飼料中賴氨酸水平對(duì)克氏原螯蝦生長的影響

飼料中賴氨酸水平對(duì)克氏原螯蝦生長的影響

事實(shí)上，水生動(dòng)物對(duì)蛋白質(zhì)的需求是對(duì)氨基酸的需求。賴氨酸是水產(chǎn)動(dòng)物必需氨基酸之一,在體內(nèi)直接參與蛋白質(zhì)的合成,同時(shí)還作為肉堿的前體參與長鏈脂肪酸酰基的β氧化克氏原螯蝦(Procambarusclarkii)是中國已規(guī)?；B(yǎng)殖的淡水蝦類,目前的克氏原螯蝦養(yǎng)殖大都采用野雜魚、玉米、小麥等天然餌料或其他蝦蟹飼料替代進(jìn)行飼喂,由此往往造成營養(yǎng)供給不當(dāng),導(dǎo)致了養(yǎng)殖蝦體免疫機(jī)能降低、生長速度緩慢、餌料效率低下、環(huán)境污染等問題,因此,克氏原螯蝦專用配合飼料的開發(fā)對(duì)其集約化養(yǎng)殖具有重要意義。目前,克氏原螯蝦營養(yǎng)學(xué)研究主要集中在蛋白質(zhì)和脂肪需求量1材料和方法1.1脂肪和蛋白源以酪蛋白、明膠、小麥面筋粉和晶體氨基酸為蛋白源,魚油和大豆油為脂肪源配制蛋白質(zhì)水平為28.00%,脂肪水平為6.00%,能量為16.42kJ·g1.2養(yǎng)殖投喂與實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)用克氏原鰲蝦購自盱眙某龍蝦養(yǎng)殖場(chǎng),初始體質(zhì)量為(7.60±0.01)g。投喂商品料馴化1周后,挑選大小均一、體格健壯的克氏原螯蝦幼蝦分為7組,每組設(shè)4個(gè)重復(fù)(網(wǎng)箱),每個(gè)重復(fù)12尾蝦,雌雄比為1∶1。每天于8:00、16:00和22:00定量投喂3次,各占每日投喂量的30%、30%和40%。日投喂量為蝦體質(zhì)量的5%~7%,每次投喂前,去除網(wǎng)箱中殘餌和糞便。實(shí)驗(yàn)周期為60d。養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)于江蘇省淡水水產(chǎn)研究所祿口養(yǎng)殖基地進(jìn)行。將實(shí)驗(yàn)用網(wǎng)箱(規(guī)格為60cm×60cm×60cm,長×寬×高)置于室外水泥池中,水深40cm,保持水泥池微流水和不間斷充氧,實(shí)驗(yàn)用水為過濾室外池塘水。養(yǎng)殖期間水溫24~28℃,pH7.0~7.5,水中溶氧4.0mg/L以上,氨氮低于5mg/L。1.3選取尾蝦—樣品采集養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,禁食24h,按網(wǎng)箱稱取蝦的終末體重,并統(tǒng)計(jì)成活率。每網(wǎng)箱隨機(jī)選取4尾蝦于-20℃冰箱中保存,用于全蝦體組成分析。每網(wǎng)箱另取4尾蝦進(jìn)行冰浴解剖,取腸道置于液氮中保存,用于相關(guān)酶活性的測(cè)定,取去殼肌肉于-20℃冰箱中保存,用于肌肉常規(guī)組成和氨基酸分析。1.4樣品分析1.4.1生長性能分析成活率(SR,%)=(實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)蝦尾數(shù)/實(shí)驗(yàn)開始時(shí)蝦尾數(shù))×100%增重率(WGR,%)=[(終末體質(zhì)量–初始體質(zhì)量)/初始體質(zhì)量]×100%特定生長率(SGR,%·d飼料效率(FER,%)=(終末體質(zhì)量–初始體質(zhì)量)/攝食量×100%1.4.2營養(yǎng)成分分析飼料、全蝦和肌肉的營養(yǎng)成分分析采用AOAC1.4.3消化酶活性測(cè)定準(zhǔn)確稱取腸道樣品,按質(zhì)量體積比1∶9的比例加入4℃去離子水后制成組織勻漿,以4000r/min轉(zhuǎn)速離心10min,取上清液于4℃保存用于組織消化酶活性和蛋白濃度測(cè)定。蛋白酶活性測(cè)定參照徐維娜等1.5統(tǒng)計(jì)分析實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤2結(jié)果與分析2.1不同大小對(duì)罪犯輸注后響應(yīng)的影響不同賴氨酸水平對(duì)克氏原螯蝦生長性能的影響如表3所示。隨著飼料中賴氨酸水平的升高,增重率、特定生長率和飼料效率顯著升高(P<0.05),并且分別在1.69%、1.69%和1.22%組時(shí)達(dá)到最大值,當(dāng)賴氨酸水平進(jìn)一步升高,上述各項(xiàng)指標(biāo)均呈下降趨勢(shì)。