1分泌抑制Treg細(xì)胞功效且有劑量依賴效應(yīng)。杭州免疫學(xué)會(huì)議發(fā)言第21頁(yè)22樹突細(xì)胞（DC）在機(jī)體免疫系統(tǒng)中處于中心地位作為