克氏原螯蝦卵巢發(fā)育過程中組織脂肪含量及脂肪酸組成的變化

克氏原螯蝦卵巢發(fā)育過程中組織脂肪含量及脂肪酸組成的變化

克氏原始錨狀蝦，也被稱為紅沼澤錨狀蝦和淡水龍眼，屬于甲殼類、軟甲殼類、頭足目、科海倫、上升科和原始錨狀蝦。原產(chǎn)于美國南部和墨西哥北部,20世紀30年代末期由日本引入中國南京附近。現(xiàn)已分布至十幾個省市,成為歸化于中國自然水體的一個物種。由于肉質(zhì)鮮美,營養(yǎng)豐富,近幾年克氏原螯蝦作為一種經(jīng)濟水產(chǎn)物種開始在一些省市地區(qū)大力推廣試養(yǎng)。對克氏原螯蝦進行全面深入的了解迫在眉睫。目前,有關(guān)克氏原螯蝦發(fā)育生物學1材料和方法1.1肝胰腺、卵巢稱重實驗所用雌性克氏原螯蝦于2009年5月至9月采自上海崇明沐雨生態(tài)有限公司稻蝦養(yǎng)殖基地,為散養(yǎng)群體,餌食以屠宰下腳料為主。每月中旬采樣一次,每次60只,體質(zhì)量為(28.54±3.05)g,體長為(8.51±0.31)cm。取蝦的肝胰腺、卵巢稱重后立即保存在-20℃冰箱內(nèi)備用。參考李勝等肝胰腺指數(shù)(HSI,%)=肝胰腺質(zhì)量/體質(zhì)量×100卵巢指數(shù)(GSI,%)=卵巢質(zhì)量/體質(zhì)量×100脂肪含量(LC,%)=脂肪質(zhì)量/組織干重質(zhì)量×100組織干重百分含量(DM,%)=組織干重質(zhì)量/組織質(zhì)量×1001.2液相色譜分析將肝胰腺、卵巢組織冷凍干燥后,參照Folch法采用室溫脂肪酸快速甲酯化法,即用石油醚:苯(1:1,V/V)溶解脂肪并稀釋至20~50mg/mL,加入2mL0.4mol/L氫氧化鉀-甲醇溶液,混勻后室溫靜置10min,加蒸餾水、振蕩、離心,取上層清液,進行氣相色譜分析。儀器為Agilent-6890,毛細管柱型號為Omegawax320(30.0m×0.32mm,USA),FID檢測器,程序升溫1.3統(tǒng)計分析方法采用SPSS13.0軟件對實驗數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析,方差分析用ANOVA法,單因子多重比較用Duncan’s法,當P≤0.05認為差異具有統(tǒng)計學意義。2結(jié)果與分析2.1干重百分含量表1顯示的是克氏原螯蝦肝胰腺指數(shù)、卵巢指數(shù)、組織干重百分含量及脂肪含量在卵巢發(fā)育不同時期的變化。隨著卵巢的發(fā)育,肝胰腺指數(shù)由7.95%降到5.31%,卵巢指數(shù)由0.12%升到6.64%。肝胰腺干重百分含量總體表現(xiàn)為先升后降的變化趨勢,在Ⅲ期達到最大,為50.80%;Ⅴ期最小,為47.31%;卵巢干重百分含量在整個時期呈顯著增加趨勢,由22.29%升到55.16%,增加近2.5倍。就脂肪含量而言,其在肝胰腺中的含量較大,最高可占組織干重的74.49%,在整個卵巢發(fā)育過程中并沒有表現(xiàn)出明顯的變化趨勢;在卵巢中,脂肪含量僅在Ⅱ期到Ⅲ期有一個顯著的增加過程(P≤0.05),在后期變化不明顯。2.2大鼠肝臟脂肪酸表2、表3分別顯示的是克氏原螯蝦卵巢發(fā)育各時期肝胰腺和卵巢中脂肪酸的組成及相對含量。從表2中可知,各時期肝胰腺中主要脂肪酸有C16:0、C16:1n7、C18:0、C18:1n9,C18:1n7、C18:2n6和C與肝胰腺不同,卵巢中主要脂肪酸不僅有C16:0、C16:1n7、C18:0、C18:1n9,C18:1n7、C18:2n6和C18:3n3,還包括ARA和EPA,特別是在早期,這2種脂肪酸所占比例較大;主要脂肪酸中的C3討論3.1組織脂肪含量隨著卵巢的發(fā)育,克氏原螯蝦卵巢指數(shù)由Ⅰ期的0.12%增加到Ⅴ期的6.64%,卵巢干重百分含量由22.29%升到55.16%,增加近2.5倍,意味著在這過程中卵巢發(fā)育以及胚胎發(fā)育所需要的各類結(jié)構(gòu)、營養(yǎng)和功能物質(zhì)在大量積累。雖然水分也是生物體中重要的組成部分,但對于克氏原螯蝦來說,卵巢在發(fā)育過程中更多積累的是有機物、無機鹽等,水分可在排卵后從水體環(huán)境中攝取。作者在隨后的實驗中發(fā)現(xiàn),克氏原螯蝦早期胚胎中的干物質(zhì)百分含量又降至40.99%,相關(guān)數(shù)據(jù)另文發(fā)表。值得注意的是,雖然卵巢干重百分含量一直在增加,但卵巢干物質(zhì)中的脂肪含量并不是一直增加,僅在Ⅱ期到Ⅲ期之間有顯著增加的過程。卵巢脂肪含量的增加在其他蝦類研究中也有發(fā)現(xiàn),與克氏原螯蝦不同的是,某些蝦類脂肪含量的增加一直持續(xù)到卵巢完全成熟在整個卵巢發(fā)育過程中,克氏原螯蝦肝胰腺指數(shù)呈顯著降低趨勢。肝胰腺作為營養(yǎng)物質(zhì)消化吸收器官被認為是甲殼動物脂肪主要的儲存和加工場所比較肝胰腺干重,在Ⅲ期達到最大,在Ⅴ期含量最小,有先增加后減少的變化趨勢?？芍诼殉舶l(fā)育早期,其需求的營養(yǎng)物質(zhì)還較少,肝胰腺中的營養(yǎng)物質(zhì)依然呈積累趨勢,但在后期,由于卵細胞的急劇增長,卵黃物質(zhì)的大量積累,導致肝胰腺中的營養(yǎng)物質(zhì)加速向卵巢轉(zhuǎn)移。因此,從這一方面來講,確保母蝦營養(yǎng)充足是至關(guān)重要的,也是一個長期的過程。3.2組織中hufa的含量克氏原螯蝦肝胰腺和卵巢脂肪酸相對含量的差異是由組織間生理功能的差異所決定的。肝胰腺作為消化吸收器官,有儲存并向其他組織提供營養(yǎng)物質(zhì)的功能,其組織內(nèi)脂肪酸組成容易受食物中脂肪酸組成的影響克氏原螯蝦屬淡水種,其肝胰腺和卵巢中的主要脂肪酸有CHUFA在對蝦卵巢發(fā)育以及胚胎發(fā)育中起著重要作用從整個卵巢發(fā)育過程來講,∑HUFA在肝胰腺和卵巢中都呈下降趨勢,但∑HUFA在卵巢各期的含量比在肝胰腺中的含量要高,說明卵巢有優(yōu)先選擇HUFA的可能,意味著雖然其在卵巢中的含量較低,但HUFA依然對克氏原螯蝦卵巢發(fā)育和胚胎發(fā)育有重要作用。卵巢中HUF