蝦的成活率為89.58%~97.92%,隨飼料賴氨酸水平的升高也呈先升高后降低的趨勢(shì),但各組之間無顯著差異(P>0.05)。對(duì)飼料賴氨酸水平與克氏原螯蝦的增重率進(jìn)行二次回歸分析,結(jié)果如圖1所示。得到飼料賴氨酸水平與增重率的二次多項(xiàng)式回歸方程:y=-39.20x2.2飼料中各蝦的粗蛋白和儲(chǔ)糧能力由表4可知,全蝦的水分含量以賴氨酸水平1.22%組最低,顯著低于0.76%組(P<0.05),但和其他組之間差異不顯著。全蝦的粗蛋白含量隨著飼料賴氨酸水平的升高而逐漸升高,以1.89%組最高,顯著高于0.76%和1.00%組(P<0.05)。全蝦的粗脂肪含量以1.69%組最高,顯著高于0.76%和1.89%組(P<0.05)。各組之間的全蝦灰分含量和肌肉組成均無顯著差異(P>0.05)。2.3破壞情況測(cè)定克氏原螯蝦肌肉中共測(cè)出17種氨基酸,包括9種必需氨基酸和8種非必需氨基酸,色氨酸因在水解過程中被破壞,未被測(cè)出。由表5可知,飼料中賴氨酸水平對(duì)肌肉中的必需氨基酸含量、氨基酸總量及單個(gè)氨基酸含量均無顯著影響(P>0.05)?？耸显r肌肉中的賴氨酸含量以1.47%組最高,2.18%組最低。肌肉中的必需氨基酸含量隨飼料賴氨酸水平的升高而呈先升高后降低的趨勢(shì),以1.22%組最高。2.4腸道消化酶活性由表6可知,飼料中賴氨酸水平對(duì)克氏原螯蝦的腸道蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶活性均無顯著影響(P>0.05)。腸道蛋白酶活性為60.09~65.62U·μg3討論3.1飼料中不同賴氨酸水平對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物成活率的影響本實(shí)驗(yàn)中,賴氨酸缺乏組的克氏原螯蝦表現(xiàn)出了較低的存活率和生長速度,隨著飼料中賴氨酸水平的升高,其生長速度和飼料效率均得到了顯著的提高。由此證明,賴氨酸是克氏原螯蝦的必需氨基酸之一,經(jīng)過羧甲基纖維素包被處理后的晶體氨基酸能夠被克氏原螯蝦有效利用。相關(guān)研究表明,隨著飼料中賴氨酸水平的增加,魚蝦類的生長速度加快,當(dāng)飼料賴氨酸水平超過適宜需求量之后,魚蝦類的生長速度呈現(xiàn)兩種不同的變化大量研究表明,飼料中賴氨酸水平對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物成活率的影響與實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種類、實(shí)驗(yàn)條件、飼料組成,基礎(chǔ)飼料中賴氨酸含量及飼養(yǎng)管理等諸多因素有關(guān)。例如,對(duì)大黃魚(Pseudosciaenacrocea)3.2飼料中不同賴氨酸水平對(duì)飼料蛋白和儲(chǔ)糧指標(biāo)的影響本實(shí)驗(yàn)中,賴氨酸缺乏組的克氏原螯蝦全蝦粗蛋白和肌肉粗蛋白含量較低,隨著飼料賴氨酸水平的升高,全體粗蛋白和粗脂肪含量也顯著提高。可能是因?yàn)樵陲暳现匈嚢彼岵蛔愕那闆r下,飼料的氨基酸模式的失衡,限制了其他氨基酸的利用,加重了多余氨基酸的脫氨基作用,最終導(dǎo)致了體蛋白合成受限3.3機(jī)體對(duì)飼料養(yǎng)分的利用性飼料營養(yǎng)質(zhì)量是影響甲殼動(dòng)物消化酶活性變化的關(guān)鍵因素,消化酶活性在一定程度上反映出機(jī)體對(duì)飼料養(yǎng)分的消化利用程度。當(dāng)攝食不同營養(yǎng)成分的飼料,甲殼動(dòng)物會(huì)出現(xiàn)消化酶分泌量的差異,以更好地消化、吸收和利用飼料中的營養(yǎng)物質(zhì),表現(xiàn)為對(duì)飼料組成的明顯適應(yīng)性3.4飼料中的氨基酸等營養(yǎng)物需求量本實(shí)驗(yàn)以增重率為指標(biāo),經(jīng)二次回歸分析得出克氏原螯蝦的適宜賴氨酸需求量為1.66%,占飼料蛋白質(zhì)的5.87%,結(jié)果高于凡納濱對(duì)蝦此外,采用劑量-效應(yīng)法評(píng)定飼料中賴氨酸等營養(yǎng)物的需求量時(shí),評(píng)定方法不同也會(huì)導(dǎo)致得出需求量的差異。一般認(rèn)為,折線模型方法更容易低估營養(yǎng)物質(zhì)的需求量;而采用蛋白沉積和氮保留率等作為評(píng)定指標(biāo),得到的需求量會(huì)高于由增重指標(biāo)回歸所得的結(jié)果4對(duì)克氏原螯蝦消化酶活性的影響